全 文 :蝴蝶兰叶基腐病生物学特性及防治研究
黄发茂
(福建省龙岩市农业科学研究所,福建 龙岩 364000)
收稿日期:2011-07-08初稿;2011-08-24修改稿
作者简介:黄发茂 (1971-),男,农艺师,主要从事园艺作物育种、栽培技术研究工作
摘 要:尖孢镰刀菌 (Fusarium oxysporum)是蝴蝶兰叶基腐病的主要病原菌,对尖孢镰刀菌的生物学特性和
防治方法进行了研究。结果表明:该病原菌最适生长温度为26℃,产生分生孢子的温度是20、22℃;最适菌丝
生长的pH值为6~7;病原菌分生孢子萌发需要高湿度环境条件,在饱和湿度和水滴中有利于分生孢子萌发;
光暗交替有利于孢子的萌发。杀菌剂毒力测定试验表明,施保功、施保克和多菌灵有很强的抑制作用,浓度为
500mg·L-1和1 000mg·L-1,菌丝抑制率都为100%;在盆栽试验中,甲基托布津和多菌灵对蝴蝶兰叶基腐
病有很好的防治效果。
关键词:蝴蝶兰;叶基腐病;病原菌;生物学特性;药剂防治
中图分类号:S 436.8 文献标识码:A
Biological Characteristics and Chemical Control of Leaf Butt Rot of Phalaenopsis
HUANG Fa-mao
(Institute of Longyan Agricultural Sciences,Longyan,Fujian 364000,China)
Abstract:The major pathogen that causes leaf butt rot of phalaenopsis disease is Fusariumoxsproum.This study
aimed to understand the biological characteristics of F.oxsproumand the pathogen′s sensitivity to fungicides.It
was hoped that some fungicides could be identified for an effective control of the leaf butt rot.The optimum
temperature for the bacteria to grow was found to be 26℃,and that for the conidia germination 20℃or 22℃.The
pH range for its growth was 6to 7.For the pathogen′s spores to germinate,it required high humidity.High
humidity and moisture promoted conidia germination.By alternating light and dark,the spore germination was
encouraged.Sportak,sporgon and carbendazim at concentration of 500mg·L-1 and 1 000mg·L-1 showed strong
inhibitive effects on F.oxsproum,with the inhibiting rate of 100%on the mycelium growth.Pot experiment by
dipping the leaves infected with phalaenopsis indicated that carbendazim or thiophanate-methyl at the concentrations
of 500mg·L-1 and 1 000mg·L-1 could effectively control the penetration of the pathogen.
Key words:phalaenopsis;leaf butt rot;Fusarium oxysporum schl;biological characteristic;chemical control
蝴蝶兰是兰科蝴蝶兰属多年生草本植物,随着
蝴蝶兰栽培面积的扩大,蝴蝶兰叶基腐病也普遍发
生。病害发生于蝴蝶兰整个种植过程,且发生面积
很广,几乎每个兰园均有此病,极大地破坏了产品
商品性,给种植者造成了巨大的经济损失,近年来
兰科花卉真菌病害已有相关报道[1-5],但是关于蝴
蝶兰叶基腐病国外尚未见报道,而国内也鲜有报
道[6-8]。本试验在黄发茂等[9]研究鉴定所得的病原
菌 (尖孢镰刀菌)为试验菌的基础上,进一步通过
对病原菌生物学特性和相应的化学药剂防治筛选研
究,以期为蝴蝶兰叶基腐病的有效防治提供依据和
实践指导。
1 材料与方法
1.1 蝴蝶兰叶基腐病病原菌生物学特性研究方案
1.1.1 温度对菌丝生长和产孢量影响的试验设计
用直径为5mm的无菌打孔器,沿菌落的边缘打
