全 文 ： 黑刺菝葜根茎中黄酮成分的分析鉴定
张存莉 1 , 马柏林2 , 傅建熙 3 , 刘俊彦 3 , 黄文华 3 , 李琰3
( 1西北农林科技大学 林产工程学院 陕西 杨陵 712100; 2西北农林科技大学 基础课部 ;
3西北农林科技大学基础科学系 )
摘 要:对黑刺菝葜根茎中黄酮类成分进行了定性分析和定量测定。 结果表明 ,在黑刺菝
葜的根茎中含有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇等多种黄酮类化合物。并以芦丁为标
样 ,用分光光度法测出总黄酮含量为 2. 23%。
关键词:黑刺菝葜 ;黄酮 ;芦丁 ;定性分析
中图分类号: Q949. 718. 23 文献标识码: A 文章编号: 1001-7461( 2000) 01-0057-03
黑刺菝葜 ( Smilax scobinicaulis ) ,又名短梗菝葜 ,是百合科菝葜属一种攀援状木质藤本 ,主
产于陕西、甘肃和山西等省 ,其根茎作为铁丝威灵仙和金刚刺入药 ,具有除风湿、活血、解毒、镇
惊息风和抗癌等功效 ,临床上用于治疗风湿性腰腿病、小儿惊风、肠炎、疮疖、瘰疠、癌肿等病
症 [1 ] ,其化学成分至今未见报道。本文对其所含黄酮成分做了定性分析和总含量的测定研究。
1 材料与方法
1. 1 仪器和试剂
仪器: UV-754分光光度计 , FA 1104电子天平 ,紫外分析仪 ,索氏提取装置。
试剂:常用化学试剂为分析纯 ,聚酰胺 ( 83305部队 701厂 ) ,芦丁 (上海试剂二厂 )。
1. 2 材料
1998年 9月挖自太白山上 ,由西北植物研究所吴振海副研究员鉴定。样品经风干 ,除去泥
沙土 , 60℃烘干 ,用粉碎机粉碎 ,过 20目筛后 ,装入塑料袋中 ,扎紧口袋备用。
黄酮类化合物提取:称取 20 g样品 ,加 200 mL95%乙醇回流提取 1 h ,过滤 ,将提取液浓
缩成浆状 ,加水溶解后 ,置于烧杯内加 10 g聚酰胺 ,放置并经常振摇 , 24 h后滤出聚酰胺 ,反复
用水冲洗聚酰胺 ,除去糖类、皂甙等水溶性杂质 ,最后用甲醇洗脱 ,洗脱液浓缩至 20 mL备用。
1. 2 检识方法 [ 2, 3]
盐酸—镁粉试验 ,取试液 1 mL加入少许镁粉 ,振摇 ,再加浓盐酸 4～ 5滴 ,加热 3 min。
铅盐沉淀试验:取试液 2 mL,滴加乙酸铅试剂。
三氯化铝试验:取试液滴于滤纸上 ,喷 1% AlCl3乙醇溶液。
与碱反应:取试液 1 mL,加入 10% NaCO35滴。
氨熏试验:取试液滴于滤纸上 ,置氨气中熏 0. 5 min,观察 ,再置紫外灯下观察。
1. 3 标准曲线绘制 [ 4, 5]
西北林学院学报 2000, 15( 1): 57～ 59
Journa l o f Nor thwest Fo restr y Univ ersity
收稿日期: 1999-07-08
作者简介:张存莉 ( 1967-) ,女 ,讲师 ,主要从事经济植物资源开发利用的教学与科研工作
精确称取芦丁对照品 10 mg ,置 10 m L容量瓶中 ,用 95%乙醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,
表 1 不同芦丁浓度的吸光度
Table 1 Th e absorbance of di f ferent concen t rations of ru tin
序 号 1 2 3 4 5 6
体积 /m L 0. 0 0. 10 0. 2 0. 3 0. 4 0. 5
浓度 /mg· mL- 1 0. 00 0. 01 0. 02 0. 03 0. 04 0. 05
吸光度 A 0 0. 125 0. 298 0. 378 0. 522 0. 580
图 1 A-C标准曲线
Fig. 1 A-C s tandard curve
分别吸取 0. 0、 0. 1、 0. 2、 0. 3、 0. 4、 0. 5 mL分别置 10 m L容
量瓶中 ,各加 95%乙醇使成 5 mL,然后分别加入 5%
NaNO2 0. 3 mL摇匀 ,放置 6 min,再加 10%硝酸铝 0. 3
m L,摇匀 ,放置 6 min,加 4% NaOH溶液 4 mL,用蒸馏水稀
释至 10 mL,在波长 510 nm测吸光度 ,结果见表 1。
以吸光度 A为横坐标 ,浓度为纵坐标 ,绘制标准曲线
(图 1)。经统计处理 ,得回归方程 y= 0. 002 5+ 0. 086x
