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2010 NO.29
SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION 学 术 论 坛
苦苣菜(Sonchus oleraceus L.)系菊科
(Compositae)苦苣属(Sonchus)1～2年生的草
本植物。广泛分布于我国的东北三省、内蒙
古、日本国等地。可全草入药,味苦,性寒。具
有清热解毒,凉血止血等作用。主治肠炎、
痢疾、黄疸、咽喉肿痛、吐血、尿血等症[1]。
国内外对苦苣菜化学成分和药理活性
的报道较多。文献报道,苦苣菜的水提液对
动物耐缺氧和急性心肌缺血具有明显的保
护作用[2];苦苣菜总黄酮对实验性肝损伤具
有明显的保护作用[3];苦苣菜酸性提取物具有
抗肿瘤作用[4];苦苣菜提取物具有明显的抗炎
和抗凝血作用[5];苦苣菜水提液对亚硝基和
羟基自由基均有很强的清除作用[6];苦苣菜
提取物对小鼠具有明显的抗伤害性疼痛的
作用[7];苦苣菜对老鼠的抗焦虑样作用[8]。
据报道,胡佩卓等[9]研究了苦苣菜的脂
溶性化学成分。徐燕等[10]对中国安徽大别
山区苦苣菜的化学成分进行了研究。白玉
华[11～12]连续对日本产苦苣菜的化学成分
进行了研究。周桂芬[13]通过不同提取方法,
采用紫外-可见分光光度法测定苦苣菜总
黄酮的含量。但国内外均未见对苦苣菜
α-葡萄糖苷酶抑制活性研究的报道。
α-葡萄糖苷酶抑制剂可有效降低餐
后高血糖,如今已作为治疗Ⅱ型糖尿病的
有效药物类型[14]。本文利用体外α-葡萄糖
苷酶抑制筛选模型对苦苣菜提取物进行了
α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究,以期为苦
苣菜开发利用提供科学依据。
1 仪器与材料
Multiskan MK3酶标仪(美国Thermo
Electron公司);LRH-150恒温培养箱(上海
一恒科技有限公司);DELTA 320型PH计
(美国Mettler-Toledo公司);电子天平(美国
Mettler-Toledo公司);旋转蒸发仪(德国
Heidolph公司)。
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase, EC 3.
2.1.20,美国Sigma公司);4-硝基苯-α-
D-吡喃葡萄糖苷(4-N-trophenyl-α-D-
glucopyranoside,PNPG,026K1516,美国
Sigma公司);阿卡波糖(Acarbose,Lot
16869, 德国SERVA 公司);4-硝基苯酚(4-
Nitrophenol,PNP,10116387,美国Alfa
Aesar公司)和二甲亚砜(DMSO)。
苦苣菜样品于2008年7月采于内蒙古阿
拉善盟额济纳旗进样,经河南大学天然药
物研究所生药教研室李昌勤副教授鉴定为
菊科植物Sonchus oleraceus Linn.,标本存
放于河南大学天然药物研究所。
2 实验方法
2.1提取
苦苣菜全草阴干,粉碎,石油醚浸泡
12h后,于索氏提取器中连续回流提取,提
取3次,每次1h,浓缩,得石油醚提取物。挥
干溶剂后,依次用乙酸乙酯、甲醇浸泡12h,
回流提取3次,每次1h,得乙酸乙酯提取物、
甲醇提取物。
2.2抗氧化活性筛选方法
2.2.1α-葡萄糖苷酶抑制活性的筛选
方法
2.2.2α-葡萄糖苷酶活力的测定
酶活力单位定义:37℃,pH6.8系统条
件下,每分钟水解底物产生1μmol对硝基
苯酚的酶量,定义为一个酶活力单位(U)。
酶活力测定:112μL磷酸钾缓冲液
(pH6.8),加入0.2U/mL的α-葡萄糖苷酶
20μL,DMSO 8μL,37℃恒温15min后加入
2.5mmol/LPNPG20μL,37℃恒温反应
15min。再加入0.2mol/L的Na2CO3溶液80μL,
于405nm波长下测OD值。
2.2.3标准曲线制作
根据采用的反应体系,用磷酸缓冲液
(pH6.8)配置1000μmol/L PNP,稀释成
400、300、200、150、100、50、25、5和0μmol/L。
分别取7种不同浓度的PNP溶液各160μL,
加入0.2mol/LNa2CO3溶液80μL,混匀,在
405nm下测定OD值,测三组取算术平均值。
以OD值为纵坐标,对硝基苯酚浓度为横坐
