全 文 :2007 年 4 月第 14 卷第 4期 中国中医药信息杂志 ·51·
还阳参化学成分的研究
倪 艳,卢方晋,郝旭亮,李先荣
(山西省中医药研究院,山西 太原 030012)
摘要:目的 研究还阳参 Crepis turczaniowii C.A.Mey.全草的化学成分。方法 采用硅胶、大孔吸附树脂及
聚酰胺层析柱进行分离和纯化,通过理化、质谱及核磁共振等现代波谱技术鉴定化合物结构。结果 从还阳参石油醚
部分分离得到 2个化合物,分别鉴定为伪蒲公英甾醇乙酸酯(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ);从其正丁醇部分分离到1个化合物,
鉴定为连翘苷(Ⅲ)。结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均为首次从该植物中分离得到,Ⅲ为首次从还阳参属植物中分离得到。
关键词:菊科;还阳参;化学成分
中图分类号:R289.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2007)04-0051-02
Study on Chemical Constituents in Crepis Turczanilwii NI Yan, LU Fang-jin, HAO Xu-liang, et al (Shanxi
Academy of TCM, Taiyuan 030012, China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents in Crepis turczaniowii C. A. Mey. Method The
constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin RA and polyamide columbine
chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, MS and NMR. Result Two
compounds were obtained in the Petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (Ⅰ) and β-sitosterol
(Ⅱ), and one compound was obtained in the n-BuOH fractions as phillyrin (Ⅲ). Conclusion All above
compounds are obtained from the plants of Crepis turczaniowii C. A. Mey. for the first time. Ⅲ is isolated
from Crepis L. for the first time.
Key words:Compsitea;Crepis turczaniowii C. A. Mey.;chemical constituent
还阳参 Crepis turczaniowii C.A.Mey.为菊科还阳参属
植物,别名屠还阳参、驴打滚儿草,多年生草本植物,生长于山
坡、路旁,主要分布在山西、内蒙古[1]一带,资源丰富,为民间
习用草药。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清热降火、益气之
功效,用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管炎等疾
病。有关其化学成分及生物活性,未见任何文献报道。药效学
实验研究表明,还阳参全草的石油醚提取物能减少小鼠咳嗽次
数,并能延长小鼠的咳嗽潜伏期,有明显的止咳作用;正丁醇提
取物能保护组胺和乙酰胆碱对豚鼠引起的哮喘,具有平喘作
用[2]。为了探寻其止咳平喘作用的物质基础,本实验对还阳参石
油醚提取物和正丁醇提取物进行了化学成分的研究,结果从石
油醚部分分离得到两个化合物,分别为伪蒲公英甾醇乙酸酯
(ω-taraxasteryl acetate,Ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,
Ⅱ);从正丁醇部分分离到一个化合物,鉴定为连翘苷
(phillyrin ,Ⅲ),化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都是首次从植物还阳参中
分离。
1 实验材料
Yanaco 显微熔点测定仪(未校正);瑞士 Bruker IFS-55
型红外分光光度计;瑞士 Bruker-ARX-300 型核磁共振仪;美
国菲尼根 LCQ-MS 质谱仪。聚酰胺(柱层析用,80~100 目,浙江
台州市路桥四甲生化塑料厂)、大孔吸附树脂(D-101 型,16~
60 目,天津农药股份有限公司树脂分公司)、硅胶(柱层析
用,160~200 目,青岛海洋化工有限公司)。其他试剂均为分析
纯。还阳参药材采集于山西省山阴县(采集时间 8-9 月份),
基金项目:国家中医药管理局青年课题(2000JQ13)
经山西省药品检验所高天爱主任药师鉴定为菊科植物还阳参
Crepis turczaniowii C. A. Mey.的全草。
2 提取分离
还阳参粗粉 4 kg,以 70%的乙醇加热回流提取 3次,合并提
取液,减压浓缩得到浸膏。用适量水分散,依次用石油醚、醋酸
乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂并浓缩,分别得到石油醚部分
(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石
油醚部分 20 g,加乙醚适量使溶解,用硅胶拌匀,乙醚自然挥干,
上硅胶柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱,得 3 个流份,再经反
复硅胶柱层析分别得化合物Ⅰ(30 mg)、Ⅱ(20 mg)。取正丁醇
部分 10 g,加水搅拌,使混悬,静置 2 h,取上清液,加入处理好
的 D-101 型大孔吸附树脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇
洗脱,紫外检测器跟踪检测,收集洗脱液,减压回收溶剂,得到
4 个不同浓度乙醇洗脱流分,将其中 30%乙醇洗脱流份经聚酰
胺柱层析和反复硅胶柱层析,得到化合物Ⅲ(40 mg)。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ为无色针状结晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃,
Libermann-Burchard 反应阳性,TLC 喷 10% H2SO4,加热后显紫
红色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。IRvKBrmax cm-1:1 731、
1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1H-NMR(CDCl3)δ:4.46
(1H,t,C21-H),2.03(3H,s,CH3-CO),1.05,0.995,0.956,0.922,
0.895,0.826,0.748(21 H,m,7×CH3)。EI-MS(m/z):468(M+)、
