全 文 ：太方法的特点是 :() l操作简便 , 只需一般
室温买验条件 ; ( 2 )需时很短 , 全部操作在 3 小
时左右即可完成 ; ( 3 )可以用于多种植物组织幼
苗 D N A提取 , 并基本上可以排除植物组织中多
酗等类物质的干扰 , 而采用 M a r m u : 法等则往
往有此种干扰 ; ( 斗) 分离效果好 , 一般情况下
D N 人 的纯度都比较理想 。 我们先后进行 了十
多次实验 , 其 D N A 在紫外分光光度计波长为 `
2 6 ()m ,` 、 2 3 o m ,` 及 Z s om 声`的光吸收值的比值 ,
即 : A 2 6 o ; n ,。 / A 2 3 0 m子。 平均为 2 . 0 , , A 2 6 om l` /
A 2 80 m产 平均为 1 . 8 3 , 接近或超过了木实验室
采用 S eP ha r or e 4 B 柱层析分离所得 的结果 。 同
时收率 (即每克鲜重材料的 D N A 提取量 )一般
均在 2 0 微克 /克鲜重左右 , 视材料不同而有所
差异 。
参 考 文 献
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山羊草叶片染色体的压片法
哀 淑 安 汪 永 祥
(中国科学院遗传研究所 )
用植物根尖压片观察和鉴定植物染色体的
方法在遗传和育种的研究中得到 了广 泛 的 应
用 , 但是它仍有一定的局限性 , 如小麦花药培养
诱导出的花粉植株的频率和小麦孤雌生殖的结
实率还不很高 , 作物远缘杂交中 , 虽然采取各
种措施来克服其杂交不亲和性和杂交后代不育
性 , 但其杂交的结实率仍然很低 。 得到的少量宝
贵种子用于根尖细胞学观察均有一定困难 。 一
方面是材料宝贵 , 剪去根尖作细胞染色体检查
影响植株的成活率 ; 另外一方面每粒种子发芽
后只能剪 1一 2 个根尖制片 , 由于制片技术的限
制 , 通过 1一 2 次压片观察 , 往往不易得到清晰
可数的分裂相 。 为了解决上述这些问题 , 我们
用半凸山羊草 ( A 笔 il o p s v e n t r ie o s a ) 的叶片进行
了细胞染色体的观察研究 。
1
. 取材 为排除叶绿素可能造成 的 干扰 ,
又能取得叶片的分生组织部分 , 取分孽盛期的
分孽心叶 ,剪去有叶绿素的部分 , 留下一段 5一 7
毫米幼嫩的基部 。为区分材料的上下部位 , 要把
两头断口剪成不同的形状 , 如 : 上为尖头 , 下为
齐头 , 齐头部位即是叶片的分生组织部位 (图
1 )
。
图 L 取材料的部位
2
. 前处理的时间与方法 我们于 4 月上中
旬在室温 ( 18 一 20 ℃ ) 下剪取山羊草叶片 ,在上
午 1 1 点 30 分进行前处理 。 处理的方法用了两
种 : ( l) 将材料放人 0 . 0 02 克分子浓度的 8一径基
唆琳溶液内 3 小时 , 然后用水冲洗 ; ( 2 )将材料
放入蒸馏水中 , 置于 1一 5℃ 冰箱内 2 0 小时左
右 。 两种方法中以冰冻处理效果为好 。
3
. 固定 用 95 务酒精与冰醋酸 ( 3 : 1 )的固
定液处理 20 小时左右 , 后再用水冲洗 。
4
. 解离 (水解 ) 放人 9 ,多 酒精和浓盐酸
( 3 : l) 的解离液中 10一 1弓分钟 ,后用水冲洗 。
5
. 媒染 以 4外 的硫酸铁按 (铁明矾 )媒染
约 20 分钟 , 然后用水冲洗 。
6
. 染色 以 0 . 弓多的苏木精染液染色 , 染色
时间 1一 2小时均可 , 后用水冲洗 。
7
. 压片 截取幼叶基部 (材料的 齐头 ) .0 5
毫米左右 , 置于载片上用刀切碎 , 滴上一滴 45 外
的醋酸 , 覆上盖片压片 。
8
. 封片 需要永久保存的片子 , 可将其放
人冰箱冻结器层内冻结 , 起冰花后 ,用刀将盖片
和载片分开 , 迅速放入 9 5多的酒精内 , 后再放
人无水酒精内 , 各约放 1一 2 分钟脱水。 干后用
油派尔胶或加拿大 胶封片 。
我们用叶片制片 , 观察到半凸山羊草的染
处理 (其他步骤同前 ) , 分别观察到了普通小麦
的染色体 ( 2 , ~ 4 2 ) (图 3 ) 和黑麦的染色体
( 2
。 一 14 ) (图 4 ) o
色休
图 3 普通小麦的染色体 (2 。 ~ 42 )
图 2 半凸山羊草的染色体 ( 2。 一 28 )
在同样室温条件下 , 于上午 10 时 30 分剪
取普通小麦 。 ’ ,落r i c u 。 : e s t i t, u o L . ) 叶片 , 用
冰冻法进行前处理 ; 在 1 时 30 分剪取黑麦
(命“ l。 `。 ea l 。 L . ) 叶片 , 用 8一经基咬琳进行前 图 4 黑麦的染色体 ( 2。 = l勺
艘欢浪浪谈浪浪浪艘注欢浪双浓欢浪欢笨该渡节签耸处兼筑欢处浪滚兼浪艘笨澎的级浪泌浪浪从浪浪浪浪欢浪浪欢浪欢滚旅浪策浓浪浪浪浓浪浪浪滚浪效浪效旅浓浪汉忿妇赚盖笨欢欢
(上接 第30 页 )
与核结合产生的核质杂种也可 能具有杂 种 优
势 。 同时 , 因为核质杂种的核是纯合的 , 不分
离 ,不要求年年制种 , 而保持杂种优势 6
当前 , 获得小麦核质杂种采用的方法是置
换回交 。 它可 以吸取品种间杂交育种 、 远缘杂
交和雄性不育研究中所积累的经验和技术 。 为
了缩短置换回交的时间 , 应该加速世代繁殖 。
国外利用人工气候室 , 冬小麦一年可种五代 , 春
小麦可种六代 。 因此 , 核置换的全过程两年内
就能完成 。 诱导小麦雄核发育迅速获得核质杂
种也是很有希望的 。 随着细胞融合 、 细胞器移
植等技术的进展 ,必将大大促进细胞质遗传 、核
置互作和核置换的研究 。
参 考 文 献
〔1 ]
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[ 5 1
童第周 : 19 78 。 细胞质对细胞核的活动和遗传性状表
现的作用 。 遗传学报 , 5 ( i ) : 1一 sa
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