全 文 ：本实验初步建立了杜仲饮片 HPCE指纹图谱分
析方法，该方法准确可靠，重现性好，为杜仲饮片内
在质量的综合评价和全面控制提供科学依据。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:154.
［2］陈晓昱，骆莉莉，任广聪，等 . 杜仲炮制前后松脂醇二葡
萄糖苷含量的比较［J］. 华西药学杂志，2008，23(5) :
592-593.
［3］王丽楠，杨美华 . HPLC法测定不同生长年限杜仲皮中
松脂醇二葡萄糖苷 ［J］. 中草药，2009，40(4) :651-
653.
［4］王丽楠，杨美华 . 杜仲不同部位主要有效成分含量比
较［J］. 天然产物研究与开发，2009，21(1) :108-110.
［5］伍 庆，张明时，王兴宁，等 . 高效液相色谱法同时测定
杜仲药材中绿原酸和松脂醇二葡萄糖苷的含量［J］. 时
珍国医国药，2008，19(2) :308-309.
［6］王丽楠，李伟，覃洁萍，等 . 不同采收期杜仲不同部位主
要有效成分的动态研究［J］. 中国药业，2009，18(18) :
29-31.
［7］平丽，杨中林，张丹，等 . 杜仲生品及盐炙品 HPLC指纹
图谱比较研究［J］. 中医药学报，2009，37(6) :65-68.
［8］狄留庆，刘圣金，赵晓莉，等 . 杜仲药材 HPLC 指纹图谱
及其共有模式的建立［J］. 中草药，2007，38(4) :596-
599.
金钱草药材的 HPLC指纹图谱研究
郭林林1，赵 德2，邓 君1*
(1. 西南大学药学院，重庆 400716;2. 北大国际医院集团重庆大新药业股份有限公司，重庆 400700)
摘要 目的:建立金钱草药材的 HPLC指纹图谱，为金钱草药材的质控提供依据。方法:用水煎-正丁醇萃取-
甲醇溶解制备样品溶液，采用 RP-HPLC 分析，色谱条件为 Phenomenex C18色谱柱(4. 6 mm × 150 mm，5 μm) ，以含
0. 5 %冰醋酸的乙腈(A)-0. 5 %冰醋酸水(B)梯度洗脱，流速 1. 0 mL /min，柱温30 ℃，检测波长 255 nm，进样量 20
μL。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同批次金钱草药材的 HPLC图进行比较分析。结果:
建立了金钱草药材的 HPLC指纹图谱，以芦丁为参照峰，确立了金钱草药材指纹图谱中的 13 个共有峰。结论:所建
立的指纹图谱稳定性和重现性均好，可用于金钱草药材的常规质量控制。
关键词 金钱草;报春花科;HPLC;指纹图谱
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)03-0382-04
Study on HPLC Fingerprint of Herba Lysimachiae
GUO Lin-lin1，ZHAO De2，DENG Jun1
(1. College of Pharmaceutical Sciences，Southwest University，Chongqing 400716，China;2. PKU International Healthcare Group
Chongqing Daxin Pharmaceutical Co.，Ltd.，Chongqing 400700，China)
Abstract Objective:To establish the chromatographic fingerprint for Herba Lysimachiae by RP-HPLC. Methods:The sample
solutions were prepared by extracting material with boiling water，followed by extracting with BuOH from the aqueous extract and ana-
lyzed by RP-HPLC with a Phenomenex C18 column(4. 6 mm × 150 mm，5 μm) ，gradiently eluted with A(acetonitrile containing 0. 5 %
of acetic acid)-B(water containing 0. 5 % of acetic acid)at 30 ℃，and monitored with UV detector at 255 nm. The flow rate was 1. 0
mL /min，and sample volume injected was 20 μL. The chromatograms of different batches of Herba Lysimachiae were compared by the
software of Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of TCM(Version 2004A). Results:HPLC Fingerprint of Her-
ba Lysimachiae was established with Rutin as the reference compound. 13 common peaks were selected as the fingerprint peaks of Her-
ba Lysimachiae. Conclusion:The established HPLC fingerprint of Herba Lysimachiae has desirable precision，reproducibility，and can
be applied to routine quality control of Herba Lysimachiae.
