全 文 :第 5 卷 第 1 期
2009 年 1 月
亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific T r aditional M edicine
Vo l.5 No.1
Jan.2009
收稿日期:2008-12-18
作者简介:江国华(1983-),女 ,蒙古族 , 新疆人 ,新疆医科大学硕士 , 研究方向为心血管药理学。
维吾尔药罗勒对环氧化酶的影响
江国华1 ,依巴代提1 ,阿布力孜2 ,盛 磊2
(1.新疆医科大学 药理教研室;2.新疆医科大学 科研中心 ,新疆 乌鲁木齐 830054)
摘 要:目的:探讨维吾尔药罗勒醇提物在体外对环氧化酶的影响 , 从而研究罗勒抗血栓的作用机制。方法:测定
人脐静脉内皮细胞 6-ke to-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞 PGE2的含量。结果:罗勒对环氧化酶-1(COX-1)和环
氧化酶-2(COX-2)都有不同程度的抑制作用。在剂量相同时 , 罗勒醇提物对 COX-2 的抑制率大于 COX-1。
结论:本实验从底物的角度证实了罗勒醇提物对 COX-1 和 COX-2 的作用 , 抗血栓部分机理可能是由于抑制环
氧化酶而介导的。
关键词:罗勒;环氧化酶-1;环氧化酶-2;抗血栓
中图分类号:R973 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2009)01-0037-01
罗勒是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一 ,是唇
形科罗勒属植物 Ocimum basi licum L [ 1 ,2] 。主要成分:全
草 ,罗勒的化学成分主要为挥发油 、黄酮 、香豆素 、甾体化合
物等 ,其中挥发油的含量最大[ 3] 。本研究是通过罗勒在体
外对环氧化酶(COX-1和 COX-2)活性的影响来探讨罗
勒抗血栓的作用机制 ,给临床选药组方提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与材料
CO2培养箱 ,全自动酶标仪 ,生物显微镜 ,超净操作台 。
罗勒 ,阿司匹林 ,吲哚美辛;脂多糖(LPS)、花生四烯酸
(AA);DMEM 干粉;RPMI1640;小牛血清(四季青);
M TT 、胰蛋白酶;6-keto-PG F1α和 PGE2ELISA试剂盒。
1.2 方法
1.2.1 在体外对 COX-1的影响
按文献方法制备内皮细胞 COX-2模型 [4] 。将培养至
第 4代的内皮细胞接种于 24孔培养板中生长融合 ,再加入
罗勒提取液 ,使其终浓度分别为 0.1mg/mL 、1mg/mL 、
10mg/mL ,或非选择性环氧化酶抑制剂阳性对照阿司匹林
(终浓度 10-6 mol/L)、COX -2 抑制剂阳性对照吲哚美辛
(终浓度 10-7mol/ L)或阴性对照溶媒。37℃、5%CO2培养
箱培养 24h ,取出每孔加入底物花生四烯酸 ,使其终浓度为
10μmol/ L , 37℃继续培养 20min 。收集上清液 ,-20℃冻存
待测[ 5] ,用 ELISA 法测定样品中 6-keto-PG F1α。
1.2.2 在体外对 COX-2的影响
按文献方法制备巨噬细胞 COX-2模型[ 6] ,将细胞接
种于 24孔板中生长融合 ,再加入一定浓度的罗勒提取液 ,
终浓度分别为 0.1mg/mL 、1mg/mL 、10mg/mL ,或阳性对
照品阿司匹林(终浓度 10-6 mol/L)、吲哚美辛(终浓度 10-7
mol/ L)或溶媒。37℃、5%CO2培养箱培养 24h ,取出 ,每孔
加入底物花生四烯酸(终浓度 10μmol/L), 37℃继续培养
20min 。收集上清液 ,-20℃冻存待测 。用 ELISA 法测定样
品中的PGE2 。
1.2.3 统计学处理
数据用 SPSS统计软件处理 ,所有结果用 x ±s表示 ,采
用独立样本 t 检验和方差分析 。
2 结果
罗勒在体外对环氧化酶的影响 ,罗勒对环氧化酶-1
(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有不同程度的抑制
作用 ,另外 ,随着剂量的增加抑制率也增大 ,存在一定的量
效关系。结果见表 1 。
表 1 罗勒在体外对 COX-1 和 COX-2 的影响
( x±s , n=3)
药物 剂量 PGF1α(μg ·L-1)
抑制率
(%)
PGE2
(μg ·L-1)
抑制率
(%)
空白 3.91±0.50 20.51±2.95
阿司匹林 10-6mo l/L 3.60±1.04 8 15.03±1.23** 27
吲哚美辛 10-7mo l/L 1.84±0.36** 55 1.44±0.41** 51
罗勒 0.1mg/ml 3.50±0.60 11 13.77±3.15** 33
1mg/ ml 3.13±0.88 21 11.68±3.59** 43
10mg/ml 2.76±0.34* 31 7.96±1.22** 62
注:与 DMSO 比较:*P < 0.05 , **P<0.01。
3 讨论
环氧化酶(COX)是花生四烯酸合成前列腺素过程中
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第 5 卷 第 1 期
2009 年 1 月
亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific T r aditional M edicine
Vo l.5 No.1
Jan.2009
收稿日期:2008-11-20
作者简介:宓伟(1978-),男 , 山东临沂人 ,滨州医学院病原生物学教研室助教 ,从事医学微生物学和普通微生物学的教学及科研
工作。
一个重要的限速酶 ,其催化的产物前列腺素 H 2是各种前列
腺素的共同中间体 ,在各组织和器官中前列腺素 H 2被不同
的前列腺素合成酶作用生成各种前列腺素 ,以自分泌或旁
分泌方式和靶细胞的前列腺素受体结合发挥各种各样的生
理功能[ 7] 。随着 COX-2 的发现 ,现在普遍认为 COX -1
负责维持身体的正常机能 ,而COX-2则是一种诱导酶 ,参
与炎症反应 ,抑制COX-2 可以发挥抗血栓作用[ 8] 。本实
验表明 ,罗勒在 3个剂量都对COX-2有抑制作用 ,并随剂
量的增加而作用增强 ,抑制环氧化酶可能是其抗血栓的作
用机制之一 。
参考文献:
[ 1] 茹克娅木.维吾尔医常用药材学(上)(维吾尔文)[ M ] .乌鲁木
齐:新疆人民卫生出版社 , 1993:426-429.
