全 文 ：菌带人培养基中去。 体表消毒均采用常规的消
毒剂如酒精 、 次氯酸钠 、 福尔马林和升汞等浸
泡 。
4
、 解剖和洗涤
经体表消毒的昆虫 , 方能带人无菌室 , 放在
事先用紫外灯消毒过的蜡盘 (用前用酒精棉球
擦净 )上 , 迅速剖开 , 取出所需组织 , 然后放人平
衡盐溶液中洗涤数次 。
,
. 消化
消化就是要将组织细胞分散 , 先用小剪将
组织充分剪碎 , 然后加少许 0 . 25 务的胰蛋白酶 ,
在 37 ℃ 消化几分钟 , 再以平衡盐溶液洗去部分
酶 , 离心去上清液 , 再用带血清的培养基打散
细胞 , 离心去上清液 , 加人新的培养基 27 ℃ 培
养。
` . 换液
在无菌室内吸走或者倒掉旧的培养基 , 加
人新的培养基。
7
. 观察
如果有倒置显微镜 , 可把细胞培养直接放
在镜台上进行观察。 没有倒置显微镜只好在无
菌打开瓶塞 , 取出少量细胞观察。 由于是无菌
培养 , 在显微镜下可了解细胞是否增殖 , 但确定
细胞死活不很容易 , 要借助生化手段 。下面简介
常用的一种活细胞染色观察 , 以每毫升细胞悬
液加 0 · 0 , 毫升 0 . 0 1外 中性红 , 在 3 7℃ 保温 2 0
分钟 , 然后加绿色滤光镜检查 , 活细胞才着色。
8
. 克隆
为 了从组织培养中获得单一亲代细胞用于
遗传和生物化学等方面研究 , 可采用一些克隆
技术 , 最简便和迅速的方法是用培养液将细咆
稀释成 10 个细胞 /毫升 ,接种于多孔板中 , 每孔
0
.
1毫升 , 在培养早期确定仅含单个细胞的孔 ,
从而得到克隆细胞株 。
9
. 传代
通过检查确定细胞 已明显增殖 , 可进人传
代培养 , 开始传代时接种的细胞数量应尽可能
多一些 , 以后细胞逐渐适应新的环境 ,可减少接
种量 。待生长稳定之后 ,细胞可 冻存于液氮之中。
楠铃虫卵集的组织培养
1
. 棉铃虫羽化后 , 选出健康雌虫单独放置 .
准备工作做好后 , 将选好的雌蛾放人 75 肠 的酒
精中浸泡 5 分钟 , 剪去双翅 , 送人无菌室中。
2
. 把消过毒的成虫放在蜡盘上 , 用眼科剪
剪开腹部 ,再用镊子分开 , 找出线状卵巢管 , 并
拉出放到盛有 H an k, : 液的称量瓶或青霉素瓶
中 , 洗涤数次。
3
. 再换一把剪刀 , 剪碎卵巢管 , 然后力山人
.0 25 并的胰蛋白酶数滴进行消化 , 时间约 , 分
钟。
4
. 弃上清液 , 加人 H an k’ s 液 , 用滴管吹打
散细胞 ,再用二层纱布过滤于另一三角瓶中。
.5 将细胞悬液倒人带盖 离 心管 中 , l ,。 0
转 /分钟离心 10 分钟 , 再加少量培养液打散细
胞 ,按上述方法离心 , 弃上清液 。
6
. 加人少量培养液打散细胞 , 然后分装到
培养瓶内 , 再加人培养液于 28 ℃ 培养。
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用凤仙花的花药作减数分裂实验
凤仙花各地均有栽培。 它的花期长 , 花粉
母细胞大 , 染色体数 目少 ( x ~ 7一 1 1 ) , 而且减
数分裂的同步性强 , 图象清 晰 , 是良好的实验材
料 。 现将用凤仙花的花药做减数分裂实验的过
程简述如下 :
(一 ) 染色液的配制
取 45 并 的冰醋酸 10 0 毫升 ,煮沸后加 1 克
洋红 , 再煮沸 10 分钟 , 加人少许氧化铁 ( F勺 q ) ,
边煮边搅动 , 继续煮沸 10 分钟后冷却过滤 (如有
沉淀 ,可加少量蒸馏水振荡后沉淀 自然消失 ) 。
(二 ) 制备临时装片的过程
1
. 取材 在上午 8 点 30 分至 1 时 30 分
(新疆克拉玛依地区 , 北京夏时制 ) , 采取大米拉
(下转第 23 页 )
1 , 8 8 年 第 l一 期 生 物 学 通 报
一个地区或一个流域的农 、 林 、 牧 、 渔业和多种
经营的发展 。
全世界林地面积约有 7 6亿公 顷。 近 20 。
年来 ,随若农牧业的发展 、 尤其是工业的发展以
及战争和 自然灾害等原因 , 森林遭到破坏 , 面积
不断减少 。 据有关报道说 目前只剩下 2 8 亿公
顷 , 覆盖率为 2 拓 , 人均林地面积为 15 ·弓亩 。
在我国则更少。 由于一些人片面地理解 “ 以粮
为纲 ” 的方针 、 毁林开荒 , 大片森林遭到毁灭 。
现在仅有森林 1 8 . 2 8 亿亩 , 覆盖率为 12 . 7务 , 居
全世界第 12 0 位。 人均林地面积 L S 亩。 相当
于世界人均面积的 12 务。 这个数字显 然 是 很
低的。 森林面积的大量减少 , 给人们带来了严
重的后果 。 碳 、 氢 、 氧 、 氮等元素的生物地化循
环受到影响。 空气 中的二氧化碳含量从过去的
3 0 0 p pm 上升到 3 3 0 p pm , 增加 T 1 3 · 7 % , 其 他
有害成分也日趋升高。 各个生态 环境不断 变
坏 ,农田生态系统平衡失调 ,水 、 旱 、 风 、 沙等自
然灾害频繁肆虐 , 给农牧业生产带来了很大损
失。 仅河南省就有 1 0 0 0 多万亩土地水土流失
严重 。 每年损失的土壤有 1 5 0 万吨左右 ,随之
流走的氮 、 磷 、 钾达 4 0 万吨之多。 在洛阳地区 ,
由于伊河 、 洛河 、 汝河等河上游森林大 量 减 少 ,
19 82 年 7 月暴雨季节 , 山洪暴发 , 冲毁农 田
, 8
.
