全 文 ：第３３卷第３期
Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．３
草　业　科　学
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ
３９３－３９９
３／２０１６
ｈｔｔｐ：??ｃｙｋｘ．ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ＤＯＩ：１０．１１８２９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－０６２９．２０１５－０４２４
李伟丽，黄丽芳，夏新界．芡欧鼠尾草的组织培养和快速繁殖．草业科学，２０１６，３３（３）：３９３－３９９．
Ｌｉ　Ｗ　Ｌ，Ｈｕａｎｇ　Ｌ　Ｆ，Ｘｉａ　Ｘ　Ｊ．Ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ．Ｐｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１６，３３（３）：３９３－３９９．
芡欧鼠尾草的组织培养和快速繁殖
李伟丽１，２，黄丽芳１，夏新界１
（１．中国科学院亚热带农业生态研究所，亚热带农业生态过程重点实验室，湖南 长沙４１０１２５；
２．中国科学院大学，北京１０００４９）
摘要：以芡欧鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ）成熟种子为外植体，１／２ＭＳ为基本培养基，研究不同浓度的外源激素对愈伤组
织的诱导、增殖和生根的影响，从而初步建立了芡欧鼠尾草组织培养的快速繁殖体系。结果表明，诱导种子愈伤组织的
最适宜培养基为１／２ＭＳ＋１０．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．４ｍｇ·Ｌ－１　ＺＴ，诱导率为６６．５％；不定芽增殖
的最适培养基为１／２ＭＳ＋３．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，增殖倍数为７．６９；生根的最适培养基为１／２ＭＳ＋０．５
ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，生根率达１００％，平均生根数为５．６８；移栽后植株生长良好，成活率较高，达９７％。
关键词：芡欧鼠尾草；成熟种子；组织培养；快速繁殖
中图分类号：Ｑ９４３．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－０６２９（２０１６）３－０３９３－０７＊
Ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ
Ｌｉ　Ｗｅｉ－ｌｉ　１，２，Ｈｕａｎｇ　Ｌｉ－ｆａｎｇ１，Ｘｉａ　Ｘｉｎ－ｊｉｅ１
（１．Ｋｅｙ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｏ－Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ　ｉｎ　Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｒｅｇｉｏｎ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ
Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈａｎｇｓｈａ　４１０１２５，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００４９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ，ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ
ｓｔｕｄｙ　ｅｘｐｌｏｒｅｄ　ｔｈｅ　ｉｍｐａｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏｔ　ｉｎ－
ｄｕｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍａｔｕｒｅ　ｓｅｅｄ　ｏｆ　Ｓ．ｈｉｓｐａｎｉｃａ　ａｓ　ｅｘｐｌａｎｔ　ａｎｄ　１／２ＭＳ　ａｓ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｃ　ｍｅｄｉｕｍ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　１／２ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　１０．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ，１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ
ａｎｄ　０．４ｍｇ·Ｌ－１　ＺＴ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　６６．５％．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｗａｓ　１／２ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　３．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ　ａｎｄ　０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
ｏｆ　７．６９．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　１／２ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ
ｈｉｇｈｅｓｔ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１００％ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｏｆ　５．６８．Ｐｌａｎｔｓ　ｇｒｅｗ　ｖｅｒｙ　ｗｅｌ　ａｆｔｅｒ
ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ａ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　９７％．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ；ｍａｔｕｒｅ　ｓｅｅｄ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：Ｈｕａｎｇ　Ｌｉ－ｆａｎｇ　Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｌｆ＠ｉｓａ．ａｃ．ｃｎ
　　芡欧鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａ）为唇形科鼠尾草
属一年生草本植物，英文名为Ｃｈｉａ（奇亚），原产于墨
西哥南部和危地马拉北部。喜阳，但也能忍耐半阴，耐
旱，耐贫瘠，不耐涝，适于生长在热带和亚热带地
区［１－２］。芡欧鼠尾草的种子又称奇亚籽，具有悠久的食
用和药用历史［３］。除直接食用外，也被用于饼干、面
包、酸奶等食品的生产［４－５］。同时，奇亚籽也可作为营
养强化剂及食品添加剂。我国已于２０１４年批准奇亚
＊ 收稿日期：２０１５－０８－０６　　接受日期：２０１５－１０－０９
基金项目：湖南省科技计划项目———名贵畅销花卉新品种繁育与产业化开发研究（２０１４ＦＪ３０８９）
第一作者：李伟丽（１９８８－），女，河南商水人，在读硕士生，主要从事药用植物品种选育与栽培技术工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｌｉ１１２７＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：黄丽芳（１９７６－），女（回族），湖南中方人，助理研究员，硕士，主要从事花卉和药用植物品种选育与栽培技术研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｌｆ＠ｉｓａ．ａｃ．ｃｎ
草　业　科　学 第３３卷
ｈｔｔｐ：／／ｃｙｋｘ．ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
籽为新食品原料。研究表明，奇亚籽中富含多种蛋白
质、矿质元素、维生素、ω－３系列多不饱和脂肪酸和抗
氧化剂等成分，具有维持正常血脂水平、抗肿瘤、抗氧
化、改善糖尿病和心血管疾病等作用，广泛应用于医
药、食品、化妆品等方面［６－１０］。
随着消费者保健意识的增强和对健康营养食品要
求的不断提高，芡欧鼠尾草已成为国内外食品研究领
域的热点，在食品和医药工业中有着巨大的开发利用
前景［１１］。近年来随着人们对芡欧鼠尾草的需求逐渐
扩大和开发日渐迅速，原料需求逐步增加。由于工业
需求的不断增加，大量野生资源被消耗，芡欧鼠尾草种
质资源面临枯竭。因此，人工种植和栽培芡欧鼠尾草
受到重视，利用组织培养可以在短期内生产大量的优
质种苗，可为芡欧鼠尾草的生理生化、遗传转化工作提
供理论参考。目前，关于药用鼠尾草属植物组织培养
有一些报道，如王宗霞和康慧［１２］通过顶芽培养获得了
蓝花鼠尾草（Ｓ．ｆａｒｉｎａｃｅａ）的再生植株；王萌等［１３］通
