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紫背鼠尾草总提物抗炎镇痛作用的研究



全 文 :第 28卷 第 4期
2 0 1 0年 4月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 28 No. 4
Ap r. 2 0 1 0
中华中医药
808
学刊
紫背鼠尾草总提物抗炎镇痛作用的研究
徐 鹏,许利平,刘长利
(首都医科大学中医药学院, 北京 100069)
摘 要:目的:研究唇形科鼠尾草属植物紫背鼠尾草的抗炎镇痛等药理活性。方法: 通过二甲苯致小鼠耳肿
胀、鸡蛋清致大鼠足趾肿胀、醋酸致小鼠扭体和热刺激小鼠等 4种药理模型对紫背鼠尾草乙醇总提取物进行抗炎
镇痛的研究。结果:在抗炎药理模型中,实验结果显示紫背鼠尾草乙醇总提取物在 200m g /kg时具有显著的抗炎
作用;在镇痛药理模型中,实验结果表明, 紫背鼠尾草乙醇总提取物在剂量 200 ~ 400m g /kg时具有较明显的镇痛
作用,在 100m g /kg时作用不太明显, 显示出镇痛作用随剂量的增加而增强。结论: 紫背鼠尾草乙醇总提取物抗炎
镇痛作用显著, 说明了紫背鼠尾草具有抗炎镇痛的功效,为该植物进一步的开发利用提供药效学资料。
关键词:紫背鼠尾草;鼠尾草属; 抗炎镇痛
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2010) 04 -0808 - 03
A S tudy on the Anti- in flammation and Analges ic
E ffects ofSalv ia Cavalerie i Lev.l var. E rythrophylla (Hems.l ) St ib
XU Peng, XU L i-ping, LIU Chang-li
( C ap italM ed icalUn iversity, B eijing 100069, Ch ina)
Abstrac t: Ob jective: To study the the anti - in flamma tion and analgesic e ffects o f Salvia cavalerie i Lev.l var. ery th ro-
phy lla ( H em s.l ) S tib. Me thods: Th rough fou r pharm aco log ica lmodels: xy lene - induced ear swe lling in m ice, eggw hite
- induced toe sw e lling in rats, acetic ac id - induced w rithing in m ice and therm a l stim ulation in m ice, the study on the
anti - inflamm ation and analgesic e ffec ts of Sa lv ia cavaleriei Lev.l var. ery throphy lla ( Hem s.l ) Stib we re carried on.
R esu lts: In the anti - inflamm atory pharm aco log ica lmode,l the experimenta l results showed tha twhen the tota l e thano l ex-
trac tw as 200 m g /kg, it had a significan t anti - inflamm a to ry effec;t In ana lgesic pha rm aco log icalm ode ,l the exper im en-
ta l results show ed tha tw hen the to ta l e thano l ex trac tw as 200 - 400 mg /kg, it had a significant ana lge sic effec,t show ing
that the analgesic e ffec t increased w ith the dose of the to ta l e thano l extrac.t Conclus ion: Sa lvia cava leriei L ev .l va r. e ry th-
rophy lla ( H em s.l ) S tib has significan tly anti - inflamm ation and analgesic efficacy.
