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中华苦荬菜干物质和有效成分积累动态研究



全 文 :第36卷 第4期 林 业 科 技 Vol. 36 No. 4
2 0 1 1 年 7 月 FORESTRY SCIENCE & TECHNOLOGY July 2 0 1 1
文章编号:1001 - 9499 (2011)04 - 0029 - 03
中华苦荬菜干物质和有效成分积累动态研究
王璐璐1 杨 莉1 李岳桦2 韩 梅1
(1. 吉林农业大学中药材学院,长春 130118;2. 长春三真实业有限公司,吉林 长春 130024)
摘要:采用称重法测定中华苦荬菜干物质积累程度,UV法测定其总黄酮和总三萜含量,分析中华苦荬菜不同生
长发育时期干物质积累及有效成分积累的变化。结果表明,中华苦荬菜的干物质积累呈“S”形曲线变化,在 4
月底至 6 月初逐渐增加,6 月上旬达到高峰,随后降低;总黄酮的含量逐渐增加,在 6 月初达到顶点;总三萜的
含量在 4 月末最高,之后逐渐降低;适宜采收期在 5 月末 ~ 6 月初之间。
关键词:中华苦荬菜;干物质;总黄酮;总三萜
中图分类号:S 58,Q 946 文献标识码:A
中华苦荬菜 (Ixeris chinensis)亦称山苦荬、小
苦荬、活血草、隐血丹,为多年生草本植物,广泛
分布于我国南北各省区,前苏联、朝鲜、日本也有
分布[1 - 2]。全草可以入药,性寒味苦,具有清热解
毒、解痉镇痛、凉血消肿等功效,用于治疗肺痈、
乳痈、痢疾、肠炎等多种疾病[2 - 4]。中华苦荬菜既
是良好的中药材,又是营养丰富的优良野菜,主要
含有萜类及黄酮类等多种化学成分。药理研究表
明,其具有良好的抗烟碱、抗氧化、抗病毒及降低
血脂和胆固醇的作用[5 - 6]。本研究测定了不同采收
时期中华苦荬菜干物质及主要次生代谢产物的含
量,为中华苦荬菜质量标准的制定以及进一步开发
利用提供科学依据。
1 试验材料与方法
1. 1 材料及仪器试剂
试验样品 2010 年采于吉林农业大学校园,由
吉林农业大学野生植物资源教研室韩梅教授鉴定
为中华苦荬菜。
仪器与试剂包括:DL - 1000E 超声波清洗器
(上海之信仪器有限公司) ;UV - 1700 紫外 - 可
见分光光度计 (日本岛津) ;AUY 220 电子天平
(日本岛津) ;HH -6 数显恒温水浴锅。标准品芦
丁、齐墩果酸购自中国药品生物制品检定所,其
余试剂均为分析纯。
1. 2 中华苦荬菜干物质的测定方法
从 4 月 25 日幼苗期开始取样,直至 6 月 22
日枯萎期。每次选取生境相似的环境,随机取样
10 株,洗净根上泥土,室内测量各部分鲜重等指
标,然后于 60℃下烘干至恒重,测定其干重。
1. 2. 1 黄酮类成分标准曲线的制作
精密称取芦丁对照品10. 0 mg,置于 50 mL容量
瓶中,加无水乙醇定容到刻度,摇匀。精密吸取此
溶液 0、1、2、3、4、5 mL,分别置于 25 mL 容量瓶
中,加无水乙醇至 5 mL,再分别加入 4% NaNO2 溶
液 1 mL,摇匀;放置 6 min 后,加 10% Al (NO3)3
溶液 1 mL,摇匀;放置 6 min 后,加入 10% NaOH
溶液 10 mL,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,放置
15 min后,以第 1 瓶做空白对照,在波长 510 nm处
测定其紫外吸光值[7 -8]。最后,以吸光度 (y)为纵
坐标,芦丁浓度 (x)为横坐标绘制标准曲线,回归
方程为 y =14. 704x -0. 0016,R2 =0. 9999。
精密度试验:精密吸取同一样品液 5mL,按
照 1. 2. 1 方法做显色测定,计算得精密度 RSD =
0. 719%。
稳定性试验:精密吸取同一样品液 5mL,按
照 1. 2. 1 方法做显色测定,每隔10 min测定 1 次,
结果显示,60 min 内样品吸收度基本稳定,RSD
= 0. 674%。
重复性试验:取同一样品 5 份,每份 1 g依法
提取,按照 1. 2. 1 项下方法做显色测定,结果显
示 RSD = 2. 517%。
加样回收率试验:精密吸取已知含量样品液 5
份,分别加入芦丁标准品溶液 1 mL (0. 2 mg /L) ,
按照 1. 2. 1项下方法做显色测定,结果显示,平均
林 业 科 技 第 36 卷
回收率为 100. 66%,RSD =1. 944%。
1. 2. 2 三萜类成分标准曲线的制作
