全 文 :云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究
郭刚军 1 彭春秀 2 何 享 3 龚加顺 3*
(1云南省热带作物科学研究所 云南景洪 666100
2云南农业大学园林园艺学院 云南昆明 650201
3云南农业大学食品科技学院 云南昆明 650201)
摘要 为研究云南晒青毛茶提取物的抗氧化活性,以芦丁和 VC 为对照,测定云南晒青毛茶不同溶剂提取物的
清除 DPPH 自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、亚硝酸盐的能力及还原力。 测定结果表明:晒青毛茶不同
溶剂提取物抗氧化活性与其浓度成正相关,对 DPPH 自由基、羟基自由基与超氧阴离子有较强的清除作用,具
有一定的清除亚硝酸盐能力与还原力。 晒青毛茶提取物中乙醇沉析物(IC50 93.80 μg/mL)、正丁醇提取物(IC50
153.90 μg/mL)、乙醇提取物(IC50 161.20 μg/mL)清除 DPPH 自由基的能力较强,在相同浓度下优于芦丁。晒青毛
茶提取物对羟基自由基均有很强的清除能力,除氯仿提取物(IC50 57.67 μg/mL)与乙醇沉析物(IC50 13.10 μg/
mL)外,其他提取物与 VC 的 IC50值均很小。 乙醇沉析物与水提取物对超氧阴离子的清除能力较强,在质量浓度
20 μg/mL 时优于标准品 VC,在相同浓度下优于其他提取物。 乙酸乙酯提取物与乙醇提取物对亚硝酸盐的清除
能力较强,但相同浓度下低于 VC。 水提取物、乙醇沉析物、乙酸乙酯提取物的还原力较好,在相同浓度下优于标
准品芦丁。 云南晒青毛茶不同溶剂提取物的抗氧化活性具有较大差异。
关键词 晒青毛茶; 不同溶剂提取物; 抗氧化活性; 自由基
文章编号 1009-7848(2013)08-0042-07
普洱茶系采用大叶种茶鲜叶制成的晒青毛茶
为原料, 经渥堆后发酵、 陈化等特殊工序加工而
成,具有干茶色泽褐红、条索粗壮、耐贮耐泡,茶汤
红浓透亮、陈香显著、滋味浓厚回甘,叶底红褐柔
软的特点。普洱茶性温和,有解渴提神、帮助消化、
清胃、生津、醒酒、减肥、通泄、利尿、解毒、降脂、降
压、抗癌等功效[1-4]。 近十几年来,活性氧和自由基
研究成为现代生命科学的热点, 评价和筛选具有
强抗氧化活性的天然资源已成为生物学、 医学和
食品科学研究的新趋势。 目前公认的生物抗氧化
剂主要指可以清除自由基, 抑制脂质过氧化的生
物活性物质。 这些物质主要包括酚类物质、 叶绿
素、胡萝卜素及维生素等。本文利用不同溶剂对云
南晒青毛茶进行分步提取,制得不同溶剂提取物。
采用体外抗氧化模型实验(即 DPPH 自由基、羟自
由基、超氧阴离子自由基、亚硝酸盐的清除实验及
还原力测定),比较分析云南晒青毛茶不同溶剂提
取物的抗氧化活性, 为进一步开发具有天然抗氧
化功能的云南晒青毛茶产品, 研究其保健价值提
供一定的技术依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
云南晒青毛茶,西双版纳勐养国艳茶厂提供。
DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl),美国
Sigma-Aldrich 公司;芦丁(HPLC﹥98%),成都思
科华生物技术有限公司;VC,南化化学试剂厂;无
水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇、邻苯三酚、Tris、
水杨酸、亚硝酸钠、对氨基苯磺酸、N-1-萘乙二胺
盐酸盐、三氯乙酸、铁氰化钾、三氯化铁等均为分
析纯试剂。
1.2 仪器与设备
紫外-可见分光光度计,上海精密科学仪器有
限公司; 电热鼓风干燥箱, 上海实验仪器有限公
司;电热真空干燥箱,上海实验仪器总厂;电热恒
收稿日期: 2012-08-30
基金项目: 国家自然科学基金项目(30760152,30960241);
云南省重点基金项目(2009CL005)
作者简介: 郭刚军,男,1980 年出生,硕士,助理研究员
通讯作者: 龚加顺
Vol. 13 No. 8
Aug. 2 0 1 3Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology
中 国 食 品 学 报第 13 卷 第 8 期
2 0 1 3 年 8 月
第 13 卷 第 8 期
温水浴锅,常州市华普达教学仪器有限公司;旋转
蒸发仪,上海亚荣仪器厂。
1.3 方法
1.3.1 晒青毛茶提取物提取工艺流程 晒青毛茶
经粉碎过筛(40~80 目)→无水乙醇浸泡(2~3 次,
每次 24 h, 温度 45 ℃)→收集乙醇浸泡液→茶叶
晾干(挥去乙醇)→加入蒸馏水(分 3 次浸泡,每次
3 h,温度 50℃,体积比 1∶5)→合并滤液,过滤除杂
