全 文 ：一点红不同溶剂浸提物的抑菌作用
陈晓伟 ,韦媛媛 ,周吴萍 ,阎柳娟 ,李军生＊　(广西工学院生物与化学工程系 ,广西柳州 545006)
摘要　[目的] 研究一点红不同溶剂浸提物的抑菌性。[方法] 采用甲醇 、乙醇、丙酮乙酸乙酯及乙醚 5种溶剂提取一点红 ,并且采用用滤
纸片扩散法研究一点红不同溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用。[结果]提取效率顺序为甲醇>乙醇>丙酮>乙醚
>乙酸乙酯 ,而一点红提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用强弱顺序为乙醚>乙醇>甲醇>丙酮>乙酸乙酯。[结论] 乙
醇浸提一点红的效率较高 ,抑菌作用较好。
关键词　一点红;不同溶剂;抑菌
中图分类号　S 567.23+9　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2008)22-09595-02
Study on Antibacterial Effect of Emilia sonchifolia Extracts by Different Solvents
CHEN Xiao-wei et al　(Department of Biological and Chemical Engineering , Guangxi University of Technology , Liuzhou , Guangxi 545006)
Abstract　[ Objective] The aim of the research was to study the antibacterial effect of Emilia sonchifolia extracts by different solvents.[Methods] Emilia
sonchifolia was extracted by methanol , alcohol , acetone, acetic ether and ether , respectively.The antimicrobial effects of these extracts of Emilia sonchi-
folia on Staphylococcus aureus and Escherichia coli were studied by paper dish diffusion.[ Results] The sequence of the extraction ratewas methanol>al-
cohol>acetone>ether>acetic ether , but the sequence of the antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli was ether>alcohol
>methanol>acetone>acetic ether.[ Conclusion] Emilia sonchifolia lixiviation extracted by alcohol had the high extraction rate and the fine antibacterial
activity.
Key words　 Emilia sonchifolia;Different solvents;Antibacterial effect
基金项目　广西自然科学基金项目(桂科基 0575023)。
作者简介　陈晓伟(1976-),男 ,辽宁沈阳人 ,在读硕士 ,讲师 ,从事天
然产物化学及药效方面的研究。 ＊通讯作者。
收稿日期　2008-05-19
　　一点红[ Emilia sonchifolia (Linn.)DC.] ,属菊科 1 年生
或多年生草本植物 ,常见野生于广东 、广西 、福建 、贵州 、江西
等地的林间和路边 ,性微寒 ,具有较好的清热解毒 、凉血消肿
等功效 ,在过去一点红只作为野菜和清热消炎的民间草药食
用。国内外研究表明 ,一点红具有抗菌消炎的活性[ 1] ,是临
床上治疗妇科炎症理想的中草药。广西花红药业有限责任
公司生产的花红片是一点红的纯中药制剂 ,但是目前并不清
楚一点红中起抗菌 、消炎作用的活性成分。笔者用不同极性
溶剂提取一点红 ,并对提取物的抑菌性能进行试验 ,为寻找
一点红中起抗菌作用的相关生物活性成分的研究提供依据。
1　材料与方法
1.1　材料　一点红(干燥全草 ,广西花红药业提供);营养琼
脂 、营养肉汤(广东环凯微生物科技公司);注射用硫酸链霉
素(大连美罗大药厂);其他试剂为市售分析纯。试验所用菌
种金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus)、大肠杆菌(Es-
cherichia coli)由广西工学院生物与化学工程系微生物实验室
提供。
1.2　方法
1.2.1　一点红不同溶剂浸提物的制备。称取干燥粉碎后的
一点红药材 40 g ,分别加入甲醇 、乙醇 、丙酮 、乙酸乙酯和乙
醚 500 ml ,密封于棕色瓶中 ,常温保藏 15 d后取出 ,抽滤 ,分
别用溶剂洗涤滤渣 ,合并滤液 ,进行黄酮和生物碱化学检识 ,
将滤液置于旋转蒸发仪中浓缩 ,再放入 80 ℃烘箱中烘干至
粉状 ,置于干燥器中保存备用 。
1.2.2　培养基和菌种液的制备。
1.2.2.1　营养肉汤培养基的制作。按照每 18 g营养肉汤粉配
制 1L培养基的比例配制 ,搅拌 ,加热煮沸至完全溶解 ,调节 pH
值至 7.4±0.2 ,分装三角瓶 ,121 ℃高温灭菌 20min ,备用。
1.2.2.2　营养琼脂培养基的制作。按照每 33 g营养琼脂粉
配 1 L培养基的比例配制 ,搅拌 ,加热煮沸至完全溶解 ,调节
pH值至 7.3±0.2 ,分装三角瓶 ,高压蒸汽灭菌(121 ℃, 20
min),备用。
1.2.2.3　菌悬液的制备[ 2] 。将供试菌种进行斜面活化 ,取
一定量已活化的供试菌装于有 9 ml无菌水的试管中 ,制成菌
悬液 ,再用无菌吸管取 1 ml充分混合的菌悬液于试管中 ,加
入 9 ml无菌水 ,用显微镜直接记数法测菌体个数 ,调至浓度
为含菌体 108 个/ml的菌悬液 ,备用 。
1.2.3　抑菌圈的测定。分别称取一点红甲醇 、乙醇 、丙酮 、
乙酸乙酯和乙醚提取物 0.15g ,加入乙酸乙酯溶解 ,并稀释到
浓度为 300 mg/ml;配置硫酸链霉素溶液 0.5 mg/ml作为阳性
对照溶液;同时 ,以乙酸乙酯作为空白对照溶液。
采用滤纸片扩散法测定抑菌圈[ 3] 。在净化工作台上各