Keyw ords: Salvia cavalerie i Lev .l var. e ry throphy lla ( H em s.l ) S tib; Salvia; an ti - inflamm a to ry and ana lge sic
e ffects
收稿日期: 2009 - 11 - 21
基金项目:北京市属市管高等学校人才强教计划资助项目 ( BAHED2006)
作者简介:徐鹏 ( 1985 - ),男,湖北黄冈人,硕士研究生,研究方向:
中药资源学。
通讯作者:许利平 ( 1962 - ) ,女, 四川人, 副教授, 博士,研究方向:
中药功效的药理及应用研究。 Te:l 010-83911639, E-
m ai:l xlp1962@ yahoo. com. cn。
鼠尾草属植物隶属于唇形科 ( Labia tae ), 全世界约有
1000多种 ,占全科植物总数的 20% , 主要分布于热带和温
带 [1 ]。根据它们的形态特征, 分为 Sc la rea、Salvia、Leonia、
Ca losphace 4个亚属。美洲分布的大多为 Ca lo sphace亚属,
而欧洲和亚洲分布的几乎均为 Sc larea和 Sa lv ia亚属 [2 ]。
我国鼠尾草植物品种, 据5中国药物志6记载有 83种, 25变
种, 9变型,其中药用 30余种 (含变种, 变型 ), 其中代表药
物为丹参,其他大多数鼠尾草植物以根入药作丹参用 [3 ],
作为民间草药一直在世界范围内广为栽培和研究, 其具有
多方面的生物活性, 如抗炎镇痛、抗氧化、抗辐射、抗菌、抗
病毒、抗肿瘤、护肝等 [5 ]。
紫背鼠尾草 ( Sa lv ia cavalerie i Lev.l v ar. e ry throphy lla
( Hem s.l ) Stib. )又名紫参、毛丹参,系唇形科 ( Labia tae )鼠
尾草属 ( Salvia)植物的干燥全草, 是湖北特有的鼠尾草品
种,在当地多以根入药作为丹参的代用品种 [4], 本课题通
过二甲苯致小鼠耳肿胀、鸡蛋清致大鼠足趾肿胀、醋酸致小
鼠扭体和热刺激小鼠等 4种药理模型对紫背鼠尾草乙醇总
提取物进行了抗炎镇痛的初步研究。
1 紫背鼠尾草总提物的抗炎作用研究
1. 1 材料
1. 1. 1 实验动物 昆明种小鼠, 雄性, 由首都医科大学实
验动物科学部提供,合格证号为医动字第 012 -3083号; SD
大鼠,由首都医科大学实验动物科学部提供 , 合格证号为
SCXK(京 ) 72000 -0012。
1. 1. 2 药材提取 取紫背鼠尾草 5kg, 粉碎, 用 70% 乙醇
渗漉,减压回收乙醇, 得浓缩液, 将浓缩液蒸发浓缩得膏状
物。
1. 1. 3 药品与试剂 紫背鼠尾草总提物 (提取方法见 1.
1. 2);阿司匹林 (武汉远城有限公司 ); 二甲苯 (分析纯 ), 上
海试剂一厂; 10%鸡蛋清 (自制 )。
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DOI:10.13193/j.archtcm.2010.04.138.xup.049
第 28卷 第 4期
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1. 1. 4 仪器 电子天平 ( BS110S型, 北京塞多利斯天平
有限公司 ); 打孔器;游标卡尺。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 二甲苯致小鼠耳肿胀的实验方法 取体重为 ( 25 ?
2) g的雄性小鼠 50只, 随机分成 5组, 每组 10只。第 1组
为阴性对照组,每只动物灌生理盐水 015mL; 第 2组为阳性
对照组,每只动物按 20m g /kg的剂量灌阿司匹林溶液; 第
3、4、5组按 100m g /kg、200mg /kg、400 m g /kg的低、中、高剂
量灌胃紫背鼠尾草的总提物。各组给药后 40m in, 将二甲
苯涂在小鼠右耳前后两面, 约 01 02mL, 左耳作对照。致炎
2h后, 将小鼠断颈处死,沿耳廓线剪下两耳, 用打孔器分别
在同一位置剪下圆耳片,用万分之一天平称重。每鼠的右
耳片重量减去左耳片重量即为肿胀度。计算各组小鼠肿胀
度的平均值和标准差, 按公式: 肿胀率 (% ) =肿胀度 /左耳
重 @ 100% 计算肿胀率 (% ), 并经方差分析作 q检验比较
