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鼠尾草种子无菌培养及快繁技术研究



全 文 :作者简介:瞿珍(1986 -) ,女,技术员,从事花卉组织培养研究。 收稿日期:2010 - 11 - 05
鼠尾草种子无菌培养及快繁技术研究
瞿 珍
(西宁市城南苗圃,青海西宁 810001)
摘 要:对鼠尾草种子进行了无菌培养,并研究其快繁技术。结果表明:鼠尾草的组培快繁中,播种芽苗最佳脱分化
诱导培养基为 MS + 6 - BA 2. 0mg /L + NAA 0. 1mg /L;最佳再分化培养基为 MS + 6 - BA 1. 0mg /L + NAA 0. 1mg /L;最
佳生根培养基为 1 /2MS + NAA 0. 1mg /L;最佳炼苗基质为基质 +珍珠岩(8∶ 2)。
关键词:鼠尾草;种子;无菌培养;快繁技术
中图分类号 S682. 39 文献标识码 A 文章编号 1007 - 7731(2010)23 - 64 - 02
鼠尾草属多年生草本,植株呈丛生状,叶对生长椭圆
形,色灰绿,叶表有凹凸状织纹,香味刺鼻浓郁,夏季开淡
紫色小花,生长强健,耐病虫害[1]。
鼠尾草系列是芳香植物的一大类群,品种众多,用于
园林绿化的同时可以实现香化,近年来颇受市场欢迎。深
蓝和天蓝鼠尾草因植株高大可在花境中做背景,超级、粉
花、墨西哥等中等高度的植物材料可在花境中做中景,观
叶为主的鼠尾草可做前景或室内小盆栽,低矮的观叶鼠尾
草可做模纹花坛。
1 材料与方法
1. 1 材料的来源 供试材料为城南苗圃引进的“鼠尾
草”蓝色花系的种子。
1. 2 基本培养基选择 以 MS 为基本培养基,添加不同
浓度的细胞分裂素(6 - BA)和生长素(NAA)组合,配制成
各种诱导培养基。其中丛生芽诱导培养基中,细胞分裂素
(6 - BA)浓度为 0. 5mg /L、1. 0 mg /L、1. 5mg /L、2. 0 mg /L,
生长素(NAA)浓度为 0. 1 mg /L、0. 3 mg /L;以 MS 和 1 /
2MS为对照;丛生芽增殖培养基中,细胞分裂素(6 - BA)
浓度为 0. 5 mg /L、1. 0mg /L,生长素(NAA)浓度 0. 1mg /L;
生根培养基中以大量元素减半为基本培养基,添加生长素
(NAA)0. 1 mg /L,就 NAA 浓度对生根的影响进行比较。
以上培养基均附加 3%的蔗糖、0. 54%的琼脂,pH 值 5. 8。
每个处理设 5瓶,诱导培养每瓶接种 1 块,增殖培养每瓶
接种 6块,生根培养每瓶接种 10株。
1. 3 试验方法
1. 3. 1 种子消毒及接种[2] 0. 3% 高锰酸钾溶液浸泡
30min—流水冲洗干净—超净台上 75%酒精浸泡 35s—无
菌水冲洗 4次—0. 1%升汞溶液浸泡 14min—无菌水冲洗
8 次—无菌滤纸吸干种子的水分—分别接种到种子诱导
培养基上。
1. 3. 2 不定芽诱导 将从种子诱导出的愈伤组织和带不
定芽的愈伤组织,分别切成 0. 5 cm3 的愈伤块和带 3 芽以
上的愈伤小块分别转接到增殖培养基中进行培养观察[3]。
1. 3. 3 不定根诱导 切取高 2 ~ 3cm,具 4 片叶片的不定
芽,转接到含有不同无机盐浓度和不同激素浓度的培养基
中观察生根情况[4]。
1. 3. 4 生根苗的驯化及移栽 生根两周后,选取长势良
好,植株健壮的小苗,在温室内盖瓶盖炼苗 3d,开瓶盖炼
苗 3d,将出瓶后的幼苗用水洗去根部的培养基,移栽至经
过灭菌处理的基质与珍珠岩的混合基质(基质∶珍珠岩 = 8
∶ 2)中和黑土中,移栽前期空气湿度保持在 80% ~ 90%,
遮光率为 50% ~ 60%,用遮阴网覆盖,环境温度在 18 ~
20℃,经过 1 ~ 2月的精细管理,即可定植于大田。
1. 3. 5 诱导培养条件 培养温度为 25 ± 2℃,光照时数
14h /d,光照强度 2000lx。
2 试验结果分析
2. 1 种子在不同培养基上的萌发 种子接种 20d后开始
露白。35d后种子具有 2 ~ 4 片淡绿色叶片,株高 0. 5 ~
2cm不等。部分生有细根。详细情况见表 1。
表 1 30d时种子发芽结果调查
培养基号
6 - BA
(mg/L)
NAA
(mg/L)
接种数量
(粒)
污染数量
(粒)
发芽数量
(粒)
发芽率
(%)
Swc1
Swc2
Swc3
Swc4
Swc5
Swc6
Swc7
