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罗勒提取物抗血栓作用及其作用机制的研究
周文婷1， 依把代提·托合提1， 田树革2， 何志琴1， 乌兰巴依尔1， 艾尼瓦尔·吾买尔1*
(1. 新疆医科大学药学院药理教研室，新疆 乌鲁木齐 830054;2. 新疆医科大学中医学院实验中心，新疆
乌鲁木齐 830054)
收稿日期:2009-10-11
基金项目:新疆自治区高校科研计划(XJEDU2006130)
作者简介:周文婷(1983 －)，女，硕士研究生。Tel:15899168882 E-mail:sherry_zwt@ 126. com
* 通讯作者:艾尼瓦尔·吾买尔(维吾尔族)，男，博士，硕士生导师，研究方向:罗勒的有效成分。
关键词:罗勒水提物;罗勒醇提物;抗血栓;抗凝血酶-Ⅲ;蛋白 C;组织型纤溶酶原激活物;纤溶酶原激活物抑制物
摘要:目的:研究罗勒提取物抗血栓作用并从抗凝、纤溶两个方面探讨其作用机制。方法:采用小鼠肺血栓模型、FeCl3 诱
导大鼠颈动脉血栓模型及大鼠下腔静脉血栓模型 3 种实验性血栓模型，考察罗勒水提物与醇提物的抗血栓形成作用;并
通过采用酶联免疫吸附测试法(ELISA)测定动物血浆 AT-Ⅲ、PC及 PLG、t-PA、PAI-1 几个指标观察各组药物对抗凝及纤
溶活性的影响进而探讨其作用机制。结果:罗勒提取物可显著提高胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂所致肺血栓小鼠的存
活率，明显延长 FeCl3 诱导大鼠颈动脉血栓形成时间并显著减轻血栓湿重，显著减轻结扎法所致下腔静脉血栓湿重，并
使血浆 AT-Ⅲ浓度降低、PC活性升高，PLG、t-PA活性升高、PAI-1 活性轻微降低、t-PA /PAI-1 比值升高。结论:罗勒提取
物无论是水提物还是醇提物均有明显抗血栓作用，其作用机制可能与抗凝系统和纤溶系统活性升高有关。
中图分类号:R285. 6 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)05-0722-05
Antithrombotic activity of Ocimum basilicum L. extract and the action of mecha-
nism
ZHOU Wen-ting1， Ibadet Tohti1， TIAN Shu-ge2， HE Zhi-qin1， Ulanbyer1， Anwar Umar1*
(1. Department of Pharmacology，Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China;2. Center of Eexperiment，Department of Triditional Chinese Medi-
cine，Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China)
KEY WORDS:Ocimum basilicum L;aqueous extract，alcohol extract;anti-thrombosis:AT-Ⅲ;PC;t-PA
ABSTRACT:AIM:To study the antithrombotic activity of Ocimum basilicum L(OBL)extracts，extracted with
aqueous and 70% ethanol，and to observe anticoagulat action and fibrinolysis. METHODS:Three experimetal
models in vivo，pulmonary thromboembolism in mice，FeCl3-induced arterial thrombosis and ligation-induced inferi-
or caval thrombosis in rats were used to examine the antithrombotic activity of aqueous and alcohol extract of OBL ;
the activity of AT-Ⅲ，PC，PLG，t-PA and PAI-1 in plasma were determined by ELISA to evaluate the effects of the
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drugs on the anticoagulant factor and fibrinolytic system. RESULTS:OBL extract by oral administration could
markedly increase the survival rate of the mouse suffering from pulmonary thrombosis induced by the mixture of col-
lagen and epinephrine，and significantly decreased the weight of the thrombus induced by ligation of inferior vena
cava. The concentration of AT-Ⅲ was decreased，the concentration of PC was increased;the activity of PLG and
t-PA were increased，the activity of PAI-1 was decreased slightly，the ratio of t-PA /PAI-1 increased. CONCLU-
SION:The OBL extracts，both aqueous and alcholol extract，have strong anti-thrombosis effect，the action of
mechanism may have correlation with the increase in the activity of the anticoagulant factor and fibrinolysis system.
