全 文 ：HPLC法测定新疆鼠尾草各部位
6, 7-去氢罗列酮的含量
热娜·卡斯木 , 张　火宣 , 堵年生 , 常军民 , 帕丽达 ,王新玲 , 王怀安
(新疆医科大学药学院天然药物化学教研室 ,新疆　乌鲁木齐　 830054)
摘要: 目的: 了解二萜类有效成分中 6, 7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。 方法: 采用 HPLC测定
6, 7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结果: 确定了 6, 7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结论:
首次利用 HPLC法明确了 6, 7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量分布情况。测定平均回收率 99. 8% , RSD=
0. 92%。
关键词: HPLC; 6, 7-去氢罗列酮 ; 新疆鼠尾草
中图分类号: Q949. 777. 6; R962　　文献标识码: A　　文章编号: 1009-5551( 2002) 03-0231-02
　　鼠尾草属植物 ( Salv ia )在天然界具有广泛的
分布 ,著名的传统中药丹参 ( Salvia m ilt iorihiza
Bunge)就是鼠尾草属植物中的一种 ,它长期用于心
血管系统及妇科疾病的治疗 [1 ]。 Luo等 [2 ]研究表明 ,
从丹参中提取分离得到的主要活性有效成分为丹参
酮 IIA(图 1)。本课题组为探索和寻找丹参在新疆的
代用品 ,对新疆鼠尾草 ( Salv ia deserta Schang ) ,亦
称新疆丹参进行了研究 [ 3] ,分离得到了 6, 7-去氢罗
列酮 [4 ] (图 2) ,并证实其具有抗心肌缺血等作用 [5 ]。
由于新疆鼠尾草根部较细小 ,有效利用率低。根据文
献调查 ,新疆鼠尾草其它各部位是否存在有 6, 7-去
氢罗列酮及它的含量高低这个工作至今还未开展。
因此 ,本研究采用 HPLC法测定新疆鼠尾草各部位
中 6, 7-去氢罗列酮的含量。
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O
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图 1　丹参酮Ⅱ A结构
O
OH
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图 2　 6, 7-去氢罗列酮结构
1　材料与方法
1. 1　仪器　 Anglent 1100高效液相色谱仪:新疆鼠
尾草采自乌鲁木齐市北郊 ; 6, 7-去氢罗列酮由本校
天然药物化学教研室提供 (熔点和光谱数据符合文
献值 ) ;甲醇 ( GR)购自北京化工厂。
1. 2　方法
1. 2. 1　色谱条件　色谱柱: SU PELCO SIL LC-18
( 4. 6× 250 mm , 5μm)。流动相:甲醇∶ 0. 1%三氟乙
酸 ( 82∶ 18)。检测波长为 254 nm , 柱温 40℃ ,流速
1. 0 m l /min。
1. 2. 2　提取溶剂选择　分别用环己烷、氯仿∶甲醇
( 3∶ 7)、甲醇提取相同量的样品。 结果证明: 氯仿
∶甲醇 ( 3∶ 7)的提取效率最高。
1. 2. 3　对照品溶液的制备　精密称取 6, 7-去氢罗
列酮对照品 8. 0 mg ,置 10 ml容量瓶中 ,加甲醇溶
解至刻度。再精密吸取 0. 1 m l置 5 ml容量瓶中 ,甲
醇定容。制成 16μg /ml的标准对照液。精密吸取 16
μg /m l 6, 7-去氢罗列酮对照液 2、 4、 6、 8、 10、 12μl分
别进样。
1. 2. 4　供试品溶液的制备　精密称取样品粉末
1. 000 g ,置 25 ml容量瓶中 ,加氯仿∶甲醇 ( 3∶ 7)
至刻度。超声提取 30 min。静置 ,待溶液澄清 ,精密
吸取上清液 10. 0 ml置 10 m l圆底烧瓶中 ,回收溶
剂至干 ,残渣用甲醇溶解并定容至 5 m l。0. 45μm的
微滤膜过滤后进样 10μl。
2　结果与分析
2. 1　色谱曲线　 6, 7-去氢罗列酮对照品色谱曲线
见图 3;新疆鼠尾草供试品色谱曲线见图 4。
2. 2　测得进样量与峰面积的关系　见表 1。
2. 3　精密度实验　取 16μg /ml对照液连续进样 3
μl,共 6次 ,峰面积为: 63. 84, 66. 15, 65. 67,
64. 57, 65. 31, 63. 82。 RSD= 1. 49% 。
231新疆医科大学学报　 JOURNAL OF XIN JIAN G MEDICAL UNIVERSITY　 2002 Sep. , 25( 3)
作者简介:热娜· 卡斯木 ( 1962- ) ,女 (维吾尔族 ) ,新疆乌鲁木齐市 ,博士 ,副教授 ,研究方向:天然药物有效成分及药效学研究。基金项目:国家“ 863”高新技术预演课题。
2. 4　样品含量测定结果　见表 2。
图 3　 6, 7-去氢罗列酮对照品色谱图
图 4　新疆鼠尾草供试品色谱图
表 1　进样量与峰面积的关系
进样体积 (μl ) 进样量 (μg) Area
2 0. 032 40. 61
4 0. 064 83. 68
6 0. 096 132. 78
8 0. 128 170. 10
10 0. 160 220. 62
12 0. 192 258. 99
　　注: r= 0. 999 4
表 2　样品含量测定结果 (n= 6, μg /g )
Area 含量 平均含量 RSD%
85. 05 79. 88