质,于 75℃减压浓缩→取适量水提取物→蒸馏水
溶解→乙酸乙酯萃取 3 次(同时收集上层液)→水
层→氯仿萃取 2~3 次(同时收集下层液)→水层→
正丁醇萃取(同时收集上层液)→水层→加无水乙
醇,静置 24 h,沉淀,过滤得到沉淀(乙醇沉析物)
和乙醇溶液(乙醇溶解物)。
将上述过程中的乙醇浸提液、水浸提液、乙酸
乙酯萃取液、氯仿萃取液、正丁醇萃取液、乙醇溶
液减压浓缩 (温度分别为 65,75,50,50,65,70
℃)。 将浓缩的 6种样液和乙醇沉析物置于真空干
燥箱中烘干,得到 7 种提取物:乙醇提取物(EE)、
水提取物(WE)、乙酸乙酯提取物(AE)、氯仿提取
物(CE)、正丁醇提取物(BE)、乙醇沉析物(ES)、乙
醇溶解物(ESO)。
1.3.2 晒青毛茶提取物的抗氧化作用研究
1.3.2.1 清除 DPPH 自由基能力测定 [5-6] 在试管
中依次加入 3.9 mL 0.04 mg/mL DPPH 自由基溶
液和 0.1 mL 待测试液,总体积为 4.0 mL,混匀后,
用 1 cm 比色杯在波长 517 nm 处测吸光值 A,记
为 As; 将 0.04 mg/mL DPPH 自由基溶液用 1 cm
比色杯在波长 517 nm处测吸光值 A,记为 Ao。 计
算 DPPH自由基清除率。
清除率(%)=(1-As/Ao)×100% (1)
1.3.2.2 清除羟基自由基能力测定[7-8] 4 mL 反应
液中含 0.15 mol/L FeSO4 1 mL,6 mmol/L H2O2 1
mL,2 mmol/L 水杨酸钠 1 mL, 不同浓度的晒青毛
茶提取物样液 1 mL,最后加入 H2O2启动反应。 37
℃反应 1 h, 测定 510 nm 处的吸光值。 吸光值越
大,清除·OH效果越好。 计算羟基自由基清除率。
清除率(%)=[A0-(Ai-A0i)]/A0×100% (2)
式中,A0——用蒸馏水代替样品的对照值 ;
Ai——加样后的吸光度;A0i——样品本身的本底值。
1.3.2.3 清除超氧阴离子能力测定[9-10] 邻苯三酚
自氧化速率的测定: 取 4.5 mL 50 mmol/L Tris-
HCl 缓冲溶液(pH 8.2),4.2 mL 蒸馏水,混匀后在
25 ℃水浴中保温 20 min,取出,立即加入在 25 ℃
预热的 3 mmol/L 邻苯三酚 0.3 mL,迅速摇匀后倒
入比色杯, 于 325 nm处每隔 30 s 测定吸光度,计
算线性范围内每分钟内吸光度的增加值, 以 10
mmol/L HCl 溶液配制空白管作为对照。
加入晒青毛茶不同溶剂提取物后, 邻苯三酚
自氧化速率的测定方法:按照上述步骤,在加入邻
苯三酚前先分别加入 0.1 mL 不同浓度的样品液,
蒸馏水减少。 同样以 10 mmol/L HCl 溶液配制空
白管并作为对照。计算清除超氧阴离子清除率。
清除率 (%)=(△A1/△t-△A2/△t)/△A1/△t×
100% (3)
式中,△A1/△t——邻苯三酚自氧化时的反
应速率;△A2/△t——加入样品液后邻苯三酚自氧
化时的反应速率。
1.3.2.4 清除亚硝酸盐能力测定 [11] 分别量取不
同浓度梯度的晒青毛茶不同溶剂提取物水溶液、
VC 水溶液于 25 mL 具塞试管中,加入 5 μg/mL 亚
硝酸钠溶液 l mL,然后置于 37℃水浴锅中反应 30
min,各加入 0.4%对氨基苯磺酸 l mL,摇匀静置 5
min;再加入 0.2%盐酸萘乙二胺显色剂 0.5 mL,摇
匀,加水定容,静置 15 min。以蒸馏水作空白,测各
溶液的吸光度 A。 把未加亚硝酸盐清除剂的溶液
的吸光度定为 A0,即空白值。计算待测物对亚硝酸
盐的清除率。
清除率(%)=(A0-A)/A0×100 (4)
式中,A0——不加待测液时反应体系的吸光
度;A——加入待测液时反应体系的吸光度。
1.3.2.5 还原力测定 [7] 分别取 2.5 mL 不同浓度
晒青毛茶不同溶剂提取物和 VC 系列溶液于 10
mL 试管中, 向其中分别加入 2.5 mL 磷酸缓冲液
(pH=6.6) 和 1 mL质量分数 1%的铁氰化钾溶液,
于 50℃下反应 20 min,冰浴。 冷却到室温后,向试
管内加入 1 mL 10%三氯乙酸,然后以 2 500 r/min
的速度离心,时间为 20 min。 取 5 mL 上清液于另
一试管中,加入 4 mL 去离子水,最后加入 1 mL 质
量分数 0.1%的 FeC13溶液, 混匀,10 min 后用紫
外-可见分光光度计于 700 nm 处测定其吸光值。
同时做空白实验。 还原力用样品吸光值来表示。
云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究 43
中 国 食 品 学 报 2013 年第 8 期
1.3.3 统计分析 所有数据采用 SPSS 16.0 软