精密称取齐墩果酸对照品 4. 0 mg 置于 50 mL
容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀。精密
吸取此溶液 0、0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0 mL于
试管中,水浴加热挥发溶剂。在每支试管中精密
加入 0. 40 mL 5%香草醛 -冰醋酸溶液和 1 mL 高
氯酸,在 60℃恒温水浴中加热 15 min 后冷却至室
温,加入 5. 0 mL 冰醋酸,摇匀后室温放置 10
min。以第 1 支试管做空白,在波长 550 nm 处测
定其紫外吸光值。最后,以吸光度 (y)为纵坐
标,齐墩果酸质量 (x)为横坐标绘制标准曲线,
回归方程为 y = 7. 7143x - 0. 0039,R2 = 0. 9995。
精密度试验:精密吸取同一样品液 0. 2mL,
按照 1. 2. 2 方法做显色测定,计算得 RSD =
1. 854%。
稳定性试验:精密吸取同一样品液 0. 2 mL,
按照 1. 2. 2 方法做显色测定,每隔 10 min 测定
1 次,结果显示,40 min内样品吸收度基本稳定,
RSD = 1. 577%。
重复性试验:取同一样品 5 份,每份 1 g依法
提取,按照 1. 2. 2 方法显色测定,结果显示 RSD
= 1. 288%。
加样回收率试验:取已知含量样品液 5 份,
分别加入齐墩果酸标准品溶液 0. 2mL (0. 08 mg /
L) ,按照 1. 2. 2 方法做显色测定,结果显示平均
回收率为 99. 49%,RSD = 0. 950%。
1. 2. 3 中华苦荬菜有效成分的提取与测定
精密称取 1g 中华苦荬菜干粉,石油醚回流
2h,放入锥形瓶中并加入 80%乙醇 100mL 浸泡,
精密称量锥形瓶重量,在 45℃下超声提取 40min,
提取完成后补足失去的重量,提取液抽滤减压回
收后以乙醇定容至 100mL 容量瓶,得供试品溶
液。取供试溶液按上述方法做显色,测定其紫外
吸光值并计算结果。
中华苦荬菜乙醇浸出物及灰分测定按照 2005
年版药典测定[11]。
2 结果与分析
2. 1 中华苦荬菜生长发育期的划分
中华苦荬菜宿根 4 月下旬开始萌发,5 月初
出苗展叶;随着温度的升高,生长发育速度加快,
进入营养生长旺盛期;营养积累达到一定程度,
进入生殖生长,5 月中旬形成花枝并出现花蕾。
中华苦荬菜在 5 月下旬零星开花,6 月上旬进入
盛花期,6 月下旬果实成熟。根据中华苦荬菜的
生长发育规律,将其生长发育期初步划分为:萌
动期、出苗期、快速生长期、现蕾期、开花期和
果实成熟期。
2. 2 中华苦荬菜不同生长期干物质的积累动态
2010 年 4 月 25 日开始,根据中华苦荬菜各生
长期的特点定期采样,并对各时期进行干物测定
分析。结果 (图 1)显示,中华苦荬菜全株干物
质累积量随着生长发育进度而呈 “S”形曲线增
加,生长前期干物质增加缓慢,5 月上旬开始干
物质增长迅速,5 月中旬进入现蕾期后增加减慢,
在盛花期达到高峰;随后由于果实成熟、叶片干
枯,干物质含量下降。
图 1 中华苦荬菜干物质含量动态变化
2. 3 中华苦荬菜不同生长期总黄酮和总三萜的积
累动态
各时期中华苦荬菜总黄酮和总三萜的积累动
态分析结果 (图 2,图 3)显示,中华苦荬菜总黄
酮含量在苗期较少,随着生长发育进入花期,总
黄酮含量升高,在 6 月 7 日达到峰值 4. 63%,之
后进入果实成熟期,总黄酮含量开始下降。中华
苦荬菜不同时期总黄酮含量具有明显的差异。中
华苦荬菜总三萜含量在苗期最高,达到 2. 84%,
随着生长发育总三萜含量迅速降低,在进入花期
后维持在一定水平。
图 2 中华苦荬菜总黄酮含量动态变化
03
第 4 期 王璐璐等:中华苦荬菜干物质和有效成分积累动态研究
图 3 中华苦荬菜总三萜含量动态变化
2. 4 中华苦荬菜乙醇浸出物和灰分的积累动态
各时期中华苦荬菜乙醇浸出物和灰分的积累
动态分析结果 (图 4,图 5)显示,中华苦荬菜乙
醇提取物在苗期含量最高,随着生长发育,乙醇
提取物含量下降;在现蕾期略有回升,但随着生
殖发育,又逐渐下降,在果实成熟期降低到最低
点。灰分含量在苗期最低,随着生长发育,逐步
升高,在现蕾期略有下降;随着生殖发育,灰分
含量又再次升高,在盛花期达到最高峰,进入果
实成熟期后又开始下降。乙醇提取物和灰分基本
成反比关系,即乙醇提取物含量高时,灰分含量
低。
图 4 中华苦荬菜乙醇浸出物含量动态变化
