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金钱草总黄酮提取物的抗血栓作用研究



全 文 :金钱草总黄酮提取物的抗血栓作用研究
薄 锋 ,袁 玲 ,张永和*
(长春中医药大学 ,吉林 长春 130117)
  摘 要:目的:观察金钱草总黄酮提取物对大鼠体内血栓形成和血小板凝聚率的影响。方法:制造大鼠体
内静脉血栓形成模型 ,观察血栓湿重;采用ADP 诱导的大鼠血小板凝聚 ,测定血小板在不同时间的聚集率以及
最大聚集率 。结果:金钱草总黄酮提取物 30 、20mg kg 组均不同程度地抑制大鼠体内静脉血栓的形成 ,减轻血
栓湿重和干重;抑制由 ADP 诱导的大鼠血小板不同时间点的聚集率和最大聚集率 。结论:金钱草总黄酮提取
物可明显对抗血栓的形成 ,并且有明显地降低血小板聚集率的作用。
  关键词:金钱草总黄酮;抗血栓;血小板聚集;小鼠
  中图分类号:R972.9   文献标识码:B   文章编号:1007-4813(2007)02-0010-02
Study on the Antithrombotic Effect of Total Flavone Extract of Lysimachia
Bo Feng , Yuan Ling ,Zhang Yong-he*
(Changchun University of Traditional Chinese Medicine , Jilin Changchun 130117 ,China)
  Abstract:Objective:To study the effects of total flavone of lysimachia on platelet aggregation and experimental throm-
bosis.Methods:Inhibition rates of platelet aggregation for TFL in vitro were determined by the model of platelet aggregation
induced by coll , inhibition rates of experimental thrombosis for TFL were measured by the model of A-V thrombosis pass-
by.Results:TFL 30 、20mg kg had magnificent effect on inhibition of platelet aggregation and decreased the wet weight of
thromboisis.Conclusion:TFL had magnificent effect on platelet aggregation and thrombosis.
Key words:lysimachia;platelet aggregation;thrombosis
 基金项目:长春市科技厅资助项目(课题号:03-20847)
 作者简介:薄 锋(1978~  ),男 , 吉林长春市人 , 在读硕士研究生。研究方向:心脑血管疾病的现代药理研究。
*通讯作者:张永和 ,男 , 教授 ,主任医师 , 硕士生导师。 E-mail:zyh987@yahoo.com.cn Tel:(0431)86177740
  金钱草为报春科植物过路黄(Lysinmachia christi-
nae Hance)的干燥全草 ,别名“活血丹” ,主要化学成分
为黄酮类 ,包括:槲皮素(quercetin),槲皮素-3-0-葡萄
糖甙 ,山柰素(kaempferol)及山柰酚等 。近年来研究
表明 ,金钱草总黄酮能明显改善心肌营养性血流 ,减
轻心肌缺血及损伤 ,与潘生丁作用相似 。本实验通过
测定体内血栓重量和血小板凝集率来探索其抗血栓
的作用机理 ,为开发和应用防治血栓性疾病的药物提
供一定的科学依据。
1 对大鼠体内血栓形成的影响
1.1 实验方法 选用Waster 大鼠 50只 ,体重 200 ~
250g ,雌雄各半 ,由长春高新技术医学动物实验研究
中心提供 ,随机分为空白对照组 、阳性对照组 、金钱草
总黄酮高 、中 、低剂量 5组 ,每组 10 只。金钱草总黄
酮(长春中医药大学第一附属医院新药中心提供),刺
五加注射液(批号:20051012 ,黑龙江省完达山制药
厂), 3%戊巴比妥钠 , 1 10000 微量电子天平(FA
1001 ,上海天平仪器厂)。所有动物静脉注射给药 ,每
日 1次。给药剂量:金钱草总黄酮高 、中 、低剂量 30 、
20 、10mg kg 体重;阳性对照组(刺五加注射液):80mg
kg体重;对照组给予同等剂量的蒸馏水 。连续给药
7d。末次给药后 30min ,大鼠以 3%戊巴比妥钠腹腔
给药麻醉 。腹部正中切口切开腹腔 ,剥离下腔静脉 ,
与左肾静脉下方用粗线结扎下腔静脉 ,缝合腹腔 ,结
扎 4h后 ,处死大鼠 ,打开腹腔 ,在结扎下方 2cm 处夹
闭管腔 ,取出瘀血段血管 ,剖开管腔 ,取出血栓 ,放在
滤纸上 , 吸干血液 ,用微量电子天平称取血栓湿重
(mg),然后将血栓在室温下放置 24h ,称取血栓干重
(mg)。
统计学处理:各组实验数据以均数加减标准差表
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第23卷第2期
2007 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.23
2 , 2007