苦苣菜α-葡萄糖苷酶的抑制活性①
江正祥
(上海现代哈森(商丘)药业有限公司 河南商丘 476000)
摘 要:采用索氏提取法提取苦苣菜全草,以96微孔板法测定苦苣菜不同极性提取物体外α-葡萄糖苷酶抑制作用,并与阳性对照
Acarbose 进行比较,发现苦苣菜石油醚和乙酸乙酯提取物均有较好的α-葡萄糖苷酶抑制作用。苦苣菜的石油醚提取物的抑制效果
最好(IC50=33.25μg·mL-1),其次为乙酸乙酯提取物(IC50=1909.14μg·mL-1)。石油醚提取物远远大于阳性对照Acarbose(IC50=1103.01
μg·mL-1)的抑制活性。不同溶剂的提取物比较,苦苣菜石油醚提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果很好,具有良好的潜在开发价值。
关键词:α-葡萄糖苷酶抑制剂 苦苣菜
中图分类号:Q556 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2010)10(b)-0220-03
α-Glucosidase inhibitory activity of Sonchus oleraceus Linn
Wang Zheng-xiang
Shanghai Modern Hanson (Shangqiu) Pharmaceutical Co., Ltd., Shangqiu, 476000, China
Abstract:Different extracts f Sonchus oleraceus Linn.were extracted by Soxhlet,and the inhibitory activity of alpa-
glucosidase in vitro was screened by the 96-microplate-based method and the results were compared with Acarbose as
positive control.In the result,petroleum ether extract and the ethyl acetate extract from S.oleraceus Linn.showed good
inhibitory activity.The petroleum ether extract had the highest inhibitory activity (IC50=33.25μg·mL-1),which i
higher than that of the ethyl acetate extract (IC50=1909.14μg·mL-1).And he petroleum ether extract had higher
inhibitory activity than that of Acarbose (IC50=1103.01μg·mL-1) as positive control.Different polar solvent extracts
showed different activity,the petroleum ether extract had good inhibitory activity of alpa-glucosidase,and it could be
exploited the diabetes drugs as α-glucosida es inhibitors in future.
Key Words:α-glucosidases inhibitors；Sonc us oleraceus Linn
注:NT表示未测定。
①作者简介:江正祥,总经理,工程师,1988年毕业于河南中医学院,本科学士学位,药学专业。从事药品研发与生产管理。
表1 苦苣菜提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性
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标,做出标准曲线。
2.2.4苦苣菜对α-葡萄糖苷酶抑制活
性的检测
将苦苣菜各提取物以DMSO溶解,并
存储于4℃冰箱中。以张丽等[15～17]建立的
96微孔板筛选方法,405nm处检测其OD
值。同时做相同体系下的样品空白组,不
加样品和酶与底物的空白对照组、不加样
品的阴性对照组和以阿卡波糖为抑制剂