件处理, 用邓肯氏法进行显著性分析, 以 P<0.05
为显著性差异。本文所有试验均重复 3次,试验结
果以平均值±标准差表示。
2 结果与分析
2.1 晒青毛茶提取物对 DPPH自由基清除作用
DPPH 可提供一种稳定的质子自由基, 当存
在抗氧化物质时,由于单电子配对使其吸收减少,
所以通过测定 DPPH 自由基含量变化来评价抗氧
化物质的抗氧化能力[12-13]。 由表 1 可看出,晒青毛
茶不同溶剂提取物对 DPPH 自由基的清除率在不
同浓度下有显著性差异(P<0.05),相同浓度不同
提取物间的清除能力也有显著性差异 (P<0.05)。
在提取物质量浓度 20~100 μg/mL范围, 对 DPPH
自由基的清除率与浓度成正相关, 其中正丁醇提
取物的清除能力较强, 几乎接近于芦丁标准品的
清除能力。 乙醇沉析物的清除能力随着浓度的增
加清除率快速增加, 由 (25.52±4.12)%增加到
(51.96±2.19)%。 当乙醇沉析物质量浓度 100 μg/
mL时,其清除能力优于标准品芦丁。 乙醇提取物
的清除能力也较强, 清除率随浓度的增加而较快
提高,由(35.16±0.49)%提高到(44.28±1.05)%。 乙
醇溶解物的增加很不明显,在相同浓度范围内,由
(28.13±0.51)%增加到(31.34±0.80)%,高于芦丁
标样。 芦丁标样的清除能力由(45.52±2.78)%增加
到(47.93±3.58)%。 抗氧化剂对自由基的清除能力
一般以 IC50值来评价,IC50值越小, 样品清除能力
越强。由图 1可以看出,晒青毛茶不同溶剂提取物
对 DPPH 自由基的清除能力次序为乙醇沉析物
(IC50 93.80)﹥正丁醇提取物(IC50 153.90)﹥乙醇
提取物(IC50 161.20)﹥芦丁(IC50 180.30)﹥乙酸乙
酯提取物(IC50 233.00)﹥水提取物(IC50 305.90)﹥
氯仿提取物(IC50 387.50﹥乙醇溶解物(IC50 643.10)。
20 15.78±
4.48Aa
35.16±
0.49Ab
25.52±
4.12Ac
31.72±
3.22Ad
40.74±
0.16Ae
13.21±
6.15Af
28.13±
0.51Ag
45.52±
2.78Ah
40 20.39±
5.82Aa
36.28±
0.42Ab
33.70±
1.29Bc
33.98±
0.90Ac
42.40±
1.39Ad
18.79±
2.84Be
29.47±
0.90Bf
46.64±
1.46Ag
60 22.81±
8.24Aa
37.79±
1.29Ab
41.33±
5.68Cc
34.51±
0.56Ad
43.91±
0.81Be
20.40±
0.61Cf
29.58±
0.76Bg
46.81±
2.06Ah
80 24.48±
0.49Aa
40.26±
1.05Bb
44.07±
3.01Dc
36.34±
1.07Bd
44.34±
1.31Be
21.10±
1.05Cf
30.00±
0.33Bg
47.13±
1.46Bh
100 25.23±
1.97Ba
44.28±
1.05Cb
51.96±
2.19Ec
39.13±
1.01Bd
46.59±
1.19Ce
21.52±
1.17Cf
31.34±
0.80Bg
47.93±
3.58Bb
WE EE ES AE BE CE ESO 芦丁
质量浓度/
μg·mL-1
清除率/%
表 1 晒青毛茶不同溶剂提取物对 DPPH 自由基清除率 (X軍±SD,n=3)
Table 1 Scavenging ratio of different solvent extracts of sun-dried green tea on DPPH free radical
with different concentration
注:同列间大写字母肩标不同者,差异显著(P<0.05);同行间小写字母肩标不同者,差异显著(P<0.05),以下同。 WE:水提取物;EE:乙醇提
取物;ES:乙醇沉析物;AE:乙酸乙酯提取物;BE:正丁醇提取物;CE:氯仿提取物;ESO:乙醇溶解物,以下同。
700
600
500
400
300
200
100
0
IC
50
值
/μ
g·
m
L-
1
WE EE ES AE BE CE ESO Rutin
云南晒青毛茶不同溶剂提取物
图 1 云南晒青毛茶不同溶剂提取物清除 DPPH
自由基的 IC50值比较
Fig.1 Compare of IC50 value of different solvent
extracts of sun-dried green tea on DPPH free radicals
44
第 13 卷 第 8 期
2.2 晒青毛茶提取物对羟基自由基清除作用
羟基自由基为高反应性自由基,攻击力强,对