罗勒是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之
一，植物维文名为热依汗(Rayhan)，是唇形科罗勒
属植物罗勒(Ocimum basilicum L，OBL)的地上部
分［1］。现代化学研究表明，罗勒的成分主要含挥发
油类、黄酮及其苷类、香豆素类，此外还含有三萜类
和生物碱类等成分［2］。据有关文献报道，罗勒提取
物具有抗肿瘤转移活性［3］、抗氧化活性［4，5］、抗炎镇
痛活性［6，7］、抗消化道溃疡活性［8］、调血脂［9，10］和降
血糖作用［11］等。前期研究发现，罗勒具有抗血小板
聚集作用且作用强于阿司匹林［12］，并可显著延长凝
血时间［13］。本实验通过三种实验性血栓模型考察
罗勒不同提取物对血栓形成的影响，并进一步对凝
血系统、纤溶系统的重要指标进行测定分析，旨在探
讨其作用机制，从而为其药理学应用提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 动物 昆明种小鼠、Wistar大鼠(清洁级)均由
新疆医科大学实验动物中心提供。
1. 2 药物与试剂 阿司匹林(Sigma 公司进口分
装)、银杏叶片(深圳海王药业有限公司，批号:
Z20027956)、胶原蛋白(Sigma公司进口分装);盐酸
肾上腺素注射液(天津药业集团新郑股份有限公
司，批号:071101);FeCl3 为国产分析纯，配成 70%
水溶液;抗凝血酶-Ⅲ(anti-thrombin 3，AT-Ⅲ)、蛋白
质 C(protein C，PC)、纤溶酶原(plasminogen，PLG)、
组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activa-
tor，t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen
activator inhibitor-1，PAI-1)酶联免疫吸附测试法
(ELISA)活性测定试剂盒均购自美国 R＆D公司。
1. 3 主要仪器 超声波清洗仪(上海科导超声仪
器有限公司，SK2200H);冷冻干燥机(北京博医康
实验仪器有限公司，FD-1);半导体点式温度计(厦
门中村电子仪器厂，Model706);全自动酶标仪
(BECKMAN COULTER AD340)。
1. 4 实验方法
1. 4. 1 药材提取 罗勒地上部分粉碎后用 10 倍量
蒸馏水(60 ～ 70℃)浸泡 1 h，以频率 25 Hz的超声波
处理 30 min后过滤，残渣再加 10 倍量蒸馏水(60 ～
70℃)超声处理 30 min，过滤，合并两次滤液，减压
蒸馏浓缩至浸膏状置 － 70℃冷藏 12 h，取出后放入
冷冻干燥机，24 h 后得罗勒水提物的固体粉末;乙
醇提方法采用 70%乙醇溶液(常温)，其余方法完全
相同，得罗勒醇提物的固体粉末。
实验时罗勒提取物固体粉末加蒸馏水溶解至所
需浓度(醇提物用超声助溶)。
1. 4. 2 小鼠肺血栓实验 取小鼠 144 只，体重 18
～ 22 g，♀♂对半，随机分成 9 组，即:对照组(生理
盐水)、阿司匹林组(5 mg /kg)、银杏叶片组(120
mg /kg)，罗勒水提物低、中、高剂量组(100 、200、400
mg /kg)，罗勒醇提物低、中、高剂量组(100、200、400
mg /kg)，每组 16 只。小鼠分别灌胃给药 15 d，每日
给药 1 次，给药体积为 0. 1 mL /10 g，末次给药 2 h
后，参照 Diminno等的方法［14］，尾静脉注射胶原蛋
白(10 mg /kg)与肾上腺素(1 mg /kg)混合诱导剂，
空白组注射生理盐水，观察 5 min内小鼠死亡数，计
算小鼠存活率。
1. 4. 3 FeCl3 诱导大鼠颈动脉血栓实验 取雄性大
