全 文 ：麦类作物学报　２０１４，３４（４）：４５４－４５９
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ　Ｃｒｏｐｓ　 ｄｏｉ：１０．７６０６／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－１０４１．２０１４．０４．０４
网络出版时间：２０１４－４－８
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｏｉ／１０．７６０６／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－１０４１．２０１４．０４．０４．ｈｔｍｌ
小麦－华山新麦草７Ｎｓ异附加系的分子细胞遗传学研究
收稿日期：２０１４－０１－１５　　　修回日期：２０１４－０２－２１
基金项目：农业部９４８项目（２０１３－Ｚ２８）；陕西省自然科学基础研究计划重点项目（２０１３ＪＺ００７）；西北农林科技大学唐仲英育种基金
项目。
第一作者Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉｕｊｕａｎｌｕｃｋ＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者：陈新宏（Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｘｈ２０８９＠１２６．ｃｏｍ）
王秀娟，赵继新，庞玉辉，孙树贵，张 军，鲁 敏，
王亮明，武 军，杨群慧，陈新宏
（西北农林科技大学农学院，陕西杨凌７１２１００）
摘　要：为了给有效利用华山新麦草基因提供新的种质材料，利用细胞遗传学、分子标记等技术，结合田
间农艺性状考察，对从小麦－华山新麦草七倍体材料 Ｈ８９１１－９９与硬粒小麦Ｄ４２８６杂交Ｆ４ 代分离群体中选育
的杂交后代１２ＤＨ２５进行了鉴定。华山新麦草基因组特异ＳＣＡＲ标记鉴定表明，１２ＤＨ２５含有华山新麦草遗
传物质；有丝分裂和花粉母细胞减数分裂中期Ｉ染色体数为２ｎ＝４４＝２２Ⅱ，基因组原位杂交（ＧＩＳＨ）出现两条
杂交信号，且能配对，表明两条外源染色体是华山新麦草的一对同源染色体。选取定位于小麦７个部分同源
群上的２８对ＳＴＳ标记对１２ＤＨ２５及其亲本基因组ＤＮＡ进行扩增，定位于小麦第７同源群上的ＳＴＳ标记
ＢＥ５９１１２７和ＢＧ２７４５７６能在１２ＤＨ２５中扩增出华山新麦草特征条带，将１２ＤＨ２５附加的华山新麦草染色体归
属于小麦第７部分同源群。由此确定矮秆材料１２ＤＨ２５是一个稳定的小麦－华山新麦草７Ｎｓ二体异附加系。
关键词：小麦；华山新麦草；矮秆；异附加系；ＳＣＡＲ；基因组原位杂交（ＧＩＳＨ）
中图分类号：Ｓ５１２．１；Ｓ３３４　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１００９－１０４１（２０１４）０３－０４５４－０６
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ－
ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　７Ｎｓ　Ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ
ＷＡＮＧ　Ｘｉｕｊｕａｎ，ＺＨＡＯ　Ｊｉｘｉｎ，ＰＡＮＧ　Ｙｕｈｕｉ，ＳＵＮ　Ｓｈｕｇｕｉ，ＺＨＡＮＧ　Ｊｕｎ，ＬＵ　Ｍｉｎ，
ＷＡＮＧ　Ｌｉａｎｇｍｉｎｇ，ＷＵ　Ｊｕｎ，ＹＡＮＧ　Ｑｕｎｈｕｉ，ＣＨＥＮ　Ｘｉｎｈｏｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｏｎｏｍｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｗｈｅａｔ－Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　ａｌｉｅｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　１２ＤＨ２５ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｆ４ｐｒｏｇｅｎｙ　ｏｆ
Ｈ８９１１－９９ａｎｄ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ｄｕｒｕｍ ｃｖ．Ｄ４２８６．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｎ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｃｙｔｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ＳＣＡＲ　ｍａｒｋｅｒｓ
ｗｅｒｅ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｉｓ　ａｌｉｅｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　１２ＤＨ２５．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　１２ＤＨ２５ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ
ｆａｖｏｒａｂｌｅ　ａｇｒｏｎｏｍｉｃ　ｔｒａｉｔｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ａｖｅｒａｇｅ　ｐｌａｎｔ　ｈｅｉｇｈｔ　ｗａｓ　５５．６４ｃｍ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｖｅｒｙ　ｌｏｗ．Ａ　ＳＣＡＲ
ｍａｒｋｅｒ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｔｏ　ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ　ｔｈｅ　ｗｈｅａｔ　ｌｉｎｅｓ　ｃａｒｒｙｉｎｇ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍＰ．ｈｕａｓｈａｎｉ－
ｃａ，ｗｉｔｈ　ａ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂａｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｏｆ　１２ＤＨ２５．Ｔｈｅ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　１２ＤＨ２５ｉｎ　ｒｏｏｔ　ｔｉｐ　ｃｅｌｓ