Key words Herba Lysimachiae;Primulaceae;HPLC;Fingerprint
收稿日期:2011-11-16
作者简介:郭林林(1986-) ，女，硕士研究生，专业方向:药用植物生物工程;Tel:13658351907，E-mail:happydaygoodluck1234@ 126. com。
* 通讯作者:邓君，Tel:023-68250761，Fax:023-68251225，E-mail:dengjcq@ 163. com。
传统中药金钱草，是报春花科珍珠菜属植物过
路黄 Lysimachia christinae Hance 的干燥全草，具有
清利湿热、通淋、消肿等功效〔1〕，临床常用于热淋、
沙淋、尿涩作痈、黄疸尿赤、痈肿疔疮、肝胆结石、尿
·283· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 3 期 2012 年 3 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.03.018
路结石等症的治疗，据文献记载，尤对肝胆结石有特
效〔2〕。金钱草在临床上应用较为广泛，目前全国生
产的金钱草制剂或以金钱草为主药的中药制剂多达
十几种，生产的厂家有数十个。
但金钱草的同名异物现象十分严重，除药典收
载的过路黄外，在各地还有多种其他如豆科植物广
金钱草 Desmodium styracifolium(Osb. )Merr. 、旋花
科植物马蹄金 Dichondra repens Forst. 、唇形科植物
活血丹 Glechoma longituba(Nakai)Kupr. 、伞形科植
物白毛天胡荽 Hydrocotyle sibthorpioides Lam. var.
batrachium(Hance) Hand. Mazz. 也被用作金钱
草〔3，4〕;过路黄的同属植物聚花过路黄 Lysimachia
congestiflora Hemsl. 、点腺过路黄 Lysimachia hemsley-
ana Maxim. 也常被误作金钱草采收使用〔5〕。金钱
草的基源混淆直接导致其临床疗效不稳定，这不但
影响对金钱草药效的判断，更重要的是延误疾病的
治疗。所以，有必要建立专属性强的质量控制方法，
以区分金钱草及其混伪品。
目前，药典收载的金钱草质量标准中，定性鉴别
主要包括粉末显微鉴定和薄层色谱(TLC)鉴别，
TLC以槲皮素、山柰素为对照品;其含量测定项也以
槲皮素和山柰素为对照品〔1〕。但槲皮素和山柰素
广泛存在于植物界，也存在于其他各种金钱草伪品
中，并非金钱草的特征化合物;而且他们的生理活性
也与金钱草的临床疗效无显著关系，故用槲皮素、山
柰素的有无及含量评价金钱草的质量有欠科学性。
文献报道未见金钱草化学成分的 HPLC 指纹图谱研
究，本文采用 RP-HPLC 比较分析了 12 批金钱草药
材，建立了金钱草药材的指纹图谱。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 岛津 LC 2010A /C 液相色谱仪(包括
LC-20AT 输液泵、SPD-20AV 检测器、CTO-10ASVP
柱温箱、class-VP色谱工作站) ;分析天平(AUY120，
岛津) ;超声波清洗器(KQ5200E 型，昆山市超声仪
器有限公司)。
1. 2 试剂 乙腈(美国 Tedia 公司，色谱纯) ;甲
醇、正丁醇、冰醋酸均为分析纯(成都市科龙化工试
剂厂) ;水为娃哈哈纯净水;芦丁标准品(批号:
F20050512，国药集团试剂有限公司)。
1. 3 材料 12 批金钱草样品均由重庆和平制药
有限公司提供(购买自成都荷花池中药材市场、重
庆中药材市场及取自该公司种植基地) ，经邓君博
士鉴定为过路黄 Lysimachia christinae Hance 的干燥
全草。
2 方法
2. 1 色谱条件 Phenomenex C18色谱柱(4. 6 mm
×150 mm，5 μm) ，柱温30 ℃，检测波长 255 nm，进
样量 20 μL，流速 1. 0 mL /min，流动相为 A(乙腈，含
0. 5 %冰醋酸)-B(水，含 0. 5 %冰醋酸) ，采用梯度
洗脱程序:0 ～ 10 min，5 % A;10 ～ 10. 5 min，5% A
～ 10% A;10. 5 ～ 30 min，10% A ～ 15% A;30 ～ 50
min，15% A ～18% A;50 ～ 60 min，18% A ～20% A;
60 ～ 60. 5 min，20% A ～ 100% A;60. 5 ～ 70 min，
100% A。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品 10
mg左右，用甲醇溶解并定容至 10 mL，配制成 1 mg /
mL左右的母液，再采用十倍稀释法配制 100 μg /mL
左右的对照品甲醇溶液，0. 22 μm微孔滤膜过滤，保
存于棕色容量瓶中。
2. 3 供试品溶液的制备 金钱草干燥药材剪碎，
精密称定 5. 0 g，置于 250 mL平底烧瓶内，精密加入
一级水 100 mL，称定重量，于电炉上回流 2 h，取下
放冷，称重，用一级水补足原重，混匀，过滤，精密量
取滤液 25 mL 于分液漏斗中，再加入 25 mL 水饱和
的正丁醇，充分振摇，静置分层，取上层 20 mL 减压
浓缩至干，残留物用 1 mL 甲醇溶解，溶液用 0. 22
μm微孔滤膜过滤，取续滤液保存于棕色容量瓶中，
即为供试品溶液。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 测定方法:取一金钱草药材样品，按“2. 3”
