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正交试验优选滇桂艾纳香的提取工艺



全 文 :中国药房 2010年第21卷第31期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 31
滇桂艾纳香系菊科植物Blumea riparia(Bl.)DC.的干燥全
草,又名管牙、假东风草[1,2],主产于广西西南部和云南东南部,是
壮族民间草药,在广西已有较长使用历史[3]。该植物具补血活
血、敛血止血之功效,用于治疗经期提前、产后血崩、产后水肿、
不孕症、阴疮等[2]。滇桂艾纳香主要活性成分是原儿茶酸[3],现代
药理证明原儿茶酸具有明显的抑制血小板聚集、增加冠脉流
量等作用[4~6],是活血化瘀类中药的重要成分之一。笔者以原
儿茶酸为考核指标,采用正交试验法优选了滇桂艾纳香的提
取工艺,以为工业生产提供理论依据。
1 材料
1.1 仪器
SD200型高效液相色谱(HPLC)仪,包括色谱3000工作站
(瑞士Rainin公司);AE260型电子天平(瑞士梅特勒-托利多
公司);pHS-3C型精密 pH计(上海雷磁仪器厂);GZX-DH型
电热恒温干燥箱(上海市跃进医疗器械一厂)。
1.2 试药
滇桂艾纳香药材收购自广西靖西产地,收购季节11月,经
广西壮族自治区药品检验所鉴定为真品;原儿茶酸对照品(中
国药品生物制品检定所,批号:200903);甲醇为色谱纯。
2 方法与结果[7,8]
2.1 滇桂艾纳香提取工艺
除去药材中的杂草等,切成4~5 cm长,加水煎煮,水煎液
滤过,滤液浓缩至相对密度为 1.08(60℃)后,静置 8 h,滤过,
滤液烘烤至干膏。
2.2 正交试验设计
选择提取次数(A)、加水量(B)、提取时间(C)为考察因素,
以原儿茶酸总量为评价指标,用L9(34)正交表安排试验方案。因
素水平见表1;正交试验结果见表2;方差分析结果见表3。
表1 因素水平
Tab 1 Factors and levels
水平
1
2
3
因素
A/次
1
2
3
B/mL
20;15;10
15;10;8
20;12;8
C/h
2;1.5;1
2;1;1
1.5;1;1
表2 正交试验结果
Tab 2 Results of orthogonal experiment
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
K1/3
K2/3
K3/3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
12.9
19.8
20.3
4.30
6.60
6.77
2.47
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
17.9
17.8
17.3
5.97
5.93
5.77
0.20
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
18.1
17.6
17.3
6.03
5.87
5.77
0.26
D(误差)
1
2
3
3
1
2
2
3
1
17.6
17.9
17.5
5.87
5.97
5.83
0.14
原儿茶酸总量/mg
4.5
4.4
4.0
6.6
6.5
6.7
6.8
6.9
6.6
ΣY=53.0
由表2、表3可知,B因素(加水量)和C因素(提取时间)对
原儿茶酸总量无显著影响,从节约成本的角度考虑,选B2水
平;从节约时间的角度考虑,选C3水平。A因素(提取次数)对
原儿茶酸总量的影响有显著差异,因而进一步对A因素的三
水平的均数作两两比较,以确定最佳提取条件。A因素两两比
正交试验优选滇桂艾纳香的提取工艺
何成章*,陆 华(广西医科大学第一附属医院,南宁市 530021)
中图分类号 R283;R97 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2010)31-2909-02
摘 要 目的:优选滇桂艾纳香的提取工艺。方法:以原儿茶酸总量为考察指标,加水量、提取时间、提取次数为考察因素优选滇
桂艾纳香提取工艺。结果:最佳提取条件为加水煎煮2次,第1次15倍水,煎煮1.5 h,第2次10倍水,煎煮1 h。结论:该提取工艺
合理、稳定,原儿茶酸有效成分的提取率高。
关键词 滇桂艾纳香;正交试验;提取工艺
Optimization of the Extraction Technology of Blumea riparia by Orthogonal Test
HE Cheng-zhang,LU Hua(The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021,Chi-
na)
ABSTRACT OBJECTIVE:To optimize extraction technology of Blumea riparia. METHODS:The extraction technology of B. ri-
paria was optimized with the content of protocatechuic acid as index and with amount of water,extraction time and the times of ex-
traction as factors. RESULTS:The optimum extraction condition was boiling water for 2 times,adding 15-folds water at the first
time,decocting for 1.5 h,adding 10-folds water at the second time,decocting for 1 h. CONCLUSION:The extraction technology
is reasonable and stable with high yield of protocatechuic acid.
