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新麦草种子贮藏时间对种子活力的影响



全 文 :收稿日期:2015-03-21
基金项目:国家自然基金项目“新麦草作图群体建立与遗传图谱构建”
(编号:31460627);内蒙古自然科学基金项目资助(编号:
2013MS 0407)。
作者简介:白亚利(1988—),男,河北康保人;在读硕士研究生,主要从
事牧草遗传育种研究工作;E-mail:whiter_01@163.com。
通讯作者:云 岚,E-mail:yunlan@imau.edu.cn。
新麦草种子贮藏时间对种子活力的影响
白亚利, 云 岚, 宋百枝
(内蒙古农业大学生态环境学院, 呼和浩特010020)
摘 要:以2013年7月收获的新麦草种子为试验材料,测定种子不同贮藏时间下的电导率、发芽势、发芽率及发芽1周
胚芽、胚根长度。结果表明,新麦草贮藏40d到160d的种子发芽率维持较高水平,恒温和自然变温条件均达到了88%
以上,贮藏160d种子发芽势最高,自然变温条件和恒温条件分别达到11.5%和15%,之后随着贮藏时间延长种子开始
出现老化,发芽率、发芽势降低;自然变温条件贮藏的种子除发芽率外,发芽势、种子活力指数等都高于恒温条件下贮藏
种子;贮藏160d种子活力指数显著高于其它贮藏时间,并且自然变温贮藏条件优于常温贮藏条件;自然变温贮藏种子
更有利于种子活力的保持;其后各指标随贮藏时间的延长下降。因此,新麦草种子最佳贮藏利用时间是在自然变温条件
下贮藏160d左右。
关键词: 新麦草;贮藏时间;种子活力
DOI编码: 10.16590/j.cnki.1001—4705.2015.08.033
中图分类号: S 543   文献标志码: A   文章编号: 1001—4705(2015)08-0033-06
Effects of Storage Time on Seed Vigor of Psathyrostachys juncea
BAI Yali,YUN Lan,SONG Baizhi
(Colege of Ecology and Environmental Science,Inner Mongolia Agricultural University,
Hohhot 010020,China)
Abstract:The Psathyrostachys junceais a dense cluster type in cool season perennial grass,which has
extremely high grazing tolerance and salt tolerance.To improve the utilization efficiency of seed of this
species,seed vigor analysis were conducted under different seed storage time and condition.The seeds
were harvested in July 2013and stored separately in natural changing temperature and indoor stable
temperature.Electrical conductivity,germination potential,germination rate and plumule radicle length
were tested in different storage time.The results show that from 40dto 160dstorage,seed germina-
tion rate gradualy increased and maintained at a higher level,both natural changing temperature and
indoor stable temperature beyond 80%,germination potential from 80dto 160dstorage was high and
the highest germination potential was 160dstorage with 11.5%and 15%,then seed began to aging
with increase of the storage time,germination rate,germination potential decreased.Seeds storage
under natural changing temperature had much higher germination rate and seed vigor which shows
that keeps in the natural low temperature were more benefit to seed vigor.The changeable trend of
seeds vigor was first increased and then decreased,and reached the top at 160d.Vigor index also
indicated that after stored for about 160d,the seed vigor were significantly higher than that of other
storage time,and al subsequent index decreased with the extension of storage time after 200d.So the
best storage time of Psathyrostachys juncea seeds is about 160dunder the natural changing tempera-
ture conditions.