项下方法制备供试品溶液，按“2. 1”项下色谱条件
分析得到色谱图，以芦丁峰为参照峰(S)计算其他
各主要峰的相对保留时间(RRT)和相对峰面积
(RPA)。
2. 4. 2 精密度试验:精密吸取同一供试品溶液 20
μL进样，按“2. 1”项下色谱条件进行分析，连续进
样 6 次，记录色谱图，考察各主要色谱峰 RRT 与
RPA的一致性。
2. 4. 3 稳定性试验:供试品溶液制备后于 0、2、4、
6、8、10 h分别进样 20 μL，按“2. 1”项下色谱条件进
行分析，考察供试品溶液的日内稳定性;相同样品溶
液，于4 ℃条件下冷藏保存，每 24 h 进样 20 μL，按
“2. 1”项下色谱条件进行分析，连续考察 5 次，考察
供试品溶液的日间稳定性。
2. 4. 4 重复性试验:取同一批次药材 6 份，分别按
“2. 3”项下方法制备供试品溶液，所得供试品溶液
分别按“2. 1”项下色谱条件进行分析，记录色谱
图。
2. 5 样品测定 取 12 批次金钱草药材分别按
“2. 3”项下方法制备供试品溶液，采用“2. 1”项下色
·383·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 3 期 2012 年 3 月
谱条件分析，所得色谱图按“2. 4. 1”项下方法对各
主要色谱峰进行校正。
2. 6 指纹图谱的建立 将“2. 5”项下所得 12 批次
金钱草药材样品的 HPLC 图以 AIA 格式文件导出，
并将数据导入国家药典委员会“中药色谱指纹图谱
相似度评价系统(2004A 版)”进行计算，以第 12 号
样品的色谱图(S12)为参照图谱，通过多点校正，自
动匹配，以中位数法，生成对照图谱 R，即金钱草的
HPLC指纹图谱。
3 结果
3. 1 色谱方法精密度考察结果 同一供试品溶液
连续进样 6 次，所得色谱图中各主要色谱峰的 RRT
的 RSD 为 0. 10% ～ 0. 53 %，RPA 的 RSD 为
0. 57% ～ 3. 63%，表明仪器精密度良好，符合指纹
图谱要求。
3. 2 色谱方法稳定性考察结果 对同一供试品溶
液进行稳定性考察，结果见表 1。
表 1 金钱草指纹图谱色谱分析方法稳定性考察结果
各共有峰的
RRT的 RSD /%
各共有峰的
RPA的 RSD /%
日内精密度 0. 11 ～ 0. 53 0. 48 ～ 3. 35
日间精密度 0. 19 ～ 0. 85 0. 76 ～ 3. 62
从表 1 可知，供试品溶液制备后 5 d 内基本稳
定，符合指纹图谱要求。
3. 3 色谱方法重复性考察结果 对同一金钱草药
材样品，采用该方法平行试验 6 份，所得色谱图中各
主要色谱峰的 RRT 的 RSD 为 0. 12% ～ 1. 19%;各
共有峰的 RPA 的 RSD 为 0. 31% ～ 0. 87%，表明该
方法重复性良好，符合指纹图谱要求。
3. 4 金钱草指纹图谱 12 批金钱草药材的 HPLC
图见图 1，其中 13 个峰是各批药材所共有的。以该
12 批金钱草药材的 HPLC 图为基础，生成金钱草的
HPLC标准指纹图谱见图 2。
图 1 12 批金钱草药材的 HPLC图
图 2 金钱草药材标准指纹图谱
3. 5 不同批次金钱草的指纹图谱与标准指纹图谱
的相似度分析 不同批次的金钱草药材的指纹图谱
与标准指纹图谱的相似度评价结果见表 2。不同批
次金钱草药材样品的指纹图谱与标准指纹图谱的相
似度为 0. 860 ～ 0. 951。
表 2 不同批次金钱草药材 HPLC图与标准指纹图谱的相似度比较结果
样品号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12
相似度 0. 916 0. 951 0. 943 0. 919 0. 860 0. 867 0. 937 0. 951 0. 911 0. 925 0. 897 0. 937
4 讨论
本研究的样品溶液制备方法之所以选择水煎，
是因为金钱草的临床应用及含金钱草的各种中成药
的制备工艺均采用水煎提取，而本实验中发现金钱
草在煎煮前后的成分变化很大，直接用甲醇或乙醇
提取制备的样品和水煎液的色谱图在该检测条件下
极少共有峰。为使建立的金钱草指纹图谱对金钱草
制剂的质量控制更具有实用价值，故选择了水煎法。
但由于金钱草的水煎液中含有大量粘液质等多糖成
分，溶液粘度大且易污染色谱柱，所以又用水饱和正
·483· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 3 期 2012 年 3 月
丁醇萃取水煎液，除去极性大分子，正丁醇萃取液减
压除去溶剂后再用甲醇溶解，制备样品溶液。
实验中考察了甲醇-水、甲醇-0. 1 %磷酸水、甲
醇-0. 5 %冰醋酸水、含 0． 5 %冰醋酸的乙腈-0. 5 %
冰醋酸水等多种流动相系统，结果表明含 0. 5 %冰
醋酸的乙腈-0. 5 %冰醋酸水作为流动相系统进行
梯度洗脱，各色谱峰分离度较好。将供试品溶液进
行了紫外全波长扫描，在 255 nm、360 nm 有最大吸
收，实验结果表明在 255 nm进行检测时，基线平稳，
各色谱峰吸收较强，因此选用 255 nm波长作为金钱
草药材指纹图谱的检测波长。
从不同批次金钱草药材指纹图谱比较结果表
明，不同批次金钱草药材质量有较大差别，所以不但
需要将金钱草与其混淆品区分开，还有必要对金钱
草药材进行标准化，或制备金钱草的标准提取物，才
能保证得到稳定的临床疗效。当然，对金钱草药材
或提取物进行标准化，建立科学、可靠的金钱草质量
控制方法是前提，不但必要，而且迫切。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:204-205.