KEY WORDS Blumea riparia;Orthogonal test;Extraction technology
*主管药师。研究方向:中药工艺制剂。电话:0771-5356581。
E-mail:hwen-2005@163.com
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China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 31 中国药房 2010年第21卷第31期
较的q′检验结果见表4。
表3 方差分析结果
Tab 3 Results of variance analysis
方差来源
A
B
C
D(误差)
离差平方和
11.402 2
0.068 9
0.108 9
0.028 9
自由度
2
2
2
2
方差
5.701 1
0.034 4
0.054 4
0.014 4
F
395.909 7
2.388 9
3.777 8
P
<0.01
>0.05
>0.05
注:F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00
note:F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00
表4 A因素两两比较的q′检验结果
Tab 4 Pairwise comparison of factors A by q′test
对比水平
Ⅲ与Ⅱ
Ⅲ与Ⅰ
Ⅱ与Ⅰ
两均数之差
0.17
2.47
2.30
组数
2
3
2
q′值
5.0
62.5
57.5
P=0.05
6.09
6.09
6.09
P=0.01
14.0
14.0
14.0
P
>0.05
<0.01
<0.01
由表4可知,A因素三水平之间,Ⅲ与Ⅱ无显著性差异,但
Ⅲ与Ⅰ、Ⅱ与Ⅰ均有显著差异(P<0.01),所以选A因素Ⅲ和
Ⅱ均可,但从节约时间和溶媒的角度考虑,选择Ⅱ水平,即提
取2次。
综合以上分析,滇桂艾纳香的最佳提取工艺为:A2B2C3,即
加水煎煮2次,第1次15倍水,煎煮1.5 h,第2次10倍水,煎煮
1 h。
2.3 验证试验
按上述所定提取工艺,称取滇桂艾纳香药材 5份,每份
200 g进行验证试验,结果见表5。
表5 验证试验结果
Tab 5 Results of verification test
样品
1
2
3
4
5
平均
药材用量/g
201.5
203.1
198.8
200.4
201.2
201.0
干膏量/g
10.1
10.2
9.9
11.1
10.0
10.2
原儿茶酸总量/mg
6.5
6.9
6.4
6.2
6.3
6.4
由表5可见,每100 g滇桂艾纳香中原儿茶酸总量在3.1~
3.4 mg之间。验证试验结果与正交试验结果一致,表明滇桂艾
纳香提取工艺合理、可行。
2.4 放大试验
根据确定的提取工艺中试3批,放大试验结果见表6。
3 讨论
正交试验结果表明,影响原儿茶酸提取的各因素依次为
为A>C>B。B因素(加水量)、C因素(煎煮时间)对原儿茶酸
总量无显著影响,提取次数则有影响。从大工业生产节约能
源考虑,最佳提取方案为A2B2C3,即加水煎煮2次,第1次15倍
水,煎煮1.5 h,第2次10倍水,煎煮1 h。放大试验也证实该工
艺合理、可行。
滇桂艾纳香不同药用部位所含有效成分不同,其中小枝
和叶的提取率最高,根部最低[9]。季节对滇桂艾纳香中原儿茶
酸含量也有影响,秋、冬季比夏季含量高[10]。
参考文献
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[10] 谢培德,桑 彤,龚秀珍.反相高效液相色谱法测定滇桂
艾纳香中原儿茶酸的含量[J].中国中药杂志,2000,25
(4):227.
(收稿日期:2009-12-15 修回日期:2010-04-02)
《中国药房》杂志——《中国科学引文数据库》(CSCD)来源期刊,欢迎投稿、订阅
表6 放大试验结果
Tab 6 Results of amplification test
样品
1
2
3
平均
投料量/kg
100.0
103.0
101.0
106.0
干膏量/g
5 002.0
5 035.0
5 026.0
5 045.0
原儿茶酸总量/mg
3 322
3 384
3 296
3 334
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