Swc8
Swc9
Swc10(1 /2MS)
0. 5
1. 0
1. 5
2. 0
0. 5
1. 0
1. 5
2. 0
0. 1
0. 1
0. 1
0. 1
0. 3
0. 3
0. 3
0. 3
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
11
9
4
8
8
9
6
11
5
11
4
4
7
8
4
3
5
5
9
3
44
36. 3
43. 7
66. 6
33. 3
27. 2
35. 7
53. 5
60
33. 3
分析结果表明,在 NAA含量相同的情况下,培养基中
6 - BA 含量为 1. 0mg /L 时发芽率最低;6 - BA 含量为
46 安徽农学通报,Anhui Agri. Sci. Bull. 2010,16(23)
DOI:10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2010.23.047
2. 0mg /L时发芽率最高;不添加任何激素,以大量元素为
基本培养基,发芽率也较高,大量元素减半,也有发芽现
象,但发芽后生长停止。结果表明鼠尾草种子在 6 - BA
含量为 2. 0mg /L的培养基上发芽率最高。
2. 2 愈伤组织诱导 在诱导培养基上继续培养无菌播种
苗,30d后芽基部出现淡黄色愈伤组织,40d后愈伤组织上
出现淡绿色小突起。具体结果见表 2。
表 2 50d时愈伤组织诱导结果调查
6 - BA浓度
(mg/L)
NAA浓度
(mg/L)
接种数量
(株)
诱导数量
(株)
诱导率
(%) 生长情况
0. 5 0. 1 168 95 56. 5
芽苗基部诱导出淡黄色愈伤组织,
基部丛芽较少,增殖情况不明显。
叶片嫩绿。苗直立,叶片边缘
干枯。
1. 0 0. 1 168 108 64. 3
芽苗基部诱导出淡黄色愈伤组织,
基部丛芽较多,增殖情况明显。叶
片嫩绿。苗直立,叶片边缘无干枯
分析结果可知,鼠尾草播种苗在诱导培养基 MS + 6 -
BA 1. 0mg /L + NAA 0. 1mg /L 中能脱分化诱导出愈伤组
织,基部丛芽较多,增殖情况明显。
2. 3 不同 NAA浓度对诱导不定根的影响 将苗高达 2 ~
3cm,具 4 片叶的不定芽分别转接到不同 NAA浓度的培养
基上,15d观察统计其生根情况。具体见表 3。
表 3 不同 NAA浓度对诱导不定根培养的影响
MS浓度 NAA浓度
(mg/L)
接种数量
(株)
生根数量
(株)
生根率
(%) 生根情况
1 /2 MS 0 280 196 70 不定根粗细均匀,根长较长,数
量少
1 /2 MS 0. 1 280 252 90 不定根粗壮,根长较长,数量多
从表 3可知,当 NAA含量为 0时,含 1 /2MS的培养基
其生根率与根系生长情况明显低于含 NAA为 0. 1mg /L的
培养基。从生根率和根系生长情况综合考虑,大量元素减
半,NAA浓度为 0. 1 mg /L的培养基为鼠尾草的最佳生根
培养基。
2. 4 生根瓶苗的移栽结果 试验表明,种植于不同基质
中的生根苗成活率各不相同。在黑土中的移栽成活率为
75%;基质∶ 珍珠岩 = 8 ∶ 2 的炼苗基质中成活率为 90%。
其原因是珍珠岩具有较大的孔隙度,透气性好,不易积水,
而黑土的透气性较差,生根苗成活率相对较低。
3 小结
鼠尾草种子无菌快繁中,播种芽苗最佳脱分化诱导培
养基为 MS + 6 - BA2. 0mg /L + NAA0. 1mg /L;最佳再分化
培养基为MS + 6 - BA1. 0mg /L + NAA0. 1mg /L;最佳生根
培养基为 1 /2MS + NAA0. 1mg /L;最佳炼苗基质为基质 +
珍珠岩(8∶ 2)。
参考文献
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业出版社,2003.
(责编:施婷婷)
(上接 31 页)在共同竞争性生长过程中,各自不同的生长
状况和不同的生物代谢过程,包括物质的吸收、降解、转
化、分泌等,很可能是光合细菌与藻类互作过程及相互作
用发生的内在机制。进一步研究光合细菌与藻类生长的
生理生化机制和生理生态关系十分必要。
参考文献
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5616 卷 23 期 瞿 珍 鼠尾草种子无菌培养及快繁技术研究