85. 91 80. 75
83. 82 78. 75
83. 96 79. 00 79. 65 0. 97
85. 45 80. 25
84. 24 79. 25
2. 5　稳定性实验
2. 5. 1　日内精密度　取一样品溶液 ,每间隔 1小时
进样 3μl,峰面积如下: 536. 75, 538. 71, 540. 36,
539. 25, 537. 79。 RSD= 0. 26% 。
2. 5. 2　日间精密度　取一样品溶液 ,每间隔 24小
时进样 3μl,峰面积如下: 543. 01, 536. 75, 541. 81,
537. 79。 RSD= 0. 56%。
2. 6　加标回收试验　精密称取样品粉末 1. 000 g,
置 25 ml容量瓶中 ,分别加入 160μg /m l对照液
0. 20、 0. 40、 0. 60 ml,各 3份 ,以下同样品处理法。进
样 10μl,结果见表 3。
表 3　回收试验结果
加标量 Area 检测量 (μg ) 回收率 (% ) 平均回收率 (% ) RSD(% )
0. 025 6 119. 8 0. 089 2 99. 6
0. 025 6 119. 3 0. 088 8 98. 0
0. 025 6 120. 0 0. 089 4 100. 4
0. 051 2 155. 2 0. 115 0 100. 2
0. 051 2 154. 8 0. 117 4 99. 6 99. 8 0. 92
0. 051 2 155. 7 0. 115 4 100. 9
0. 076 8 190. 1 0. 140 4 99. 8
0. 076 8 189. 0 0. 139 6 98. 8
0. 076 8 191. 1 0. 141 0 100. 6
方法学考察结果 , RSD均 < 2% ,说明采用
HPLC法测定 6, 7-去氢罗列酮含量 ,方法可靠。
3　结论
实验未发现新疆鼠尾草叶、茎、花中含有 6, 7-
去氢罗列酮 ,只有根中含有被测组份含量最高 (图
3, 4)。本文通过 HPLC法测定 6, 7-去氢罗列酮在新
疆鼠尾草各部位的含量 ,首次对其进行了量化 ,补充
了鼠尾草属植物中 6, 7-去氢罗列酮在各部位的分
布资料 ,为如何进一步有效利用该属植物提供了新
思路。
参考文献:
[1 ]　 Pharmacopoeia Committee of th e Heal th Minist ry of th e Reo-
ple s Republic of China( ed. ) , “ Pharmacopoeia of people s Re-
public of China,” [M ]. Vol. 1. Guangdong: Guangdong Scien-
ti fic Techn ologic Publis her, 1995. 62-63.
[2 ]　 Luo HW, Wu BJ, Wu MY, et al. Studyon isolated com pou-
nds f rom salvia mil t iorih iza Bunge. Ph ytoch emist ry, 1985,
24: 815-817.
[ 3]　 Yasuhi ro T, Rena K, Jian XL, et al. Cons ti tuents of roots of
Salvia deserta Sch ang [ J] . Ch em Ph arm Bull. 1998, 46 ( 1):
107-112.
[4 ]　常军民 ,热娜· 卡斯木 ,堵年生 .新疆鼠尾草化学成分研究 [ J ].
天然产物研究与开发 , 2001, 13( 1): 27-29.
[ 5]　何新 ,常军民 ,迪丽拜尔 ,等 . 6, 7-去氢罗列酮对实验性心肌缺
血的保护作用 [ J ].中国药理学通报 , 2000, 16( 5): 596-597.
[收稿日期: 2002-05-17 ]
An assay of 6, 7-Dehydroroyleanone of each part
of Salv ia deserta Schang by HPLC
Rena, ZHANGXuan, DU Nian-sheng, et al
(College of Pharmacy ,X injiang Medical University ,Urumqi 830054,China )
Abstract: Objective: To assay of 6, 7-Dehydro royleanone o f each part of Salvia deserta Schang. Methods:
Determinated by means of HPLC. Results: Completely cor robo rated 6, 7-Dehydro royleanone of each pa rt
o f Salv ia deserta Schang. Conclusion: Dist ributiv e condi tion of 6, 7-Dehydro ro yleanone o f each part of
Salvia deserta Schang was assigned by means of HPLC fo r the first time. The average recovery was 99.
8% , RSD= 0. 92% .
Key words: HPLC; 6, 7-Dehydroroy leanone; Salvia deserta Schang
232 新疆医科大学学报　 JOURNAL OF XIN JIAN G MEDICAL UNIVERSITY　 2002 Sep. , 25( 3)