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甘西鼠尾草的抗缺氧研究



全 文 :○药  苑 ○
甘西鼠尾草的抗缺氧研究

王利彦  王津慧  吕慧玲 范雪汝 陈湘宏
青海大学医学院药理教研室 (青海 西宁 810001)
  摘要:目的:研究甘西鼠尾草的抗缺氧作用 , 探讨其作用机制。方法:选用异丙肾上腺素 、 亚硝酸钠 、 结扎小鼠
两侧颈总动脉 、 常压缺氧 , 制备急性缺氧动物模型进行实验研究 , 测定常压缺氧后脑组织 SOD和 LDH 活性 、 MDA 和
LD含量。结果:甘西鼠尾草能够延长缺氧动物存活时间 , 与对照组的比较差别有显著性 , P<0.01;并能提高常压缺
氧后脑组织 SOD和 LDH 活性 、 降低MDA 和 LD含量。结论:甘西鼠尾草具有明显的抗缺氧作用 , 这与其提高缺氧脑
组织的 SOD和 LDH 活性 , 防止膜脂质过氧化 、 减轻缺氧时脑中乳酸堆积有关。
  关键词:甘西鼠尾草 抗缺氧 药理学
  中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1000-3649 (2008)04-0043-02
  Effects of Salvia Przewalskii on Hypoxia/ Wang Liyan Wang Jinhui Lv Huiling Fan Xueru Chen Xianghong ∥(Department of
Pharmacology , Medical College of Qinghai University , Xining 810001)
  Abstract Objective:To study the effects of Salvia Przewalskii on hypoxia , and to explore its anti-hypoxia mechanisms.Methods:
Model of acute hypoxia was established with the use of isoprenaline , sodium nitrite , ligation of bilateral carotid artery.SOD and LDH
activity andMDA and LD content in cerebral tissue were measured.Results:Salvia Przewalskii prolonged the survival time of model
rats , increased activity of SOD and LDH in brain tissue , and decreased MDA and LD content after hypoxia under normal pressure.Con-
clusion:Salvia Przewalskii has a remarkable antihypoxic function.The mechanism may be related to increasing SOD and LDH activity ,
inhibiting membrane lipid peroxidation in cardiac muscle tissue , and decreasing lactic acid accumulation.
  Keywords:Salvia Przewalskii;anti-hypoxia;pharmacology
  甘西鼠尾草 (Salvia Przewalskii Maxim)为唇形科
植物 (藏文译音:吉子恩保)。 藏医经典 《晶珠本
草》 记载该药有 “清肝热 、 治口腔病” 的作用[ 1] ,
主要产于青海 、 西藏 、 四川、 甘肃西部等地。甘西
鼠尾草是青藏高原丹参的代用品 , 含有丹参酮、 丹
参素、 丹参酚等多种活性成分[ 2] , 是目前用于治疗
心血管疾病、 高原病的中藏药材 , 本文选用急性缺
氧动物模型 , 观察甘西鼠尾草的抗缺氧作用及作用
机制 , 现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 昆明种小鼠 , 雌雄各半 , 体重 (18~
24)g (青海省实验动物中心提供)。
1.1.2 药品与试剂 甘西鼠尾草 (采用青海省黄南
州同仁县境内 , 海拔 2800米)提取液 , 用 90%乙醇
回流 3次提取其活性物 , 过滤 , 滤液减压下浓缩到
糖浆状 , 然后将其放到 80℃水浴中浓缩成浸膏剂 ,
临用前用蒸馏水稀释到所需浓度;红景天 (青海三
普药业股份有限公司);异丙肾上腺素 (上海天丰药
厂);亚硝酸钠 (上海试剂一厂);钠石灰 (上海五
四化学试剂厂);超氧化物歧化酶 (SOD)试剂盒 、
丙二醛 (MDA)试剂盒 、 乳酸脱氢酶 (LDH)、 乳酸
(LD)试剂盒 (南京建成生物工程研究所)。
1.2 方法[ 3 , 4]
1.2.1 异丙肾上腺素耗氧量影响的实验 取小鼠 40
只 , 随机均分成 4组:NS组 、 红景天组 、 甘西鼠尾
草高 、 低剂量组。剂量见表 1 , NS 组给同体积 NS ,
po 给药 7天。末次给药后 1小时 , 各组均 ip 异丙肾
上腺素 10mg/ kg , 15min 后 , 放入 250ml广口瓶内密
闭 (瓶内放钠石灰 5g , 每瓶放入 1只小鼠), 记录小
鼠存活时间 , 以呼吸停止为指标。
1.2.2 亚硝酸钠中毒小鼠缺氧影响的实验 取小鼠
40只 , 随机均分成 4组 , 给药剂量和方法同前 , po
给药 7 天 , 末次给药后 1 小时 , ip 2%亚硝酸钠
0.1mg/ 10g , 记录小鼠存活时间。