[ 2] 新疆维吾尔自治区卫生厅.维吾尔药材标准[ S] .乌鲁木齐:新疆
科技卫生出版社 , 1993:183-187.
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志 , 2003 , 28(8):740-742.
[ 4] 侯琦 ,胡玉芳,郭颖 ,等.非普拉宗对环氧酶活性的影响[ J] .药学
学报 , 2000 , 35(7):481.
[ 5] 龙启才 ,邱建波.雷公藤 、防己醇提取物对淋巴细胞和环氧化酶
的影响[ J] .中药材 , 2004 , 27(11):851.
[ 6] 胡玉芳 ,程桂芳.环氧酶选择性抑制剂筛选模型的建立[ J] .药学
学报 , 2000 , 35(5):343.
[ 7] Funk C D.Prostaglandins and leu kot rienes:advances in eico-
sanoidbiology[ J] .S cience , 2001 , 294(5548):1871.
[ 8] Marx J .Ant i-inf lammato ries in hibit cancer grow th bu t how
[ J] .S cience , 2001 , 291(5504):581.
(责任编辑:姜付平)
沙棘对小鼠免疫功能作用的研究
宓 伟1 ,鞠艳华2
(1.滨州医学院 ,山东 滨洲 256603;2.烟台市警备区第二干休所 ,山东 烟台 264000)
摘 要:目的:观察沙棘对小鼠抗体形成细胞的作用。方法:取小鼠 24 只 , 随机分为对照组和实验组 ,分别用生理
盐水和 100%浓度沙棘浸出液定期给小鼠灌胃 ,然后进行小鼠抗体产生能力检测 、特异玫瑰花环结形成细胞检测
(S RFC)、血清 IgG 检测。结果:实验组以上三项免疫学指标均有显著增高 ,与对照组相比均有非常显著性差异。
结论:沙棘有明显促进小鼠免疫功能增强的作用。
关键词:沙棘;小鼠免疫功能;研究
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2009)01-0038-02
沙棘(Hippophae rhamnoides L)又名醋柳 、酸刺子为
胡颓子科多年生灌木或小乔木沙棘的成熟果实和叶 。秋 、
冬二季果实成熟或冻硬时采收 ,除去杂质 ,干燥或蒸后干
燥 。主产于陕西 、四川 、甘肃 、宁夏 、山西 、辽宁等省 。主要
功效:益气生津 ,祛痰止咳 ,消食止泻 ,活血散瘀[ 1] 。其化学
成分主要有黄酮类 、萜类 、甾体类 、蛋白质和氨基酸类 、油和
脂肪酸类 、挥发油类 、有机酸类 、糖及微量元素等 ,是一种营
养丰富 、药用价值极高的植物[ 5] 。近年来引起国内外学者
的极大重视 。我们主要进行了沙棘对抗体形成细胞作用的
研究 ,旨在为沙棘的临床应用提供科学依据 。
1 材料与方法
1.1 仪器与药物
低温冷冻离心机(Beckmen ,美国);美国 Multiskan产
全自动酶标仪;恒温水浴箱(上海);电泳仪(上海);100目
不锈钢网 。沙棘(购于附属医院中药房),取 100g 加水
1000mL ,文火煎煮 2h ,去渣浓缩为 100mL(浓度为 100%)
备用 。
1.2 实验动物及分组
取BA LB/C纯系小鼠 24只 ,体重 18~ 22g ,雌雄各半 ,
随机分为两组 ,每组 12只 , Ⅰ组为生理盐水对照组 , Ⅱ组为
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