吸取 0.2 ml待试菌悬液 ,均匀地涂布于固体琼脂培养基 , 37
℃在培养箱中正置培养 1 h ,制成含菌平板。用无菌镊子夹
取 6mm无菌滤纸片 ,浸泡供试品溶液 20 s ,沥干后轻贴在平
皿上 。37 ℃恒温正置培养 1 h后倒置培养 24 h ,观察抑菌情
况 ,并测量抑菌圈直径。每种菌重复 3 个平板 ,评价其抑菌
效果。抑菌圈直径 15 ～ 20 mm为高敏;抑菌圈直径 10 ～ 15
mm为中敏;抑菌圈直径<10 mm为低敏;无抑菌圈为不敏。
2　结果与分析
2.1　不同提取溶剂对一点红提取效率的影响　采用冷浸法
提取一点红 ,极大程度地降低了提取方式对药材中有效成分
的破坏 ,保护了提取物中有效成分的完整性 。选用溶剂的极
性顺序为甲醇>乙醇>丙酮>乙酸乙酯>乙醚 , 5种提取物
的化学检识均显黄酮 、生物碱阳性反应。一点红中含有多种
化学成分 ,包括黄酮[ 4-5] 、生物碱[ 6] 、甾醇[ 7]等 ,其中黄酮和
生物碱类化合物为主要成分。天然黄酮类化合物多以苷类
形式存在 ,黄酮苷一般易溶于极性强的溶剂中 ,故该次试验
中极性大的溶剂提取效率较高 ,其中以甲醇最高(图 1)。化
学检识结果(表 1)表明 ,提取物中含有黄酮 。大多数生物碱
几乎不溶于水 ,但是溶于乙醚 、乙醇 、丙酮等有机溶剂。该试
验化学检识的结果也证明在提取物中存在一点红生物碱 。
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008 ,36(22):9595-9596　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　刘月娟　责任校对　况玲玲
图 1　不同溶剂浸提一点红的提取效率
Fig.1　The extraction efficiency of the extracts from Emilia sonchifo-
lia with different solvents
表 1　提取物化学分析
Table 1　The chemical analysis of the extracts
反应类型
Reaction type
试验现象
Test phenomena
结果
Results
与碱反应Alkali reaction 浅黄色 ,加热黄色不变 可能有黄酮类化合物存在
铅盐沉淀反应 Lead salt
sedimentation reaction
黄绿色沉淀 可能有黄酮类化合物存在
AlCl3试验AlCl3 test 浅黄色斑点 , 紫外灯下显蓝色 可能有黄酮类化合物存在
硅钨酸试验 Silicotungstic
acid test
灰白色沉淀 可能有生物碱存在
浓硫酸试验 Concentrated
sulfuric acid test
紫色 可能有生物碱存在
浓硝酸试验 Concentrated
nitric acid test
棕红色 可能有生物碱存在
2.2　一点红不同溶剂提取物的抑菌作用　在抑菌圈试验
中 ,抑菌圈越大表示该菌对药物的敏感性越高 ,反之越低;若
无抑菌圈 ,则说明该菌对药物具有耐药性。由表 2可知 ,一
点红甲醇 、乙醇 、丙酮和乙醚浸提物对金黄色葡萄球菌均具
有抑菌作用(抑菌圈>10 mm),其中乙醚浸提物的抑菌作用
最强 ,乙醇次之 ,乙酸乙酯提取物作用最弱。由表 3 可知 , 5
种提取物对大肠杆菌的抑菌作用均较弱 ,其中乙醚提取物的
抑菌作用稍强 ,乙醇提取物的抑菌作用次之 ,丙酮 、乙酸乙酯
提取物的抑菌作用最弱。试验结果表明 , 5种溶剂中乙醇的
提取效率较高 ,且抑菌作用较好。
3　小结
由化学检识结果可知 ,一点红 5种溶剂浸提物中均含有
黄酮和生物碱 ,其中甲醇提取效率最高 ,但抑菌性较差 ,乙醚
抑菌性虽然最高 ,但提取率较低。综合提取 、抑菌结果 ,乙醇
的提取效率较高 ,提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑
制作用均呈现出中度敏感 ,为提取的最佳溶剂。
表 2　一点红不同溶剂提取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用
Table 2　The inhibition of the extracts from E.sonchifolia with different
solvents to Staphylococcus aureus
组别
Group
抑菌圈直径∥mm
Diameter of bacteriostatic circle
1 2 3 平均Average
空白对照Blank control - - - -
硫酸链霉素 22 24 26 24.0
Streptomycin sulfate
甲醇提取物Methanol extract 18 12 14 14.7
乙醇提取物 Ethanol extract 16 16 18 16.7
丙酮提取物 Acetone extract 18 16 12 15.3
乙酸乙酯提取物 14 12 10 12.0
Extract with ethyl acetate
乙醚提取物 Aether extract 20 18 18 18.7
　注:-表示无抑菌圈 ,为滤纸直径(6 mm)。下同。
　Note:-mean the diameter of filter paper(6 mm), without no bacteriostatic
circle.The same as below.
表3　一点红不同溶剂提取物对大肠杆菌的抑制作用
Table 3　The inhibition of the extracts from E.sonchifolia with different
solvents to Escherichia coli
组别
Group
抑菌圈直径∥mm
Diameter of bacteriostatic circle
1 2 3 平均Average
空白对照Blank control 　- 　- 　- 　　 -
硫酸链霉素 　15 　17 　18 　　 16.7
Streptomycin sulfate
甲醇提取物Methanol extract 10 9 8 9.0
乙醇提取物 Ethanol extract 10 12 10 11.0
丙酮提取物 Acetone extract 7 9 7 7.6
乙酸乙酯提取物 　- 8 　- 6.7
Extract with ethyl acetate
乙醚提取物 Aether extract 16 14 12 13.0
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