细胞等组织毒性强,毒害大。 它可通过电子转移、
加成以及脱氢等方式与生物体内的多种分子作
用,造成糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类等物质
的氧化性损伤,细胞坏死或突变。羟自由基还与衰
老、肿瘤、辐射损伤和细胞吞噬等有关,羟自由基
清除率是反映药物抗氧化作用的重要指标 [14]。 从
表 2 可看出, 晒青毛茶不同溶剂提取物具有较强
的清除羟基自由基能力, 在不同浓度下有显著性
差异(P<0.05),在相同浓度不同提取物间的清除
能力也有显著性差异(P<0.05)。 在提取物质量浓
度 20~100 μg/mL 范围内,各提取物对羟基自由基
的清除率与浓度成正相关。 在提取物质量浓度较
低(20 μg/mL)时,晒青毛茶不同溶剂提取物清除
率绝大部分超过 50%。 乙酸乙酯提取物的清除能
力较高,在 40~80 μg/mL 范围,其清除羟基自由基
的能力高于其他提取物,接近 VC。 水提取物的清
除能力也较高,当较低质量浓度 20 μg/mL 时清除
能力最高达(65.52±0.56)%;随着水提取物浓度的
升高,其清除率提高很快,当水提取物质量浓度达
到 100 μg/mL时,清除率达到(88.6±4.09)%。 相对
而言,氯仿提取物的清除率较低,变化也较慢,在
氯仿提取物 20~100μg/mL范围内,清除率由(43.21±
0.69)%提高到 (58.2±0.10)%。 从各提取物的 IC50
数值来看,氯仿提取物 57.67 μg/mL,乙醇沉析物
13.10 μg/mL, 其他提取物与 VC 的 IC50的数值均
很小。 晒青毛茶不同溶剂提取物对羟基自由基均
有很强的清除能力。
20 65.52±
0.56Aa
53.81±
0.86Ab
53.5±
3.41Ab
57.60±
3.26Ac
59.11±
1.27Ad
43.21±
0.69Ae
54.42±
3.29Ab
91.80±
3.42Af
40 73.38±
1.85Ba
74.97±
3.43Ba
70.6±
4.01Bb
94.00±
0.91Bc
87.75±
1.73Bd
46.08±
0.91Be
74.12±
3.13Ba
99.80±
0.81Bf
60 75.27±
9.43Ca
78.24±
4.02Cb
76.45±
2.16Ca
94.70±
2.13Bc
89.20±
3.49Cd
48.62±
0.41Ce
75.54±
4.62Ba
99.80±
0.20Bf
80 85.22±
1.94Da
85.80±
3.41Da
94.47±
1.66Db
97.50±
1.54Cc
90.11±
5.31Dd
56.21±
1.63De
84.88±
1.39Cf
100.37±
1.11Cg
100 88.6±
4.09Ea
89.07±
1.58Ea
100.00±
1.35Eb
100.00±
0.86Db
100±1.05 58.20±
0.10Ec
86.23±
1.57Dd
100.41±
0.70Cb
WE EE ES AE BE CE ESO VC
质量浓度/
μg·mL-1
清除率/%
表 2 晒青毛茶提取物对羟基自由基清除率 (X軍±SD, n=3)
Table 2 Scavenging ratio of extracts of sun-dried green tea on OH- free radical
with different concentration (X軍±SD,n=3)
2.3 晒青毛茶提取物对超氧阴离子自由基清除
作用
从表 3 可以看出,不同浓度时,低浓度乙醇提
取物和乙醇溶解物的清除率无显著性差异, 高浓
度乙醇沉析物无显著性差异, 其他各种提取物具
有显著性差异(P<0.05),在相同浓度下,乙醇提取
物与乙醇溶解物的清除率无显著性差异(P>0.05),
不同提取物的清除能力有显著性差异(P<0.05)。
在质量浓度 20~100μg/mL 范围,各提取物对超氧
阴离子自由基的清除率与浓度成正相关。其中,乙
醇沉析物、水提取物清除能力较强,相同浓度下优
于其他提取物。在质量浓度 20 μg/mL时上述物质
清除率分别达到 ( 74 . 12± 5 . 32 )% , ( 61 . 41 ±
8 . 76)%,优于标准品 VC。 在质量浓度 20~100 μg/
mL 范围,乙醇沉析物、水提取物的增加速率也较
快,上述物质清除率分别由(74.12±5.32)%,(61.41±
8.76)%增加至(84.65±2.01)%,(73.24±0.76)%。 而
乙醇提取物、乙醇溶解物的清除能力较差,其质量
浓度为 100 μg/mL 时的清除率仅分别为 (27.63±
2.28)%,(31.58±1.32)%。
云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究 45
