全 文 ：第 6 卷
第 1 期
哈尔滨师范大学自然科学学报 V ol . 6 No . l 19 9 。
N AT U R A S LC IE NCE S J O U R N A O F H A LR B I N NO R MA U LNIV E R S IT Y
鸽二二二二二二二二二二= 二 ` ` 一 = ` 兰二一二 - 一 忿厂 一 _ _ ` 乙 一
硬粒小麦 ( T d ru um ) x天蓝堰麦草
(El y tri sia la scu m) 属间杂种无性系的建立
李集临 胡赞民. 赵连喜
生物 系
`搞要 1 本实脸 以 “ 人民麦 ” x“ 天蓝惬 麦草 ’ , F 。成熟 胚 、 F 工 幼 德 及 “ 坷
坷瑞特 ” 又 “ 天蓝惬麦草 ” F : 幼穗为外植 体 。 在人1 5 + 2 。洲 2 、 4一 D 的培养墓
上诱导愈伤组 织 、 在无激素的 M s培 养基上 , 诱导再生植林 。 产生 胚性 愈伤 组
织 的须率最高为 7 8 . 9% , 实体显微镜及 电镜观察表明 : 胚性愈伤组织表面存在
许多胚状休 , 植株再生 方式 为体细 胞胚 胎发生 方式 , 再生 频率最 高 为 10 0 % 。
胚性 愈伤组织 经 13 个 月的继 代培 养仍 具有再生 能 力 , 实验结果表明 : lc 阴左 右
的 幼穗 为较合适 的外植体 。 2 。 川 1 2 . 4一 D 甘胚性愈伤组织 的诱导 、 增拉起重要
作用 , 本实验发现一种特殊分化现象 。 即 小 花结构的分化 。 衬产生 这种现 象的
原因进行 了分析 。
关键词 : 硬粒 小 麦 天蓝 惬麦草 体细 胞胚 胎发 生 无性 系
利用组织培养改 良作物品种已日益受到重视 〔 ’ ` , ` 7〕 , 了以呀无件系是这一技术应川 的
关键 。 近年来通过组织培养研究体细胞胚胎发生已有很大进展 〔“ , 4 : 了 , ” 〕 , 多种植 物 通
过休细胞胚胎发生途径获得再 `日 }针 } , 廷立 j ` 无 性 东 , 如! 黑 麦〔 ’ ” 〕、 汽守子 〔“ 门〕、 高 粱
〔 ’ `〕 、 水稻 〔 ’ “ 〕、 八倍体小黑麦 r仁丁.,’于不术〔” 〕、 人麦 \ 小麦杂种〔 ’ “ 〕等 。 `夕呀践 i: l一 i{jj i业过自 t织 培
养诱哥 )6j 胎发生 可获得大员的 再产!:.植株 。
硬粒小麦 x 天蓝惬麦草 F : 高 }笼不介〔`玉〕 , 仃人认 少J组织结 养 ,叮能址克服属间杂 钟 小
育的方法 之一 〔。 , )仁且 可以 l汉 卜大 ; ,上的 变异植株加〕。 我 们 从 1 9 8 6年 开 始 对 人 民 麦
( 2
。 = 2 8 ) x 天蓝帆麦草 、 坷坷端特 ( Z n 二 2 8 ) x 天蓝帆麦草 几个属间杂交创l台 的 F 。成熟
胚 、 F : 幼穗进行红卿乏培养 , 建立 」’ 两 个无性系 , 琴断呀人 {:卜的 冉生植株与变异 个 休 , 有
的再生植株 )沁引:.少城种子 , 现将实验结果报道 如 卜。
1 材料与方法
供试材料为人民麦 ( T : it 翻 ” ;
i g i a g l a e u m ) l
了。 ,戊熟胚 及 F ,幼穗
d “ r u ,几 : , u r l砂召” , ; zf 几 ” : a i ) x
、 于可坷瑞特 ( ` f . d u r u n l k C k e
少之蓝 似 麦 一草 l( 二l y t -
R iu t e ) x 天蓝仪草
F
,幼穗 。 种子 由哈尔滨师范少(学 生物 系迷传阴}究空提州. 。
。 现在哈尔谊以 乍:{人学
啥尔滨师范大学自然科学学报 10 9 9年
1
.
