全 文 ：张 伟，乔保建，李冰冰，等． 蝴蝶兰高效组培快繁及温室移栽技术［J］． 江苏农业科学，2015，43(9) :83 － 86．
doi:10． 15889 / j． issn． 1002 － 1302． 2015． 09． 023
蝴蝶兰高效组培快繁及温室移栽技术
张 伟，乔保建，李冰冰，李延龙，王利亚，王 贞，刘文克，张亚丽
(河南省平顶山市农业科学院，河南平顶山 467001)
摘要:为优化蝴蝶兰组培快繁及小苗温室移栽技术，研究以蝴蝶兰花梗段侧芽为外植体的高效快繁技术。在
MS +3． 0 mg /L 6 － BA +1． 0 g /L 花宝 1号培养基中诱导出营养芽，2 个月诱导率达 90%;而用 VW +3． 0 mg /L 6 － BA +
1． 0 g /L花宝 1 号 + 10%香蕉泥培养基诱导出花葶，2 ～ 3 个月诱导率达 80%。利用诱导的无菌营养芽、花葶节段切片
在 MS + 5． 0 mg /L 6 － BA + 0． 5 mg /L NAA + 10%椰子汁 + 30 mg /L 柠檬酸培养基中，2 个月诱导出丛生芽，再利用小
块丛生芽分化增殖丛生芽，1． 5 个月增殖率可达 6 倍。当芽长超过 1． 5 cm时，在 1 /2MS + 0． 1 mg /L 6 － BA + 0． 3 mg /L
NAA + 0． 2%活性炭培养基中壮苗生根，2 个月后小苗长出 3 条以上的根，根长超过 1． 5 cm，于智能温室炼苗 3 ～ 4 周
后移栽。应用该小苗移栽试验方法，经统计 3 个月后成活率可达 95%。
关键词:蝴蝶兰;花梗侧芽;营养芽;花葶;丛生芽
中图分类号:S682． 31 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2015)09 － 0083 － 04
收稿日期:2014 － 10 － 12
基金项目:河南省平顶山市农业科学院自选项目。
作者简介:张 伟(1977—) ，男，陕西汉中人，助理研究员，主要从事
现代农业生物技术组培的研究。E － mail:zhw9380@ 163． com。
蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)别称蝶兰，被誉为“洋兰皇
后”，是热带兰中的珍品［1］。蝴蝶兰花朵硕大、朵数多、开花
期长、花色艳丽、色泽丰富，可盆栽放置于书房、客厅、卧室等
处，典雅大方并给人以美的享受，花朵可作新娘的捧花、襟花、
胸花，同时是切花的好材料［2］。蝴蝶兰是兰科植物中栽培最
广泛、普及程度最高的品种之一，深受各国人民喜爱。蝴蝶兰
是单茎性气生兰，植株极少发育侧枝，且种子极难萌发，实生
苗变异严重，不适于大规模商业种植。应用植物组培快繁技
术可在短期内生产大量整齐一致的种苗，因此大规模商业种
植一般采用组织培养快繁的方法［3］。关于蝴蝶兰组织培养
的报道较多［4 － 7］，多以蝴蝶兰的叶片［8］、茎尖［8 － 9］、花梗腋
芽［8 － 11］、种子［12］、根尖［8］、花梗节间［13］为外植体进行组织培
养研究，而对以花梗为外植体的研究常采用未开花、即将开花
的花梗，这对母株伤害较大，将影响其观赏价值、经济价
值［14］。本试验于蝴蝶兰开花 3 个月后(农历正月之后)采摘
花梗，尽量减少对其观赏价值、经济价值的影响。以蝴蝶兰丛
生芽途径开展组培快繁，具有诱导率高、诱导时间短、丛生芽
增殖率高(可达 6 倍)、技术难度低、遗传性能稳定等优点，可
避免生产中发生大量变异，对大规模生产具有重要意义［15］。
在前人研究的基础上，开发出一套成熟、先进的蝴蝶兰组培快
繁及温室移栽技术，以期为相关生产及研究提供参考。
1 材料与方法
1． 1 供试蝴蝶兰
供试蝴蝶兰采自河南省平顶山市农业科学院农业生物技术实