中 国 食 品 学 报 2013 年第 8 期
20 61.41±
8.76Aa
25.00±
5.74Ab
74.12±
5.32Ac
47.37±
2.28Ad
43.42±
2.27Ae
30.26±
1.32Af
24.56±
5.48Ab
60.97±
0.76Aa
40 64.04±
7.71Ba
25.44±
3.04Ab
79.82±
5.48Bc
48.25±
2.74Bd
42.98±
4.62Ae
34.65±
0.76Bf
25.00±
2.28Ab
87.72±
1.10Bg
60 67.98±
2.74Ca
25.88±
3.31Ab
85.53±
2.64Cc
49.41±
1.52Cd
43.86±
2.01Ae
39.04±
2.74Cf
26.32±
1.32Ab
95.17±
0.99Cg
80 71.05±
3.48Da
26.76±
0.76Bb
85.97±
0.76Cc
50.40±
2.74Cd
42.11±
1.32Ae
42.11±
2.28De
25.88±
3.31Ab
97.76±
0.35Df
100 73.24±
0.76Ea
27.63±
2.28Cb
84.65±
2.01Cc
51.72±
2.74Cd
46.49±
0.76Be
44.30±
1.52Ef
31.58±
1.32Bg
98.95±
0.23Dh
WE EE ES AE BE CE ESO VC
质量浓度/
μg·mL-1
清除率/%
表 3 晒青毛茶提取物对超氧阴离子自由基清除率 (X軍±SD, n=3)
Table 3 Scavenging ratio of extracts of sun-dried green tea on superoxide anion free radical
with different concentration(X軍±SD,n=3)
2.4 晒青毛茶提取物对亚硝酸盐清除作用
从表 4 可以看出, 晒青毛茶提取物在不同浓
度时对亚硝酸盐的清除能力有显著性差异(P<0.05),
在相同浓度时各种提取物对亚硝酸盐的清除能力
也有显著性差异(P<0.05)。 其中乙酸乙酯提取物
的清除能力最强,当其质量浓度为 20 μg/mL 时对
亚硝酸盐的清除率达到(35.52±2.50)%,当其质量
浓度 80 μg/mL 时清除率达(68.30±0.47)%,仅次
于 VC 清除率。 其次是乙醇提取物的清除能力,当
其质量浓度为 80μg/mL时,清除率达(52.19±1.71)%。
其他提取物的清除能力较低,80 μg/mL 乙醇沉析
物的清除率仅(10.93±1.25)%。 氯仿提取物与乙醇
溶解物呈现负值清除率, 这可能是各提取物的成
分不同,与亚硝酸盐作用的结果。从清除率随浓度
的增加看,20~100 μg/mL乙醇提取物增加最快,清
除亚硝酸盐的能力由 (18.58±7.57)%增加到
(52.19±1.71)%。
20 6.56±
3.76Aa
18.58±
7.57Ab
2.19±
0.95Ac
35.52±
2.50Ad
7.65±
2.06Ae
-14.75±
1.42Af
-8.75±
1.71Af
90.43±
4.80Ag
40 9.02±
3.57Ba
30.33±
5.12Bb
4.65±
1.71Bc
46.45±
5.73Bd
16.39±
4.99Be
-12.57±
0.94Af
0.55±
1.25Af
91.53±
4.66Ag
60 24.86±
9.22Ca
37.70±
5.12Cb
6.01±
1.25Cc
62.02±
6.15Cd
18.03±
4.34Ce
1.37±
0.47Bf
2.73±
0.95Bg
92.62±
5.91Ah
80 27.05±
11.39Da
46.99±
2.06Db
10.93±
1.25Dc
68.30±
0.47Dd
25.41±
5.91De
7.11±
4.52Cf
7.38±
4.33Cf
94.53±
4.52Bg
100 28.41±
11.49Ea
52.19±
1.71Eb
15.37±
0.88Ec
71.35±
2.65Ed
29.68±
3.66Ee
16.39±
3.57Dc
10.38±
2.50Dd
95.35±
4.52Be
WE EE ES AE BE CE ESO VC
质量浓度/
μg·mL-1
清除率/%
表 4 晒青毛茶提取物对亚硝酸盐自由基清除率 (X軍±SD, n=3)
Table 4 Scavenging ratio of extracts of sun-dried green tea on nitrite with different concentration(X軍±SD,n=3)
46
第 13 卷 第 8 期
2.5 晒青毛茶还原力测定
还原能力是抗氧化活力的一个重要指标,吸
光度越大还原力越大,抗氧化能力越强[15-16]。 从表