的阳性对照组。并用Origin软件求出相应
的IC50值。
3 结果与讨论
3.1各提取物的抑制活性
表1显示,苦苣菜的石油醚、乙酸乙酯
和甲醇提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制活
性。从表1可以看出该植物各提取物在质量
浓度为1500μg·mL-1时,石油醚和乙酸乙
酯提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较,
且均高于阳性对照药阿卡波糖(55.63%),表
明苦苣菜具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制
活性。
为进一步研究抑制活性,对苦苣菜石
油醚和乙酸乙酯提取物的初筛终浓度依
次对半稀释进行IC50值计算。从表1可以看
出,不同溶剂比较,苦苣菜的石油醚提取
物的IC50值最小(IC50=33.25μg·mL-1),显
示其抑制效果最好,其次为乙酸乙酯提取
物(IC50=1909.14μg·mL-1)。说明苦苣菜石
油醚和乙酸乙酯提取物具有很好的抑制
活性。
3.2提取物浓度对α-葡萄糖苷酶抑制活
性的影响
图1显示,苦苣菜的不同极性提取物对
α-葡萄糖苷酶的抑制活性均呈剂量依赖
性,其中石油醚提取物在质量浓度小于93.75
μg·mL-1时,抑制率达到了最大值100%,此
后,再增加提取物浓度抑率也不再变化,出
现“平台期”。Acarbose在实验质量浓度范围
内,抑制率随质量浓度的增加而增大,几乎
呈线性增长。说明苦苣菜石油醚提取物具
有很好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。
4 结语
本实验利用课题组建立的一种简单的
α-葡萄糖苷酶抑制作用的微量筛选模型,
对苦苣菜的不同提取物进行酶抑制活性筛
选。
实验结果表明,苦苣菜的石油醚和乙
酸乙酯提取物具有较高的α-葡萄糖苷酶
抑制活性,各提取物的抑制活性均与浓度
呈正相关性,说明其抑制活性具有剂量依
赖性;提取物的抑制活性与提取极性有关,
石油醚提取物的抑制活性高于乙酸乙酯提
取物,且远远好于Acarbose的抑制活性。表
明可以对该提取物进行活性成分追踪。
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1 《病理学》名词教法研究的意义
研究《病理学》名词教学方法,选择最
简单、最有效、易于为学生所接受的方法,
传授《病理学》名词,能帮助学生在最短的
时间内掌握《病理学》的名词,提高学生对
《病理学》的学习兴趣,从而更快、更好地对
《病理学》这门课程有一个概括的认识。同
时,有助于提高自身的教学水平。孔子对学
习与思考的关系,有著名的论断:“学而不
思则罔,思而不学则殆”,其实,教学与教研
之间的关系也是如此,可以描述为:“教而
不研则罔,研而不教则殆”。即一个老师只
注重教学而不注重教学研究,就会被教科
书的表象所迷惑而不得其解,就难以把书
教好;而单纯进行教学研究而不从事教学
工作,也只能是纸上谈兵,问题仍然不会得
到解决,也就会产生更多疑惑而更加危险。
只有把教学和教研结合起来,才能有利于
提高教学水平。
2 《病理学》名词教法
2.1概要法
概要法,即将名词的内容进行深入的
梳理,进一步地概括为若干个要点,对这些
要点进行解析,最后,再把这些知识要点有
机地结合在一起,构成这个名词的知识体
系,给学生一个完整的概念,这就是概要法
的基本内涵。在《病理学》中细胞和组织损
伤部分,介绍到“变性”、“血栓形成”等名词
时,可用此法。教科书是这样解释“变性”
的:“因物质代谢障碍引起的细胞内或细胞
间质内出现异常物质或正常物质的数量显
着增多的一类可复性的形态变化”。教学中
可以把变性分成以下几个要点:原因(物质
代谢障碍),部位(细胞内或细胞间质内),问
题(异常物质或正常物质的数量显着增多),
结果(可复性的形态变化)。学生只要记住以
上四个要点就可以全面、系统而完整地记
住该名词。这样会使名词的传授具有条理
清晰的特点,而且在考试时,教师的标准答
案也是按要点去做的,使得教师的教、学生
的学及教学测评三者统一,有利于减轻学
生的学习负担,提高教学效果。概要法既是
一种教学方法,也是学生学习名词的一个
常见方法,古人云:“授之一鱼,不如授之以
渔”。学生在校学习的时间毕竟有限,毕业
后的终身学习至关重要,而自学又是终身