ｗｅｒｅ　４４ｗｉｔｈ　２２ｂｉｖａｌｅｎｔｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｍｏｓｔ　ＰＭＣ　ａｔ　Ｍ　Ｉ，ａｎｄ　ａ　ｐａｉｒ　ｏｆ　Ｎｓ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｗｉｔｈ　ｆｌｕｏｒｅｓ－
ｃｅｎｃｅ　ｓｉｇｎａｌｓ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ｉｎ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＧＩＳＨ）ａｎａｌｙｓｉｓ　ｕｓｉｎｇ　Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　ｗｈｏｌｅ
ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ．ＳＴＳ　ｍａｒｋｅｒｓ　ＢＥ５９１１２７　ａｎｄ　ＢＧ２７４５７６ ，ｗｈｉｃｈ　ｍａｐｐｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｗｈｅａｔ　ｈｏｍｏｃｅｌｏｇｏｕｓ
ｇｒｏｕｐ　７，ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂａｎｄｓ　ｆｏｒ　Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａ，Ｈ８９１１－９９ａｎｄ　１２ＤＨ２５．Ｉｔ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ　ｔｈａｔ
ｔｈｅ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｆｒｏｍＰ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａｈａｄ　ａ　ｈｏｍｏｅｏｌｏｇｏｕｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｅｖｅｎｔｈ　ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｓｅ－
ｑｕｅｎｔｉａｌｙ，１２ＤＨ２５ｗａｓ　ａ　ｄｗａｒｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｏｆ　ａ　ｗｈｅａｔ－Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａｄｉｓｏｍｉｃ　ａｌｉｅｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ，ｗｈｉｃｈ
ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｅｘｐｌｏｉｔｅｄ　ａｓ　ａｎ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎｄ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｐｒｏｇｒａｍｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍ；Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ；Ｄｗａｒｆ；Ａｌｉｅｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ；ＳＣＡＲ；Ｇｅ－
ｎｏｍｉｃ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＧＩＳＨ）
　　利用远缘杂交技术将外源染色体或染色体片
段导入小麦，从而将近缘种属的优良基因导入小
麦，可以改良小麦遗传组成，拓展小麦遗传基础，
对小麦品种遗传理论研究和育种工作具有重要的
意义。
华山新麦草 （Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ
Ｋｅｎｇ．）是禾本科（Ｇｒａｍｉｎｅａｅ）小麦族（Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ）
大麦亚族（Ｈｏｒｄｅｉｎａｅ）新麦草属（Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈ－
ｙｓ）的多年生异花授粉植物，具有抗寒、抗旱、耐瘠
薄、早熟、优质、矮秆、抗病等特点［１］。自２０世纪
８０年代Ｄｅｗｅｙ［２］首次确认华山新麦草含Ｎｓ组染
色体以来，国内外学者对华山新麦草基因组部分
基因进行了深入研究，表明其具有改良小麦品种
的抗条锈病、黄矮病和全蚀病基因［３－６］。本课题组
自２０世纪９０年代初成功获得普通小麦７１８２和
华山新麦草杂种一代 Ｈ８８１（２ｎ＝２８，ＡＢＤＮｓ），并
且从回交一代中选育出了普通小麦－华山新麦草
倍半二倍体 Ｈ８９１１－９９（２ｎ＝４９，ＡＡＢＢＤＤＮｓ）［１］。
在此基础上，侯文胜等［７］、傅 杰等［８］、赵继新
等［９－１０］、武 军等［１１］利用细胞遗传学鉴定了一批小
麦－华山新麦草中间材料，Ｄｕ等［１２－１５］结合ＥＳＴ和
ＳＴＳ标记鉴定出了一批抗病的４Ｎｓ、５Ｎｓ、６Ｎｓ和
７Ｎｓ小麦－华山新麦草二体异附加系，为研究和利
用华山新麦草有益基因提供了可能。
本研究利用细胞遗传学、分子标记等技术，结
合田间农艺性状调查，对从小麦－华山新麦草七倍
体材料 Ｈ８９１１－９９与硬粒小麦Ｄ４２８６杂交Ｆ４ 代
分离群体中选育的小麦－华山新麦草二体异附加
系１２ＤＨ２５进行了鉴定，并对其外源染色体的同
源群归属进行了确定，以期为有效利用华山新麦
草基因提供新的种质材料。
１　材料与方法
１．１　供试材料
华山新麦草（Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ），
普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍ）品种７１８２；普通小
麦与华山新麦草杂交和回交后选育的倍半二倍体
Ｈ８９１１－９９（染色体组型 ＡＡＢＢＤＤＮｓ，２ｎ＝４９），
Ｈ８９１１－９９ 与 硬 粒 小 麦 Ｄ４２８６（染 色 体 组 型
ＡＡＢＢ，２ｎ＝２ｘ＝２８）杂交选育的 Ｆ４ 代材料
１２ＤＨ２５。以上材料均来自陕西省植物遗传工程
育种重点实验室。
１．２　实验方法
１．２．１　农艺性状调查
供试材料于２０１２年１０月种植于西北农林科
技大学试验田，通过田间农艺性状调查、室内考
种，统计株高、小穗数、穗粒数、千粒重等。
１．２．２　ＤＮＡ提取