鼠 100 只，随机分成 10 组，即:空白组(生理盐水)、
模型组(生理盐水)、阿司匹林组(5 mg /kg)、银杏叶
片组(120 mg /kg)，罗勒水提物低、中、高剂量组
(100 、200、400 mg /kg)，罗勒醇提物低、中、高剂量
组(100、200、400 mg /kg)，每组 16 只。各组动物灌
胃给药 15 d，每日给药 1 次，给药体积为 1 mL /100
g，末次给药 1 h 后腹腔注射乌拉坦(1. 5 g /kg)麻
醉，参照 Kurz 等［15］的方法改良制作颈总动脉血栓
模型，分离左侧颈总动脉 2 cm，下方置小片塑料薄
膜(3 cm × 1. 5 cm)，用于保护血管周围组织，将吸
有 70% FeCl3 溶液的滤纸片(1 cm × 1 cm)敷于暴
露的动脉表面上，空白组敷生理盐水滤纸片，用半导
体点式温度计监测动脉表面温度变化，记录从敷上
滤纸片开始计时，至温度突然下降的时间为血栓形
成时间(occlusion time，OT)，剪下血栓发生部位的
血管放于滤纸上吸干残血，以电子分析天平测其重
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量。
1. 4. 4 下腔静脉血栓实验 动物分组给药方法同
上，末次给药 1 h 后腹腔注射乌拉坦(1. 5 g /kg)麻
醉，参照 Reyer等的方法［18］，沿大鼠腹中线开腹腔，
分离下腔静脉，于下腔静脉和左肾静脉交叉下方用
丝线结扎，缝合腹壁。4 h 后重新开腹腔，用止血钳
将距结扎处 2 cm 的下腔静脉和与下腔静脉连接的
其他静脉侧枝夹住，剪取该段静脉，分离出血管内血
栓与滤纸上吸干残血，测其血栓重量。
1. 4. 5 抗凝及纤溶系统活性测定 于上述下腔静
脉血栓实验剪取形成血栓的静脉血管后，立即腹主
动脉取血 6 mL /只，枸橼酸钠 1 ∶ 9 抗凝，混匀后
3 000 r /min离心 15 min，按照 ELISA 试剂盒说明测
定测血浆 AT-Ⅲ、PC及 PLG、t-PA、PAI-1 含量。
1. 5 数据统计分析与处理 各组数据均用
SPSS16. 0 统计分析软件进行处理，其中小鼠肺血栓
实验以 χ2 检验进行统计比较;其他各组数据以 珋x ± s
表示，以单因素方差分析和 q检验进行统计比较。
2 结果
2. 1 对小鼠肺血栓形成的影响
罗勒提取物对由胶原蛋白和肾上腺素混合诱导
剂引发的肺血栓有一定的保护作用，其中罗勒醇提
取物中高剂量组存活率达到 81. 3%和 87. 5%，与生
理盐水对照组(存活率为 12%)相比可明显抑制小
鼠的死亡(P < 0. 01)，提高小鼠肺栓塞的存活率。
见表 1。
表 1 罗勒提取物对小鼠肺栓塞的抑制作用
组别 动物数 /只 存活数 /只 存活率 /%
对照组 16 14 /16 12. 5
阿司匹林组 15 9 /15 40. 0*
银杏叶片组 15 9 /15 40. 0*
水提物低剂量组 16 11 /16 31. 3
水提物中剂量组 16 8 /16 50. 0
水提物高剂量组 16 6 /16 62. 5
醇提物低剂量组 16 5 /16 68. 8*
醇提物中剂量组 16 3 /16 81. 3
醇提物高剂量组 16 2 /16 87. 5
与对照组比较，* P < 0. 05，P < 0. 01。
2. 2 对 FeCl3 诱导大鼠颈动脉血栓形成的影响
假手术组无血栓形成，模型组左侧颈总动脉可
见有闭塞性血栓形成。与模型组相比，罗勒水提物
中高剂量组、罗勒醇提物各组均能显著延长血栓形
成时间并降低血栓重量(P < 0. 01)，且作用呈浓度
依赖性。见表 2。
表 2 罗勒提取物对 FeCl3 诱导大鼠颈总动脉血栓形成时间及重量的影响(珔x ± s)
组别 动物数 /只 血栓形成时间 / s 血栓重量 /mg 血栓形成抑制率 /%