验室智能温室，于2013年3月至5月初采取，品种为宝龙皇后。
1． 2 外植体
供试外植体为蝴蝶兰花梗节间侧芽，以及花梗段侧芽诱
导出的无菌营养芽和花葶，以营养芽和花葶作为组培快繁试
验材料。
1． 3 消毒过程
剪取蝴蝶兰母株近基部花梗，将花梗切割为 2 ～ 3 cm 长
的切段，每个花梗切段带 1 个节间侧芽，每节距侧芽上部
1 cm、下部 2 cm。消毒时先用洗洁精与自来水清洗 30 min，于
超净工作台中用 75%乙醇浸泡 30 s，再用 0． 1%HgCl2 溶液浸
泡 13 min，倒掉 HgCl2 并用无菌水冲洗 4 ～ 6 遍。消毒后切去
花梗段两端少许部分，按照正常生长方向将花梗节段插入供
试培养基。
1． 4 供试培养基
基础培养基为 MS、VW、1 /2 MS。采用不同质量浓度植
物生长调节剂的培养基进行诱导与增殖，并进行壮苗生根培
养，培养环境为:温度(25 ± 2)℃、光照度 2 000 ～ 3 000 lx、光
照时间 12 h /d。筛选出 5 种主要培养基(20． 0 g 蔗糖、6． 0 g
琼脂粉、pH值 5． 6 ～ 5． 8)。诱导培养基(A) :MS + 3. 0 mg /L
6 － BA +1． 0 g /L 花宝 1 号 + 30 mg /L 柠檬酸;诱导培养基
(B) :VW +3． 0 mg /L 6 － BA +1． 0 g /L花宝 1 号 + 100 g /L香
蕉泥 + 30 mg /L柠檬酸 + 1． 0 g /L 活性炭;分化培养基(C) :
MS +5． 0 mg /L 6 － BA + 0． 5 mg /L NAA + 10% 椰子汁 +
30 mg /L 柠檬酸;壮苗生根培养基(D) :1 /2MS + 0． 1 mg /L
6 － BA +0． 3 mg /L NAA +2． 0 g /L活性炭。
1． 5 小苗炼苗和移栽
将准备移栽的试管苗不揭盖连瓶置于温室 3 ～ 4 周炼苗。
移栽时用水苔作栽培基质，所有操作工具和水苔均消毒灭菌。
移栽前先将水苔用清水浸泡 12 h，甩干后方可使用。移栽时
打开封口膜，小心夹出小苗，洗净根部培养基，于 0． 2%高锰
酸钾溶液中浸泡几分钟后捞出，用甩干的水苔包住小苗根部，
放入穴盘中;将移栽好的小苗穴盘放置于白天温度 22 ～
30 ℃、夜晚温度 18 ～ 25 ℃、相对湿度 65% ～ 85%、光照度低
于 10 000 lx、洁净通风的环境中。移栽结束后用 2 000 倍多
菌灵杀菌剂对小苗统一喷洒，2 周 1 次，连续喷洒 3 次;第 1
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周保持每天上午、下午 2 次喷雾增湿，第 2 周后浇水并且每
1 ～ 2 周施用 1 次均衡肥料，于 3 个月时统计。
2 结果与分析
2． 1 技术路线
试验流程见图 1、图 2。
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2． 2 花梗芽的诱导
利用花梗段侧芽在诱导培养基中诱导营养芽和花葶，培
养 2 ～ 3 个月即可获得;培养过程中若培养基消耗过多或褐化
严重则转接 1 次，培养基不变，连续 3 个月进行统计(表 1)。
由表 1 可见，MS、VW 2 种基础培养基均可作为诱导培养基，
但添加不同质量浓度的激素、添加物使 2 种基础培养基诱导
出不同的植物组织;因此，不能表明某一培养基更适合作为诱
导基础培养基。使用相同基础培养基，同时使用 6 － BA、
NAA时诱导率比单独使用 6 － BA 时低，且萌动出芽时间长。
当 6 － BA 的浓度达到 5． 0 mg /L 时，诱导率略下降且生长偏
弱，表明此浓度或更高浓度并不适于蝴蝶兰花梗侧芽的诱导;