采用 ＣＴＡＢ法［１６］提取供试材料的基因组
ＤＮＡ。
１．２．３　华山新麦草基因组特异ＳＣＡＲ标记鉴定
根据Ｄｕ［１７］等发表的华山新麦草染色体特异
ＳＣＡＲ标记ＲＨＳ１４１（表１），以华山新麦草、７１８２、
Ｄ４２８６、Ｈ８９１１－９９和１２ＤＨ２５基因组 ＤＮＡ为模
板进行扩增。ＰＣＲ反应在ＰＴＣ－２００扩增仪上进
行，２０μＬ总反应体系中含２．０μＬ　１０×ｂｕｆｆｅｒ（含
Ｍｇ２＋），２．０μＬ 引 物 ＲＨＳ１４１（２．５μｍｏｌ·
ｍＬ－１），０．２μＬ　ＴａｑＥ（５ Ｕ·μＬ
－１），１．６μＬ
ｄＮＴＰ（２．５μｍｏｌ·ｍＬ
－１），２．５μＬ模板 ＤＮＡ
（１００μｇ·μＬ
－１），１１．７μＬ　ｄｄＨ２Ｏ。ＰＣＲ反应程
序为：９４℃预变性４ｍｉｎ；９４℃变性５０ｓ，６０℃复性
４５ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ，３５个循环；７２℃延伸１０
ｍｉｎ，４℃保存。１５０Ｖ恒压条件下，１％琼脂糖凝胶
电泳１ｈ，溴化乙锭（ＥＢ）染色，显影后照相观察。
１．２．４　细胞学观察
（１）根尖细胞染色体数目鉴定　将１２ＤＨ２５
种子浸泡至露白，４℃低温处理２４ｈ，然后将种子
转移到垫有 ２ 层湿润滤纸的培养皿内发芽
（２５℃），当根长至１～２ｃｍ时用镊子夹取根尖放
入冰水中处理２４ｈ，然后用卡诺氏Ⅰ固定液（３份
乙醇∶１份冰乙酸）固定，于－２０℃冰箱保存。一
周后，根尖转入７０％酒精中，４５％醋酸洋红染色
后制片，镜检。
（２）花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ（ＰＭＣ　ＭⅠ）
染色体构型观察　田间选取适龄幼穗，用卡诺氏
Ⅱ固定液（６份乙醇∶３份氯仿∶１份冰乙酸）固
定２４ｈ，转入７０％的酒精，４５％醋酸洋红染色后
制片，镜检。
１．２．５　基因组原位杂交（ＧＩＳＨ）
（１）材料处理　将１２ＤＨ２５的根尖和幼穗固
定２～５ｄ后用体积分数４５％醋酸压片，液氮冷冻
揭片，气干备用。
·５５４·第４期 王秀娟等：小麦－华山新麦草７Ｎｓ异附加系的分子细胞遗传学研究
（２）探针标记　用Ｄｉｇ－Ｎｉｃｋ－Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ　Ｍｉｘ
（Ｒｏｃｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）试剂盒标记基因组ＤＮＡ，详细
标记方法参考制造商产品说明书（２０μＬ体系中，
Ｄｉｇ－Ｎｉｃｋ－Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ　Ｍｉｘ　４μＬ，华 山 新 麦 草
ＤＮＡ　１μＬ，加ｄｄＨ２Ｏ至２０μＬ）。
（３）基因组原位杂交（ＧＩＳＨ）　参照武 军［１１］
等的方法。探针杂交信号用荧光素（ＦＩＴＣ）检测，
洗脱后用ＰＩ复染及抗退色剂（Ｈ－１３００）封片，用
ＯＬＹＭＰＵＳ　ＢＸ６０荧光显微镜检测，在蓝光下，外
源染色体呈黄绿色，小麦染色体呈红棕色，最后用
Ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｓ　ＳｅｎＳｙｓ　ＣＣＤ成像。
１．２．６　ＳＴＳ分析
从网站ｈｔｔｐ：／／ｗｈｅａｔ．ｐｗ．ｕｓｄａ．ｇｏｖ／ＳＮＰ／
ｎｅｗ／ｐｃｒ＿ｐｒｉｍｅｒｓ．ｓｈｔｍ选取定位于小麦７个部
分同源群上的２８对ＳＴＳ标记对普通小麦７１８２、
硬粒小麦Ｄ４２８６、Ｈ８９１１－９９、１２ＤＨ２５及华山新麦
草基因组ＤＮＡ进行扩增，所有引物由上海生工
生物技术有限公司合成。反应体系：２０μＬ反应
体系包括１０×ＰＣＲ　Ｂｕｆｆｅｒ（含 Ｍｇ２＋）２μＬ，引物
（２．５μｍｏｌ·ｍＬ
－１）２μＬ，Ｔａｑ酶（５Ｕ·μＬ
－１）
０．２μＬ，ｄＮＴＰ　Ｍｉｘｔｕｒｅ（２．５μｍｏｌ·ｍＬ
－１）１．６
μＬ，模板ＤＮＡ（５０μｇ·μＬ
－１）２μＬ，ｄｄＨ２Ｏ　１２．２
μＬ。ＰＴＣ－２００扩增仪扩增，反应程序：９４℃预变
性４ｍｉｎ，９４℃变性１ｍｉｎ，６０℃退火１ｍｉｎ，７２℃
延伸５５ｓ，３５个循环，７２℃延伸１０ｍｉｎ。用８％非
变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，银染，并照相。
２　结果与分析
２．１　农艺性状分析
１２ＤＨ２５主要表现为矮秆，平均株高仅为
５５．６４ｃｍ。与亲本小麦７１８２相比，１２ＤＨ２５的株
高显著降低，单株穗数、穗长、小穗数、千粒重等产
量性状有所下降，但与亲本差异不显著，穗粒数降
低显著（表２）。整体来看，１２ＤＨ２５农艺性状稳
定，是较好的遗传材料。
表１　分子标记及序列
Ｔａｂｌｅ　１　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｕｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
标记
Ｍａｒｋｅｒ
标记类型
Ｔｙｐｅ
序列
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ
染色体位置
Ｌｏｃａｔｉｏｎ
退火温度
Ａｎｎｅａｌｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／℃
ＲＨＳ１４１　 ＳＣＡＲ Ｆ
：ＣＴＣＧＧＣＡＣＣＡＴＡＡＡＣＴＡＴ
Ｒ：ＣＴＣＧＧＣＡＣＴＡＧＡＧＧＡＡＡＣ １Ｎ－７Ｎ ６０
ＢＥ５９１１２７　 ＳＴＳ Ｆ
：ＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＴＴＣＡＴＧＧＴＣＡ
Ｒ：ＣＧＴＴＧＣＡＧＣＡＡＴＣＡＧＴＣＣＴＡ ７ＡＳ　７ＢＳ　７ＤＳ　 ６０
ＢＧ２７４５７６ ＳＴＳ Ｆ：ＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＴＧＣＧＣＴＧＧＡＴＲ：ＡＧＣＴＣＧＡＴＧＡＴＣＴＧＣＴＴＧＧＴ ７Ａ７ＢＬ　７ＤＳ　 ６０
表２　异附加系１２ＤＨ２５及其亲本的农艺性状
Ｔａｂｌｅ　２　Ａｇｒｏｎｏｍｉｃ　ｔｒａｉｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　１２ＤＨ２５ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅｓ
供试材料
Ｔｈｅ　ｔｅｓｔｅｄ
ｍａｔｅｒｉａｌｓ
株高
Ｐｌａｎｔ
ｈｅｉｇｈｔ／ｃｍ
单株穗数
Ｐａｎｉｃｌｅｓ
ｐｅｒ　ｈｉｌ
穗长
Ｓｐｉｋｅ
ｌｅｎｇｔｈ／ｃｍ
小穗数
Ｓｐｉｋｅｌｅｔ
ｐｅｒ　ｓｐｉｋｅ
穗粒数
Ｋｅｒｎｅｌｓ
ｐｅｒ　ｓｐｉｋｅ
千粒重
１０００－ｇｒａｉｎ
ｗｅｉｇｈｔ／ｇ