1万亩 , 占洛阳地区耕地面积的 1 多。 冲走
泥沙 36 0 万吨 , 摄失氮 、 磷 、 钾约 7 .7 3 万吨 , 折
合碳按 4 3 6 万吨 ,为洛阳地区 19 81 年碳按总产
量的 10 倍。 暴雨造成的直接经济损失估计达
4
.
0 7 亿元。
值得注意的是 , 世界森林面积减 少的趋势
还在继续 , 尤其是大片的热带原始森林正在遭
(上接第 1 页 )
大小的凤仙花花蕾作为实验材料 。
2
. 离解与漂洗 在载玻片上 滴 2 滴 10 拓
的盐酸 , 用解剖针挑开花蕾 ,取出花药并浸泡于
盐酸中离解 , 在 25 ℃ 左右时离解 2一 3 分钟 。如
果温度较低 (或较高 ) , 可适当延长 (或缩短 )离
解时间。 离解后用清 水滴洗三次 , 每次 4 分钟
左右 , 漂洗以后用吸水纸吸干水分。
3
. 染色与制片 用解剖针将漂洗的花药压
到毁灭性的破坏 。 据 有关报道 , 由于发展中国
家的乱砍滥伐 , 发达国家的酸雨危害 ,现在世界
上的森林正以每分钟 20 公顷的速度从 地 球 上
消失 。 照这样的速度 ,不需 2 0 年 , 世界森林资
源将毁灭殆尽 , 人类将会遭到更大的甚至是毁
灭性的灾难 。
单就近几十年来看 ,森林面积锐减 , 减弱和
失去了它的生态价值 , 环境惨遭破坏 。 加 之 沁
年代以来人工化学药物种类和 数 量 的 与 日俱
增 , “ 三废” 的大量排放 , 农药的大量使用 , 使环
境和生物休 (包括人类自己 ) 都受到了严重污
染。 因之 , 疾病 、 死亡率 、胎儿畸型率明显上升 。
过去以传染病为主的病谱已被“ 职业病 ” 和 “ 公
害病 ” 所代替。 据有关统计表明 , 这些疾病的死
亡率占总死亡率的 90 拓 以上 。
以上事实可以说明 , 不论是从眼前利益 ,还
是 从长远观点看 ;不论从局部利益出发 , 还是从
全局观点考虑 , 森林在环境保护 、 生态平衡方面
的生态价值都是巨大的 、 无法直接用经济数字
来估算。 正因如此 , 贯彻执行森林法 , 保护现有
森林 资源和在宜林地大力植树造林 , 扩大林地
面积就有着非常巨大的意义 。
应该说明 , 保护森林资源并不是完全禁止
采伐 , 相反 , 有计划地进行合理采伐还有利于森
林生态系统的更新。
综上所述 , 我们应大力宣传森林的生态学
价值 ,把保 护森林资源和大力植树造林 ,绿化 祖
国当成一个重要的 、 长远的战略措施。 全民动
员 , 统筹安排 、 制定切实可行的规划 , 让人们把
保护森林和植树造林当成一个白觉的行动。
碎成糊状 , 滴 1一 2 滴醋酸洋红染液 , 搅匀 。 在
25 ℃左右的温度下染色 6 分钟 , 如温度较低可
稍加热 。 最后加上盖玻片 , 用吸水纸覆盖于盖
玻片上 , 并 用食指轻压盖玻片 (使装片变薄 , 并
吸去多余的染液 )后即可 观察 。
用韭菜花药做减数分裂实验 , 效果 也很好 。
方法同上 。
(新 . 克拉玛依市第一中学 关生茂 甘佑忠)
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1 , 8 8 年 第 1 1 期 生 物 学 通 报