1成熟胚接种
将 F,种子洗净后 , 用 0 . 1 %的 l 瑰C 12消毒 , 在无菌条件下使之吸水膨胀 , 然后剥 出
胚置于诱导培养摧」: 。
1
.
2 幼祖姆种 二 。
选已孕穗的 F ,植株 (幼穗 一长约 1一 4匣米 ) , 在超净工作台上用 70 % 酒精表面消 毒 ,
无菌水冲洗 , 剥出幼穗切 1一 3段 , 分别置于诱导培养基上 。
1
.
3 培养基成份及培养条件
诱导培养基成分为 M S基本成份附加 2 . 4一 D Zm g I/ , 记作M S : , 继 1一弋培 养 基 亦 用
M S :
。 观察 2 . 4一 D不 同浓度对胚性愈伤组织继代培养的作用 , 采用 M X : 、 M X : 、 M X 3
培养基 , 成 份为 M S基本培养墓分别附加 2 . 4一D l m g / l 、 3 m g / 1、 4m g / l 。 分化培养基为
无激素的 M S从本培养基 , 记作 M A 3 , 在温度为 2 6一28 ℃的黑暗条件下诱导愈伤组 织 ,
2 . 又后转入光照培养 , 光照强度为 1 5 0 I/ “ x , 光照时间每天 13 小时以上 。 1个月继代培养
1次 。
1
.
4 愈伤组 织襄面的观察
川}买体眨微旋 咬扫描 ;已镜进行 。 再 ,=.1 杭眯长片龙孙代“ !之左右 , 移 浅 犷温宝内的花盆 「! , 。
2 结果与讨论
2
.
1 愈伤组织的诱导
幼德切块培养一周后 , 开始膨大 , 15 一 20 天产生愈伤组织 。 愈伤组织 一f于2类 : 1类 为
非胚性愈伤月杖只, 白色 、 灭软 、 质地疏松 , 表面光滑无结构 (图 1 ) , 另1类为胚 性 愈
伤组织 、 黄色或黄绿色 , 质地硬 , 表 面凸凹不平 , 具瘤状或颗粒状结构 (图 2 ) 。 成熟
胚接种 3天后开始产生愈伤组织 , 均为非胚性愈伤组 。 不 同杂交组合和不 同的外植休 产
生愈伤组织的 领率如表 1 。
表 1 表伟」不 1司基因型 、 不 同外植休 、 同一外植体不同发育阶段产生愈伤组织和胚性
愈伤组织的频率有差异 , 人民麦 x 天蓝很麦草比坷坷瑞特 . x 天蓝很麦草产生胚性愈伤组
织的频率高 , 人 民麦 x 天蓝假麦草以幼穗作为外植体比成熟胚产生胚性愈伤组织的频率
高 。
以幼穗作为外植体诱导胚性愈防组织并高频再生植株已 有 许 多 报 道 , D al e 〔`“ 〕在
L ol iu m m ut if l or
u m的幼穗培养中发现 1一 6m m的幼穗与 7一 50 m m的幼穗产生胚性愈 伤
组织的能 力有较大差别 。 王大元〔2〕在稗草组织培养中发现幼穗大于cZ m 只能诱导出非胚
性愈伤组织 。 郑企成等 〔8〕在八倍体小黑麦单倍体组织培养中发现护颖分化期的幼穗诱导
分化频率较高。 ’ !叮见幼穗的发育时期对胚性愈伤组织的诱导 , 有瓜要作用 。 不同基因型
第 1期 硬粒小麦( T d ur u二 ) x天蓝僵麦草( E l y tr i gi a gl a e um )属间杂种无性系的建立 71
了 川 、 表 1 愈伤组织的诱导频率
T a b l e 1
.
T he fr e q ue n e y o fe a l l u si n d uc ti o n
刀、盯口啥,
杂交组合
七 r严, ` n ` 七 o m D ` 一 }c全
l
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植体种类及大小
t e g o r y a n d
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} 胚性愈伤组织
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人民麦 x 天蓝住麦
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阿坷瑞特 x 天蓝值
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成熟胚
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I n l l o r e SC e n C e a D .