［2］孔增科，李利军，傅正良 . 金钱草、广金钱草的鉴别与合
理应用［J］. 河北中医，2008，30(11) :1208-1209.
［3］杨安荣，杨培君，彭强 . 四种商品金钱草的辨析及鉴别
［J］. 时珍国医国药，2005，16(9) :835-836.
［4］乔健 . 金钱草与五种混淆品的经验鉴别［J］. 山东中医
杂志，1999，18(11) :513-514.
［5］陈幼君 . 金钱草古今药用考［J］. 黑龙江中医药，2001，
(6) :55.
收稿日期:2011-11-17
基金项目:国家自然科学基金资助项目《叶形态-脉序图谱鉴定中药的方法研究及其支持平台的建立》(30860371)
作者简介:何报作(1948-) ，男，教授，研究方向:中药鉴定;Tel:13978888430，E-mail:hobaozuo@ yahoo． com． cn。
马蓝叶与其易淆品路边青叶的叶形态-脉序
图谱的鉴别特征
何报作，覃继佳，朱意麟，廖月葵
(广西中医学院药学院，广西 南宁 530001)
摘要 目的:寻找马蓝叶与其易淆品路边青叶的鉴别特征，建立有效的鉴别方法。方法:LMVP(叶形态-脉序
图谱鉴别法) ，QAERM(定量分析评价鉴别中药品种真伪方法的可靠性方法)。结果:主要区别点:马蓝叶的叶基渐
狭下延，干叶深暗蓝绿色、暗棕绿色，具梭状小点，无腺点或局部有小腺点，叶柄与中脉的界限不明显，最末二级脉
的下方有三级脉从中脉发出;路边青的叶基不下延，干叶黄绿色、绿色、绿黄色、黄棕色，无梭状小点，密布腺点，叶
柄与中脉的界限明显，最末二级脉的下方无三级脉从中脉发出。同时以上述 6 组区别点为指标，鉴别结果的正确
性(AC)= 98. 5% ～ 99. 2%;重复性为符合率(ARO)= 97. 7%，一致性强度(Kappa)= 0. 95。结论:建立的“叶形态-
脉序图谱鉴别法”可准确鉴别马蓝叶及易淆品路边青叶。操作简便、快速、价廉、可靠性强。
关键词 马蓝叶;路边青叶;叶形态-脉序图谱;中药鉴定
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)03-0385-07
Identification Characters of Leaf Morphological and Venation Pattern of Baphicacanthus cusia
with its Confused Herb Clerodendrum cyrtophyllum
HE Bao-zuo，Qin Ji-jia，ZHU Yi-lin，LIAO Yue-kui
(Faculty of pharmacy，Traditional Chinese Medical College of Guangxi，Nanning 530001，China)
Abstract Objective:To study the identification characters of Baphicacanthus cusia and its confused herb Clerodendrum cyrtophyl-
lum and establish an identification method. Methods:LMVP(leaf morphological-venation pattern for identification Chinese herbs)and
QAERM(quantitatively analyze and evaluate reliability for the method of identification Chinese herbs)were applied for the study. Re-
sults:The main differences of the leaf were as follows:Baphicacanthus cusia:leaf base attenuate，dry leaves deep dull blue green，spin-
dle spots，no or small glandular scales somewhere，the limit between midrib and petiole was not clear，below undermost secondary vein
some tertiary veins issue from midrib;Clerodendrum cyrtophyllum:leaf base not attenuate;dry leaves yellow green，green，green yellow，
·583·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 3 期 2012 年 3 月