453(M-CH3)、408(M-CH3CO-H2O)、393、249、204、189。与伪
蒲公英甾醇乙酸酯对照品薄层色谱 Rf 值[3]及显色行为一致。
综合分析以上数据,并结合文献[4-5]对照,确证化合物Ⅰ为伪
蒲公英甾醇乙酸酯。
·52· Chinese Journal of Information on TCM Apr.2007 Vol.14 No.4
·质量标准研究·
活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定
李 庆 1,王 东 2
(1.郑州市第一人民医院,河南 郑州 450004;2.河南中医学院,河南 郑州 450008)
摘要:目的 制定活血胶囊中丹参素和原儿茶醛的含量测定方法。方法 采用 HPLC 法,以丹参素和原儿茶醛为
对照品,检测波长为 280 nm,甲醇-0.5%醋酸水溶液(22∶78)为流动相。结果 丹参素在 0.421~3.364 µg 范围、原
儿茶醛在 0.212~1.699 µg 范围有良好的线性关系,样品平均加样回收率丹参素和原儿茶醛分别为 100.05%和
99.39%,RSD 分别为 3.07%和 1.62%。结论 本法结果准确,精密度及重现性较好,可作为该制剂的质量控制方法。
关键词:活血胶囊;高效液相色谱法;丹参素;原儿茶醛
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2007)04-0052-02
Determination of Danshensu and Protocatechuic Aldehyde in Huoxue Capsule LI Qing1, WANG Dong2
(1.The First Peoples Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450004, China;2.Henan College of TCM, Zhenzhou 450008,
China)
Abstract : Objective To establish a method for determining the content of Danshensu and
Protocatechuic Aldehyde in Huoxue capsule. Methods The HPLC method was adopted for the
determination. Danshensu and Protocatechuic Aldehyde were used as the standard. Detection wave length
was set at 280 nm, the mobile phase consisted of methanol-0.5 % HAc (30∶70). Results The linear range of
Danshensu was 0.421~3.364 µg and Protocatechuic Aldehyde was 0.212~1.699 µg. The average recovery
rate of Danshensu was 100.05% with RSD of 3.07% and Protocatechuic Aldehyde was 99.39% with RSD
of 1.62%. Conclusion This method is accurate, specific and reliable for the quality control of Huoxue
capsule.
Key words:Huoxue capsule;HPLC;Danshensu;Protocatechuic Aldehyde
活血胶囊由丹参、三七等 6 味药物组成,具有活血祛瘀、
清血安神之功效,用于心绞痛、胸闷等病症的治疗。其中丹参
为方中君药,具有活血祛瘀之功效。丹参酸类成分(有丹参素、
原儿茶醛等)是丹参中的主要化学成分,具有明显的抗心肌缺
血和增加冠状动脉血流量等生理活性。本试验以丹参素和原儿
茶醛作为含量测定的指示性成分,采用高效液相色谱法测定其
化合物Ⅱ为无色针状结晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙
醚,mp137~138 ℃,Libermann-Burchard 反应阳性。在数种不
同展开剂条件下进行薄层层析,其 Rf 值与β-谷甾醇对照品一
致,并且与对照品混合后展开,只显示一个斑点。综合上述分析,
故鉴定该化合物为β-谷甾醇。
化合物Ⅲ为白色粉末,mp 148~150 ℃,molish 反应阳性,
不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于热甲醇。该化合物经酸水解
后,PC 鉴定有葡萄糖。IRv KBrmax cm-1:3412,2923,2800,1744,
1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。FAB-
MS m/z(%):533[M-1],372[M-glc]+。1H-NMR(C5D5N)δ:8.7
(1H,s,Ar–H),7.6-6.9(6H,m,arom H),3.75-3.68(9H,s,2O CH3),
4.66(1H,d,j=6.9Hz,glc-1H)。13C-NMR(C5D5N)δ:132.2 (C-1),
136.3(C-1),110.5(C-2),111.1(C-2),148.0(C-3),149.0(C-
3),147.5(C-4,C-4),112.4(C-5),116.3(C-5),118.4(C-6),
119.1(C-6),82.3(C-7),87.9(C-7),50.5(C-8),55.2(C-8,
OCH3),71.3(C-9,C-9),55.9(2O CH3),Glc:102.3(C-1),74.9
(C-2),78.6(C-3),70.0(C-4),78.9(C-5),62.0(C-6)。化合物
Ⅲ的 13C-NMR 和 1H-NMR 波谱数据与文献[6]的连翘苷的数据比
较,两者基本一致。因此鉴定化合物Ⅲ为连翘苷。
参考文献:
[1] 《全国中草药汇编》编写组.内蒙古中草药[M].北京:人民卫生出版
社,1985.
[2] 刘振权.还阳参有效部位止咳平喘作用的研究[D].山西省中医药研究
院硕士研究生毕业论文,2002.5.
[3] 凌 云.中药蒲公英的理化鉴别研究[J].西北药学杂志,1999,12(14):250.
[4] P L Majumder.Chemical Constituents of Launaea nudicaulis:C-13
Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Taraxasterenes and
Pseudo-Taraxasterenes[J].J Indian Chem Soc,1982,7:881-883.
[5] 凌 云.蒲公英三萜类化学成分的研究[J].中草药,1998,29(4):224.
[6] 石 钺.银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的分离与鉴定[J].中国
中药杂志,2001,28(1):43-46.
(收稿日期:2006-07-31,编辑:华强)