5 可以看出, 晒青毛茶不同溶剂提取物的还原力
有显著性差异(P<0.05),在相同浓度时各种提取
物还原力也有显著性差异(P<0.05)。 就还原力来
说,水提取物、乙醇沉析物、乙酸乙酯提取物的还
原力较强,在质量浓度为 0.09 mg/mL 时,分别达
到 (1.576±0.041)%,(1.714±0.051)%,(1.821±0.04)%;
而芦丁标样仅(0.552±0.050)%。 氯仿提取物的还
原力最差, 基本无还原力, 当其质量浓度为 0.09
mg/mL时,还原力仅(0.072±0.005)%。 从还原力随
着浓度的增加来看, 乙醇溶解物、 乙酸乙酯提取
物、水提取物及乙醇沉析物的增加速度非常快,而
氯仿提取物还原力随浓度增加非常慢。
0.1 0.244±
0.014Aa
0.199±
0.009Ab
0.301±
0.019Ac
0.591±
0.025Ad
0.542±
0.035Ae
0.004±
0.004Af
0.130±
0.014Ag
0.353±
0.012Ah
0.3 0.595±
0.021Ba
0.263±
0.005Bb
0.707±
0.023Bc
1.362±
0.016Bd
0.613±
0.002Be
0.026±
0.006Bf
0.292±
0.006Bg
0.407±
0.027Bh
0.5 0.946±
0.026Ca
0.327±
0.001Cb
1.167±
0.089Cc
1.663±
0.101Cd
0.684±
0.087Ce
0.039±
0.004Cf
0.448±
0.005Cg
0.458±
0.011Ch
0.7 1.265±
0.020Da
0.392±
0.013Db
1.436±
0.098Dc
1.763±
0.017Cd
0.755±
0.039De
0.060±
0.007Df
0.579±
0.015Dg
0.499±
0.044Dh
0.9 1.576±
0.041Ea
0.456±
0.028Eb
1.714±
0.051Ec
1.821±
0.044Cd
0.413±
0.014Ee
0.072±
0.005Ef
0.736±
0.019Eg
0.552±
0.050Eh
WE EE ES AE BE CE ESO 芦丁
样品质量浓
度/μg·mL-1
还原力/A
表 5 晒青毛茶不同溶剂提取物还原力 (X軍±SD, n=3)
Table 5 Reducing power of extracts of sun-dried green tea (X軍±SD,n==3)
3 结论
云南晒青毛茶不同溶剂提取物对 DPPH 自由
基、羟自由基、亚硝酸盐的清除率及还原力差异显
著,其抗氧化活性与其浓度成正相关。对 DPPH自
由基的清除能力较强, 清除能力由强到弱依次为
乙醇沉析物(IC50 93.8 μg/mL)﹥正丁醇提取物(IC50
153.9 μg/mL)﹥乙醇提取物(IC50 161.2 μg/mL)﹥
芦丁(IC50 180.3 μg/mL)>乙酸乙酯提取物 (IC50
233.0 μg/mL)﹥水提取物(IC50 305.9 μg/mL)﹥氯
仿提取物 (IC50 387.5 μg/mL)>乙醇溶解物 (IC50
643.1 μg/mL)。不同溶剂提取物对羟基自由基具有
很强的清除能力,除氯仿提取物(IC50 57.67μg/mL)
与乙醇沉析物(IC50 13.10 μg/mL)外,其他的提取
物与 VC 的 IC50的数值均为负值。 乙醇沉析物与
水提取物对超氧阴离子的清除能力较强, 其质量
浓度为 20 μg/mL 时清除能力高于 VC。 乙酸乙酯
提取物与乙醇提取物对亚硝酸盐的清除能力较
强,但在相同浓度下低于 VC。水提取物、乙醇沉析
物、乙酸乙酯提取物的还原力较强,且相同浓度下
优于标准品芦丁。氯仿提取物的还原力最差,基本
无还原力。
参 考 文 献
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云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究 47
中 国 食 品 学 报 2013 年第 8 期
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Antioxidant Activity of Extracts of Sun-dried Green Tea in Yunnan
Guo Gangjun1 Peng Chunxiu2 He Xiang3 Gong Jiashun3*
(1Yunnan Institute of Tropical Crops, Jinghong 666100, Yunnan
2College of Horticulture and Landscape, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201