Key words: Psathyrostachys juncea;storage time;seed vigor
  种子是农业生产的基础和关键,对农业的发展起
着重要的作用。1876年,德国科学家Nobbe[1]作为种
子学的创始人,提出同一批次种子之间存在发芽和幼
苗生长速度的个体性差异,并且不同批次的种子的发
芽和生长速度的均值通常不同的观点,他把这种现象
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研究报告  白亚利 等:新麦草种子贮藏时间对种子活力的影响
定义为生长力,也就是之后的种子活力(seed vigor)。
种子活力是决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活
性水平和行为的那些种子特性的综合表现[2],北美官
方种子分析家协会(AO-SA)更新种子活力定义为:在
田间条件下,决定种子快速整齐出苗并且使幼苗正常
生长的潜能[3]。颜启传等在进行种子活力研究的同
时,对种子活力的定义给予了更加详细的描述:植株能
正常发芽、出苗,快速整齐的健康生长,表现出的抗逆
性强,能达到高产和优质的潜能[4],这与郑光华[5]对种
子活力定义的描述类似。
  在进行种子评定中,种子活力作为一项描述种子
品质的变量占据重要的地位。种子活力高的植物种子
与活力低的种子相比,具有明显的生长优势和巨大的
生产潜能,对作物产量的提高和品质的改善具有重要
的意义。在恒温条件下进行种子活力测定的方法有很
多,其中发芽率、发芽势的测定,电导率的测定,加速老
化试验是国际种子检验协会推荐的几种方法。发芽率
和发芽势主要是测定种子在发芽过程中发芽数所占的
比例和发芽的趋势来对种子的活力进行评定,电导率
是将种子进入蒸馏水中,通过测定种子浸出物电导度,
这种方法快速,能很好的对种子的活力进行分析判断,
加速衰老是通过人工的方法加速种子较快衰老,测定
种子老化的速度可以在一定程度上判定种子的抗衰老
能力,也就从另一个角度反映了种子活力的高低。尽
管研究种子活力的方法很多,但是在不同的贮藏条件
下应用适宜的方法测定不同贮藏时间的新麦草种子活
力的研究很少,所以有必要采取一定的方法在一定的
贮藏时间下对新麦草的种子活力进行测定。
  种子活力的基础是种子体内营养物质的积累。因
此,在种子逐渐成熟的过程中,营养物质不断的积累,
种子活力逐渐增强,直至在成熟期达到最高水平[6]。
对于贮藏种子,随着贮藏时间的增加,种子内部营养物
质随自身的呼吸作用消耗,种子活力下降。种子贮藏
过程中,含水量对种子的保存也至关重要,通过降低种
子含水量的方法来贮藏种子可以降低用于低温贮藏种
子所产生的花销。刘大林等对新麦草含水量进行处
理,分成不同的含水量梯度进行对比分析种子活力的
变化,结果表明,超干贮藏种子由于其细胞膜结构完
整,功能保持较好,外渗物质较少,保持了新麦草种子
较好的活性[7]。但并非含水量越低越有利于保持种子
活力,最适宜新麦草种子贮藏的含水量区间应该是在
4.471%~6.470%,保证细胞膜完整对保持种子活力
至关重要。
  影响种子活力的因素很多,主要是内因和外因,即
遗传因子和外界条件对种子的影响,而内因对种子活
力的影响起着决定性作用。T.M.Ching进行作物试
验中发现,种子活力具有很高的遗传性,种子活力强的
作物其后代种子也表现出较强的活力[8],与此同时,种
子发育条件,采购、调制、干燥、清洗、包装以及运输,和
贮藏条件等外因的影响,也会在一定程度上决定种子
活力表达的可能性。此外,种子历经的土壤、气候条
件、降水等生理生化条件对种子活性也有一定影响,
Gurusinghe在研究种子寿命潜能中发现,从种子形成
到种子成熟的过程中,种子活力下降的过程是不可逆
的[9],在这个过程中种子内部正在发生着一系列的变
化,包括呼吸能力和生物合成能力的下降。郑文寅在
研究大豆种子活力与贮藏蛋白关系中发现,低活力种
子的贮藏蛋白利用效率比高活力种子的贮藏蛋白利用
效率要低很多[10];苏桂萍研究甜菜种子活力结果表明