７１８２　 ７７．１７±１．０４ａ ６．６７±０．５８ａ ８．２０±０．４０ｂ １５．６７±０．５８ａ ４４．６７±２．５２ａ ４１．４３±１．４４ａ
Ｄ４２８６　 ７８．９０±２．８２ａ ７．３３±１．５３ａ ７．３３±０．９９ｂ １６．００±１．００ａ ３６．０７±３．６９ａ ４０．４０±１．６１ａ
Ｈ８９１１－９９　 ７３．３０±１．０４ａ ５．６７±１．５３ａ １０．６７±０．５８ａ　 １５．３３±０．５８ａ ２５．３３±２．０８ｂ ３７．１７±３．２１ａ
１２ＤＨ２５　 ５５．６４±９．９１ｂ ５．２０±１．３０ａ ７．６４±０．９８ｂ １３．４０±２．３０ａ ２４．００±８．６０ｂ ３６．０４±９．５３ａ
　　数据后的小写字母不同表示材料间差异达０．０５显著水平
Ｓｍａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ａｔ　０．０５ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｌｅｖｅｌ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　１２ＤＨ２５ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｗｈｅａｔｓ
２．２　华山新麦草基因组特异ＳＣＡＲ标记鉴定结果
利用华山新麦草染色质的特异ＳＣＡＲ标记
ＲＨＳ１４１对供试材料的基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩
增，结果显示，华山新麦草、Ｈ８９１１－９９和１２ＤＨ２５
的ＤＮＡ可以扩增出９３４ｂｐ的华山新麦草特异条
带，普通小麦７１８２、硬粒小麦 Ｄ４２８６的 ＤＮＡ不
能扩增出条带，证明１２ＤＨ２５含有华山新麦草外
源染色体（图１）。
２．３　小麦－华山新麦草异附加系１２ＤＨ２５的细胞
学表现
对１２ＤＨ２５进行根尖有丝分裂（ＲＴＣ）及花
粉母细胞减数分裂中期Ｉ（ＰＭＣ　ＭＩ）染色体制片
观察，发现１２ＤＨ２５根尖细胞染色体数目为２ｎ＝
４４（图２ａ），在观察的５２个细胞中，４８个花粉母细
·６５４· 麦　类　作　物　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第３４卷
胞减数分裂中期Ｉ染色体具有２２ＩＩ构型，其中环
状二价体平均为１９．３４个，棒状二价体为２．５８个
（图２ｂ），说明１２ＤＨ２５细胞学基本稳定。
２．４　ＧＩＳＨ分析结果
以华山新麦草基因组 ＤＮＡ 为探针，对
１２ＤＨ２５根尖体细胞进行原位杂交鉴定，显示根
尖体细胞（ＲＴＣ）中有２条带有明显黄绿色杂交
信号的染色体（图３ａ），表明这两条染色体来源于
华山新麦草Ｎｓ基因组。花粉母细胞减数分裂中
期Ｉ（ＰＭＣ　ＭＩ）基因组原位杂交结果显示，有１个
二价体显示黄绿色杂交信号，表明这２条外源Ｎｓ
染色体能够完全配对（图３ｂ），说明１２ＤＨ２５中的
２条外源染色体是华山新麦草的１对染色体，
１２ＤＨ２５是小麦－华山新麦草二体异附加系。
　　Ｍ：ＤＮＡ　Ｍａｋｅｒ　ＤＬ　２０００；１：华山新麦草（Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａ）；２：
７１８２；３：Ｄ４２８６；４：Ｈ８９１１－９９；５：１２ＤＨ２５
图１　华山新麦草基因组特异ＳＣＡＲ标记分析
Ｆｉｇ．１　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｇｅｎｏｍｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ＳＣＡＲ　ｍａｒｋｅｒ
图２　根尖细胞（ａ）和花粉母细胞（ｂ）观察
Ｆｉｇ．２　Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔ－ｔｉｐ　ｃｅｌ（ａ）ａｎｄ　ｐｏｌｅｎ　ｍｏｔｈｅｒ　ｃｅｌ（ｂ）ｏｆ　１２ＤＨ２５
图３　根尖细胞（ａ）及花粉母细胞（ｂ）原位杂交
Ｆｉｇ．３　Ｇｅｎｏｍｉｃ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＧＩＳＨ）ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ－ｔｉｐ　ｃｅｌ（ａ）ａｎｄ　ｐｏｌｅｎ　ｍｏｔｈｅｒ　ｃｅｌ（ｂ）ｏｆ　１２ＤＨ２５
２．５　ＳＴＳ标记分析结果
利用２８对 ＳＴＳ标记对供试材料基因组
ＤＮＡ的扩增结果表明，２对定位于小麦第７部分
同源群上的ＳＴＳ标记ＢＥ５９１１２７和ＢＧ２７４５７６（表
１）在 Ｈ８９１１－９９、１２ＤＨ２５及华山新麦草基因组
ＤＮＡ均扩增出特征条带，分别约１　０００ｂｐ（图４ａ）
和５００ｂｐ（图４ｂ），而在普通小麦７１８２、硬粒小麦
Ｄ４２８６中无此条带。
·７５４·第４期 王秀娟等：小麦－华山新麦草７Ｎｓ异附加系的分子细胞遗传学研究
　　Ｍ：ＤＮＡ　Ｍａｋｅｒ　ＤＬ２０００；１：７１８２；２：Ｄ４２８６；３：Ｈ８９１１－
９９；４：１２ＤＨ２５；５：华山新麦草（Ｐ．ｈｕａｓｈａｎｉｃａ）；箭头所指为特
征条带 Ｔｈｅ　ａｒｒｏｗ　ｐｏｉｎｔｓ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｂａｎｄ
图４　ＳＴＳ标记ＢＥ５９１１２７ （ａ）和ＢＧ２７４５７６ （ｂ）扩增结果
Ｆｉｇ．４　Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆ　ＳＴＳ　ｍａｒｋｅｒｓ
ＢＥ５９１１２７ （ａ）ａｎｄ　ＢＧ２７４５７６ （ｂ）
３　讨 论
ＳＴＳ（Ｓｅｑｕｅｎｃｅ－Ｔａｇｇｅｄ　Ｓｉｔｅ）来自转录间隔
区，是基因组上定位明确的短ＤＮＡ序列，在近缘
种属间有很高的保守性［１８］。ＳＴＳ已作为一个有
效的工具广泛应用于异染色体的基因分析。目前
由于没有来自华山新麦草 Ｎｓ基因组的标记，因
此利用小麦ＳＴＳ标记划分华山新麦草的Ｎｓ染色
体同源群。前人研究表明，小麦ＳＴＳ标记在异种
属间具有很高的通用性［１９－２１］。Ｄｕ等［１５］用小麦
ＳＴＳ标记ＢＥ５９１１２７和ＢＧ２７４５７６证明小麦附加
材料中含有华山新麦草第７同源群染色体，本实
验结论与其结果吻合，因此将１２ＤＨ２５附加的华
山新麦草染色体归属小麦第７同源群。
株高是小麦的重要农艺性状之一，矮秆和半
矮秆小麦品种的育成和推广对小麦产量的提高起
了关键性作用，矮化育种已成为高产育种的一个
重要途径［２２］。目前，在世界小麦矮化育种中，应
用最为广泛的矮秆基因主要来自日本的赤小麦
（Ａｋａｇｏｍｕｇｉ）、达摩麦（Ｄａｒｕｍａ）及由达摩衍生出
的农林１０号（Ｎｏｒｉｎ　１０）［２３］。应用范围最广的矮
秆基因仅有Ｒｈｔ１、Ｒｈｔ２、Ｒｈｔ８ 和Ｒｈｔ９ 等个别基
因［２４－２６］，其利用的单一化在一定程度上限制了小
