全 文 ：收稿日期:2013-10-30
作者简介:陈海娟(1979-) ，女，硕士，副教授，主要从事中藏药资源的开发和利用;Tel:0971-6307616，E-mail:haijuanchen84@ 163. com。
藏药长毛风毛菊的质量标准研究
陈海娟1，刘亚蓉2，刘学良2
(1. 青海师范大学生命与地理科学学院 /青藏高原环境与资源教育部重点实验室，青海 西宁 810008;2. 青
海省食品药品检验所，青海 西宁 810016)
摘要 目的:采集我国藏区长毛风毛菊样品，建立藏药长毛风毛菊的质量控制方法。方法:采用显微鉴别、薄
层色谱法对长毛风毛菊进行定性研究;采用 HPLC测定长毛风毛菊中绿原酸的含量。结果:绿原酸的进样量在 0. 21
～ 1. 57 μg范围内与峰面积线性关系良好，r = 0. 9998(n = 5)，平均加样回收率为 99. 11%，ＲSD 为 2. 3%(n = 9)。
结论:该方法专属性强，简便可行，重现性好，能全面、有效的控制长毛风毛菊药材的质量。
关键词 长毛风毛菊;资源;显微鉴别;薄层色谱鉴别;绿原酸;HPLC
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)03-0507-03
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 03. 020
菊科植物长毛风毛菊 Saussurea hieracioides
Hook. f. ，藏文为“莪吉秀”，又名“贝治牙扎”，以全
草入药，为藏族常用药材。分布在青海、四川、云南、
甘肃、湖北、西藏等地。生于海拔 4 450 ～ 5 200 m的
高山碎石土坡、高山草坡〔1-3〕。长毛风毛菊具有渗湿
利尿的功效，主要用于水肿、腹水、膀胱炎、小便不利
等症〔2〕。《晶珠本草》记载:“贝治牙扎”引泻腹
水〔4〕。文献〔5〕报道风毛菊属植物含倍半萜、黄酮、
甾体、三萜、有机酸、糖类等化合物，其药理作用主要
表现为抗肿瘤、抗炎、抗衰老和改善心血管系统机能
等。本实验对收集到的 8 个长毛风毛菊样品从显
微、薄层色谱鉴别、含量测定等方面进行研究，旨在
为控制长毛风毛菊药材的质量提供参考。
1 仪器与试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪，VWD检测器(安
捷伦科技有限公司);OLYMPUS CX31 生物显微镜
(日本奥林巴斯公司) ;XS105DU 电子天平(瑞士梅
特勒-托利多公司)。绿原酸对照品(中国食品药品
检定研究院，批号:110753-200413，供含量测定用)。
甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。
不同来源的长毛风毛菊样品收集情况见表 1。
经青海师范大学生命与地理科学学院马继雄副教授
鉴定为菊科植物长毛风毛菊 Saussurea hieracioides
Hook. f. 的全草。长毛风毛菊对照药材由青海省食
品药品检验所提供。
2 方法与结果
2. 1 粉末显微鉴别 黄绿色。非腺毛众多，大多
细长，有的弯曲，胞腔明显，多为单细胞，偶见多细
胞;花粉粒众多，球形，直径 35 ～ 52 μm，萌发孔沟 3，
外壁较厚，表面有颗粒状突起。叶表皮细胞呈不规
则形，不定式气孔类圆形，副卫细胞 4 ～ 5 个;草酸钙
方晶分布在叶肉细胞中;导管多为网纹导管和螺纹
导管，偶见具缘纹孔导管，直径 12 ～ 39 μm。见图 1。
表 1 长毛风毛菊药材样品收集情况
样品编号 采(收)集地 样品量 /g
1 青海省黄南州河南县 200
2 青海省互助县北山 200
3 青海省黄南州泽库 200
4 青海省金诃藏药药业股份有限公司 1000
5 西藏自治区藏药厂 1000
6 青海省西宁市八一路药材市场 500
7 青海省西宁市九康药材公司 500
8 青海省西宁市朝阳药材市场 500
2. 2 薄层色谱鉴别 取长毛风毛菊药材样品粉末
各 0. 5 g，分别加甲醇 20 mL，超声(250 W，50 kHz)
处理 10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1 mL使溶
解，作为供试品溶液。取长毛风毛菊对照药材 0. 5
g，同法制成对照药材溶液。取绿原酸对照品，加甲
醇制成每 1 mL 含 2 mg 的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典 2010 年版一部附录ⅥB)
试验，吸取上述 3 种溶液各 5 μL，点样于硅胶 G 薄
层板(青岛海洋化工厂)，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水
(10∶ 6∶ 1 ∶ 2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾
干，喷以 1%亚硝酸钠的甲醇溶液，在 105 ℃加热至
斑点显色清晰。日光下检视，供试品色谱中，在与对
照药材色谱和对照品色谱相应的位置上显相同颜色
的斑点。试验表明，此方法制备合理，色谱条件适
宜，背景干扰小，斑点清晰，分离度好。见图 2。
2. 3 含量测定
2. 3. 1 对照品溶液的制备:精密称取绿原酸对照
品适量，加 50%甲醇制成每 1 mL含 0. 0524 mg绿原