高活力种子的物质降解效率和生理生化过程中物质贮
藏的转运效率都要比低活力种子高[11]。因此,利用高
活力种子进行生产,不仅能够节约成本,还为高产高效
打下坚实的基础。
  新麦草(Psathyrostachys juncea(Fisch.)Nevski)
属于禾本科新麦草属,是多年生疏丛型牧草[12],原产
于中亚和西伯利亚,20世纪初引入北美西部种植,现
已成为该地区草场植被更新的重要牧草之一[13]。新
麦草寿命很长,可达20年以上,分蘖能力和再生能力
强,其营养生长期长,粗蛋白含量很高,是良好的耐旱
放牧型禾草,也是一种值得研究的改良干旱草地和培
育抗旱的牧草品种的材料[14],对于我国北部干旱地区
的退耕和生态重建有重要的价值,在我国,对新麦草的
研究不多,与国外相比仍然有一定的差距。在胁迫条
件下新麦草生存能力的研究中,杜利霞[15]采用不同浓
度的盐水对新麦草种子进行胁迫处理,来分析和判定
新买草的萌发和生理特性,确定了新麦草萌发的最适
合盐浓度,同时也了解到盐对新麦草生理特性的影响;
李倩等[16]对华山新麦草种子进行干旱和盐的胁迫来
研究新麦草种子萌发和幼苗生长,推测出了华山新麦
草濒危的可能原因;武军等从细胞学水平对华山新麦
草的细胞学特点进行研究,结果表明,华山新麦草在多
代的自交过程中,外源染色体丢失的概率逐渐增
大[17];张秀丽利用不同的浓度秋水仙素处理不同阶段
的山丹新麦草幼苗,使染色体数加倍,发现0.1%浓度
的秋水仙素处理24h山丹新麦草的诱变率达到最
高[18]。
  种子是牧草生产的基础,种子质量包括品种质量
和播种质量,品种质量与种子的遗传有关,播种质量与
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第34卷 第8期 2015年8月              种 子 (Seed)            Vol.34 No.8 Aug. 2015
种子的水分、发芽力和净度、健康度、千粒重以及种子
活力等因素[19]。种子活力是检验牧草种子质量的重
要指标,它作为种子生理学研究的一个新领域,是以植
物生理学、生物化学和遗传学为基础,与农业、林业和
园艺等领域的生产实践活动密切相关[20],种子的起始
阶段是萌发,而种子萌发率的高低受种子活力的影响
很大;同时,在进行种植过程中,种子活力的好坏也会
在一定程度上影响植物的生长和发育,对于作物产量
和相关产业的发展也会产生很大的影响。为了了解种
子在不同贮藏条件下,不同的贮藏时间对种子活力的
影响,进行本试验,以期为新麦草种子的生产与合理贮
藏提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为2013年7月收集的蒙农4号新麦草
种子,收集地内蒙古农业大学东校区试验基地,N 40°
48′,E 111°42′,海拔1 090m。
1.2 试验方法
收获后的干燥种子分装在牛皮纸袋中,分别在
20℃恒温贮藏室和自然变温条件下贮藏,及时对在
20℃恒温贮藏室和自然变温贮藏室贮藏种子贮藏0d、
40d、80d、120d、160d、200d分别取样进行种子活力
各项指标测定。通过查询呼和浩特市气象局网站
www.hhhtqx.gov.cn记录并得到试验期间月平均气
温变化,结合试验结果对种子合理贮藏条件进行分析。
图1 试验期间月气温变化
1.2.1 种子发芽势、发芽率测定
按照牧草种子检验标准(GB/T 2930.4—2001)的
方法,采用培养皿发芽法测定新麦草种子发芽势及发
芽率。随机选取新麦草种子50粒,放入垫有双层滤纸
的培养皿中,加入适量的蒸馏水,置于人工气候箱,培
养条件为25℃光照与10℃暗环境各12h交替,逐日
加适量蒸馏水保持湿润并观察记录种子发芽数,重复
4次。计算种子的发芽势与发芽率,统计第3天发芽
种子数为发芽势,统计第7天发芽种子数为发芽率。
1.2.2 胚芽长、胚根长与活力指数测定
采用培养皿发芽法测定新麦草种子发芽势及发芽
率。随机选取新麦草种子50粒,放入垫有双层滤纸的