空白组 9 － － －
模型组 10 531. 3 ± 88. 3 10. 52 ± 1. 29 －
阿司匹林组 10 777. 4 ± 66. 1* 6. 84 ± 2. 03 35. 0
银杏叶片组 10 831. 7 ± 108. 7 6. 29 ± 1. 68 40. 2
水提物低剂量组 10 688. 0 ± 117. 3 6. 49 ± 1. 40 38. 3
水提物中剂量组 10 833. 6 ± 162. 2 6. 26 ± 2. 18 40. 5
水提物高剂量组 10 943. 7 ± 188. 8 5. 83 ± 1. 58 44. 6
醇提物低剂量组 9 913. 4 ± 206. 7 6. 19 ± 1. 62 41. 2
醇提物中剂量组 10 1 046. 5 ± 243. 6 4. 55 ± 1. 71 56. 7
醇提物高剂量组 10 1 240. 6 ± 113. 9 3. 96 ± 0. 81 62. 4
与模型组比较，* P < 0. 05，P < 0. 01。
2. 3 对大鼠下腔静脉血栓形成的影响
与生理盐水组相比，罗勒水提物中高剂量组、醇
提物各剂量组能显著减少结扎所致大鼠下腔静脉血
栓重量(P < 0. 01)，且作用呈浓度依赖性。见表 3。
2. 4 对大鼠血浆 AT-Ⅲ、PC浓度的影响
与空白组相比，大鼠下腔静脉血栓模型组血浆
AT-Ⅲ、PC浓度均显著下降(P < 0. 01)。
各给药组与模型组相比，罗勒水提物中、高剂量
组和醇提物中、高剂量组血浆 AT-Ⅲ浓度显著下降
(P < 0. 01)，而阿司匹林组和银杏叶片组变化无显
著性差异;各给药组与模型组相比，银杏叶片组(P
< 0. 01)、罗勒水提物中剂量组(P < 0. 05)和高剂量
表 3 罗勒提取物对实验性大鼠下腔静脉血
栓形成的影响(珔x ± s)
组别 动物数 /只 血栓重量 /mg 血栓抑制率 /%
空白组 10 － －
模型组 10 6. 80 ± 0. 57 －
阿司匹林组 9 5. 40 ± 0. 72 20. 6
银杏叶片组 10 5. 14 ± 0. 62 24. 4
水提物低剂量组 9 6. 64 ± 0. 95 2. 4
水提物中剂量组 10 4. 84 ± 1. 39 28. 8
水提物高剂量组 10 3. 21 ± 0. 72 52. 8
醇提物低剂量组 10 5. 24 ± 1. 15 22. 9
醇提物中剂量组 10 3. 19 ± 0. 60 53. 1
醇提物高剂量组 10 2. 11 ± 0. 62 69. 0
与模型组比较，* P < 0. 05，P < 0. 01。
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组(P < 0. 01)、罗勒醇提物中、高剂量组(P < 0. 01)
大鼠血浆 PC 浓度均显著升高，阿司匹林组无显著
性差异。见表 4。
表 4 罗勒提取物对实验性下腔静脉血栓大鼠血浆
AT-Ⅲ和 PC的影响 (珔x ± s)
组别 动物数 /只 AT-Ⅲ /(ng /L) PC /(μg /mL)
空白组 10 546. 10 ± 137. 67 7. 02 ± 1. 46
模型组 10 417. 6 ± 106. 55 4. 36 ± 0. 98
阿司匹林组 9 388. 0 ± 162. 87 4. 66 ± 0. 94
银杏叶片组 10 345. 27 ± 215. 90 6. 56 ± 1. 91▲▲
水提物低剂量组 9 373. 54 ± 94. 91 4. 89 ± 2. 06
水提物中剂量组 10 274. ± 140. 55▲▲ 5. 54 ± 1. 67▲
水提物高剂量组 10 270. 8 ± 39. 79▲▲ 6. 80 ± 1. 03▲▲