给药组和对照组的差异情况。
1. 2. 2 鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的实验方法 取体重为
150~ 170g的雄性大鼠 50只, 随机分成 5组, 每组 10只。
用记号笔在每只大鼠左后足趾同一部位划一清晰标记线,
并用游标卡尺测定该标记处的正常足趾厚度。第 1组为阴
性对照组,每只大鼠灌生理盐水 5m L; 第 2组为阳性对照
组,每只动物按 20m g /kg的剂量灌阿司匹林溶液;第 3、4、5
组分别按 100mg /kg、200mg /kg、400m g /kg的低、中、高剂量
灌胃紫背鼠尾草总提物。各组给药后 1h, 用注射器先自左
足趾标记处皮下注射新鲜的 10%鸡蛋清约 0. 1mL。致敏
后 1、2、3h分别测定每鼠标记处的厚度, 致敏前后的厚度差
即为肿胀度。计算各组小鼠肿胀度的平均值和标准差,按
公式:肿胀率 ( % ) =肿胀度 /致敏前的厚度 @ 100% 计算肿
胀率 (% ) ,并经方差分析作 q检验比较给药组和对照组的
差异情况。
1. 3 实验结果
1. 3. 1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 致炎 2h后, 各组
小鼠右耳均可见红肿。分别测定各组小鼠左耳和右耳的重
量,并计算各组小鼠肿胀度和抑制率 (% )。对各小鼠的肿
胀度进行方差分析,以判断各给药组间的差异。紫背鼠尾
草乙醇总提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的作用结果见表 1。
表 1 紫背鼠尾草总提物对二甲苯致
小鼠耳肿胀的作用结果 ( €x ? s )
组别 n 剂量
( mg /kg )
左耳重
( mg )
右耳重
( mg )
肿胀度
( mg )
肿胀率
(% )
阴性对照组 10 - 17. 2 ? 3. 3 6. 6 ? 1. 1 10. 5 ? 2. 7 61. 92
阿司匹林组 10 20 16. 3 ? 5. 7 9. 5 ? 1. 4 6. 8 ? 5. 0* 40. 74*
低剂量组 10 100 16. 3 ? 4. 6 7. 6 ? 1. 3 8. 8 ? 4. 5 53. 36
中剂量组 10 200 16. 1 ? 5. 3 8. 2 ? 0. 8 8. 0 ? 5. 4* 46. 50*
高剂量组 10 400 15. 3 ? 3. 8 6. 5 ? 0. 9 8. 8 ? 3. 2 56. 65
注: 与阴性对照组比较, * P < 0. 05。
由表 1可见: 与阴性对照组比较, 阿司匹林组、中剂量
组有显著性意义 ( P < 0. 05),中剂量组的耳肿胀率较阿司
匹林组稍低,但两者没有显著性差异 ( P > 0. 05 )。高、低
剂量组有一定的抑制作用。由此可见:紫背鼠尾草乙醇总
提物的中剂量组 ( 200m g /kg )对二甲苯致小鼠耳肿胀有显
著抑制作用。
1. 3. 2 对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的影响 致敏后,各组大
鼠左足趾均可见红肿。分别测定各组大鼠左足趾致敏前后
的厚度,并计算各组大鼠肿胀度和肿胀率 (% )。对各大鼠
的肿胀率进行方差分析,以判断各给药组间的差异。紫背鼠
尾草总提物对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的作用结果见表 2。
由表 2可知,与阴性对照组比较,中剂量组 ( 200mg /kg)
在 1h、2h、3h、均有显著性差异 ( P < 0. 05), 中剂量组在 1h、
2h、3h有显著的抗炎作用; 高低剂量组有一定的抗炎作用。
由此可见:紫背鼠尾草总提物的中剂量组 ( 200mg /kg)对鸡
蛋清致大鼠足趾肿胀有抑制作用,且与阿司匹林组的抗炎作
用相当,见图 1。
表 2 紫背鼠尾草总提物对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的作用结果 ( €x ? s )
组别 n 剂量
( mg /kg)
1h
肿胀度
( cm )
肿胀率
(% )
2h
肿胀度
( cm )
肿胀率
(% )
3h
肿胀度
( cm )
肿胀率
(% )
阴性对照组 10 - 0. 550 ? 0. 091 56. 92 0. 506 ? 0. 085 52. 13 0. 476 ? 0. 063 50. 56