培养皿中,加入适量的蒸馏水,置于人工气候箱,培养
条件为25℃光照与10℃暗环境各12h交替下进行萌
发培养,逐日加适量蒸馏水保持湿润。培养第7天用
直尺测量萌发种子的胚根与胚芽长度,计算种子活力
指数。
  种子活力指数(VI)=∑Gt/Dt×S(Gt为在时间t
内的发芽数;Dt为相应的发芽日数;S为第7天测得
种子平均胚芽长)
1.2.3 种子电导率测定
采用国产DDS-114型电导率仪。随机取20粒种
子(4次重复)称重。将种子用蒸馏水重复洗3次。置
于盛有20mL重蒸水的烧杯中测定初始电导率,静止
放置5h后再次测定浸泡后的电导率,为终期电导率。
计算相对电导率。计算公式为:相对电导率=终电导
率-初始电导率。
1.3 统计分析方法
  采用SAS 9.1软件和Excel 2007软件进行数据分析。
2 结果与分析
2.1 贮藏对种子活力的影响
2.1.1 发芽势
发芽势是指在发芽过程中日发芽种子数达到最高
峰时,发芽的种子数占供测样品种子数的百分率,一般
以发芽试验规定期限的最初1/3期间内的种子发芽数
占供验种子数的百分比为标准[20]。统计分析发现,自
然变温贮藏80d、120d的种子的发芽势无显著性差异
(p<0.05),恒温条件贮藏80d、120d、160d的种子的
发芽势无显著性差异;2种不同条件下贮藏的种子发
芽势的总体趋势随贮藏天数的增加而逐渐增强,贮藏
160d时的种子发芽势最强,之后减弱;恒温和自然变
温条件下贮藏160d的种子发芽势分别为11.5%和
15%,达到最大,自然变温贮藏种子的发芽势总体要好
于恒温条件贮藏种子的发芽势。
2.1.2 发芽率
发芽率是指种子在适宜条件下能够发芽并长成正
常植株的能力,可以直接反映种子的生活力[21]。如图
2所示,自然变温贮藏40d、80d、120d和160d的种子
的发芽率差异均不显著,与贮藏0d和贮藏200d的种
子相比差异显著;恒温条件40d和120d的新麦草种
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研究报告  白亚利 等:新麦草种子贮藏时间对种子活力的影响
子发芽率无显著差异;恒温条件贮藏种子发芽率和自
然变温条件下贮藏种子发芽率整体趋势随着贮藏天数
增加种子的发芽率逐渐增强,在40d到160d之间,种
子的发芽率整体趋于平稳,波动较小;贮藏160d左右
的种子发芽率达到最大,恒温和自然变温条件分别为
95%和91.5%,随后下降,恒温贮藏种子的发芽率水
平总体高于自然变温贮藏种子。
注:不同大写(小写)字母表示在0.05水平上差异显著。下同。
图2 不同贮藏条件及贮藏时间发芽势(%)的变化
图3 不同贮藏条件及贮藏时间发芽率(%)的变化
2.1.3 不同贮藏条件和贮藏时间对种子胚芽生长的
影响
表1 不同贮藏条件及贮藏时间种子胚芽长(cm)的变化
贮藏时间
0d 40d 80d 120d 160d 200d
恒温条件 0.54D 1.57B 0.7CD  0.8C 2.5A 0.74C
自然变温 0.54d 1.57b 0.76c 0.85c 2.6a 0.84c
  注:同列不同大写字母(小写字母)表示在0.05水平差异性显著。
下同。
  如表1所示,恒温贮藏种子的胚芽长0~40d时
逐渐增长,差异显著,当进入9月份(贮藏40d)以后胚
芽生长减缓;贮藏80d后,胚芽生长重新加快,到120
d(2010年3月份)时种子胚芽达到最长,即胚芽长2.5
cm,其后开始下降,且下降幅度较大。除80d、120d、
200d外,其他贮藏时间种子胚芽长均显著;自然变温
条件贮藏种子胚芽生长变化与恒温条件相似,自然变
温种子胚芽生长情况略好于恒温条件贮藏种子。
2.1.4 不同贮藏条件和贮藏时间对种子胚根生长的
影响
  从表2可以看出,恒温和自然变温贮藏0d至贮
藏160d种子的胚根长逐渐增长,在贮藏40d时最长,
均为1.53cm,之后生长减缓,贮藏200d时胚根长分
别为0.65cm和0.68cm,降幅明显;而自然变温贮藏
种子胚根长生长要好于恒温条件的种子。恒温贮藏种