过叶片获得了甘西鼠尾草（Ｓ．ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ）的再生植
株；有关芡欧鼠尾草组织培养的研究在国外也有一定
报道，如 Ｍｉｒｉａｎ等［１４］通过幼嫩叶片、子叶和带芽茎段
３种外植体，首次进行芡欧鼠尾草的微体快繁研究；
Ｍａｒｃｏｎｉ等［１５］以茎段为材料建立了芡欧鼠尾草的组织
培养体系。然而国内则尚未见相关报道。基于此，本
研究以芡欧鼠尾草的种子为外植体，探讨芡欧鼠尾草
再生组织培养的最佳条件，以期为人工规模化生产芡
欧鼠尾草提供重要的技术参考，同时对保护芡欧鼠尾
草野生种质资源具有重要的现实意义。
１　材料与方法
１．１　试验材料
试验材料来源于中国科学院作物耐逆境分子生物
学课题组试验基地，选用成熟的芡欧鼠尾草种子为外
植体。
１．２　试验方法
１．２．１　无菌材料的获得　选取芡欧鼠尾草无病、无虫
害的成熟种子。将种子置于消毒瓶中，用７０％乙醇溶
液消毒３０ｓ，再用无菌水冲洗３～４次后放入０．１％升
汞（ＨｇＣｌ２）溶液中浸泡１０ｍｉｎ，期间不断摇晃，取出后
用无菌水清洗５～６次，无菌滤纸吸干种子表面水分。
１．２．２　种子愈伤组织的诱导和分化　将外植体接种
到１／２ＭＳ基本培养基中，利用Ｌ９（３４）正交试验设计，
研究不同浓度的ＮＡＡ（０、０．５和１．０ｍｇ·Ｌ－１）、６－ＢＡ
（３．０、５．０和１０．０ ｍｇ·Ｌ－１）和 ＺＴ（０、０．４和０．８
ｍｇ·Ｌ－１）组合对愈伤组织诱导的影响。因芡欧鼠尾
草种子较小（图１），用１　０００μＬ移液枪吸取种子。将
种子接种于诱导培养基上，每个处理接种５瓶，每瓶接
种１０个，重复４次。接种２０ｄ后统计种子愈伤组织
的诱导率和分化率。
１．２．３　不定芽的增殖　将诱导出的丛生芽分成单株，
基部保留部分愈伤块，切割后接种到增殖培养基上增
殖培养，以１／２ＭＳ为基本培养基，附加不同浓度的
６－ＢＡ和ＮＡＡ。每个处理接种５瓶，每瓶接种５个，重
复４次。３０ｄ后，观察统计不定芽的增殖倍数和生长
状况。
１．２．４　继代生根　待不定芽生长至约４ｃｍ时自基部
剪下，接种至适宜的增殖培养基中继代培养，每３０ｄ
左右继代一次。生根培养时，将组培苗接种至添加不
同浓度ＮＡＡ的１／２ＭＳ培养基中培养。每个处理接
种５瓶，每瓶接种５个，重复４次。培养１６ｄ后，观察
统计不定芽的生根率、平均生根系数及生长状况。
１．２．５　炼苗移栽　取生长健壮、叶色浓绿、根系发达、
长８～１０ｃｍ的组培苗，打开瓶盖，室温条件下炼苗２ｄ
后取出，清洗根部残留的培养基，稍微蘸取ＩＢＡ （０．１
ｍｇ·Ｌ－１）溶液，再将其移栽至小盆中，移栽基质为泥
炭土和珍珠岩（１∶１）的混合基质（培养基质预先用
１／１　０００的高锰酸钾溶液浸泡２ｈ，沥干备用），遮阴培
养，散射光照。每周喷施１／２的营养液一次，定期观察
幼苗生长情况，２０ｄ后，统计移栽苗的成活率。然后，
将部分组培苗置于温室中继续培养，另一部分组培苗
移栽于大田中，完全暴露于自然的环境下。
１．３　培养条件
培养基均以１／２ＭＳ为基本培养基，培养基含蔗糖
３０ｇ·Ｌ－１、琼脂８ｇ·Ｌ－１，培养基在高压灭菌前将
ｐＨ值调至５．８。培养温度为（２５±２）℃，空气相对湿
度为７０％，光照强度为 ２　０００ｌｘ，光照时间为 １２
ｈ·ｄ－１。
１．４　评价指标
诱导率＝（诱导出愈伤组织外植体数／接种的外植
体总数）×１００％；
分化率＝（有芽形成的愈伤组织块数／愈伤组织的
总数）×１００％；
增殖倍数＝增殖后的幼苗数／接种的幼苗数；
生根率 ＝（生根的幼苗数／接种的幼苗数）×
１００％；
平均生根数＝根的总数／生根的苗数。
数据采用ＳＰＳＳ　１９．０软件对所测数据进行统计分
析，用平均值和标准误差表示测定结果，并用Ｄｕｎｃａｎ
法对各测定结果进行多重比较。
４９３
第３期 李伟丽　等：芡欧鼠尾草的组织培养和快速繁殖
ｈｔｔｐ：／／ｃｙｋｘ．ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
２　结果与分析
２．１　不同激素浓度的培养基对种子诱导的影响
将无菌的种子接种到诱导培养基上培养，各处理
均能诱导出愈伤组织。培养２０ｄ左右开始形成愈伤
组织，且部分愈伤组织的边缘同步分化出绿色的小芽
（图１），随后不断增加。以愈伤组织的诱导率和分化
率为指标，记录数据并对诱导率进行极差分析（表１）。
结果表明，不同浓度的６－ＢＡ、ＮＡＡ和ＺＴ组合对愈伤
组织的诱导和分化有明显影响，单独使用６－ＢＡ对愈
伤组织诱导率极低，处理 Ａ６、Ａ８ 的诱导率（４２．５％、
４０．５％）显著高于处理 Ａ２、Ａ３（１５．５％、１２．５％）（Ｐ＜
０．０５）。可知ＮＡＡ较ＺＴ对芡欧鼠尾草种子愈伤组织
诱导更有效，更有利于愈伤的诱导。同时，根据Ｒ 值
判断可知，６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＺＴ对愈伤组织的诱导作用为
