全 文 ：园艺学 现代农业科技 2010年第 9期
基金项目 贵州省林业厅中药专项（2007-07）；贵州省黔南州科技局中
药现代化专项（2007-01）。
作者简介 孙云玲（1958-），女，贵州都匀人，工程师。研究方向：植物
组培。
收稿日期 2010-04-13
表 1 不同培养基及激素组合对马蓝嫩梢丛生芽诱导与生长的影响
培养基 激素组合∥mg/L MAP∥mg/L 蔗糖∥g/L 诱导率∥% 生长表现
MS 6-BA 1.0+NAA 0.1 50 20 75 长势较好
MS 6-BA 2.0+NAA 0.3 100 25 58 长势一般，高生长慢
MS 6-BA 3.0+NAA 0.5 - 30 36 芽多不伸长，部分玻璃化
1/2 MS 6-BA 0.1+IBA 0.2 150 15 84 长势好
1/2 MS 6-BA 0.3+IBA 0.4 200 20 90 长势好，丛生芽易于分切
1/2 MS 6-BA 0.5+IBA 0.6 - 25 62 长势一般
马蓝 （Baphicacanthus cusia （Nees）Bremek）为爵床科灌
木状多年生草本植物，根、茎、叶均可入药。其根和茎作为南
板蓝根入药，干燥叶作为大青叶入药，既是临床上的常用
中药，也是许多中成药的主要原料。马蓝茎叶加工的成品
青黛，靛玉红含量高，质量优于其他同类产品 [1]。据记载：马
蓝主产于两广地区、贵州及云南等地，具有清热解毒、凉血
的功效，主治热病发斑、流脑、流感、肺炎、小儿发热惊痢、咯
血、吐血；外用治丹毒；用于治疗感冒、上呼吸道感染、咽炎
和肝炎等，用其全株水煎服，治疗流行性乙型肝炎有较好的
疗效，为华南地区及东南亚常用的治疗呼吸道疾患的抗病毒
良药。因此，马蓝有较大的市场潜力 [2]。由于马蓝产种量少，
传统的栽培方式都是在春季采用扦插繁殖育苗移栽，需要
较多的繁殖材料扦插枝条，且繁殖速度慢，种质退化严重 [3]，
难以扩大生产并满足市场需求。植物组织培养技术具有效
率高、生长快、周期短、重复性强、可全年生产等优点 [4-6]，利
用组织培养技术对马蓝进行快繁具有广阔的前景。有关马蓝
外植体嫩梢离体快繁技术还未见报道，笔者对马蓝的微繁
殖技术进行了大量的试验和研究，以期找到马蓝离体快繁
的最佳培养基，为其资源的研究应用提供科学的理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试外植体为马蓝植株嫩梢，由独山县甲里镇提供。
1.2 试验方法
1.2.1 消毒。将采回的生长健壮、无病虫害的外植体嫩梢剪
去叶片，用洗衣粉清洗干净，置于流水中冲洗 0.5～1.0 h，无
菌水冲洗 2 次，在超净工作台上（经紫外光灭菌 30 min），用
75%酒精浸泡 30 s，无菌水冲洗 2次；再用 0.15%的 HgCl2浸
泡 10 min，无菌水冲洗 5 次；用灭菌滤纸吸干表面水分后，
将外植体切取 0.5～1.0 cm 的茎梢和带腋芽茎段，接种到经
过高温灭菌含有不同激素用量和配方的诱导培养基中。
1.2.2 培养基。以不同浓度的 MS 为基本培养基，根据不同
阶段的培养目的，添加不同种类、浓度和配比的植物生长调
节剂和蔗糖 20%～30%，琼脂 0.5%，pH 值 5.8，设置不同浓
度、配比处理（表 1）。
1.2.3 培养条件。培养室温度 20～25℃，光照强度 2 000～3 000
lx，光照时间 12 h/d。
1.2.4 移栽。当生根幼苗根长至 1 cm 以上时，在室内打开
瓶盖炼苗 3～5 d；将生根植株从瓶中取出，洗净根部粘附的
培养基，栽植于装有砂质壤土的营养袋或苗圃地中；浇透
水，搭小拱棚覆盖塑料膜保湿，每隔 2～3 d 少量浇水，以保持
土壤湿润。当幼苗长出新叶后缓慢增加光照，降低湿度，直
至完全见光，然后进行常规管理。
2 结果与分析
2.1 外植体的诱导
马蓝嫩梢可不经过愈伤组织直接诱导丛生芽，不同培
养基及激素组合丛生芽诱导率不同，生长表现不同。从表 1
可以看出，1/2 MS 培养基的诱导效果优于 MS 培养基，其中