·705·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 3 期 2015 年 3 月
图 1 长毛风毛菊药材粉末图(×100)
1. 非腺毛 2. 气孔 3. 导管 4. 草酸钙方晶 5. 花粉粒
图 2 长毛风毛菊药材 TLC图
1 ～ 8. 长毛风毛菊药材 9. 对照药材 10. 绿原酸
酸的对照品溶液。
2. 3. 2 供试品溶液的制备:取不同产地的长毛风
毛菊样品粉末(过三号筛)约 0. 2 g，精密称定，分别
置 50 mL 量瓶中，加 50%甲醇约 40 mL，超声(250
W，50 kHz)处理 30 min，取出，放至室温，加 50%甲
醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 3. 3 色谱条件与系统适用性试验:十八烷基硅
烷键合硅胶色谱柱;以甲醇-0. 4%醋酸(15∶ 85)为流
动相;柱温为 25 ℃;检测波长为 327 nm。理论板数
按绿原酸色谱峰计算应不低于2 000。见图 3。
2. 3. 4 线性关系考察:分别精密吸取 0. 0524 mg /
mL的绿原酸对照品溶液 4、8、12、16、20、24、30 μL，
按“2. 3. 3”项下色谱条件测定，以进样量对峰面积
进行线性回归，得回归方程 y = 0. 0106x + 0. 6931，r
= 0. 9998，结果表明绿原酸在 0. 21 ～ 1. 57 μg 进样
量范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2. 3. 5 精密度试验:精密吸取对照品溶液 10 μL，
重复进样6次，按“2. 3. 3”项下色谱条件测定，记录
图 3 对照品(A)和长毛风毛菊药材(B)HPLC图
1. 绿原酸
峰面积，峰面积的 ＲSD 为 1. 0%。结果表明仪器精
密度良好。
2. 3. 6 稳定性试验:取“2. 3. 2”项下的供试品溶液
(青海省黄南州河南县) ，分别在制备后 0、2、4、8、
10、12 h，按“2. 3. 3”项下色谱条件测定，进样量为
10 μL。以绿原酸的峰面积计算，ＲSD 为 0. 8%。表
明供试品溶液在 12 h内稳定。
2. 3. 7 重复性试验:取同一长毛风毛菊样品粉末
(青海省黄南州河南县)6 份，每份约 0. 2 g，精密称
定，按“2. 3. 2”项下方法制备供试品溶液，“2. 3. 3”
项下色谱条件测定，分别进样 10 μL，以绿原酸的峰
面积计算，ＲSD为 1. 3%。表明方法重复性良好。
2. 3. 8 加样回收率试验:取已知含量的药材样品
(青海省黄南州河南县)9 份，每份约 0. 1 g，精密称
定，分别精密加入绿原酸对照品 3. 62、6. 52、10. 86
mg，按“2. 3. 2”项下方法制备供试品溶液，“2. 3. 3”
项下色谱条件测定，计算加样加收率。结果平均加
样回收率为 99. 11%，ＲSD为 2. 3%。
2. 3. 9 样品含量测定:精密称取 8 批长毛风毛菊
药材各 0. 2 g，按“2. 3. 2”项下方法制备供试品溶
液，“2. 3. 3”项下色谱条件测定，进样量为 10 μL，测
定色谱峰峰面积。计算 8 批长毛风毛菊样品中绿原
酸的含量，结果见表 2。
表 2 长毛风毛菊药材中绿原酸的含量(n =4)
样品编号 含量 /% ＲSD /%
1 1. 4 0. 82
2 4. 0 1. 88
3 1. 8 0. 43
4 2. 2 1. 63
5 4. 1 1. 52
6 1. 9 1. 01
7 1. 2 0. 96
8 1. 3 1. 12
3 讨论
·805· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 3 期 2015 年 3 月
由于长毛风毛菊产地较少、生长环境比较特殊，
仅在海拔在 3 500 m以上生长，天然生产比较缓慢，
加之野生长毛风毛菊资源不断减少，货源较为紧缺，
目前无栽培品种，因此样品采集和收集均较为困难。
本实验多次赴青海省黄南州河南县、互助县、湟中
县、贵南县等地采集样品，最终采集到 3 份长毛风毛
菊的野生小样。后又从市场收购青海产原料药材 4
份、西藏产原料药材 1 份，共计 8 份样品。
风毛菊属植物由于分布区域狭窄，同时又具有
较高经济价值，因而面临来自自然和人为因素的威
胁，有可能遭到严重破坏，但目前仍未引起足够重
视。合理开发和保护此类植物的生境和种质资源已
迫在眉睫，建议有关部门应尽快制定相关的规定，优
先发展引种栽培一些应用价值较高的濒危品种。
参 考 文 献
［1］陈艺林，石铸 . 中国植物志［M］．第 78(2)卷 . 北京:科
学出版社，1999.
［2］青海省药品检验所，青海省藏医药研究所 . 中国藏药
［M］．上海:上海科学技术出版社，1990:200-202.
［3］卫生部药典委员会 . 中华人民共和国卫生部药品标准
·藏药［S］．第一册 . 北京:化学工业出版社，1995:18.
［4］中国科学院西北高原生物研究所 . 藏药志［M］．西宁:
青海人民出版社，1991:245.
［5］王红兵，秦国伟 . 风毛菊属植物的化学成分和生物活性
［J］．国外医药·植物药分册，2005，20(2):47-48.
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