子除0d、80d、120d之间差异不显著外,其他贮藏天
数之间均存在显著性差异;自然变温贮藏种子80d与
120d无显著差异,其它贮藏天数之间差异显著。
表2 不同贮藏条件及贮藏时间种子胚根长(cm)的变化
贮藏时间
0d 40d 80d 120d 160d 200d
恒温条件 1.17C 1.53A 1.25C 1.26C 1.38B 0.65D
自然变温 1.17cd 1.53a 1.32b 1.35b 1.2c 0.68d
2.1.5 不同贮藏条件及贮藏时间对种子活力指数的
变化
  种子活力是决定种子或种子批在发芽和出苗期间
的活性水平和行为的种子特性的综合表现[13]。统计结
果表明,自然变温贮藏种子活力好于恒温贮藏种子活
力,恒温和自然变温条件种子贮藏160d时种子活力最
大,分别为79.7和80.51;贮藏200d时,恒温和自然变
温条件贮藏种子活力降幅明显,分别下降了58.52%和
54.09%,恒温条件下贮藏种子活力降幅更大。
表3 不同贮藏条件及贮藏时间种子活力指数(VI)变化
贮藏时间
0d 40d 80d 120d 160d 200d
恒温条件 8.14F 31.5C 19.04E19.86D 79.7A 33.06B
自然变温 8.14e 31.5c 21.45d 23.18  80.51a36.96b
2.2 不同贮藏条件和贮藏时间对种子浸出物的影响
对不同贮存时间新麦草种子浸出物电导率的测定
结果表明,随着贮存时间的增加,恒温和自然变温条件
下贮藏种子电导率均呈上升趋势,贮藏200d时2种
条件的贮藏种子初始电导率和终期电导率均最大,分
别达到56.27μS/cm、62.05μS/cm和58.47μS/cm、
62.78μS/cm,而贮藏0d、40d、80d和120d种子相对
电导率无显著差异,与贮藏160d和200d的种子相对
电导率有显著差异;自然变温贮藏0d、40d、80d、120
d种子相对电导率无差异,与贮藏160d种子的相对电
导率存在显著差异。
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表4 贮藏种子浸出物电导率的变化(μS/cm)
贮藏时间
0d 40d 80d 120d 160d 200d
初始电导率 41.20D 45.20C 45.57C 48.08C 53.38B 56.27A
恒温条件 终期电导率 42.87C 47.81B 48.24B 49.62B 60.43A 62.05A
相对电导率 1.67B 2.61B 2.67B 1.54B 7.05A 5.78A
初始电导率 41.20a 45.20b 46.58c 48.11cd  53.37d 58.47e
自然变温 终期电导率 42.87c 47.81b 49.24b 50.61b 60.40a 62.78a
相对电导率 1.67b 2.61b 2.66b 2.5b 7.01a 4.31ab
3 结 论
新麦草贮藏40~160d的种子发芽率维持较高水
平,恒温和自然变温条件下均达到了88%以上,贮藏
80~160d的种子发芽势高,贮藏160d发芽势最高,
自然变温条件和常温条件分别达到11.5%和15%,之
后随着贮藏时间延长种子开始出现老化,发芽率、发芽
势降低;自然变温条件贮藏的种子除发芽率外,发芽
势、种子活力指数等都高于常温条件下贮藏种子;贮藏
160d种子活力指数显著高于其它贮藏时间,并且自然
变温贮藏条件优于常温贮藏条件;自然变温贮藏种子
更有利于种子活力的保持;其后各指标随贮藏时间的
延长下降。因此,新麦草种子在自然变温条件下的最
佳利用时间是贮藏160d左右。
4 讨 论
对不同贮藏时间与贮藏条件下种子进行观察分
析,发现贮藏0~160d的新麦草种子发芽势逐渐上
升,贮藏0~40d发芽率上升,40~160d变化趋于平
稳,贮藏160~200d都下降。在贮藏时间为80~120
d时,种子发芽率与发芽势呈下降趋势;贮藏160d时
种子的发芽率和发芽势达到最大,其发芽势和发芽率
均随着时间的变化呈先增高后降低的变化趋势,其发