醇提物低剂量组 10 293. 31 ± 69. 41 4. 60 ± 1. 20
醇提物中剂量组 10 270. 8 ± 39. 79▲▲ 5. 94 ± 1. 55▲▲
醇提物高剂量组 10 217. 9 ± 60. 00▲▲ 7. 32 ± 1. 30▲▲
与空白组比较，* P < 0. 05， P < 0. 01，与模型组比较，▲ P <
0. 05，▲▲P < 0. 01。
2. 5 对大鼠血浆 PLG、T-PA和 PAI-1 浓度的影响
与空白组相比，大鼠下腔静脉血栓模型组血浆
PLG、t-PA浓度显著性下降(P < 0. 01)、PAI-1 浓度
显著性升高(P < 0. 01)、t-PA /PAI-1 比值显著性降
低(P < 0. 01)。
各给药组与模型组相比，银杏叶片组、罗勒水提
物中、高剂量组和醇提物中、高剂量组大鼠血浆 PLG
浓度显著升高(P < 0. 01)，阿司匹林组无显著性差
异;罗勒水提物中、高剂量组和醇提物中、高剂量组
大鼠血浆 t-PA 浓度显著升高(P < 0. 01)，阿司匹林
组和银杏叶片组均无显著性变化;各给药组大鼠血
浆 PAI-1 浓度均有轻微降低，但无统计学差异;罗勒
水提物中、高剂量组和醇提物中、高剂量组大鼠血浆
t-PA /PAI-1 比值显著升高(P < 0. 01)，阿司匹林组
和银杏叶片组变化无统计学差异。见表 5。
表 5 罗勒提取对实验性大鼠下腔静脉血栓大鼠血浆 PLG、t-PA 、PAI-1 和 t-PA /PAI-1 的影响(珔x ± s)
组别 动物数 /只 PLG /(μg /L) t-PA /(ng /L) PAI-1 /(ng /L) t-PA /PAI-1(× 102)
空白组 10 2 506. 17 ± 433. 80▲▲ 20. 00 ± 3. 84▲▲ 560. 24 ± 81. 26▲▲ 3. 63 ± 0. 86▲▲
模型组 10 1 400. 55 ± 393. 00 7. 66 ± 1. 99 807. 16 ± 127. 45 1. 01 ± 0. 45
阿司匹林组 9 1 636. 75 ± 344. 30 8. 02 ± 3. 01 801. 12 ± 116. 62 0. 99 ± 0. 29
银杏叶片组 10 2 217. 26 ± 915. 26▲▲ 10. 67 ± 3. 83 713. 39 ± 125. 03* 2. 15 ± 0. 61▲▲
水提物低剂量组 9 1 894. 27 ± 494. 90* 11. 88 ± 6. 87 756. 85 ± 124. 19 1. 58 ± 0. 93
水提物中剂量组 10 2 241. 57 ± 751. 56▲▲ 14. 49 ± 1. 88▲▲ 732. 91 ± 154. 16* 2. 09 ± 0. 72▲▲
水提物高剂量组 10 2 668. 20 ± 477. 65▲▲ 15. 94 ± 2. 84▲▲ 718. 40 ± 75. 57* 2. 25 ± 0. 51▲▲
醇提物低剂量组 10 1 926. 20 ± 447. 17 12. 76 ± 6. 59 745. 24 ± 173. 57 1. 72 ± 0. 73
醇提物中剂量组 10 2 252. 82 ± 743. 23▲▲ 15. 24 ± 3. 01▲▲ 715. 06 ± 114. 25* 2. 20 ± 0. 68▲▲
醇提物高剂量组 10 3 143. 83 ± 375. 29▲▲ 19. 42 ± 7. 12▲▲ 706. 18 ± 99. 60* 2. 76 ± 0. 99▲▲
与空白组比较，* P < 0. 05，P < 0. 01，与模型组比较，▲P < 0. 05，▲▲P < 0. 01。
3 讨论
本研究通过小鼠肺血栓、大鼠颈总动脉、下腔静
脉三种血栓形成实验以及对大鼠血浆凝血系统、纤