ＮＡＡ＞６－ＢＡ＞ＺＴ。经多重比较分析可知，处理Ａ９ 培
养基配方对愈伤组织诱导的效果更明显，显著高于其
它处理（Ｐ＜０．０５）。Ａ９ 条件下丛生芽诱导率高达
６６．５％，且不定芽叶片嫩绿，茎较粗。因此，处理 Ａ９，
即１／２ＭＳ＋１０．０ ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋１．０ ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ＋０．４ｍｇ·Ｌ－１　ＺＴ是芡欧鼠尾草种子诱导的最
适宜培养基。
２．２　不同浓度的６－ＢＡ、ＮＡＡ组合对不定芽增殖的影响
将初代培养的０．５ｃｍ以上的不定芽接种于增殖
培养基中培养。随后，不定芽体积不断增多，迅速伸长
（图１）。方差分析与多重比较结果表明，不同浓度
ＮＡＡ和６－ＢＡ组合对芡欧鼠尾草不定芽增殖有明显
影响。培养基中仅含 ＮＡＡ 时，不定芽增殖倍数随
ＮＡＡ浓度增加先升高后下降，其最大值为６．７８（表
２）；当ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ·Ｌ－１时，不定芽增殖倍数
随６－ＢＡ浓度增加而下降，最大值为７．６９。因此，最适
宜不定芽增殖的 ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ·Ｌ－１。ＮＡＡ
浓度为０．５ｍｇ·Ｌ－１时不定芽增殖倍数均较高，其中
处理Ｂ５ 的不定芽增殖倍数显著高于其它处理（Ｐ＜
０．０５），不定芽增殖倍数最高。且处理Ｂ５ 诱导出的不
定芽苗叶色浓绿，茎较粗壮，植株较高。因此，处理
Ｂ５，即１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋３．０ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ是芡欧鼠尾草不定芽增殖的最适宜培养基。
２．３　不同培养基对生根与移栽的影响
将经增殖培养长至４ｃｍ左右高的组培苗，转入生
根培养基中培养。培养５ｄ后，基部分化出根点，９ｄ
后长出白色根，１６ｄ后统计结果。结果表明，各处理
条件下的幼苗易生根，且生长状况好。不定芽在不添
加任何激素的１／２ＭＳ培养基中，同样可以诱导出根，
生根率高达９０％（表３），但诱导生根时间较长，且根较
细弱；添加低浓度的ＮＡＡ（０．１～０．５ｍｇ·Ｌ－１）可促进
芡欧鼠尾草根的形成，生根率达９８％以上，不同浓度
之间无显著差异。ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ·Ｌ－１时，培养
９ｄ左右可形成完整根系，根长而多（图１），平均根数
最高达５．６８，显著高于其它处理（Ｐ＜０．０５）。综上所
表１　不同浓度ＮＡＡ，６－ＢＡ和ＺＴ组合对愈伤组织诱导的影响
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＡＡ，６－ＢＡ　ａｎｄ　ＺＴ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ　 ６－ＢＡ　 ＺＴ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
Ａ１ ０　 ３．０　 ０　 ６．５±１．６ｇ　 ０．０±０．０ｄ ＋
Ａ２ ０　 ５．０　 ０．４　 １５．５±４．３ｆ ２２．０±６．４ｃ ＋
Ａ３ ０　 １０．０　 ０．８　 １２．５±３．８ｆｇ　 ２６．７±４．９ｂｃ ＋
Ａ４ ０．５　 ３．０　 ０．４　 ３５．０±４．９ｄ ２７．８±６．５ｂｃ ＋＋
Ａ５ ０．５　 ５．０　 ０．８　 ２３．５±２．９ｅ ３３．８±２．５ｂ ＋
Ａ６ ０．５　 １０．０　 ０．０　 ４２．５±４．５ｃ ３４．９±５．９ｂ ＋＋
Ａ７ １．０　 ３．０　 ０．８　 ５５．５±４．７ｂ ４９．２±６．４ａ ＋＋＋
Ａ８ １．０　 ５．０　 ０．０　 ４０．５±４．７ｃｄ　 ４６．５±５．９ａ ＋＋
Ａ９ １．０　 １０．０　 ０．４　 ６６．５±６．０ａ ５６．０±４．１ａ ＋＋＋
ｋ１ ３４．５　 ９７．５　 ８９．５
ｋ２ １０１．５　 ７９．５　 １１７．５
ｋ３ １６２．５　 １２１．５　 ９１．５
极差Ｒ　 １２８　 ４２　 ２８
注：表中数据为平均值±ＳＤ。同列不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）。“＋”表示生长的强弱，越多表示长势越好。表２、表３同。