图 5 中华苦荬菜灰分含量动态变化
3 讨 论
3. 1 中华苦荬菜的干物质积累在营养生长期最
快,进入生殖生长后缓慢增加;中华苦荬菜总黄
酮的含量在现蕾期后增长较快,盛花期后呈负增
长趋势;总三萜的含量在苗期最高,随着生长发
育,含量逐渐降低。
3. 2 中华苦荬菜的适宜采收期应确定在既能保证
质量,又能保证产量相对最高的结合点上。研究
表明,中华苦荬菜在现蕾期前已达到产量的最大
增长点,后期的增长缓慢 ;总黄酮的含量一直增
长,到盛花期增长到最高点,此后呈下降趋势;
醇溶性浸出物的含量在苗期最高,随着生长发育
逐渐降低。综合考虑以上因素,在 6 月份采收,
中华苦荬菜的质量和产量均能保持在一个较高的
水平,此时为中华苦荬菜的最佳采收期。
参 考 文 献
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第 1 作者简介:王璐璐 (1985 -) ,女,硕士,研究
方向:植物生态学。
收稿日期:2011 - 04 - 06
(下转第 48 页)
13
林 业 科 技 第 36 卷
量的原则,可采用淋施或叶片喷施,淋施即与灌
溉同时进行,将一定比例的复合肥和微肥溶解后
加入贮水罐中搅拌均匀,然后随水喷淋。叶面喷
施可将尿素(0. 1%)和磷酸二氢钾(0. 1%)溶解后
进行叶面喷施,每 10 天一次。炼苗初期(缓苗期)
尤其要加强水分管理,宜保持培养土湿润,以促
进成活。浇水的次数因天气状况、降雨状况以及
气温等实际情况而异,晴天每日浇 1 ~ 2 次;湿润
的情况下,可 3 ~ 4 天浇 1 次,应避免在夏、秋季
中午高温时段浇水。
(3)除草:苗株上袋后应及时拔草,拔除时
宜一手压紧植株另一手拔除杂草,单手拔除时常
会将植株一同拔出从而影响植株生长。
(4)病虫害防治:三角梅病虫害较少,主要
有炭疽病,一般出现在初夏阶段,可用甲基托布
津 800 倍液喷施即可。
参 考 文 献
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第 1 作者简介:赖瑞云 (1972 -) ,女,助理研究员,
从事园艺植物栽培生理研究。
收稿日期:
檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷
2011 - 04 - 26
(上接第 31 页)
Research of Dynamic Characteristic and Dry Matter
Accumulation and Active Component of Ixeris chinensis
WANG Lulu
(Jilin Agriculture University,Changchun 130118)
Abstract The accumulation of dry matter and changes of active component content and accumulation of
Ixeris chinensis was studied by weighing method to weight the dry matter and an UV method to determine
the content of totals flavonoids and triterpenoids. The results showed that dry matter gradually increased
from the end of April to the early June and got to the peak in early June,then gradually decreased;
totals flavonoids gradually increased and got to the peak in early June;totals triterpenoids was the highest
in the end of April,then reduce. Conclusion The optimal time for harvest is from the end of May to the
early June.
Key words Ixeris chinensis;Dry matter;Totals flavonoids;Totals triterpenoids
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