溶系统指标的测定，发现罗勒提取物具有较强的抗
血栓作用，其作用可能与抑制凝血系统活性并激活
纤溶系统有关。胶原蛋白、肾上腺素都是血小板聚
集诱导剂，当两者合用时有显著的协同作用。将两
种诱导剂混合后，小剂量给药小鼠静脉注射，可诱发
小鼠血栓性偏瘫和死亡。对血小板聚集具有拮抗作
用的药物可以拮抗由该复合诱导剂所引起的血栓性
偏瘫［16］。由此可推测，罗勒提取物可以通过抑制血
小板功能来达到抗血栓作用的，这与已经发现的罗
勒提取物能抑制血小板聚集是吻合的［12］。
FeCl3 诱导颈总动脉血栓形成模型由 Kurz 等首
先报道，之后被广泛应用于抗血栓药理研究。FeCl3
可损伤血管，使血管内膜受损，从而激活血小板和凝
血系统，在损伤局部形成阻塞性栓塞。Kurz 等人电
镜观察其血栓由激活的血小板、纤维蛋白丝和红细
胞组成，符合人类动脉血栓特征［15］。Broersma 等进
一步研究表明［17］，预先使血小板减少和静注抗凝血
酶药 FPRCH2CI，用 FeCl3 后 60 min 观察，可防止血
栓阻塞，表明此模型中血小板依赖性和凝血酶形成
处于主要地位。据唐映红等研究表明［18］，在 FeCl3
损伤后，模型组血浆 TXB2 含量升高，6-keto-PGF1α
含量降低，同时血浆 t-PA 活性降低，t-PA /PAI-1 比
值降低，PLG活性降低，血浆 AT-Ⅲ和 PC 活性也降
低。提示此模型的形成既存在血小板活化和凝血系
统激活，也存在抗凝和纤溶活性降低的血液病理变
化。本研究中，罗勒提取物可以抑制 FeCl3 诱导血
栓形成，使血栓形成时间延长，血栓重量减轻，推测
罗勒提取物具有增强抗凝系统和纤溶系统活性的作
用。
Reyer等下腔静脉血栓模型原理是局部血流瘀
滞、缺氧，导致血管内皮细胞损伤，启动内源性凝血
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May 2010
Vol. 32 No. 5
系统，此外，黏聚的血小板与局部形成的凝血因子也
因血流受阻停留在局部，致使血栓形成［19，20］。
本研究中，对结扎法所致下腔静脉模型组凝血
系统和纤溶系统的活性进行了测定，实验结果表明
模型组血浆 AT-Ⅲ和 PC浓度均有显著性降低，提示
模型组抗凝系统活性降低;同时，模型组血浆 PLG、
t-PA浓度降低、PAI-1 浓度升高、t-PA / PAI-1 比值降
低，提示模型组纤溶活性降低。而罗勒提取物中、高
剂量组可以抑制血栓形成，不同程度的增加血浆
PLG、t-PA 浓度和 t-PA / PAI-1 比值，并降低 AT-Ⅲ
浓度，升高 PC 浓度，推测罗勒提取物可能通过与
AT-Ⅲ结合使 AT-Ⅲ活化发挥抗凝血作用，从而使游
离的 AT-Ⅲ浓度降低，同时可能减少了 PC 的消耗，
使 PC浓度升高，表明罗勒提取物可以有效抑制结
扎法所致下腔静脉血栓模型抗凝系统和纤溶系统活
性的降低，并呈浓度依赖性。
目前现有的抗血栓药物按作用机制可分为抗凝
血药、抗血小板药和纤维蛋白溶解药［21，22］。各类药
物虽有不同程度的作用，但不良反应也日趋明显或
半衰期太短，或无法口服、出血倾向、过敏反应和溶
栓后再栓塞等不良反应限制其广泛应用。因此，研
究安全、有效的抗血栓药物具有重要意义。本研究
表明，罗勒提取物同时兼有抗凝、抗血小板和纤溶活
性的作用，具有较大的研究意义和开发前景。
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2010 年 5 月
第 32 卷 第 5 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
May 2010
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