单独使用3． 0 mg /L浓度的 6 － BA 时，蝴蝶兰花梗侧芽诱导率
较好。本试验中 A培养基(表 1 中 2 号培养基)外植体诱导
表现突出，出芽最早且出芽率达到 90 %，萌动仅需 12 d，形
成营养芽需要 2 个月左右;VW 培养基加入 100 g /L 香蕉泥、
1． 0 g /L花宝 1 号后，大多数诱导出花芽，其中 B培养基(表 1
中 5 号培养基)的出芽率达到 80 %，形成可诱导分化丛生芽
的花葶需 2 ～ 3 个月。
表 1 不同培养基对花梗侧芽诱导的结果
序号 基础培养基
激素浓度(mg /L)
6 － BA NAA
外植体数
(个)
萌动出芽
时间(d)
诱导率
(%) 备注
1 MS 1． 0 0． 1 20 18 35 大部分为营养芽，出芽缓慢
2 MS 3． 0 0． 0 20 12 90 绝大部分为营养芽，生长健壮
3 MS 5． 0 0． 5 20 14 75 大部分为营养芽，生长偏弱
4 VW 1． 0 0． 3 20 20 30 部分为花芽，生长较弱
5 VW 3． 0 0． 0 20 15 80 部分为花芽，出芽较快，生长健壮
6 VW 5． 0 0． 0 20 17 70 部分为花芽，生长偏弱
注:所有培养基均添加 1． 0 g /L花宝 1 号、30 mg /L柠檬酸;VW诱导培养基均添加 100 g /L香蕉泥。
2． 3 丛生芽的分化和增殖
将诱导出的营养芽从花梗节段基部切下，在各培养基中
进行丛生芽分化增殖，于 3 个月时统计(表 2)。由表 2 可见，
营养芽分化增殖时 MS培养基优于 VW培养基。NAA浓度为
0． 5 mg /L、6 － BA 浓度为 1． 0 ～ 7． 0 mg /L 时营养芽分化的丛
生芽增殖率逐渐提高;6 － BA浓度为 5． 0 mg /L时诱导分化的
平均出芽数较多，且生长健壮;6 － BA 浓度为 7． 0 mg /L 时诱
导分化的平均出芽数最多，但有部分畸形。可见，6 － BA 浓
度过高并不能达到良好效果，只有 6 － BA、NAA 在适宜浓度
下配合使用，才能取得最好的营养芽分化增殖效果。C 培养
基(表 2 中Ⅱ号培养基)最适于营养芽分化再增殖，其分化出
的芽数多、生长快、健壮、无畸形，且芽的生长均能成为小苗，
最早 1． 5 个月可见芽，但分化出增殖丛生芽需 2 个月左右;分
化出丛生芽后采用多芽增殖并仍使用 C 培养基，可极大缩短
增殖周期，仅需 1． 5 个月。
表 2 不同质量浓度 6 － BA培养基中营养芽的分化增殖结果
序号 基础培养基
6 － BA
(mg /L)
NAA
(mg /L)
外植体数
(个)
总出芽数
(个)
外植体平均
出芽数(个)
生长情况
Ⅰ MS 1． 0 0． 5 30 81 2． 7 增殖少，芽生长缓慢，长势不好
Ⅱ MS 5． 0 0． 5 30 216 7． 2 增殖多，芽生长快，健壮
Ⅲ MS 7． 0 0． 5 30 235 7． 8 增殖多，芽生长快，有畸形
Ⅳ VW 1． 0 0． 5 30 57 1． 9 增殖少，芽生长缓慢，长势一般
Ⅴ VW 5． 0 0． 5 30 175 5． 8 增殖多，芽生长快，健壮
Ⅵ VW 7． 0 0． 5 30 201 6． 7 增殖多，芽生长快，有畸形
注:培养基中均添加 10%椰子汁、30 mg /L柠檬酸。
将花梗段侧芽诱导出的花葶节部横向切割为 0． 5 ～
0． 8 cm 的切片，按生长方向接入 C 培养基，约 2 个月可见小
芽丛，分化增殖情况与营养芽增殖情况相似。
2． 4 小苗壮苗生根
当芽生长至 1． 5 cm时将其切下，转入 D培养基中壮苗生
根，约 30 d可见生根，50 d长出 3 条以上根，2 个月根长超过
1． 5 cm，则可进行炼苗。