些兰二… 。 3…二 10 0 4 5 7 8 . 0o u t 1 e m l o n g3 c m以上幼秘y o u n g i n f lo r o s e
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、 c m左右幼穗
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.
1
1 0 ( ) 2 :弓 吕
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最佳发育时期可能不同 。 人 民麦 x 天蓝很麦草 、 坷坷瑞特 x 天蓝似 麦草以 I c m 左右的 幼
秘做外植体培养较为适 `言。
2
.
2 愈伤组织在继代培养中的变化与筛选
l]不性愈伤组织 注继代培养 ` }`生 长迅速 , 能了 城的胚性慈 {) ,勿屯织 阳 一 1卜胚 f与匆t
织 。 胚性愈伤 il1 织农面逐渐出现绿色结钩 , ’ ,飞点状或曲亡以戈 比 } 2 ) 。 、一。 : 培 冲 谈 _龙
胚性愈伤组织有时分化 , 形成小的叶状体并 长出芽和很 , 生成 小植物 ( :’.l 9 ) , }{州三沃
缓慢 , 转移至 M A 3上可长成 健壮的植株。 在M S ; 培养荃上胚性愈伤组织有少 .星分 化 出
小花结构 , 具颖壳与雌蕊 , 无雄蕊 。
胚性愈伤组织在 M S培养胚基上继代培养发 生分化的频率统 计结果如 农 2 :
t 公乏2 胚性愈伤组织在继 代过程 , } ,的 分化
T a b l e Z T h e d i f f e r e n t i a t i o
r一 o f e m b r y o g e r: i e e a l l i d u r i x l g s u l) c u l t u r c
杂交组合 统计块数
粉 {_ _ 分化出小花故声三人
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哈尔滨师范大学自然科学学报 1 9 9 0年
从表 2 中可以看出早期的继代培养分化频率较高为0 4%一 0 5% , 随继代时间延 长 ,
分化频率降低 。 非胚性愈伤组织在M S : 培养基上继代培养 , 偶而可分化出根 , 但无芽 。
胚性愈伤组织已分化的部分和增殖的非胚性愈伤组织不再产生胚性愈伤组织 , 继代
培养应将其除去 , 只选择未分化的胚性愈伤组织进行继代培养 , 经过不断筛选我们已获
得 10 几个不 同胚性愈伤组织块的克隆 。 两个属间杂种的胚性愈伤组织均已继代培养 18 个
月以 _ .[ 。
2
.
3 2
,
4一O浓度对胚性愈伤组织继代培养的效应
将在M S 培养从上继代培养的 “ 人民麦 ” x 天蓝 f匾麦草胚 性 愈 伤 组 织 , 转 移 至
M X
, 、 M X
Z 、
M X
3中培养 , 观察其生 长状况 , 结果如表 3 :
表 3 2 1一 D浓 表对胚性愈伤组织继代培养的效应
T a b l e 3 T h e e f f e e t o f 2 4一D d e n s i t y o n s u b e u l t u r e o f e m y b r o g e n i e e a l l i
基 m e d l u m
_ 生 民状况 一~\ a b o u t g r o w t h
M S
,
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备 注
M X :
材 料m a t e r i a l
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人民麦 x 天 蓝催麦草胚性愈
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州与 M S I 不分化 , 生长速度慢产 月 注
多的非胚性愈伤
组织
M X
: 培 养
l 个 月M X : 、
M X
。 培养 2 个
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!|司ól川ù
解为 3 3 . 5 呱
从发3中 可以看到胚性愈仿组织在 M X , 、 M X 。 、 培养雌上继代培养是不适宜 的 , 只
有在M X Z培养大绍 . 4一 l) 浓度为 2一 3 0 9 / l二巨长良 好 不 发 生 分 化 , 2 . 4一 D浓 度 低 于
2 0 9 / I愈伤组织容易发 ’ }弓全化 , 2 . 4一 D浓变高 犷3 0 9/ 1愈伤组织增繁速度缓慢 , 均不 能
达到大从 .增殖胚性愈伤红l织的口的 。
2
.