相关系数 R= 0. 988,查表得: R0. 01= 0. 917, R> R0. 01 ,
故相关显著。
2 结果与分析
2. 1 黑刺菝葜根茎黄酮类化合物检识
经测试分析 ,黑刺菝葜根茎含有黄酮类化合物 (表 2)。
表 2 黄酮类化合物分析结果
Table 2 The resul t of th e sys tematic test s to f lav onoids
反应类型 现象 结果
盐酸—镁粉反应 迅速变成红色反应 可能含黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇等黄酮类化合物
铅盐沉淀试验 红色沉淀 可能存在黄酮类化合物
三氯化铝反应 黄色斑点 ,在紫外灯下显天蓝色荧光
可能含有 4′羟基黄酮醇或 7, 4′-二羟基黄酮
醇等黄酮类化合物
与碱反应 样品液变黄色 可能含有二氢黄酮、黄酮醇等黄酮类化合物
氨熏试验 置氨气中观察到黄色斑点 ,在紫外灯下显黄色荧光 可能含有黄酮醇等黄酮化合物
2. 2 黄酮总含量测定
2. 2. 1 提取溶剂的选择 每次准确称量样品 5 g ,共 4份 ,分别置于索氏提取器中 ,各加入 80
m L石油醚 ,回流提取 50 min,放冷 ,倾出石油醚 ,挥发掉样品中吸收的石油醚 ,分别装入索氏
提取器中 ,然后分别加入 50%甲醇、纯甲醇、 70%乙醇、 95%乙醇 80 m L,回流提取 1 h,放冷 ,
将提取溶剂置于 100 mL容量瓶中 ,再用提取液少量多次洗涤 ,洗涤液过滤置于上述容量瓶
中 ,并用提取溶剂稀释至刻度 ,摇匀。精密吸取上述提取液各 0. 2 mL,置 10 mL容量瓶中。然
58 西北林学院学报 15卷
后分别加 95%乙醇 4. 8 mL,按与对照品相同的方法显色。空白每次取样 0. 2 mL,加 95%乙醇
4. 8 m L,然后用蒸馏水稀释至 10 mL,作空白对照。在波长 510 nm测定吸光度 ,将测得各吸光
度值代入回归方程 ,并计算结果 (表 3)。 测定结果表明 ,用 70%乙醇提取率较高。 因此本实验
采用 70%乙醇做为提取总黄酮的溶剂。
表 3 溶剂对提取效果的影响
Table 3 Flavonoids ext ract rate by di fferen t solvents
溶 剂 95%乙醇 70%乙醇 甲醇 50%甲醇
吸光度 0. 162 0. 203 0. 104 0. 095
总黄酮含量 /% 1. 14 1. 50 0. 64 0. 57
表 4 提取时间对提取效果的影响
Table 4 Flavonoids ext ract rate by dif ferent t ime
提取时间 /min 60 90 150 180 240
吸光度 0. 203 0. 236 0. 271 0. 288 0. 268
总黄酮含量 /% 1. 50 1. 78 2. 08 2. 23 2. 05
3. 2. 2 提取时间的选择 精密称取样品 5 g ,共 4份 ,按上述方法用石油醚处理后 ,分别加入
70%乙醇 80 mL,然后回流提取 90、 150、 180、 240 min,过滤 ,洗涤 ,定容 100 mL,按照与对照品
相同的方法显色 ,测定总黄酮含量。 由测定结果可知 (表 4) ,提取时间 180 min最佳。
3. 2. 3 样品溶液的制备和总黄酮的测定 准确称量样品粉末 5 g置于索氏提取器中 ,加入 80
m L石油醚 ,回流提取 50 min后 ,放冷 ,倾出石油醚 ,加入 70%乙醇回流提取 3 h,放冷 ,将提取
液倒入 100 mL容量瓶中 ,再用提取溶剂少量洗涤烧瓶 ,将洗涤液过滤并合并倒置于上述容量
瓶中 ,并用提取溶剂稀释至刻度 ,摇匀。
精密吸取上述样品液 0. 2 mL2份 ,分别置 10 mL容量瓶中 ,然后分别加 95%乙醇 4. 8
m L,一份用与对照样相同的方法的显色 ,另一份用蒸馏水稀释至 10 mL作空白对照。 用波长
510 nm测定吸光度 ,其值为 0. 288,将其代入回归方程 ,计算出黑刺菝葜根茎中总黄酮的含量
为 2. 23%。
3 结论和讨论
定性试验结果表明 ,黑刺菝葜根中含有黄酮醇 ,二氢黄酮醇和二氢黄酮类等多种黄酮成
分。黄酮量最佳提取条件为 70%乙醇提取 180 min。黑刺菝葜中总黄酮含量为 2. 23% 。
取对照溶液和供试溶液于 700～ 300 nm的波长之间扫描 ,结果表明两者均在 510 nm波
长处有最大吸收 ,故将测定波长定为 510 nm,由于供试溶液在 510 nm波长处有最大吸收 ,所