芽率和发芽势最高达88%和94%,这与程钰宏等[22]
研究在自然条件下贮藏的新麦草种子生活力变化规律
相似,在自然条件下的最适储藏时间为6~9个月。可
见新麦草种子要经过一个低温的过程,去除休眠,种子
才能完全萌发。种子经过低温春化,种子发芽率达最
高。随着时间的延长种子开始发生老化,其发芽率、发
芽势出现下降趋势。
  电导率是常被用来判定种子活力的一个重要指
标。种子浸入到蒸馏水中出现液体电导率变化的现
象,是由于细胞膜存在通透性,细胞膜是否完整是种子
活力高低的重要指标。Robert E H[23]研究贮藏对种
子活力的影响时发现,随着种子贮藏时间的增加,种子
内部会发生一系列生理生化反应,导致种子内部发生
劣变,膜系统遭到种子内阴离子自由基的攻击,导致膜
脂氧化、酸败,破坏了胞膜系统的结构和功能,可溶性
离子外渗性增强,种子内液浸出细胞膜,细胞膜通过调
节种子细胞内部溶质的进出来保证细胞内外渗透压的
动态平衡,进而保证了种子正常的生理活性[24]。测定
浸入种子溶液的电导率,在一定程度上反映了种子细
胞膜的完整性,种子活力高,电导率低,种子细胞膜完
整[25]。本试验结果表明,随贮藏时间的增加,不论变
温和恒温贮藏种子电导率都随贮藏时间延长而逐渐增
大,表明种子细胞膜随贮藏时间的增加逐渐损坏和老
化。但是电导率测定种子活力差异性很大,可能原因
是电导率不能反映种子确切的活力水平,这与石海
春[26]在研究玉米种子活力的优化条件得到的结论类
似。马正华[27]以大花野豌豆种子为研究材料,筛选出
硬实种子和非硬实种子,研究2种种子活力及生理指
标,表明随着种子吸胀吸水时间的延长,大花野豌豆种
子的电导率逐渐降低,10d以内,种子的电导率下降幅
度较大,超过10d下降幅度变缓,非硬实种子先吸水
的种子活力要低于后吸水的种子活力,电导率后吸水
低于先吸水;硬实种子的种子活力高于非硬实种子。
  当然,种子发生老化也是导致电导率发生变化的
原因。种子老化后膜系统受到破坏,引起种子内部各
种离子迅速外渗,导致电导率升高。因而,随着种子的
老化,电导率值随之增加,即电导率与种子的活力呈负
相关。在本试验中,随着时间的增加,种子相对电导率
在贮藏前120d时,电导率变化不大,在贮藏120~160
d时外渗电导的变化较大;在贮藏160d时种子活力指
数达到最大时,电导率也随之上升,可能是由于初期种
子的贮藏时间短,未完全破除休眠,贮藏160d时春天
气温回升,种子的呼吸作用加强,代谢加快导致细胞内
容物浓度增加,电导率也相应增大。试验后期贮藏
200d后种子呼吸作用持续加强,细胞膜脂氧化导致膜
结构破坏从而增加细胞内容物外渗,因此,此时测定电
导率仍维持在较高水平。本试验所研究的是将刚成熟
的新麦草种子分别置于自然变温和常温下进行短期贮
藏处理并进行种子活力的比较,因此在不同的试验材
料和试验设计中电导率这一指标可能反映的是特定阶
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研究报告  白亚利 等:新麦草种子贮藏时间对种子活力的影响
段种子的状态,而不能作为反映种子老化的绝对指标。
  李有春等通过研究遗传对小麦种子活力的影响,
认为小麦种子的发芽率、发芽势、千粒重等与种子活力
有关的指标存在显著差异[28],刘毓侠则认为种子活力
的相关指标在内因(基因型)上存在显著性差异[29]。
除遗传外,种子的发育、收获和贮藏时间等环境因素也
对种子活力产生影响。本试验仅对新麦草种子在不同
贮藏环境中发芽率、发芽势、电导率以及胚芽胚根长度
的变化进行研究,以此来分析新麦草种子收获初期活
力变化规律以及不同贮藏条件对新麦草种子活力的影
响,而长期贮藏对新麦草种子活力的影响还有待进一
步研究。
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第34卷 第8期 2015年8月              种 子 (Seed)            Vol.34 No.8 Aug. 2015