取菌龄一致原菌饼,移入植于PDA平板中央,分
别置于6~36℃的16种温度下 (图1),蝴蝶兰叶
基腐病原菌在培养5d后,用十字交叉法测量菌落
生长直径,培养15d后,在显微镜下用血球记数
板测定产孢量。每处理3皿[10],重复3次。
1.1.2 pH 值对病原菌菌丝生长和产孢量影响的
试验设计 PDA培养基灭菌后用1%NaoH和1%
福建农业学报26(5):808~811,2011
Fujian Journal of Agricultural Sciences
文章编号:1008-0384 (2011)05-808-04
的 HCl调pH值。获得pH值 (2.0~13.0)共12
个的PDA培养基 (图2),将PDA培养基倒入培
养皿中制成平板;用直径为5mm的无菌打孔器,
沿菌落的边缘打取菌龄一致的菌饼,分别置于2~
13共12个pH 值的PDA平板中,在26℃下,病
原菌培养5d后,用十字交叉法测量菌落生长直
径,培养15d后,在显微镜下用血球记数板测定
产孢量,重复3次[5]。
1.1.3 湿度对病原菌分生孢子萌发影响的试验设
计 在干燥器内用不同浓度的硫酸或盐酸的饱和溶
液调制成RH 55%~100%的7种湿度 (图3),用
硫酸钙饱和水溶液配成98%的湿度,将孢子悬浮
液滴于载玻片上,快速风干后置于不同湿度的干燥
器内,25℃培养24h后镜检萌发率,以水滴中孢
子萌发率为对照,重复3次[10]。
1.1.4 光照对病原菌菌丝生长和产孢量影响的试
验设计 用直径为5mm的无菌打孔器,沿菌落的
边缘打取菌龄一致的菌饼,移入植于PDA平板中
央,分别置于连续光照 (3 000Lx日光灯)、12h
光暗交替、完全黑暗3种光照处理下,温度为
26℃下,病原菌在培养5d后,用十字交叉法测量
菌落生长直径,培养15d后,在显微镜下用血球
记数板测定产孢量,重复3次[10]。
1.2 不同杀菌剂对病原菌生长抑制作用的测定
采用菌丝生长速率测定法,分别将杀菌剂按一
定量加入定量的PDA 培养基中,配制成浓度为
500、1 000mg·L-1含不同杀菌剂的培养基平板,
移入直径为5mm的菌苔,置于26℃下培养,以
不加杀菌剂处理的作为对照。病原菌培养5d后,
用十字交叉法测量菌落生长和计算抑制率。每处理
3次重复,抑制率计算为:抑制率= [(对照直径
-处理直径)/对照直径]×100%。
1.3 不同杀菌剂对蝴蝶兰叶基腐病的防治效果
将25%施宝克乳油、50%枯萎灵、70%甲基
托布津可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂,分别
配制成浓度为1 000mg·L-1的溶液。然后将蝴蝶
兰V31健康植株采用2种处理方法:(1)将蝴蝶兰
(2.5寸苗)供试材料先进行人工接种病原菌,保
湿24h后,再分别浸泡在不同的杀菌剂溶液中,
处理1min,取出晾干后,进行盆栽。(2)将蝴蝶
兰供试材料分别浸泡在不同的杀菌剂溶液中,处理
1min,取出晾干后,进行人工接种病原菌,保湿
24h,然后进行盆栽,对照植株只接病原菌,25d
后观察发病情况,计算发病率,重复3次。
2 结果与分析
2.1 病菌的生物学特性
2.1.1 不同温度对病原菌生长的影响 由图1可
知,该病原菌在36℃下不能生长,菌丝生长的温
度范围是6~34℃,最适生长温度为26℃,在
26℃下培养5d后菌落直径为82.42mm,达到最
大。该菌产生分生孢子的温度是20、22℃,在20、
22℃下培养15d后产孢量分别为82.75×105
个·皿-1、71.18×105个·皿-1,其他温度下无产
孢。
图1 温度对蝴蝶兰叶基腐病病原菌菌丝和产孢量的影响
Fig.1 Temperature effect on F.oxysporumgrowth
2.1.2 不同pH值对病原菌生长的影响 试验结
果 (图2)表明,蝴蝶兰叶基腐病病原菌菌丝在
pH值为3~10均能生长,最适菌丝生长的pH 值
为6~7,在pH 值为6、7的PDA培养基上培养
5d后,菌落直径分别为76.7、75.5mm,无显著
性差异。基物颜色随着pH 值的变化而变化,pH
值升高,颜色由深到浅。在pH值为7~10均能产
孢,最适分生孢子产生的pH值为9。在pH值为
9时,PDA培养基上培养15d后产孢量为93.8×
105个·皿-1。
2.1.3 不同湿度对病原菌生长的影响 从图3可
以看出,病原菌分生孢子萌发需要高湿度环境条
件,在相对湿度为35%~75%的条件下均不能萌
发,在相对湿度为90%、98%条件下24h后萌发
率分别为65.1%、68.1%,在饱和湿度和水滴中
的萌发率分别为91.1%、91.2%。
2.1.4 光照对病原菌生长的影响 从表1可以看
出,光暗交替有利于孢子的萌发,全黑暗时孢子萌
发率最低,不利于菌丝生长和不产生分生孢子。
908第5期 黄发茂:蝴蝶兰叶基腐病生物学特性及防治研究
图2 pH 值对蝴蝶兰叶基腐病病原菌菌丝和产孢量的
影响