4 愈伤组织衰面结构 的观察
经实体 显微镜及电镜观察 , 石到非胚性愈伤组织 成 l雨无任 何 结 构 (图版 I , 5) ,
胚性愈份组织 表面具有各种形状的胚状体 ( }组版 I , 3 、 6) , 胚状 体上具绿色突起 (图
版 I , 3) , 多数胚状体无规律的聚集在一起 , 少数排列成线状或园圈形 (图 4) 。 继代
培养一段时间后 , 从上述的联状休上长出的绿色突起聚集起来形成一 些肉眼可见的绿色
结构 。 在成熟的任状体上芽原垫明显 可见 (j 叫版 1 , 7) 。 许 多 作 者比 “ , , ’ , , 2 , ` .5
`” , 2。 〕亦观察到 )jE 性愈伤组织 _ l几存在胚状体 。
2
.
5 植株的再生
非胚性愈衡组织转移至M A 3 培养丛土 , 1 0 %能分化出根 , 但不能分化出芽 。 胚性
愈伤组织转移至 M A 3培养从上 , 10 一 20 天 出芽 z仁根 , 从叶状体的侧面首先 长出 1至数个
芽 ( !月版 I , 8) , 然后 _ ` !几银 。 在一 个胚性愈伤组织的绿色结构上 一可 i创扛多个植 株 ( 图
第 1朔 硬拉小龙 ( T d u u rnl )x 天花恨麦草( E l y t ri gi a gl a eu m )属 l’d e杂种无性系 11勺建立 7 3
版 I , 1 0 ) 。 再 产卜嘟i率统计结果如表4。
人 4 胚性愈伤 f,l1 织在分化 J音 2荞: J却 1的分化
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转入分化时间 出 苗 数
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人民 .麦 x 天蓝俊 州一…0一 1 00一 10 3 4。 61 5 . 31毛 . 2
不同基因型的胚性愈伤组织再生植株的频率不 同 , “ 人 民麦 x 天蓝僵草 ” 与 “ 坷坷
瑞特 义天蓝很麦草 ” 两个杂交组合比较 , 前者 明显高于后者 , 但两者均随继代培养时间
的延 民再生频率下降。 在人民麦 x 天蓝恨 麦草组合中已获得 再 生 植 株 10 0多 株 (图版
l
,
1 2)
, 在坷 坷瑞特 x 天蓝收麦草组合 「!“ 亦获得再生植株几 10 株 。
A k i n s 等〔” 〕认为叶状休是盾片的修饰物 , 是胚的一部分。 作者观察到从叶状体侧面
常常 长出几个芽而不是一个芽 , 因此 , 认为叶状体不是来自一个胚状体 , 一可能是多个怪
状体联合形成 。
在M A 3培养基中加 .2 4一 l龙。 g / l 可诱 导出胚状体并使其大量增殖 〔` , `” 〕 , 但萌 发受
七 列抑制 , 除去 .2 4一D, 胚状体如正常种子胚 一可萌发成 完整健壮的 幼 苗 (图 版 I , n ) ,
由此 ` , l’ 见胚状体可以合成供其萌发 的各种激素 。
2
.
6 一种特殊分化现象
每
乃扮比愈伤组织在M A 。少行养蓬中不 仅分化出根 、 芽 , 有的还分化 出 小 花 (图版 I ,
1 3)
。 小花的结构具颖壳和雌蕊 , 但无雄蕊 , 常成簇存在 ( }匆版 1 , 13 ) , 多 者 达 15
个 。 雌蕊具完整的子房 、 花住 、 柱头 (图版 I , 14 ) , 花柱单一或具二叉 、 三叉 ( 图版
l
, 1 4)
。 在M A 3培养从 ` }, 么全化出小花的胚性愈伤组织 均可分化出根 (图版 I , 13 ) ,
有的还能分化出芽并 民成植仆 。 不 同基因型的胚性愈伤组织分化出小花的频率不同 , 人
民麦 x 天蓝仪麦草组合明显佰于坷坷瑞特 x 天蓝堰麦草组合 ( 表 4) , 前者继代 培 玲13
个月后小花分化的频率仍 l佰达 1 5 . 3% 。
孙敬三 、 朱至清 〔` 〕在八倍体小黑麦幼穗培养中发现愈伤组织转移 至分化培 冷从上 , ,耳
分化出小花并开放 。 I) a l e 〔 ’ “ 〕在 L o l i u m m u t i f l o r u m 的幼穗培 养 ,1,发现如果幼穗较 大 .