3College of Food Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201)
Abstract Antioxidant activity of different solvent extracts of sun-dried green tea was studied in this paper. The
scavenging ability of DPPH free radical, OH- free radical, superoxide anion free radical and nitrite of different solvent
extracts of sun-dried green tea as well as reducing power were investigated by using rutin and ascorbic acid (vitamin C)
as control. Results suggested that the different solvent extracts of sun-dried green tea had significant scavenging effects
on the DPPH free radical, OH- free radical, superoxide anion free radical and nitrite, all kinds of extracts had signifi-
cant reducing power. Antioxidant activity of different solvent extracts of sun-dried green tea had positive correlation with
their concentrations. The scavenging effects of ethanol sedimentation segment (IC50 93.80 μg/mL), n-butanol extract(IC50
153.90 μg/mL), ethanol extract (IC50 161.20 μg/mL) on the DPPH free radical were stronger than that of rutin control at
the same concentration. All kinds of extracts had significant scavenging effects on ·OH- free radical, IC50 value of dif-
ferent solvent extracts of sun-dried green tea was very small except chloroform extract (IC50 57.67μg/mL) and ethanol
sedimentation segment (IC50 13.10μg/mL). The scavenging effects of ethanol sedimentation segment and water extract on
superoxide anion free radical were stronger than that of VC control at the 20 μg/mL concentration and stronger other ex-
tracts at the same concentration. Acetal extract and ethanol extract had stronger ability of scavenging nitrite, but lower
than that of VC control. Reducing power of water extract, ethanol sedimentation segment and acetal extract had stronger
than that of rutin control at the same concentration. These results suggest that the antioxidant activity of different solvent
extracts of sun-dried green tea had significant differences.
Key words sun-dried green tea; different solvent extracts; antioxidant activity; free radical
48