2． 5 小苗移栽及栽培管理方法
小苗炼苗时，试管瓶不揭盖炼苗 3 ～ 4 周，移栽时挑选炼
过苗的蝴蝶兰组培苗，要求其无污染、叶数 3 ～ 5 张、叶宽
1． 5 ～ 2． 5 cm、叶子健壮、叶色翠绿、根数 3 条以上、根长 0． 8 ～
3． 0 cm、根系粗壮有活力、单轴茎较明显。小苗移栽后 1 周内
不浇水，尽量以喷雾方式供给水分，以便小苗及早生根，同时
可避免幼嫩小苗出现软腐病害，使小苗根部充分生长，但要保
持较高的湿度;第 2 周即可浇水，当小苗水草表面干燥，且观
察透明穴盘内下部无水滴水雾，即可浇透水;第 3 周后可施用
液肥，施肥间隔期为 1 周 1 次，开始时采用较低肥料浓度，随
后逐渐提高，但不可过高，小苗前期常施用 N ∶ P2O5 ∶ K2O 为
20% ∶ 20% ∶ 20% 的肥料，浓度为 3 000 ～ 4 000 倍液，施肥
时应薄肥勤施。当小苗长出新叶、新根即为成活，3 个月时的
成活率可达 95%以上。
3 结论与讨论
蝴蝶兰一般通过有性繁殖、无性繁殖 2 种方式进行繁殖，
有性繁殖多为杂交或自交苗，遗传性状不稳定，不能表现出优
良的母本性状，且花色、花期不易控制，因此蝴蝶兰快繁通常
采用无性繁殖［16］。蝴蝶兰植株极少发育侧枝，比其他种类兰
花更难以进行常规无性繁殖，无法大量生产［17］，组织培养是
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蝴蝶兰快速繁殖的主要手段［18 － 20］。在组织培养中，可通过诱
导原球茎途径进行植株再生［21］，也可利用丛生芽途径快速繁
殖，后者是从芽到芽的增殖，无需通过诱导原球茎分化不定芽
来稳定遗传母本的特征特性，从而可降低后代发生变异的概
率［22］。本试验采用从芽到芽的增殖途径，利用花梗芽诱导出
的营养芽、花葶组织来诱导分化丛生芽，减少变异且分化时间
短，大幅缩短了繁殖周期。
试验过程中第 1 次分化诱导使花梗段侧芽充分利用，不
破坏母株并尽可能保存母体，达到商业种植的高效利用;丛生
芽分化出来后的每次分化增殖过程均比第 1 次分化诱导过程
缩短一半时间，1． 5 个月即可增殖 6 倍左右，其他资料中尚未
见如此高的增殖倍数［16］。
由培养基的成分及外植体的培养过程可知，6 － BA 是诱
导侧芽萌发的主要因子，这与谭文澄等的观点［19］一致。向
VW培养基中添加香蕉泥、花宝 1 号可能是花梗侧芽诱导成
花葶的主要因素，有待进一步研究证实。柠檬酸可有效抑制
酶促褐变，通过降低褐变死亡率以提高诱导效率［23］，整个试
验中向培养基添加 30 mg /L柠檬酸效果显著，能够减少褐化。
试验首次将营养芽、花葶节切片于相同培养基、相同环境下诱
导分化出丛生芽;营养芽诱导分化丛生芽的关键点为茎基部，
将营养芽底部和花梗节段接触的部分切割后培养才易诱导出
丛生芽，丛生芽一般从营养芽基部的短缩茎分化出来，应注意
保存该部位;将试管花葶节部上下切割为 0． 5 ～ 0． 8 cm 的切
片，注意保留节部，按自然生长方向放入培养基中才能诱导分
化出大量节间丛生芽，没有节部的花葶组织一般无法分化出
丛生芽。分化增殖培养基中的椰子汁同样是增殖的关键因素
之一，从生产角度考虑，椰子汁含量为 10%时增殖倍数、增殖
时间、经济效益均为最佳。进行壮苗生根时，一般培养基只使
用 NAA或 IBA进行生根，而本试验添加少量 6 － BA 可使小
苗健壮生长并生根，提前进入炼苗阶段。小苗移栽时，用
0. 2%高锰酸钾溶液浸泡小苗几分钟，既能杀菌消毒，又可使
小苗伤口快速氧化愈合，从而提高成活率，此结论经实践总结
得出。组培苗于春季移栽，若栽培管理得当第 2 年春节即可
开花。
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