麦品种产量的进一步提高，创造和筛选新的矮秆
基因尤为重要。
目前，前人从小麦与中间偃麦草［２７］、粗山羊
草［２８］、长穗偃麦草［２９］的杂交后代中选育了多个矮
秆种质，这说明远缘杂交是获得新矮秆资源的有
效途径之一。华山新麦草平均株高为６０～７０
ｃｍ，具有矮秆的优良特性［１］，本实验中创制的
１２ＤＨ２５是一个小麦－华山新麦草异附加系，有利
于华山新麦草矮秆基因在小麦中的利用。
Ｄｕ等［１５］鉴定出了一个高抗叶锈病的小麦－
华山新麦草７Ｎｓ二体异附加系２－１－６－３，平均株高
为７５ｃｍ，而本研究中鉴定的１２ＤＨ２５平均株高
仅为５５．６４ｃｍ。两个材料都附加了两条华山新
麦草７Ｎｓ染色体，株高却有明显差异，造成这一
现象 的 原 因 可 能 是 材 料 选 育 的 途 径 不 同，
１２ＤＨ２５的亲本除了７１８２、华山新麦草外，较２－１－
６－３还多了一个亲本Ｄ４２８６，从而使受体遗传背景
发生了变化。
高中良等［３０］、李杏普等［３１］认为某些矮秆基因
降低株高的同时，也有可能降低产量。本研究中
创制的小麦－华山新麦草异附加系１２ＤＨ２５与亲
本小麦品种７１８２相比，平均株高降低了２７．９０％，
能有效矮化株高，同时产量性状单株穗数、小穗
数、千粒重等都有所下降。产生这种现象的原因
可能是异附加系１２ＤＨ２５导入的华山新麦草的染
色体上含有矮秆基因的同时，也带入了一些不利
于产量性状的基因，也可能是外源遗传物质的导
入引起了小麦亲本相关基因突变或表达。由于小
麦矮 秆 性 状 受 多 因 素 影 响，导 致 异 附 加 系
１２ＤＨ２５株高显著降低的具体原因或遗传机理尚
不清楚，另外，该矮秆异附加系是否具有新的矮秆
基因，还需进一步研究。
参考文献：
［１］Ｃｈｅｎ　Ｓ　Ｙ（陈漱阳），Ｚｈａｎｇ　Ａ　Ｊ（张安静），Ｆｕ　Ｊ（傅 杰）．Ｔｈｅ
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍａｎｄ　Ｐｓａｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ
ｈｕａｓｈａｎｉｃａ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｇｅｎｅｔｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ（遗传学报），１９９１，１８
（６）：５０８－５１２（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）．
［２］Ｄｅｗｅｙ　Ｄ　Ｒ，Ｇｕｓｔａｆｓｏｎ　Ｊ　Ｐ．Ｇｅｎｅ　Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　Ｉｍ－
ｐｒｏｖｅｍｅｎｔ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ，１９８４：２０９－２７９．
［３］Ｋａｎｇ　Ｈ　Ｙ，Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｆｅｄａｋ　Ｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｒｏｍｏ－
ｓｏｍｅ　３Ｎｓ　ｆｒｏｍＰｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａｉｎｔｏ　ｗｈｅａｔ　ｓｐｅｃｉｆ－
ｙｉｎｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｓｔｒｉｐｅ　ｒｕｓｔ［Ｊ］．ＰｌｏＳ　Ｏｎｅ，２０１１，６（７）：
ｅ２１８０２．
［４］Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｙｕ　Ｋ，Ｘｉｅ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　３Ｎｓ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｏｆ　Ｐｓａｔｈｙ－
ｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　ｃａｒｒｉｅｓ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅ（ｓ）ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｗｈｅａｔ
ｓｔｒｉｐｅ　ｒｕｓｔ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎｄ　Ｇｅｎｏｍｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，
２０１１，１３４（２）：１３６－１４３．
［５］Ｓｏｎｇ　Ｓ，Ｔａｏ　Ｙ，Ｚｈａｎｇ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ，ａ
ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　Ｂａｒｌｅｙ　ｙｅｌｏｗ　ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ－
ＧＡＶ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１３，１３７
（２）：２１７－２２１．
［６］Ｗａｎｇ　Ｍ　Ｎ（王美南），Ｓｈａｎｇ　Ｈ　Ｓ（商鸿生）．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅ－
ｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎ　Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａｔｏ　ｗｈｅａｔ　ｔａｋｅ－ａｌ　ｆｕｎ－
ｇｕｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｕｎｉｖ．Ａｇｒｉｃ．Ｂｏｒｅａｌｉ－ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ（西北农业学
报），２０００，２８（６）：６９－７１（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［７］Ｈｏｕ　Ｗ　Ｓ（侯文胜），Ｚｈａｎｇ　Ａ　Ｊ（张安静），Ｙａｎｇ　Ｑ　Ｈ（杨群慧），
·８５４· 麦　类　作　物　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第３４卷
