全 文 ：U SH ZI H EN M E D IC IN E A N D M A TE R IA M ED ICA R ES EA R C H Z峨洲)7 V O L. 18 N 0 . 9 时珍国医国药 2X() 7 年第 18 卷第 9期
表 2 。
表 2 各组对慢性肾功能衰姻大吸血电解质水平的影响 (无土 : )
组别 剂量 c/ g · k g一 , 心 . , /~ 司i L卫 / m m ol · L C e礴 C p / m m 0 1 · L 一 I
ō气à门了O矛夕04门、ù内j
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2,`几0564r38
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一
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幻曰一01
8017以54,山弓曰4心 .二ù .二山.正常对照
模型对照
肾衰宁胶囊
燕草高剂量
捧草中剂量
6 2 5
3 0
l 5
士 0 . 4 0
士 1 . 6 1 .
出 0 . 7 3△
出 0 . 5 6△
十
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L
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.
7 4 士 0 . 12
.
3 0 士 0 . 2 1 .
.
6
士 0 . 13△△
.
6 9 土 0 . 17 △ 之
与对照组比较 , . 尸 < 0 . 01 ;与模型组比较 , △ p < 0 . 05 , △ △ p < O
讨论 参考文献 :
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即扭叮 ao rt i e oc e lu s i o n an d re p e rfu s i o n [ J ] . U几 cS i , 19 1 , 4 9 ( 3 )
: 9 6 1
.
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腺嗦吟诱发的 CRF 模型已广泛应用于药效学研究 ,异常高
浓度腺嗦吟通过黄嗦吟氧化酶的作用变成极难溶于水的 2 , 8 -
二经基腺嗦吟 , 后者沉积在肾小管 ,影响了氮质化合物的排泄 , 导
致氮质血症 ,毒素蓄积及电解质紊乱 ,最终引起肾功能衰竭〔, 一 , 〕。
本实验观察到随着食用腺嗦吟时间的延长 ,大鼠日益消瘦 ,体毛
脱落 ,蜷缩拱背 ,精神萎靡 , 血 BU N , cS r 水平进行性升高 ,血钾 、
磷升高 ,血钙降低 。 律草煎剂能明显改善大 鼠肾衰症状 ,使大鼠
的活动 、外观接近正常大鼠 ,体重增长较模型对照组动物快 ,使血
BU N
,
cS
r 水平明显低于模型对照组 ,对肾衰大鼠的高钾 、磷及低
钙有不同程度的改善作用 。 可见藻草煎剂具有治疗慢性肾功能
衰竭大鼠的作用 ,关于其更深人的机理研究还有待于继续进行
探索。
[ 5 ]
反相高效液相色谱法
测定艾纳香中不同部位花椒油素的含量
文永新 , 黄永林 ` , 朱廷春 , 赵志国
(广西壮族自治区中国科学院 · 广西植物研究所 ,广西 桂林 541 0 0 6 )
摘要 : 目的 建立艾纳香中不 同部位花椒油素的含童测定方法 。 方法 以花椒油素为对照品 , z 0 R BxA x D B一 C : 。 ( 4 . 6 ~
xl 50 ~
,
5 卿 ) 色讲柱 , 甲醉 一水 ( 60 : 40 ) 为流动相 , 流速 0 . 8 n l l/ m in ,柱温 30 ℃ ,检浏 波长 20 n m 。 结果 花椒油紊在
0
.
0 1
一
0
. 以 m岁 耐 范围内呈良好线性关系 , 回归方程 Y = 12 6 26 1X + 27 . 肠 9 , ( r = 0 . 卯9 5) , 加样平均回收率为 98 . 1 % ,
人5刀为 1 . 06 % 。 结论 该方 法简便 、 准确 、 可靠 , 适用于艾纳香中花椒油素含量的测定 。
关键词 : 艾纳香 ; 花椒油素 ; 反相高效液相色语法
中图分类号 : 2R 84 . 2 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8刃80 5 ( 20 7 )09 2 13 7刃 2
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M e ht do s X即 ht ox y li n w as u s e d as er fe er n e e . C hor m a ot gar Ph i e 朋ayS w as pe for mr e d o n a Z O RB AX X D B一 C .。 ( 4 . 6 m m x 150
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04 m岁 m l , Y = 126 26 l X + 27 . 4 6 9 ( r 二 0 . 99 5 ) . hT e a v e r ag e er e o v e口 w as 98 . l l% a n d RS D w as l . 06 % . C o n d u ·
幼o n hT is m e thed 15 s i m lP e , a e e u ar t e a n d er p or d u e i b l e fo r th e d e t e mr in a t io n of x a n th o x y li n i n lB u me a b赫 a n jer a DC .