Fig.2 Effect of pH on F.oxysporumgrowth
图3 湿度对蝴蝶兰叶基腐病原菌分生孢子萌发的影响
Fig.3 Effect of RH on F.oxysporumgrowth
表1 光照对蝴蝶兰叶基腐病病菌生长、产孢量、孢子萌发
的影响
Table 1 Effect of ilumination on F.oxysporumgrowth
光 照 菌落直径
产孢量
(×105个·皿-1)
孢子萌发率(%)
6h 24h
连续光照 62.7a 26.7 59.0c 78.2b
光暗交替 56.0b 5.0 67.2a 86.8a
全 黑 暗 51.0c 0.0 61.2b 78.2b
注:同列数据后小写字母表示在0.05水平上的差异显著性。下同。
2.2 不同杀菌剂对病原菌生长的抑制作用
由表2可知,8种杀菌剂对蝴蝶兰叶基腐病病
原菌菌丝生长的抑制作用随着杀菌剂的浓度增加而
增强,但是不同的杀菌剂的抑制作用不同,其中施
保功、施保克和多菌灵抑制作用最强,在浓度为
500mg·L-1和1 000mg·L-1均可达100%抑制
率,其次恶霉灵在500和1 000mg·L-1浓度下抑
制率分别为96.0%和100%。
2.3 不同杀菌剂对蝴蝶兰叶基腐病的防治效果
由表3可知,人工接种25d后,对照和施保
功先接后泡处理的蝴蝶兰植株,叶片表现出黄化,
变红,脱落;对照、施保克接种24h后药剂处理
发病率都为100%,枯萎灵接种24h后药剂处理发
病率为50%;枯萎灵,施保功先泡后接处理以及
多菌灵和甲基托布津在2种处理下都未发病。
表2 不同杀菌剂对蝴蝶兰叶基腐病病原菌的菌丝生长的
影响
Table 2 Effect of fungicides on inhibiting F.oxsproum Schl
growth
杀菌剂
500mg·L-1 1000ml·L-1
菌落直径
(mm)
抑制率
(%)
菌落直径
(mm)
抑制率
(%)
CK 81.5a — 81.5a —
好生灵 65.5b 19.7f 60.7b 25.5e
代森锰锌 50.4c 38.2e 43.5c 46.6d
甲基托布津 30.5d 62.6d 27.07d 66.8c
百菌清 18.1e 77.8c 14.2e 82.6b
恶霉灵 3.2f 96.0b 0 100a
施保功 0 100a 0 100a
施保克 0 100a 0 100a
多菌灵 0 100a 0 100a
表3 不同杀菌剂对防治蝴蝶兰叶基腐病效果的影响
Table 3 Efficacy of fungicides in controling leaf butt rot of
phalaenopsis disease
杀菌剂 处理
发病率
(%)
相对防治效果
(%)
CK 接病原菌 100 —
施保克 接种24h后药剂处理 100 0
药剂处理1mim后接种 0 100
枯萎灵 接种24h后药剂处理 50 50
药剂处理1mim后接种 0 100
多菌灵 接种24h后药剂处理 0 100
药剂处理1mim后接种 0 100
甲基托布津 接种24h后药剂处理 0 100
药剂处理1mim后接种 0 100
3 讨 论
对尖孢镰刀菌的生物学特性研究发现,尖孢镰
刀菌喜欢高温、高湿、微酸性环境,光暗交替有利
于孢子的萌发,全黑暗时孢子萌发率最低,可见光
018 福建农业学报 第26卷
照对于病菌孢子的萌发较为重要,这与前人的研究
结论相似[11-12]。从对菌株生物学特性室内研究结
果可以推测,栽培的温度、湿度主要影响病原菌的
菌丝生长和孢子萌发,从而影响福建地区蝴蝶兰叶
基腐病的发生与流行。通过对病原菌的生物学特性
研究,对今后生产实践有一定的指导作用,
陈艳等[13]对香荚兰根腐病进行药剂毒力测定
试验表明,苯莱特、多菌灵和甲基托布津抑菌效果
最好,王勇等[14]研究表明,腐皮镰刀菌敏感株系
极易对多菌灵产生抗药性,孔琼等[15]对香荚兰根
腐病病原菌尖饱镰刀菌的毒力测定结果表明,4种
药剂对其具有明显的抑制作用,其中以施菌克的抑
菌作用最为突出,多菌灵次之,恶霉福和百菌清最
差,药剂浓度与抑制作用呈正相关。本研究从不同
杀菌剂对尖孢镰刀菌菌丝抑制作用和药剂防治效果
可以看出,施保功、施保克和多菌灵对病原菌菌丝
抑制率有很强的抑制作用,抑制率均为100%。而
在防治试验中,甲基托布津和多菌灵对蝴蝶兰叶基
腐病有很好的防治效果。同时发现相同的药剂在菌
丝生长抑制试验和病害防治效果试验的结果有一定
的差别,这可能是因为在菌丝生长抑制试验中,药
剂对病菌的抑制作用是药剂的毒力直接作用于病原
菌,而在病害防治效果试验时,防治效果除药剂的
毒力起作用外,其它外界条件亦对药剂毒力的发挥
产生影响,如用药方法、植物生长情况、栽培管理
措施、温湿度等都会影响药剂毒力的发挥。
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(责任编辑:柯文辉)
118第5期 黄发茂:蝴蝶兰叶基腐病生物学特性及防治研究