Ｎｏｔｅ：Ｖａｌｕｅｓ　ａｒｅ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ａｓ　ｍｅａｎ±ＳＤ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｏｗｅｒ　ｃａｓｅ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｓｈｏｗ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｔ　０．０５ｌｅｖｅｌ．“＋”ｉｎ　ｔｈｅ
ｔａｂｌｅ　ｍｅａｎｓ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔａｔｕｓ，ｍｏｒｅ“＋”ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｖｉｇｏｒｏｕｓ　ｇｒｏｗｔｈ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｉｎ　Ｔａｂｌｅ　２ａｎｄ　Ｔａｂｌｅ　３．
５９３
草　业　科　学 第３３卷
ｈｔｔｐ：／／ｃｙｋｘ．ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
图１　芡欧鼠尾草种子的离体培养和植株再生
Ｆｉｇ．１　Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｓｅｅｄｓ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　ｈｉｓｐａｎｉｃａｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ
表２　不同培养基对不定芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉａ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
植物生长调节剂
Ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ　 ６－ＢＡ
增殖倍数
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｍｕｌｔｉｐｌｅｓ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
Ｂ１ ０．２　 ０　 ５．１５±０．１１ｄ 　细长Ｓｌｅｎｄｅｒ
Ｂ２ ０．５　 ０　 ６．７８±０．０８ｂ 　健壮 Ｈｅａｌｔｈｙ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｎｇ
Ｂ３ ０．８　 ０　 ５．３３±０．１３ｄ 　健壮，生长慢 Ｈｅａｌｔｈｙ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｎｇ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｌｏｗｌｙ
Ｂ４ １．０　 ０　 ４．７０±０．０６ｅ 　老化，长势弱Ａｇｉｎｇ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅａｋ
Ｂ５ ０．５　 ３．０　 ７．６９±０．０９ａ 　粗壮，长势强Ｔｈｉｃｋ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｎｇ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔｒｏｎｇ
Ｂ６ ０．５　 ５．０　 ６．３９±０．０７ｃ 　健壮，生长慢 Ｈｅａｌｔｈｙ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｎｇ，ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｌｏｗｌｙ
述，本试验中芡欧鼠尾草适宜生根培养基为１／２ＭＳ＋
０．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ。芡欧鼠尾草试管苗移栽成活率较
高，在温室炼苗、移栽后２０ｄ，新叶长出，生长旺盛，移
栽成活率达９７％。生长于温室和大田中的植株长势
均较好，叶色浓绿（图１）。
３　讨论与结论
在植物组织培养中，植物细胞受到包括生理、形
态、生化等多因素的影响，其中外植体和植物激素是关
键的制约因素。唇形科鼠尾草属植物丛生芽诱导常用
的外植体多为叶片、茎段、茎尖、顶芽［１６－１９］，较少有关种
子作为外植体的报道［２０－２２］。成熟种子同其它类型外植
体相比，取材容易，受消毒的影响小，且不受季节和植
株发育时期等因素的限制，具备取材方便、操作简单等
特点。因此，成熟种子作为外植体进行组织培养建立
一个高频的植株再生体系成为大多数研究者的首
选［２３］。所以，本研究选择的外植体为芡欧鼠尾草成熟
的种子。
６９３
第３期 李伟丽　等：芡欧鼠尾草的组织培养和快速繁殖