以用相应供试品的不经过显色的溶液作对照以消除其他有色成分对黄酮吸光度的影响。
用本试验方法进行黄酮测定时 ,测定液澄清透明 ,测定结果稳定 ,重现性好。
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典委员会 .中华人民共和国药典 [M ] . 1部 ,北京:人民卫生出版社 , 1985. 311
2 肖崇厚主编 .中药化学 (第二版 ) [M ] .上海:上海科技出版社 , 1997
3 林启寿编著 .中草药成分化学 [M ] .北京:科学出版社 , 1977
4 李淑芹 ,李延水 ,希昌杰 .蓝靛果中黄酮类成分初探及总含量测定 [ J ].东北农业大学学报 , 1996, 27( 1): 99～ 101
5 唐孟成 ,贾之慎 ,朱祥瑞等 .春秋桑叶中黄酮类化合物总含量及提取方法比较 [ J] .浙江农业大学学报 , 1996, 22( 4): 394～
398
(下转 93页 )
59第 1期 张存莉等 黑刺菝葜根茎中黄酮成分的分析鉴定研究
The Economic Analyzing and Model of Joint Production of Fo rest
Gao Jianzhong Meng Quansheng Zhou Qingsheng Yao Shunbo
(Depar tment of Forest Economy and Managem ent ,N or thw . S ci-t ech Un i. of A gr . and For . ,
Yang lin g , Shanx i 712100)
Abstract The Production and use o f mutiple products of fo rest has become a mo re
rema rkable issuelem. This paper uses principle of w est economics to analy ze the production
and rela tionship o f fo rest multiple products, expounds the economic principle and model of
joint-production.
Key words joint production o f fo rest; relationship of production; economic analy sis;
economic model
(上接 59页 )
Analysis of the Flav onoids in the
Roo ts of Smilax scobinicaulis
Zhang Cunli1 Ma Bail in1 Fu Jianxi2 Liu Junyan2 Huang WeiHua2 Li Yan2
( 1 Faculy of Forest Product and Eng ineering , Northw . Sci-tech Uni . of Ag r. and For. , Yangl ing , Shaanx i 712100;
2 Dep t . of Basic Coures , Northw . Sci-tech . Uni. of Agr . and For . 3 Dept . of B asic Science, Northw . Sci-tech . Uni .
of Agr . and For . )
Abstract Flavonoids in the roo ts o f Smilax scobinicaulis are analysed quali tativ el. It w as
found that the ro ots o f Smilax scobinicaulis contains f lav ones, f lav onol. flavanones f lav anono l
etc. To tal f lav onoids content w as also deteminded to be 2. 23% by spect ropho tometic method
using rutin as standa rd sample.
Key words Smilax scobinicaulis; f lav onoid; rutin; quali ta tiv e analysi
93第 1期 高建中等 森林联合生产的经济分析及模型