ｅｔ　ａｌ．Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍ－ｐｓ－
ａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｉｃａ　ａｌｉｅｎ　ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ　ｌｉｎｅｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｂｏ－
ｔａｎｉｃａ　Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａ　Ｓｉｎｉｃａ（西北植物学报），１９９７，１７
（３）：３６８－３７３（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［８］Ｆｕ　Ｊ（傅 杰），Ｗａｎｇ　Ｍ　Ｎ（王美南），Ｚｈａｏ　Ｊ　Ｘ（赵继新），ｅｔ　ａｌ．
Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｗｈｅａｔ－Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈ－
ｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　ｍｅｄｉｕｍ　ｍａｔｅｒｉａｌ　Ｈ８９１１ ｗｉｔｈ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ
ｗｈｅａｔ　ｔａｋｅ－ａｌ　ｆｕｎｇｕｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｂｏｔａｎｉｃａ　Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａ
Ｓｉｎｉｃａ（西北植物学报），２００３，１２：２１５７－２１６２（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ
Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［９］Ｚｈａｏ　Ｊ　Ｘ（赵继新），Ｃｈｅｎ　Ｘ　Ｈ（陈新宏），Ｗａｎｇ　Ｘ　Ｌ（王小利），
ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｌｉｅｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅｓ　ｏｆ
Ｔｒｉｔｉｃｕｍ－Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ（西北农林科技大学学
报：自然科学版），２００４，３２（１１）：１０５－１０８，１１３（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ
Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［１０］Ｚｈａｏ　Ｊ　Ｘ（赵继新），Ｃｈｅｎ　Ｘ　Ｈ（陈新宏），Ｗａｎｇ　Ｘ　Ｌ（王小
利），ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｌｉｅｎ　ｓｕｂｓｔｉｔｕ－
ｔｉｏｎ　ｌｉｎｅｓ　ｏｆ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ－Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｂｏｔａｎｉｃａ
Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａ　Ｓｉｎｉｃａ（西北植物学报），２００４，２４（１２）：
２２７７－２２８１（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［１１］Ｗｕ　Ｊ（武 军），Ｍａ　Ｌ（马 琳），Ｚｈａｏ　Ｊ　Ｘ（赵继新），ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃ－
ｕｌａｒ　ｃｙｔｏｌｏｇｙ　ｏｎ　ａ　ｄｗａｒｆ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｔｒｉｔｉｃｕｍ
ａｅｓｔｉｃｕｍ × Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ（西北
农林科技大学学报：自然科学版），２０１０，３８（１２）：１２３－１２７（ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［１２］Ｄｕ　Ｗ　Ｌ，Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｌｕ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｗｈｅａｔ－
Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　Ｋｅｎｇ　４Ｎｓ　ｄｉｓｏｍｉｃ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ
ｆｏｒ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｔｉｌｅｒ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ａｎｄ　ｓｔｒｉｐｅ　ｒｕｓｔ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．
Ｐｌａｎｔａ，２０１４，２３９（１）：９７－１０５．
［１３］Ｄｕ　Ｗ　Ｌ，Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｌｕ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｉｄｅｎｔｉｆｉ－
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｗｈｅａｔ－Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　Ｋｅｎｇ　５Ｎｓ　ｄｉ－
ｓｏｍｉｃ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｉｐｅ　ｒｕｓｔ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｒｅｅｄｉｎｇ，２０１３，３１（４）：８７９－８８８．