K e y w o r ds : lB
u
me
a ba ls a n诉ar n C . ; x a n th o x y li n ; RP 一H PL C
收稿日期 ; 2X() 7孤 一 12 ; 修订日期 : 2X() 7习 5一 16基金项目 : 广西 自然科学基金资助 项 目 ( N o . 俐4 808 7 ;
广西科技攻关资助项 目 ( N o . 肠 3《x洲〕2 4 )B
作者简介 : 文永新 ( 19 5 3 一 ) , 男 (汉族 ) ,广西桂林人 ,现任广西植物研究所
研究员 , 主要从事天然产物开发利 用研究工作 .
. 通讯作者简介 :黄永林 ( 19 74 一 ) , 男 (汉族 ) , 广西桂林人 , 现任广西植物
研究所助理研究负 , 学士学位 , 主要从事天然产物开发利 用研究工作 .
艾纳香 lB “ me 。 ba 肠a 几诉ar D C . 又称大风艾 、 大艾 、 冰片艾等 ,
属菊科多年生木质草本植物 ,为壮族民间草药 , 主产于广西西南
部和云南东南部及贵州 、广东等省。 艾纳香叶和嫩枝及根均可药
用 ,性味温辛 ,具有清热利尿 、 祛风消肿 、温中活血 、 消炎镇痛 、补
虚壮阳之功效 。 可用于治疗寒湿泻痢 、 腹痛肠鸣 、跌打刀伤和高
血压病等症川 。 对其化学成分的研究结果表明 , 艾纳香植物中
含有大量的花椒油素。 现有的药理研究结果表明花椒油素体内
·
2 13 7
时珍国医国药 2 )(X 7年第 18 卷第 9期 l S HZI HEN ME ID CIN E A N D M A .花R IA ME D I CA R EES A R CH Z仪刀 V O L. 18 N 0 . 9
外给药对胶原和 以F , A D P ,从 和凝血酶诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用及量一效关系 .tz , 〕。 同时 ,花椒油素作为间苯三酚
的衍生物 ,各种资料显示 ,很多间苯三酚衍生物都有生理活性 ,引
起了国内外药学及化学工作者的关注 ,所以了解艾纳香植物中花
椒油素的含量及分布对开发艾纳香植物资源具有较好的实用价
值。 有人采用反相高效液相法对较纯的花椒油素进行了含量测
定 [’] ,鉴于对含量低 ,成分相对复杂的植物资源中花椒油素的含
量测定未见文献报道 ,本实验探索出一套反相高效液相色谱法测
定花椒油紊在艾纳香中叶 、小枝条 、 茎中的含量 。 该方法简便 、可
靠 、 准确 ,结果可作为艾纳香植物中花椒油素的检测方法 。
1 药品与仪器
1
.
1 试荆与药材 花椒油素对照品为本实验室 自制 , LT C 的
fR
,
IR
,
vu
,
N M R值均与文献值一致川 ,液相色谱峰为单峰 ,纯度
达到 9 . 5% 。 所测样品采自广西天峨县 ,经广西植物研究所分
类室韦发南研究员鉴定为菊科植物艾纳香 ( lB ~
a b必 “州在m
D C
.
)的干燥地上部分。 色谱纯甲醇 (美国 ET DI A 公司 ) 。 重蒸
蒸馏水为自制 ,其他试剂均为 A R 级。
1
.
2 仪异 A igl en t一 1 0 分析型高效液相色谱仪 ,包括二极管阵
列检测器 、 四元梯度泵 、 在线真空脱气机 、 77 25 1手动进样器 、 H P
化学工作站 (美国 A igl 即 t 公司 ) 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 色谱柱为 Z O R BXA X DB 一 C .: 柱 ( 4 . 6 m m x 150
~
,
5 叩 ) ;柱温 30 ℃ ;流动相为甲醇一水 (体积比 60 : 40 ) ; 流速
0
.
s m」/而 n ;检测波长 20 n m ; 进样量 10 闪。 定量方法为外标
法 。 在上述条件下花椒油素色谱峰与其它组分达到了良好分离 。
色谱图见图 1 。
定峰面积 ,结果花椒油素峰面积值的人5刀为 0 . 39 % ( n 二 5 ) ,说明
仪器精密度良好 。
2
.
6 重复性实脸 精密称取同一样品 5 份 ,按 2 . 3 项下方法制
备 ,进行 5 次平行测定 ,计算艾纳香的含量 ,结果 刀5。 为 2 . 36 %
(
n 二 5 )
。 说明本法重复性较好。
2
.