DOI :10.13463/j.cnki.cczyy.2007.02.006
示 ,组间差异的显著性检验用 t 检验 。
1.2 实验结果 见表1
表 1 各组大鼠静脉血栓湿重干重比较( x±s , n=10)
组  别 剂量(mg kg) 血栓湿重 血栓干重
对照组 — 32.19±7.164 15.77±2.164
阳性对照组 80 25.38±2.712**13.24±1.825**
金钱草总黄酮高剂量组 30 25.39±2.712**13.27±1.512*
金钱草总黄酮中剂量组 20 26.01±4.514* 14.29±1.622*
金钱草总黄酮低剂量组 10 28.15±3.267 14.54±1.621
  与对照组比较:*P<0.05 , **P<0.01。
结果表明 ,金钱草总黄酮高剂量组和中剂量组及
阳性对照组的湿重和干重与空白对照组比较均有显著
性差异(P<0.05 , P<0.01),低剂量组与对照组比较未
见显著性差异(P >0.05),提示金钱草总黄酮对大鼠体
内血栓模型动物的血栓形成有明显的抑制作用。
2 对大鼠血小板聚集率的影响
2.1 实验方法[ 1]  选用Waster 大鼠 50只 ,体重 200
~ 250g 雌雄各半 ,由长春高新技术医学动物实验中
心提供 ,随机分为空白对照组 、阳性对照组 、金钱草总
黄酮高 、中 、低剂量 5组 ,每组 10 只。金钱草总黄酮
(长春中医药大学第一附属医院新药中心提供),刺五
加注射液(批号:200510012 , 黑龙江省完达山制药
厂), 3.8%枸缘酸钠 , ADP(美国 Simga 公司产品),
PH7.4的磷酸盐缓冲液 ,离心机(LDZ 2.北京医用离
心机厂),1 10000 微量电子天平(FA 1004 ,上海天平
仪器厂),多功能智能血液凝聚仪 TY XN-96(上海通
用机电技术研究所)。大鼠乙醚麻醉下 ,腹腔主动脉
取血 ,3.8%枸椽酸钠抗凝。1000r min ,离心 5min ,取
富含血小板血浆(PRP)备用。血小板促凝剂的准备:
用 1 1000天平精确称取 ADP5mg ,用 PH7.4 的 0.2M
磷酸盐缓冲液溶解 ,最终配制成浓度为 2um 。金钱草
总黄酮实验分别配制成 4 、2 、1mg ml ,超声震荡充分溶
解 ,用双层滤纸过滤。滤液再用 0.45μm 微孔滤膜抽
滤 ,备用 。血液凝集仪的准备:将 TYXN-96智能型血
液凝集仪按实验操作步骤 ,取富含血小板血浆 100μl ,
加入试验测药 10μl(分别含金钱草总黄酮 4 、2 、1mg
ml),对照组加同体积生理盐水 。测试时再加入促凝
剂 ADP11μl。观测血小板聚集曲线变化:每组测试 10
例 ,分别计算各级 1 、5min(PAG-1 , PAG-5)的血小板聚
集率及血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。
统计学方法:实验数据以均数加减标准差表示 ,
组间差异的显著性检验用 t 检验 。
2.2 实验结果 见表 2。
表 2 各组血小板聚集性的比较( x±s , n=10)
组  别 剂量(mg ml) PAG-1 PAG-3 PAG-5 PAG-M
对照组 — 75.73±3.50 81.89±2.49 79.88±2.00 84.42±2.21
阳性对照组 8 69.99±3.85* 78.63±4.19 * 76.61±4.26* 75.75±3.47*
金钱草总黄酮高剂量组 4 70.34±5.83 76.03±7.59 * 74.53±7.08* 80.58±2.53*
金钱草总黄酮中剂量组 2 72.02±5.86 76.83±12.3 71.91±10.14* 81.45±6.39
金钱草总黄酮低剂量组 1 73.24±5.84 79.81±4.65 79.49±4.52 82.59±4.20
  与对照组比较:*P<0.05。
  结果表明 ,与对照组比较 ,金钱草总黄酮体外 4 、
2mg ml在 3 、5min测试点上血小板聚集率明显小于对
照组 ,血小板聚集最大聚集率也明显小于对照组 ,提
示一定剂量的金钱草总黄酮体外给药对ADP所致的
血小板聚集均有一定的抑制作用。
3 讨论
血栓的形成涉及到机体的凝血功能 、血小板凝聚
功能等多种因素 ,由其引起栓塞和缺血是许多心血管
疾病发生的重要病理基础。如能有效地控制血栓的
形成并能降低血小板凝聚率 ,对防治缺血性心脑血管
疾病有着深远的意义[ 2、3] 。
本实验通过测定体内静脉血栓的重量观察金钱
草总黄酮对于血栓形成的抑制作用 ,证明了金钱草总
黄酮能显著减轻病理状态下大鼠体内静脉血栓形成
的湿重和干重 ,降低血栓形成的百分率 ,显示出显著
的血栓抑制作用 ,而且这种抗血栓作用部分是通过抑
制ADP 诱导的血小板凝聚功能而实现的[ 4 、5] 。这一
结果也显示了金钱草总黄酮的抗血栓 ,活血化瘀功效
是具有一定的理论基础 ,为开发和应用防治血栓性疾
病的药物提供一定的科学依据 。
参考文献:
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究[ J] .昆明医学院学报 , 2006 , 1(1):10-12.
(收稿日期:2006-09-07;修回日期:2006-12-21)
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第23卷第2期
2007 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.23
2 , 2007