全 文 ：从德国鼠尾草中检测出 3种危险性病毒
孔宝华1　陈海如1　蔡　红1　蒋小龙2　沐咏民2
魏　正2　唐　惠1　曹云华2　李　凡1　刘进元3
(1.云南农业大学省植病重点实验室　昆明　650201　2.云南出入境检验检疫局　3.清华大学生物系)
Three kinds of quarantine viruses were detected from Salvia spp.of Germery.　Kong Baohua1 ,
Chenhairu1 ,Cia Hong1 , Jian Xiaolong2 , Mu Yongming2 ,Wei Zheng2 , Tang Hui1 ,Cao Yunhua2 , Li
Fan1 ,Liu Jinyuan3(1.The Phy topathology Lab.of Yunnan Province ,Kunming 650201 ,2.Kun-
ming Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau ,3.Dept.of Biological Science and Bio technolo-
gy Tsinghua University)
Abstract　Salv ia spp.infected tomato ringspot virus(ToRSV),Arabis mosaic virus(ArMV)and
tobacco ring spot vi rus(TRSV)were identif icated by ELISA 、EM and Biological methods.
Key words　Salv ia spp ,ArMV , TRSV ,ToRSV , identification
摘要　对世博会来自德国的鼠尾草进行了目检 、酶联实验 、电镜观察及生物接种实验 。初
步确证鼠尾草携带番茄环斑病毒(ToRSV), 南芥菜花叶病毒(ArMV)和烟草环斑病毒
(TRSV)。
关键词　鼠尾草　番茄环斑病毒　南芥菜花叶病毒　烟草环斑病毒　检测
　　鼠尾草为唇形花科的草花植物。采自
99 世博会上的德国鼠尾草病株 ,表现花叶 、
明脉 、叶片不对称 ,轻皱缩 ,具有明显的病毒
病症状 。德国为番茄环斑病毒 、南芥菜花叶
病毒 、香石竹环斑病毒和李坏死环斑病毒的
疫区 。尤其是番茄环斑病毒和南芥菜花叶病
毒 ,寄主范围广泛 ,易侵染草花植物[ 1] ,因此
我们用酶联 、电镜和生物接种的方法对上述
鼠尾草病株进行了诊断和鉴定 。
1　材料和方法
1.1　样品的采集和保存
样品采自世博园检疫温室 ,并于检疫温
室内隔离种植。
1.2　症状观察
以健康植物为对照 ,对种植的样品进行
了症状观察和记录 。
1.3　生物侵染实验
采用 0.01M PBS(pH7.0),选用相关寄
主 ,常规摩擦接种方法接种 ,隔日观察实验结
果。
1.4　酶联免疫吸附实验(ELISA)
选用美国 Agdia 公司的番茄环斑病毒
(ToRSV)、南芥菜花叶病毒(ArMV)、烟草环
斑病毒(TRSV)、香石竹环斑病毒(CRSV)、
黄瓜花叶病毒(CMV)、李坏死环斑病毒
(PNRSV)、番茄斑萎病毒(TBWV)、番茄黑
环病毒(TBRV)等 ELISA试剂盒 ,利用双抗
夹心法进行实验。健康植株为阴性对照 。
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2000 年第2 期　　　　　植物检疫　PLANT QUARANTINE　　　　　Vol.14　No.2
云南省院省校合作研究项目
　　　收稿日期:1999-12-21
1.5　电镜负染观察
2%PTA 常规方法负染 , JEM -1200EX
透射电镜观察。
2　实验结果与分析
2.1　症状表现
感病的鼠尾草表现花叶 、明脉 、叶片不对
称 ,轻皱缩 ,具有明显的病毒病症状 。
2.2　生物侵染症状表现
实验结果见表 1。
表 1　鼠尾草接种鉴别寄主的症状反应
鉴别寄主 症状表现
普通烟　Nicotiana tabacum 少数环斑
心叶烟 Nicotiana glut inosa 无症状
黄花烟 Nicotiana rust ica 少数环斑