7 加样回收率实脸 精密称取已知含量的同一样品 5 份 ,准确
加人花椒油素对照品 2 m g ,按 2 . 3 项下方法制备 , HP L C 分析 ,进
样量均为 10 闪,计算平均回收率 。 结果花椒油素的平均回收率
为 9 8 . 1 1% 沂5刀为 1 . 肠% ( n 二 5 ) 。 结果见表 l 。
襄 l 艾纳 . 样品加样回收率实脸
回收率 平均回收 月5刀
率 (% ) (% )óùù一ù3 . 6 17 4 2 . 心洲刃 0 5 . 5 76 23 , 627 6 2 . 以幻 0 5 . 620 13 . 6 13 2 2 . (拟】0 5 . 585 3
3
. 朋9 2 2 . 侧刃 0 5 . 63 3 6
3
.
7 15 6 2
. 仪心 0 5 . 6 58 3
98
.
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.肠
心一绷626114些97f如81兜.97
编号一12345
2
.
8 样品的侧定 精番称取不同部位艾纳香药材样品 1 9 ( 过 4O
目) ,按 2 . 3 项下方法制备 ,进样量均为 10 闪 ,外标法定量 ,计算
含量 ,取平均含量 。 测定结果见表 2 。
农 2 不同部位艾纳香中花椒油班的含. %
样品 含量
茎
小枝条
0
.以 3 3 0 .
0
.
03 0 4 0
.
0
.
3 5 9 4 0
.
7 0
.
04 1 8
5 0
.
0 3 0 2
3 0
.
3 6 1 6
平均含 t
0
. 《抖2 6
0
.
0 30 4
0
.
3 6 1 8
立0423拟
2吕公- ~ 兰目组尧会治乙鉴尧二` 么尧
0 2 今 6 吕 1 0
t / m i n
圈 1 花椒油索对照品及样品 HP LC 圈
2
.
2 对照品洛液的制备 精密称取花椒油素 20 m g , 置于 10 耐
容量瓶中 ,用甲醇超声溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,此溶液 A 质量
浓度为 0 . Z m『ml 。 准确吸取溶液 A 20 耐 , 置于 l o inl 容量瓶
中 ,用甲醇超声溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,此溶液 B 质量浓度为
0
.
04 m了耐 。 分别准确吸取溶液 B ,配成质量浓度分别为 0 . 0 1 ,
0
. 以抖 , 0 . 01 2 , 0 . 02 , 0 . 以 m岁ml 甲醇溶液 ,摇匀 ,过 0 . 45 卿 微孔
滤膜 ,作为对照品溶液备用 。
2
.
3 供试品洛液的制备 精密称取样品 1 9 (过 40 目筛 )于 10
耐 锥形瓶 , 加人甲醇 10 , 80 耐 超声提取 2 次 ( 2 h x l h) , 用少许
甲醇冲洗残渣 , 过滤 ,合并滤液加甲醇定容置 25 0 耐 , 摇匀 ,过
0
.
45 卜m 微孔滤膜 ,滤液作为供试品溶液备用 。
2
.
4 线性关系的考察 分别吸取花椒油素对照品溶液 , 注人液
相色谱仪中 (用 1 . 0 闪 定量环定量 ) , 按上述色谱条件测定 ,记
录峰面积和进样浓度 , 以进样浓度 ( X )为横坐标 , 峰面积 ( )Y 为
纵坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程 :
Y 二 1 26 2 6 l X + 2 7 . 46 9
, r 二 0 . 9 9 9 5
结果表明花椒油素在进样量浓度在 0 . 0 1 一 0 . 以 m留 ml 范
围内呈良好线性关系 。
2
.
5 精密度实脸 吸取花椒油素对照品溶液注人液相色谱仪
测定 ( 用 10 闪定量环定量 ) ,重复进样5次 ,按选定的色谱条件测
3 讨论
通过二极管阵列检测器在 190 一 950 nl 对花椒油素对照品
进行光谱波谱图的扫描 ,扫描结果在 ZI O lun 及 20 n m 波长附近
有较强吸收 ,但在靠近 21 0 n m 波长附近溶剂易产生干扰吸收 ,所
以本检测选用 2卯 n m 作为检测波长 。
在供试品样品的制备时 ,先后采用了甲醇回流提取及甲醉超
声提取制备供试品 ,并进行含量检测比较 ,结果表明两者相差较
小 ,因此本实验选用操作简便 、省时的甲醇超声提取制备供试品
溶液。
本实验探索出的 RP 一 H PCL 法检测花椒油素在艾纳香不同
部位含量的方法简便易行 ,稳定性好 ,准确度高 ,适于对艾纳香及
其它含有花椒油素植物中花椒油素的含量检测 。 从表 2 的结果
来看 , 艾纳香中不同部位叶 、小枝条 、茎中花椒油素的含量有比较
大的差别 ,其中叶中花椒油素的含量最高达 0 . 361 8% ,小枝条与
茎的含量匀较低仅为叶中含量的十分之一 , 通过对艾纳香叶 、 小
枝条 、茎中花椒油素的检测 ,结果可为充分开发与利用艾纳香奠
定基础 。
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