以 1/2 MS+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.4 mg/L+MAP 200 mg/L 的培
养基 （含蔗糖 20 g/L、琼脂 5 g/L，pH 值 5.8）的诱导效果最
好，诱导率达 90％。接种 7 d 后顶端抽出新芽，腋芽开始萌
发；培养 40 d 后，分化出的丛生芽长势好、伸长快、易于分
切，便于进行继代培养。
2.2 继代增殖培养
因初代诱导培养获得的试管苗数量有限，还需经过多
马蓝组培快繁技术研究
孙云玲 姚洪源 田华林 李廷媛 罗 源 侯 伟
（贵州省黔南州林业科学研究所，贵州都匀 558000）
摘要 以马蓝嫩梢为外植体进行组培快速繁殖，选用 MS 培养基为基本培养基，添加不同浓度及种类的植物生长调节物质，接种后进
行对比试验。结果表明，1/2 MS+蔗糖 20 g/L+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.4 mg/L+MAP 200 mg/L 诱导外植体芽的生长效果最佳，产生的丛生芽易于
分切，便于进行继代培养；MS+蔗糖 30 g/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+MAP 100 mg/L 是继代培养的理想培养基，对促进丛生芽形成生长
效果最好，增殖倍数达 5.6倍；生根培养基选用 1/2 MS+蔗糖 20 g/L+IBA 0.6 mg/L+MAP 20 mg/L 为最佳，生根率达 100%。
关键词 马蓝；嫩梢；组织培养；快速繁殖
中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2010）09-0102-02
次继代增殖培养以获取大量增殖的无性材料，达到快速无 性繁殖的目的。在继代增殖培养中，芽的增殖速度是离体快
繁中最为重要的一个问题，增殖速度快在生产中才有应用
价值，决定增殖速度的最主要因子是材料本身的生理生化
状态，外植体的生理生化状态可通过适当的生长调节剂去
调节，也可通过及时继代培养得到改善。激素的浓度和种类
102
（上接第 101页）
肥力田纯氮 8 kg/667 m2、五氧化二磷 8 kg/667 m2、氧化钾 5
kg/667 m2；低肥力田氮 10 kg/667 m2、五氧化二磷 8 kg/667 m2、
氧化钾 6 kg/667 m2。
4 参考文献
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农业大学，2006：1-10.
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业科技，2007（15）：31.
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[J].中国农技推广，2006，22（4）：36-39.
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[6] 海拉提.无公害食葵高产栽培技术[J].新疆农业科技，2007（6）：33.
培养基 激素组合∥mg/L MAP∥mg/L LH∥mg/L 芽增殖倍数∥倍 生长表现
MS 6-BA 0.5+NAA 0.1 - - 3.5 长势一般
MS 6-BA 1.0+NAA 0.1 80 - 5.8 长势好，高生长较快
MS 6-BA 2.0+NAA 0.1 50 - 6.1 丛芽多，高生长慢，少量玻璃化
MS 6-BA 3.0+NAA 0.1 - - 2.3 芽密而多，不生长，玻璃化
MS 6-BA 1.0+NAA 0.2 100 - 5.6 长势好，高生长快
MS 6-BA 1.0+NAA 0.5 - 50 3.2 叶片下垂，黄化，高生长较慢
MS 6-BA 1.0+NAA 0.2 50 50 2.7 叶片微卷，高生长较慢
MS 6-BA 1.0+NAA 0.15+GA3 0.4 20 20 4.1 叶片卷曲，高生长慢
表 2 不同培养基对继代增殖的影响
注：蔗糖为 30 g/L，生长素 IBA 如同表 1 也做了不同浓度的继代增殖试验，效果略差于 NAA。