阿司匹林组 10 20 0. 300 ? 0. 205* 45. 63 0. 218 ? 0. 125* 32. 57 0. 179 ? 0. 007* 25. 67
低剂量组 10 100 0. 321 ? 0. 015 49. 15 0. 292 ? 0. 028 45. 54 0. 258 ? 0. 058 43. 37
中剂量组 10 200 0. 319 ? 0. 506* 45. 78 0. 251 ? 0. 045* 33. 52 0. 213 ? 0. 062* 27. 64
高剂量组 10 400 0. 386 ? 0. 053 49. 62 0. 350 ? 0. 018 43. 58 0. 296 ? 0. 121 37. 49
注:与阴性对照组比较, * P < 0. 05。
图 1 总提物对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的作用结果
2 紫背鼠尾草总提物的镇痛作用研究
筛选镇痛药的常用致痛模型有醋酸扭体法、热辐射甩
尾法和热板法,该方法适用于中枢和外周镇痛药研究, 实验
中药物作用强度和临床镇痛效果具有明显的相关性, 可作
为药物粗筛的方法。本实验选择醋酸小鼠扭体法、热板法
为镇痛模型,以考察紫背鼠尾草总提物的镇痛作用。
2. 1 材料
2. 1. 1 实验动物 昆明种小鼠, 雌性, 由首都医科大学实
验动物科学部提供,合格证号为医动字第 012 -3083号。
2. 1. 2 药品与试剂 紫背鼠尾草总提物 (提取方法见
1. 1. 2);冰醋酸 (分析纯, 上海试剂一厂 ) ;阿司匹林 (武汉
远城有限公司 )。
2. 1. 3 仪器 电热恒温水浴箱 ( HW IA型, 北京医疗设备
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厂制造 )。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 醋酸致小鼠扭体的实验方法 取体重为 ( 20 ? 2) g
雌性小鼠 50只, 随机分成 5组, 每组 10只。第 1组为阴性
对照组,每只灌胃生理盐水 0. 5m L; 第 2组为阳性对照组,
每只动物按 20mg /kg的剂量灌阿司匹林溶液 ;第 3、4、5组
分别按 100m g /kg、200mg /kg、400mg /kg低、中、高剂量灌胃
总提物。各组小鼠在给药后 1h, 每只小鼠腹腔注射 0. 6%
的醋酸溶液 0. 2mL。观察并记录注射醋酸后小鼠扭体的潜
伏期及 15m in内的扭体次数, 计算各组潜伏期、扭体次数的
平均值和标准差, 按下式计算抑制率 (% ), 并经方差分析
作 q检验比较给药组与对照组的差异情况。
抑制率 (% ) = (生理盐水组扭体次数 -试药组扭体次
数 ) /生理盐水组扭体次数 @ 100%
2. 2. 2 热刺激小鼠痛阈值的实验方法 小鼠痛阈值的测
定:实验前将小鼠放在 ( 55 ? 1) e 的热板上测正常痛阈值,
以小鼠舔后足、踢腿、跳跃为痛阈出现的指标。凡痛阈超过
30s(痛觉不敏感 )或小于 3s(痛觉过于敏感 )的小鼠淘汰。
取痛阈值在 3~ 30s的小鼠 50只, 随机分成 5组,每组
10只。第 1组为阴性对照组, 每只灌胃生理盐水 0. 5m L;
第 2组为阳性对照组, 每只动物按 20m g /kg的剂量灌阿司
匹林溶液;第 3、4、5组分别按 100m g /kg、200m g /kg、400m g /
kg低、中、高剂量灌胃总提物混悬液 0. 5mL。分别在各组
给药后 0. 5、1、1. 5h测定各组小鼠的痛阈值。如果小鼠在
热板上停留的时间超过 60s仍无痛反应, 则即刻取出, 按
60s计算。用测得的数值与同一时间间隔的阴性组痛阈值
进行比较,并经方差分析作作 q检验比较给药组与对照组
的差异情况。按下式公式为计算各组动物给药后在不同时
间间隔的抑制率 (% )。
抑制率 (% ) = (用药后的平均痛阈值 -用药前的平均
痛阈值 ) /用药前的平均痛阈值 @ 100%
2. 3 实验结果
2. 3. 1 对醋酸致小鼠扭体的影响 小鼠扭体反应的表现
为腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起等行为反应。腹腔
注射醋酸,部分小鼠出现扭体反应。计算各组小鼠扭体反