ｈｔｔｐ：／／ｃｙｋｘ．ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
表３　不同培养基对移栽苗生根的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　ｒｏｏｔｉｎｇ
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
培养基＋ＮＡＡ
Ｍｅｄｉｕｍ＋ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
平均生根数
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｎｕｍｂｅｒ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
Ｃ１ １／２ＭＳ　 ９０．０±６．００ｂ ３．１５±０．１７ｆ ＋
Ｃ２ １／２ＭＳ＋０．１　 ９８．０±２．００ａ ３．８６±０．０６ｅ ＋＋
Ｃ３ １／２ＭＳ＋０．２　 １００．０±０．００ａ ４．４４±０．０７ｄ ＋＋＋
Ｃ４ １／２ＭＳ＋０．３　 １００．０±０．００ａ ４．８７±０．０５ｃ ＋＋＋
Ｃ５ １／２ＭＳ＋０．４　 １００．０±０．００ａ ５．２９±０．０４ｂ ＋＋＋
Ｃ６ １／２ＭＳ＋０．５　 １００．０±０．００ａ ５．６８±０．１５ａ ＋＋＋
　　此外，在植物组织培养中，植物生长调节剂用量虽
然微小，但不可缺少［２４］。植物激素起着传递遗传物质
的脱分化、再分化等发育信号的作用［２５］。植物激素中
细胞分裂素的主要作用是促进细胞分裂，诱导愈伤组
织［２６］。在鼠尾草植物愈伤组织诱导中，６－ＢＡ是重要
的激素之一，对愈伤组织的诱导起决定性作用。本研
究发现，外植体在仅含６－ＢＡ的培养基上也能诱导出
愈伤组织，这与鼠尾草属其它植物研究结果不同［２１］。
分析原因可能是基本培养基种类，鼠尾草种类、材料部
位和激素浓度的不同造成的，这一问题仍有待进一步
研究。值得一提的是，愈伤组织诱导中细胞分裂素和
生长素的比例尤为重要［２７］。根据前人研究可知，６－ＢＡ
（０．４～３．０ｍｇ·Ｌ－１）与ＮＡＡ（０．０６～１．０ｍｇ·Ｌ－１）的
比值通常在６～１０，本研究所加６－ＢＡ和ＮＡＡ配比符
合这一范围。
有研究表明，在继代培养过程中，需附加外源生长
素来维持愈伤组织的增殖和生长，生长素进入愈伤组
织的细胞后，诱发一系列生理效应，进而维持细胞在继
代培养过程中正常的生理活动［２８］。适当增加 ＮＡＡ
的浓度有利于提高不定芽的增殖率。本研究在增殖培
养中提高了 ＮＡＡ 的含量比例。ＮＡＡ 浓度为０．５
ｍｇ·Ｌ－１时，不定芽增殖率随６－ＢＡ浓度增加而下降，
且最高增殖率时６－ＢＡ浓度为３．０ｍｇ·Ｌ－１，这一结果
与沙红和瘳康［１７］指出的当 ６－ＢＡ 浓 度 高 于 ０．８
ｍｇ·Ｌ－１时，鼠尾草增殖倍数开始减少的观点有一定
差异。
根据沙红和廖康［１７］的研究得知，１／２ＭＳ培养基的
生根效果优于 ＭＳ培养基，生根率最高为７０％。本研
究发现，在完全不含植物生长调节剂的１／２ＭＳ培养
基，生根率达到９０％，更有利于根的生成，且再生植株
长势也较好。因此，１／２ＭＳ培养基较适合于芡欧鼠尾
草组培苗的生根培养。这一结果也与房师梅等［１８］对
丹参（Ｓ．ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ）组培快繁技术的研究结果一
致，而与王宗霞和康慧［１２］对蓝花鼠尾草（Ｓ．ｆａｒｉｎａ－
ｃｅａ）生根的研究结果相反。
本研究用种子作外植体，试验材料取材容易，数量
大。将种子接种在诱导培养基上，直接长出愈伤的同
时，又能分化出芽，而且同步诱导愈伤和芽的频率高，
转入生根培养基中９ｄ左右形成完整植株；不仅简化
了操作过程，而且大大缩短了培养时间，节省了生产成
本，可批量生产，应用价值高。再生体系的建立不仅使
芡欧鼠尾草的大规模快繁生产成为可能，还为今后芡
欧鼠尾草优质种质资源再生体系的构建以及生理生化
研究等方面提供了技术保障。
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（责任编辑　武艳培）
《草业科学》２０１６年征订启事
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国内外公开发行的综合性科技期刊。本刊为“中文核心期刊”、“中国科技核心期刊”和ＣＳＣＤ核心库来源期刊，并
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态等。本刊结合草业科学学科发展和科技期刊的定位，目前主要设有专论、前植物生产层、植物生产层、动物生产
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