一
l
lT直接形成小花 。 张炎等 〔7〕花山羊草 (刁 e夕i l o p s ) 、 小麦 ( T r i t f c u m ) 、 黑麦 ( S e e a l e )
三 属杂种幼德培养中也发现幼穗有直接形戍小花的现象。
哈尔滨师范大学自然科学学报 1。。o年
产生小花分化的原因可能有二 : 第一所用外植体较大 , 花原纂已分化 , 在诱导培养
毯上细胞没有脱分化继续发育成 小花 ; 第二愈伤组织不仅有再生营养器官根 、 芽 、 完整
植物体的能力 , 也具有直接再生繁殖器官花的能力 。 在继代培养中胚性愈伤组织发生小
花分化现象 , 一可能是后一种原因 。
本实验研究了属间杂交 F : 的成熟胚及幼穗在M S + 2 0 9 / 1 2 . 4一 D培 养 基 上 , 诱 导
胚性愈伤组织的频率 、 胚性愈伤组织的结构 、 继代培养与植株再生方式等 , 对 了解体细
胞胚胎发生机理有一定的意义 。 同时建立了人民麦 x 天蓝恨麦草 、 坷坷瑞特 x 天蓝%1 麦
草二个属间杂交组合的无性系 , 从无性系中不断的获得再生植株 。 作者比较了再生植株
的形态与育性 , 观察到叶表面茸毛的有无 、 叶宽度 、 株高 、 穗 长、 小穗数 、 小花数 、 育 ,
性在不同株间有差异 , 如孙敬三等〔4〕在大麦 x 普通小麦无性系中获得可育的植株 , 李浚
明等 〔” 〕在栽培大麦 x 普通小麦无性系中获得多种变异 , 看到的结果相似 。 作者认为经过
筛选有可能获得有结实能力 、 高度抗小麦多种病害 、 不同倍数休的新遗传资源 。
参 考 文 献
〔 1 〕王大元 , 29 3 连. 细胞生物学杂志 , 6 ( 一) : l a一 20 .
〔 l 〕王大元 、 孔恬 , 一0 5 4 . 实验生物学报 , 1了( 3 ) : 2 7 x一 2 了。 .
〔 3 〕朱激 , 19 了5 . 遗传学报 , 5 ( 1 ) : 7 日一 5 6 .
〔 4 〕孙敬三 , 朱至清 , 1 0 5 6 . 植物学报 , 2 5 ( 一) : 3 3一 37 .
〔 5 〕李浚明 , 1 9 8 6 。 北京农业大学学报 , r么( 4 ) : 4 5 3一 4 6 2 .
( 6 )弓长大明 、 李集临 , 1 9 8 5 . 哈尔滨师范大学自然科学学报 , 3 : 57 一 78 .
〔 7 〕张炎等 , 10 5 5 . 科学通报 , 一7 : 1 3泣5一 1 3 4 7 .
〔 8 〕郑 企成 、 朱绷蓝 , 19 5 7 . 才江物学报 , 2 9 ( 4 ) : 3 6 7一 3 7 2 .
〔 9 〕A k in s , P . 0 a n d I . K . V a s 注. l o s Z . P r o t o P l a s m a , 1 1 0 : 9 5一 1 0 5
〔1 0〕B h o iw a n i , S . S . a n d M . K . R a z d a n . l o s 3 . I n P la n t T i , s u e C u l t u r e : T比。 v a n d P r a t i e e . E ls e v ie r一
A m
s t e r d
a n P r e s s
.