对接种的芽分化出芽、伸长和生长情况的影响比较明显。不
同浓度 6-BA 对芽增殖的效果不同，随着 6-BA 浓度的增
加，芽的增殖倍数不断增加，芽的长度则表现为随浓度升高
而降低，壮苗效果在减弱，芽体生长受到抑制，部分芽苗出
现玻璃化的现象（表 2）。
将诱导出的丛生芽切成 0.5～1.0 cm 的茎梢和带腋芽茎
段接种于含有不同浓度生长调节物质的芽增殖培养基上，1
周后基部开始膨大，茎段叶腋处萌发出多个侧芽 。结果表
明：芽的增殖倍数还与芽的长度有关，芽越长腋芽越多，增
殖倍数也越高。因此，选择分化率为 100%、增殖倍数达 5.6
倍的 MS+蔗糖 30 g/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+MAP
100 mg/L 培养基作为丛生芽增殖的最佳配方，既可保证较
高的增殖倍数，又可降低芽苗的玻璃化。
2.3 生根培养
将丛生芽中株高 2 cm 以上的单芽剪下，切割成 1.5～3.0
cm 的茎梢和带腋芽茎段，置于含不同浓度生长素和 MAP
的培养基上诱导生根。从表 3 可以看出，芽苗在 5 种不同的
生根培养基上均能诱导生根，其中以 1/2 MS+蔗糖 20 g/L+
IBA 0.6 mg/L+MAP 20 mg/L 的培养基效果最好，接种 8 d 左
右开始生根，15 d 后生根达高峰，20 d 后根系发育良好，每
株苗有 5～13条根，根长 1～3 cm，生根率可达 100%。
2.4 炼苗移栽
试管苗生根培养 20 d 左右植株形成完整根系后，在散
射自然光下炼苗 3～5 d，即可移栽到经过土壤消毒剂消毒的
苗圃中，移栽后用 1 000 倍多菌灵叶面喷施灭菌。成活率达
95%以上，期间除注意保温、保湿、适当遮荫外，土壤湿度不
宜太大，避免幼苗死亡。
3 结论与讨论
植物组织培养中常用 MS培养基，培养基中外源激素的
种类和浓度及不同的配比组合对植物外植体的诱导及分化
起着重要作用。长期以来，人们广泛地把生长素和细胞分裂
素运用于组培中，两者的比例决定着根和芽的分化。一般来
说，当其比值高时，有利于长根，低时有利于长芽，中间有利
于愈伤组织的诱导和分化。本试验针对马蓝的诱导、增殖、
生根等不同阶段的培养目的，选用不同的生长调节物质细胞
分裂素 6-BA、生长素 NAA 和 IBA、赤霉素 GA3，又根据马蓝
苗期需氮肥较多的特点，添加 MAP 和 LH 含氮量高的营养
剂，附加蔗糖 20%～30%，琼脂 0.5%，pH 值 5.8 以不同浓度
的 MS 为基本培养基的基础上，设置不同浓度、配比处理 50
余种，进行了大量的试验和研究，从中找出适合马蓝不同阶
段培养的最隹培养基。试验表明，马蓝嫩梢组培诱导比较易
分化出芽，可不经过愈伤组织直接诱导丛生芽，再通过反复
切割试管苗茎段，并利用其腋芽萌发形成再生植株及基部
膨大出现丛生芽，可达到快速无性繁殖的目的。由于这种方
法不经过愈伤组织诱导和再分化阶段，因而可避免培养过
程中所导致的性状变异，可成功培育出马蓝植株，并应用于
生产。研究发现，移植到田间的马蓝组培苗基部萌芽能力
强、生长整齐旺盛、叶色浓绿，降低了生产上单位面积的用
苗量，获得了比较令人满意的结果。
4 参考文献
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培养基
NAA
mg/L
IBA
mg/L
MAP
mg/L
生根率
% 生根状况
1/2 MS 0.6 - 20 80 较粗，数量较少
1/2 MS 1.0 - 40 96 中粗，数量较多
1/2 MS - 0.6 20 100 中粗，数量多
1/2 MS - 1.0 40 92 较细，数量多
1/2 MS 0.2 0.2 30 84 中粗，数量较多
注：蔗糖为 20 g/L。
表 3 不同浓度生长素对生根的影响
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孙云玲等：马蓝组培快繁技术研究
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