教育的重要学习形式。教会学生学习名词
的方法,使学生终身受用。
2.2溯源法
《病理学》的部分名词具有其自身的历
史渊源,传授这些名词可选用溯源法,追根
求源,加深印象。疾病的命名有的因地命
名,有的因人命名,有的因其特征命名,有
的因病理变化结合器官命名的。如“化脓性
阑尾炎”是病理变化结合器官命名的例子,
病变的性质是化脓性,器官是阑尾。化脓性
炎症的病理特点主要是以中性粒细胞渗出
性为主的炎症。而“尤文氏瘤”、“霍奇金
病”、“麦克细胞瘤”等,则是因人名命名的,
因为最初描述或研究该疾病的是他们,人
们为了纪念他们则以其名命名。
2.3比较法
所谓“比较法”就是将名词进行对比分
析,找出名词与名词之间的差异,以供学生
有鉴别地学习这些名词。由于有些名词之
间含义相近似,学生常常把这些名词混淆
在一起。因此,比较法主要用在一些相近似
名词的教学之中。通过对照、比较并进行分
析,找出相近似名词之间的些许差异,从而
把一个名词与另一个名词区分开来。如讲
授“坏死”、“坏疽”、“凋亡”与“梗死”这四个
名词时,就可以采用此法。这四个名词都与
组织死亡有关,其组织细胞都丧失了功能。
“坏死”泛指活体内局部组织细胞的死亡,
是被动的死亡;“坏疽”是指局部组织细胞
的死亡又合并了腐败菌感染,后果更加严
重;“凋亡”是基因调控下细胞自身的程序
性死亡,是主动死亡;“梗死”则是缺血引起
的局部组织细胞死亡。还有“一期愈合”与
“二期愈合”特点的比较,“良性肿瘤”与“恶
性肿瘤”的区别等均可用此法教学。
2.4剖析法
剖析法,顾名思义,就是利用解剖、分
析的方法,对教学中一些难度较大的概念
或定义进行剖析,化难为易,以帮助学生理
解、记忆。只有在理解的基础上记忆,才能
记得住,记得牢。剖析法主要适用于抽象名
词的解释,通过剖析法解释名词时,能给学
生一种水到渠成的感觉,使学生在不知不
《病理学》名词教法研究
张志萍 姜新峰
(宿州卫校 安徽宿州 234000)
摘 要:教师将科学知识用最简单方法传授给学生,并培养和提高学生的学习能力。这是中专教学必须遵循的教学法则。认识事物总是
从概念开始,而概念往往又以名词的形式出现,对《病理学》的认识也不例外。作者对《病理学》名词教法进行初步的探讨,并将其名词
的教法概括为:概要法、溯源法、比较法、类推法、扩展法和剖析法。
关键词:病理学 名词 教学方法 研究
中图分类号:R36.61 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2010)10(b)-0222-01
觉中掌握了该名词。如在肿瘤部分中的“原
位癌”这一概念就比较抽象,教材上的定义
是:“局限于上皮层内的癌,没有突破基底
膜”。可借助剖析法解释如下:“癌”指起源
于上皮细胞的恶性肿瘤,“原位”谓之在原
来的位置上,没有突破上皮下方的基底膜。
故是早期的没有转移的癌,如果能及时发
现和治疗,可防止发展为浸润癌。
2.5类推法
类推法就是对同类的几个名词中有代
表性的名词进行解释,然后,再类推到其它
名词。类推法一般应用在内容相类似的名
词教学之中。类推法的最大特点是以此类
推,触类旁通,举一反三,简捷而高效。像
《病理学》中的“栓塞”部分有多个名词内容
相近,且有包容关系。如血栓栓塞、羊水栓
塞、脂肪栓塞、空气栓塞、细胞栓塞和虫卵
栓塞等,“血栓”、“羊水”、“脂肪”、“空气”、
“细胞和虫卵”分别是不同的“栓子”,只要
学习了“血栓栓塞”就可以以此类推,从而
学会“羊水栓塞”、“脂肪栓塞”、“空气栓
塞”、“细胞栓塞”、和“虫卵栓塞”等名词。再
如“肝性脑病”、“肺性脑病”、“狼疮性脑病”
及“胰性脑病”等均可用此法教学。
2.6扩展法
扩展法,即把某一个名词的每一个要
素进行分别诠释,逐步加以扩展,然后,再
把这个名词的各组成要素归纳成一两句
话,就相当于用几个关键词进行造句一样,
这样久而久之,一看到某一个名词,就能让
人联想到这个名词所包含的诸多内容。这
也是我们常讲的顾名思义的方法。如“弥散
性血管内凝血”就可以用扩展法进行教学:
“弥散性血管内凝血”中的“弥散”指广泛,
“血管”指毛细血管或微血管,“凝血”指血
液发生凝固。结合在一起,则可把“弥散性
血管内凝血”解释扩展为“广泛的毛细血管
或微血管内血液发生凝固”。简明扼要,甚
至可以说过目不忘。
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