P P 9 1一 1 1 2
〔一 〕B o y e s , C . J . a n d . I . K . V a s i l . 19 8 4 . P 1a n t S e ie o e e L e t t e r , 3 5 : 一5 3一 15 7
〔12 〕C h u , C . C . e t a l : 一。 s 4 . T h e o r . A P P I . G e n e t , 6 5 : 3 7 5一 3 7 0 .
〔13 〕D a l e , , P . J . e t a l : 19 8 一 P la n t C e l l T is s u e o r g a n C u l t u r e , 1 : 一7一 5 。
〔x ` 〕E v a n s , D . A . e t a l : 10 5 4 A m e r . J . B o t , 7 生( e ) : 7 5 9一 7 7 通 .
〔15〕G r e e n , C . E . a n d R . L . P h i l li p s : l。 了5 . C r o p S e i e n e e一 5 : 4 17一通2 1 .
〔 xe 〕H e y s e r , J . W . e t a l : l o 83 . Pl a n t S e ie n e e L e t t e r s , 2。 : 一7 5一 5 2 .〔一7 〕L a r k in , P . x . 。 n d . w . R . s e o w e r o r t . l o s ,1: Th e o : 人 p p一 G e n e t , 6 0 : 10 7一 2 1 , .
〔 18〕R y b e y z n s k i , J . J a n d . W . Zd u n e z y k : 一g s 6 . T h e o r A p p l . G e n e t . 7 3 : 26了一 2 了1 .
〔 19〕V a s i l , I . K : x o s Z . I n P l a n t T达s u e C u l tu r e : p r o e . s t h I n t l . e o n g P la n t T i s s u e a n d C e ! 1 C u lt u r e . p p
1 0 1一 1 0 4 .
〔2 0 〕Y e卜, M . L a n d W . C C h a n g . l o 8 6 . T五e o r . A p p l G e n e t , 7 3 : 16一 16 3 ·
万 I J另 议拉小麦( T d u r u , , 1 ) x 天 11花很麦草 ( E l y t r i g i a g l a e u 二 )属 l’de 杂种无性系的建立 7 5
T h e E s t a b l i s h m e n t o f C l o n e s o f T r i t i e u m D u r u m x
E ly t r i g i a G l a e u m I n t e r g e n e r i e H y b r id
L 1 J i l i n H u Z a r l rn i n Z h a o L i a l丫x i
D e p a r t m e
ll t o f B i o l o g y
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7 6 哈尔滨师范大学自然科学学报 1 9 9 0年
图 版 说 明
田版 I
l
、 非胚性愈伤组织 .
2
、 胚性愈伤组织 .
3
、 胚性愈伤组织 表面的肠状体及绿色结构 .
4
. 直 线排列的胚状体 .
5
、 扫描电镜下非胚性愈伤组织表面结构 . `
6
“扫描电镜下胚性愈伤组织表面的胚状体 。
Fi ` 一 no ne mb r yng e nie e a l lu s Fig . 2 e mb r yog e ni e e a l lu s
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Fig
.
4 s e v e r a le r nb r yo i ds i n li ne
Fig
.
5 Th e s t r u e t u r e o n t h e s v r f ae e o f no ne mb r yo g e nie e a llu s o b se r v e db ys c a n ni ng e le c t r o 。
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Fig
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6 e mb r yo i ds o n t h e s u r f ae e e mb r yo g e nie e a llu s o b s e r 甲e db ys e a n ni ng e le e t r o n mie r o s e o p e
圈版 l
7
、 一个成熟胚状体及叶状体 , 芽原基 明显可 见 .
8
、 叶状体一侧几个萌发 的胚状体 .
9
、 继代培养中分化出的芽 .
, 。 、 从胚性愈伤组织上再生的植株 .
1 1
、 由一个胚状体萌发形成的植株 .
1 2
、 盆栽的再生植株 .
13
、 分化 出的小花和根 。
拭昼. )、飞黑飞e m b r y。 ;。 , h ;。 、 , : i m 。 r d i a l s、 。 。 t , 。 s c ;姜。 n。 。 le a f , s , r 。 。 t。 : 。
19
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9 Sh o o t d if fe r e n t i a t e d d u r i n g s u b e u l t u r e
F i g
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