［１４］Ｄｕ　Ｗ　Ｌ，Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｐａｎｇ　Ｙ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒ－
ｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　Ｋｅｎｇ　６Ｎｓ　ｃｈｒｏｍｏ－
ｓｏｍｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｏｍｍｏｎ　ｗｈｅａｔ［Ｊ］．ＰｌｏＳ　Ｏｎｅ，２０１３，８（１）：
ｅ５３９２１．
［１５］Ｄｕ　Ｗ　Ｌ，Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｗａｎｇ　Ｌ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃ－
ｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　Ｋｅｎｇ　７Ｎｓ　ｃｈｒｏ－
ｍｏｓｏｍｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｌｉｎｅ　ｗｉｔｈ　ｌｅａｆ　ｒｕｓｔ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．ＰｌｏＳ　Ｏｎｅ，
２０１３，８（８）：ｅ７０８７９．
［１６］Ｃｏｔａ－Ｓáｎｃｈｅｚ　Ｊ　Ｈ，Ｒｅｍａｒｃｈｕｋ　Ｋ，Ｕｂａｙａｓｅｎａ　Ｋ．Ｒｅａｄｙ－ｔｏ－
ｕｓｅ　ＤＮＡ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ＣＴＡＢ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｄａｐｔｅｄ　ｆｏｒ　ｈｅｒｂａｒ－
ｉｕｍ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ａｎｄ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｕｓ　ｐｌａｎｔ　ｔｉｓｓｕｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｍｏ－
ｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　Ｒｅｐｏｒｔｅｒ，２００６，２４（２）：１６１－１６７．
［１７］Ｄｕ　Ｗ　Ｌ，Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｗａｎｇ　Ｌ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｎｏｖｅｌ　ＳＣＡＲ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ
ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ　ｈｕａｓｈａｎｉｃａ　Ｋｅｎｇ　ｃｈｒｏｍａｔｉｎ　ｉｎｔｒｏ－
ｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１３，１２
（４）：４７９７－４８０６．
［１８］Ｇａｌｅ　Ｍ　Ｄ，Ｄｅｖｏｓ　Ｋ　Ｍ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒａｓｓｅｓ
［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，
１９９８，９５（５）：１９７１－１９７４．
［１９］Ｗａｎｇ　Ｄ，Ｚｈｕａｎｇ　Ｌ　Ｆ，Ｓｕｎ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ａｌｏｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｐｏｗｄｅｒｙ
ｍｉｌｄｅｗ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｌｏｃｕｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ａｒｍ　６ＲＬ　ｏｆ　Ｓｅ－
ｃａｌｅ　ｃｅｒｅａｌｅ　Ｌ．ｃｖ．＇Ｊｉｎｇｚｈｏｕｈｅｉｍａｉ＇［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２０１０，１７６
（２）：１５７－１６６．
［２０］Ｋｏｎｇ　Ｌ　Ｎ，Ｌｉ　Ｑ，Ｗａｎｇ　Ｈ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ
ｏｆ　ｗｈｅａｔ－Ｒｏｅｇｎｅｒｉａ　ｃｉｌｉａｒｉｓ　ａｄｄｉｔｉｏｎｓ　ｌｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｈｅｒｅｄｉｔａｓ，
２００８，３０（１０）：１３５６－１３６２．
［２１］Ｓａｉｄ　Ｍ，Ｃａｂｒｅｒａ　Ａ．Ａ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｍａｐ　ｏｆ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　４Ｈｃｈ
ｆｒｏｍ　Ｈ．ｃｈｉｌｅｎｓｅ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ＳＳＲ，ＳＴＳ　ａｎｄ　ＥＳＴ－ＳＳＲ　ｍｏｌｅｃｕ－
ｌａｒ　ｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２００９，１６７（２）：２５３－２５９．
［２２］Ｘｕ　Ｘ　Ｂ（徐相波），Ｚｈａｎｇ　Ａ　Ｍ（张爱民），Ｌｉ　Ｘ　Ｈ（李新华），ｅｔ
ａｌ．Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ
ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅｓ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｎｕｃｌｅ－
ａｔａｅ　Ｓｉｎｉｃａ（核农学报），２００１，１５（３）：１８８－１９２（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［２３］Ｈａｎ　Ｊ　Ｒ（韩静然），Ｗａｎｇ　Ｃ　Ｙ（王长有），Ｚｈａｏ　Ｎ　Ｊ（赵宁娟），
ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｗａｒｆ　ｔｒａｉｔ　ｉｎ　ｎｅｗ　ｗｉｎｔｅｒ　ｗｈｅａｔ
ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｎ０２３８Ｄ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｏｃｃｉｄｅｎ－
ｔａｌｉｓ　Ｓｉｎｉｃａ（西北农业学报），２０１０，１９（６）：６０－６３（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［２４］Ａｈｍａｄ　Ｍ，Ｓｏｒｒｅｌｓ　Ｍ　Ｅ．Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅ　ａｌｅｌｅｓ
ｌｉｎｋｅｄ　ｔｏ　Ｒｈｔ８　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２００２，
１２３（２）：２３５－２４０．
［２５］Ｂｏｔｗｒｉｇｈｔ　Ｔ　Ｌ，Ｒｅｂｅｔｚｋｅ　Ｇ　Ｊ，Ｃｏｎｄｏｎ　Ａ　Ｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｉｎ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　Ｒｈｔ８　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅ　ｏｎ　ｌｅａｆ　ｅｐｉｄｅｒ－
ｍａｌ　ｃｅｌ　ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｅａｒｌｙ　ｖｉｇｏｕｒ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓ－
ｔｉｖｕｍＬ．）［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｂｏｔａｎｙ，２００５，９５（４）：６３１－６３９．
［２６］Ｅｌｉｓ　Ｍ，Ｓｐｉｅｌｍｅｙｅｒ　Ｗ，Ｇａｌｅ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．“Ｐｅｒｆｅｃｔ”ｍａｒｋｅｒｓ　ｆｏｒ
ｔｈｅ　Ｒｈｔ－Ｂ１ｂａｎｄ　Ｒｈｔ－Ｄ１ｂｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ［Ｊ］．Ｔｈｅｏ－
ｒｅｔｉｃａｌ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２００２，１０５（６－７）：１０３８－１０４２．
［２７］Ｂａｏ　Ｙ　Ｇ，Ｃｕｉ　Ｆ，Ｌｉ　Ｘ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ
ｄｗａｒｆ　ａｎｄ　ｅａｒｌｉｎｅｓｓ　Ｔｒｉｔｉｔｒｉｇｉａ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｓｈａｎｎｏｎｇ　００５７－２
［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，１７（４）：
６８４－６８９．
［２８］Ｚｏｎｇ　Ｈ，Ｃｕｉ　Ｆａ，Ｂａｏ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒｓ
ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｒｈｔ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｌｉｎｅ　Ｓｈａｎｎｏｎｇ　４９５
［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ　Ｃｒｏｐｓ，２００９，２９（３）：３８５－３８９．
［２９］Ｃｈｅｎ　Ｇ　Ｌ（陈桂玲）．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒ
ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ－Ｔｈｉｎｏｐｙｒｕｍ　ｐｏｎｔｉｃ－
ｕｍｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｌｉｎｅ［Ｄ］．Ｍａｓｔｅｒ　Ｄｅｇｒｅｅ　Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｈａｎ－
ｄｏｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（山东农业大学硕士学位论文），
２０１１：１－２（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）．
［３０］Ｇａｏ　Ｚ　Ｌ（高中良），Ｚｈｅｎｇ　Ｑ　Ｙ（郑钦玉）．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｏｍｉｎａｎｔ
ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｎ　ｐｌａｎｔ　ｈｅｉｇｈｔ　ａｎｄ　ｇｒａｉｎ　ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎ　ｗｈｅａｔ
［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｓｉｎｉｃａ（华北农学报），２００８，
２３（Ｚ１）：１－６（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
［３１］Ｌｉ　Ｘ　Ｐ（李杏普），Ｐａｎｇ　Ｃ　Ｍ（庞春明），Ｊｉａｎｇ　Ｃ　Ｚ（蒋春志），ｅｔ
ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｇｅｎｅｓ　ｏｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ
ｓｐｒｉｎｇ　ｗｈｅａｔ　ｐｌａｎｔ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｉｎｄｉｒｅｃｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｇｒａｉｎ　ｙｉｅｌｄ［Ｊ］．
Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－Ｓｉｎｉｃａ（华北农学报），１９９８，１３
（４）：１－７（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ）．
·９５４·第４期 王秀娟等：小麦－华山新麦草７Ｎｓ异附加系的分子细胞遗传学研究