1.2.3 结扎颈总动脉致小鼠缺氧影响的实验 取小
鼠40只 , 随机均分成 4组 , 给药剂量和方法同前 ,
po 给药 7天。末次给药后 1小时 , 乙醚浅麻醉 , 手
术结扎两侧颈总动脉 , 术中保持无血 , 观察小鼠存
活时间。
·43·2009年第 27卷第 4期Vol.27 ,No.4 ,2009 四 川 中 医Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine
基金项目:2007年度教育部重点项目 (编号:207123)
1.2.4 小鼠常压缺氧影响的实验 取小鼠 40只 , 随
机均分成 4组 , 给药剂量和方法同前 , po 给药 7天。
末次给药后1小时 , 放入 250ml广口瓶内密闭 , 观察
小鼠存活时间。
  常压缺氧试验后立即断头取脑 , 置于-40℃低
温冰箱中保存备用。取脑组织约 0.1g 置于匀浆器中 ,
加入 0.9%冷 Nacl液制成 10% (g/ml)的脑匀浆 ,
3000rpm离心 , 取上清液检测 SOD 和 LDH 活性、
MDA和 LD含量 , 其测定方法按试剂盒说明进行。
3 结 果
  异丙肾上腺素耗氧量影响的实验结果见表 1;亚
硝酸钠中毒小鼠缺氧影响的实验结果见表 1;结扎颈
总动脉致小鼠缺氧影响的实验结果见表 2;小鼠常压
缺氧实验结果见表 2;小鼠常压缺氧后脑组织 LDH、
SOD活性和 LD、 MDA含量测定结果见表 3。
表 1 异丙肾上腺素耗氧量影响和
亚硝酸钠中毒小鼠存活时间 ( x±s)
组别 剂量
g/kg 异丙肾上腺素/min 亚硝酸钠/min
NS - 10.2±3.0 16.2±3.1
红景天 2 18.3±4.8** 26.1±5.4**
甘西鼠尾草低 1 15.1±2.7** 23.4±4.3**
甘西鼠尾草高 2 18.1±5.2** 25.4±5.0**
  注:与 NS组比较:*P<0.05 **P<0.01
表 2 结扎颈总动脉和常压
缺氧小鼠存活时间 ( x±s)
组别 剂量
g/kg 结扎颈总动脉/min 常压缺氧/min
NS - 2.5±1.2 18.2±1.7
红景天 2 5.0±2.0** 24.3±2.1**
甘西鼠尾草低 1 3.8±1.4** 21.5±2.3**
甘西鼠尾草高 2 4.6±1.8* 22.6±2.7**
  注:与 NS组比较:*P<0.05 **P<0.01
表 3 常压缺氧后脑组织 LDH、 SOD活性和
LD、 MDA含量 ( x±s)
组别 剂量
g/ kg SOD/ nu/ml LD/mmol/ L MDA/nmol/ml
NS 386±52 279.2±30.6 1.37±0.34 22.15±2.60
红景天 475±55* 339.2±23.4* 0.90±0.17** 18.26±1.43**
甘西鼠尾草低 398±60 314.1±25.5** 1.02±0.20* 19.51±2.70*
甘西鼠尾草高 469±73* 331.4±29.8** 0.94±0.16** 18.75±2.31**
  注:与 NS组比较:*P<0.05 **P<0.01
4 讨 论
目前认为 , 利用异丙肾上腺素 、 亚硝酸钠以及
结扎两侧颈总动脉、 常压缺氧等方法 , 制备急性缺
氧的动物模型是研究耐缺氧药物的有效方法。本实
验结果表明 , 甘西鼠尾草对多种缺氧模型均显示了
良好的作用。
甘西鼠尾草减少由异丙肾上腺素引起小鼠缺氧
程度 , 这可能与其具有抗异丙肾上腺素加快心率和
降低肾上腺素功能的效应有关。减少由亚硝酸钠引
起的小鼠组织细胞缺氧程度 , 增加组织耐受缺氧能
力 , 而且对脑缺血性缺氧或在耗氧量增加的动物 ,
亦能延长其存活时间 , 表明甘西鼠尾草对心脏和脑
等重要器官缺氧也有明显的保护作用。在常压条件
下 , 甘西鼠尾草能明显延长小鼠的存活时间 , 使动
物整体耗氧量降低。
MDA是脂质过氧化反应的主要产物 , SOD是机
体内最重要的抗氧化酶之一 , 检测这一对指标 , 可
敏感地反映机体内抗氧化酶系统的平衡。在低氧环
境下 , 机体内发生一系列氧自由基代谢改变 , 表现
为抗氧化能力下降和脂质过氧化反应增强。本结果
显示 , 甘西鼠尾草能提高缺氧小鼠脑组织 SOD活性
和降低 MDA含量 , 提示甘西鼠尾草在缺氧条件下的
脑保护作用 , 可能与其抗氧化作用有关。
LDH在无氧代谢中起着重要的作用 , 我们选用
LDH和 LD这一对指标 , 观察甘西鼠尾草对缺氧小鼠
脑组织的能量代谢的影响。本实验的结果显示甘西
鼠尾草能提高缺氧小鼠脑组织 LDH 活性 , 降低 LD
含量 , 推测甘西鼠尾草可能通过提高 LDH 活性 , 提
高脑组织 LD代谢能力 , 促进细胞无氧酵解过程 , 维
持缺氧状态下能量供应的作用 , 延长小鼠缺氧存活
时间。
甘西鼠尾草抗缺氧及改善缺氧状态的作用 , 为
预防和缓解高原缺氧所造成的疾病提供了初步的理
论基础。
参考文献
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海人民出版社 , 1991:92~ 93
   [ 2] 史彦斌 , 薛明 , 崔颖, 等.甘西鼠尾草的生药学研究
[ J] .时珍国医国药 , 2002 , 7:43
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抗缺氧作用研究[ J] .中国药房 , 2006 , 6:654~ 656
(收稿日期 2008-12-27)
·44· 四 川 中 医Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine 2009 年第 27卷第 4 期Vol.27 , No.4 , 2009