应的潜伏期、15m in内的扭体次数并计算抑制率 (% )。对
各组扭体反应的潜伏期、扭体次数进行方差分析,以判断各
组差异。紫背鼠尾草总提物对醋酸致小鼠扭体的作用结果
见表 3。
表 3 紫背鼠尾草总提物对醋酸致小鼠
扭体的作用 ( €x ? s )
组别 n 剂量
( mg /kg)
潜伏期
( s)
扭体反应
(次 /15m in)
抑制百分
率 (% )
阴性对照组 10 - 4. 37 ? 0. 12 28. 0 ? 2. 02
阿司匹林组 10 20 9. 76 ? 0. 33 8. 5 ? 1. 73* 69. 64
低剂量组 10 100 4. 66 ? 0. 39 21. 3 ? 1. 70 24. 11
中剂量组 10 200 7. 26 ? 0. 42 12. 1 ? 1. 54* 56. 69
高剂量组 10 400 10. 10 ? 0. 33 8. 8 ? 1. 20* 68. 75
注:与阴性对照组比较, * P < 0. 05。
由表 3可以看出,与阴性对照组比较, 阿司匹林组、总
提物高剂量组的潜伏期明显延长, 两组均能明显抑制小鼠
因腹腔注射醋酸刺激引起的扭体次数, 扭体抑制百分率分
别为 69. 64% , 68. 75% ; 另外总提物中剂量组的抑制百分
率也有 56. 69% ,稍弱于阿司匹林阳性对照组和总提物高
剂量组。由此可见:紫背鼠尾草总提物在中、高剂量 ( 200~
400m g /kg)时有较显著的镇痛作用, 且随剂量增加而增强。
2. 3. 2 对热刺激小鼠痛阈值的影响 (热板法 ) 分别测定
各组小鼠个给药后 0. 5h、1h、1. 5h测定的痛阈值,以测得值
与同一时间间隔阴性对照组痛阈值进行比较, 并进行方差
分析比较各组之间的差异。紫背鼠尾草总提物对热刺激小
鼠的作用结果见表 4。
表 4 紫背鼠尾草总提物对小鼠的
镇痛作用 (热板法, €x ? s )
组别 n
剂量
( mg /kg)
给药前痛
阈值 ( s)
给药后痛阈值 ( s)
0. 5h 1h 1. 5h
阴性对照组 10 - 21. 47 ? 0. 96 22. 04 ? 1. 12 22. 05 ? 1. 07 21. 41? 0. 94
阿司匹林组 10 20 22. 58 ? 1. 19 25. 52 ? 0. 78* 25. 67 ? 0. 67* 25. 34? 0. 73*
低 10 100 21. 19 ? 0. 81 21. 26 ? 0. 71 21. 50 ? 0. 68 21. 31? 0. 66
总提物 中 10 200 21. 08 ? 0. 98 24. 51 ? 0. 59* 24. 08 ? 0. 43* 23. 39? 0. 51*
高 10 400 21. 37 ? 1. 18 25. 43 ? 0. 69* 24. 55 ? 0. 36* 24. 05? 0. 54*
注: 与阴性对照组比较 , * P < 0. 05。
由表 4可知, 与阴性对照组比较, 中、高剂量组在
01 5h、1h、1. 5h、均有显著的镇痛作用 ( P < 0. 05); 从痛阈
均值来看 ,中、高剂量组的镇痛效果与阿司匹林阳性对照组
的镇痛效果相当;而低剂量组无明显镇痛效果。由此可见:
紫背鼠尾草总提物在中高剂量 ( 200~ 400mg /kg )时有较显
著的镇痛作用,且随剂量的增加而增强。
3 讨 论
通过二甲苯致小鼠耳肿胀、鸡蛋清致大鼠足趾肿胀、醋
酸致小鼠扭体和热刺激小鼠等 4种药理模型对紫背鼠尾草
乙醇总提取物进行了抗炎镇痛的初步研究,在抗炎药理模
型中,实验结果显示紫背鼠尾草乙醇总提取物在 200mg /kg
时具有显著的抗炎作用; 但在低剂量 ( 100mg /kg )、高剂量
( 400mg /kg)时却无显著的抗炎作用; 在镇痛药理模型中,
实验结果表明, 紫背鼠尾草乙醇总提取物在剂量 200 ~
400m g /kg时具有较明显的镇痛作用, 在 100mg /kg时作用
不太明显,显示出镇痛作用随剂量的增加而增强。
抗炎作用有最佳作用剂量,而镇痛实验中显示镇痛作
用随剂量的增加而增强, 这可能是因为两模型中药物作用
的方式不同导致药物作用剂量上的差异, 其原因有待进一
步研究。
紫背鼠尾草乙醇总提取物抗炎镇痛作用显著, 说明了
紫背鼠尾草具有抗炎镇痛的功效, 为该植物进一步的开发
利用提供药效学资料。
参考文献
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