番杏 Tetragon ia expansa 退绿斑
黄瓜 Cucumber sativus 退绿斑
番茄 Lycopersicon esculen tum 无症状
千日红 Gom phrena g lobosa 无症状
矮牵牛 Petunia hybrida 无症状
苋色藜 Chenopodium amarant icolour 少数枯斑
昆藜 Chenopodium quinoe 少数枯斑
菠菜 Spinacia oleracea 退绿斑
豇豆 Vig na sinensis 少数枯斑
菜豆 Phaseolus v ulgaris 无症状
酸浆 Physali s alkkeng i 无症状
曼陀罗 Datu ra stramonium 无症状
2.3　酶联免疫吸附实验结果
酶联实验结果(见表 2)显示鼠尾草能与
番茄环斑病毒(ToRSV)、南芥菜花叶病毒
(ArMV)、烟草环斑病毒(T RSV)显示阳性反
应 ,而与其他病毒抗血清 ,如 CMV 、TBRV 、
TBWV 、PNRSV 、CRSV 无血清学反应 。
2.4　电镜观察实验结果
于电镜下观察到 28 ～ 30nm 直径的球形
病毒粒子 。
3　小结与讨论
通过症状观察 、酶联实验 、电镜负染观察
和生物侵染实验 ,初步证实 ,来自德国的鼠尾
草 Salv ia spp.复合感染番茄环斑病毒 、南芥
菜花叶病毒和烟草环斑病毒[ 1～ 3] 。
表 2　8种病毒 ELISA试剂盒
检测鼠尾草样品
抗血清种类 待测样品与对照
405nm OD 值
重复Ⅰ 重复Ⅱ 重复Ⅲ
南芥菜花叶病毒 健康 CK 0.001 0.004 0.006
阳性 CK 0.107 0.103 0.102
样品 0.082 0.097 0.106
番茄环斑病毒 健康 CK 0.005 0.008 0.004
阳性 CK 0.105 0.103 0.101
样品 0.083 0.097 0.096
烟草环斑病毒 健康 CK 0.006 0.010 0.008
阳性 CK 0.104 0.103 0.109
样品 0.061 0.060 0.071
香石竹环斑病毒 健康 CK 0.006 0.003 0.008
阳性 CK 0.107 0.110 0.108
样品 0.000 0.002 0.000
李坏死环斑病毒 健康 CK 0.005 0.004 0.006
阳性 CK 0.108 0.109 0.109
样品 0.000 0.002 0.000
黄瓜花叶病毒 健康 CK 0.005 0.004 0.006
阳性 CK 0.104 0.110 0.108
样品 0.000 0.001 0.001
番茄斑萎病毒 健康 CK 0.009 0.002 0.006
阳性 CK 0.107 0.100 0.101
样品 0.000 0.000 0.001
番茄黑环病毒 健康 CK 0.002 0.005 0.007
阳性 CK 0.108 0.106 0.107
样品 0.000 0.001 0.001
　注:待测样品数值与健康样品数值比(P/N)>2.1判断为
阳性。
国内外关于鼠尾草的病毒病研究较少 ,仅有
Pisi A.1989年报道过侵染鼠尾草的黄瓜花
叶病毒和鼠尾草黄脉花叶病毒(Salvia yellow
vein mosaic virus)[ 4] 。番茄环斑病毒 、南芥菜
花叶病毒和烟草环斑病毒侵染鼠尾草为国内
外首报。
参考文献
1　中华人民共和国动植物检疫局 ,农业部植物检疫实验所
编.中国进境植物有害生物选编.北京:中国农业出版
社.1997.
2　CM I/AAB Descript ion of Plant Vi ruses.
3　保坂康弘 ,川濑茂富 ,松井千秋编.梁训生 ,张成良译.植
物病毒图鉴.北京:农业出版社.1980.
4　Pisi A , Vicchi V.Informatore-Fi topathologico , Jan 1989 ,
39(1):49～ 51
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2000 年第2 期　　　　　　植物检疫　PLANT QUARANTINE　　　　　　Vol.14　No.2