全 文 ：收稿日期:2010-08-23; 修订日期:2011-02-28
基金项目:黑龙江省教育厅资助项目(No． 11551544 )
作者简介:杨晓杰(1962-) ，女(汉族) ，辽宁法库人，现任齐齐哈尔大学生
命科学与农林学院教授，硕士学位，主要从事植物学的教学、科研工作．
药用蒲公英不同器官多糖含量的比较
杨晓杰，付学鹏，李 娜
(齐齐哈尔大学，黑龙江 齐齐哈尔 161006)
摘要:目的 从药用蒲公英 Taraxacum officnala Wigg．叶、花、根中提取多糖并测定其含量。方法 硫酸 －蒽酮比色法于波
长 622 nm处测定吸收值。结果 药用蒲公英叶多糖含量为 9． 63%(n = 4) ，平均加样回收率为 95． 80%，RSD = 1． 17%;花
多糖含量为 11． 21%(n = 4) ，平均加样回收率为 91． 64%，RSD = 4． 01%;根多糖含量为 42． 75%(n = 4) ，平均回收率为
96． 81%，RSD = 1． 16%。结论 根中多糖含量较高且根多糖在操作中稳定性较好。
关键词:药用蒲公英; 多糖; 硫酸 －蒽酮比色法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 09． 084
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)09-2228-01
我国对多糖的研究始于 20 世纪 70 年代，虽然起步较晚，但
发展很快，到目前为止，人们发现多糖对肿瘤、病毒、心血管、抗衰
老以及增加免疫性等方面有独特的生物活性。蒲公英属植物有
清热解毒，消痈散结之功能;具有抗病原微生物、提高免疫力、利
胆保肝、抗自由基延缓皮肤衰老等功效［1］。但是关于蒲公英多
糖提取及抗肿瘤、抗突变、抗氧化、抗疲劳等生物活性的研究在国
内外仅见作者的几篇报道［2 ～ 5］。本实验就药用蒲公英(Taraxa-
cum officnala)不同器官活性多糖的提取和含量进行了比较分析，
以期对蒲公英活性多糖资源的开发利用提供有价值的实验依据。
1 材料与方法
实验材料购自齐齐哈尔市医药公司，分为叶、花、根各器官洗
净干燥备用。
蒲公英多糖提取采用热水浸提法［6］，Sevage 法脱蛋白［6］，活
性炭 80℃脱色 30 min，蒽酮 －硫酸比色法测定多糖含量并计算
回收率［7］。
2 结果
2． 1 叶、花、根的多糖含量及重复性 分别精确称取 3 份来自同
一批原料的药用蒲公英根、茎、叶粉末各 2 g，按文献［7］方法测定
吸光值，计算蒲公英多糖含量。结果见表 1。
表 1 蒲公英叶、花、根多糖含量以及重复性
测定次数
叶
C X(%)
花
C X(%)
根
C X(%)
1 0． 011 183 9． 45 0． 017 9 10． 90 0． 087 7 42． 11
2 0． 011 39 9． 63 0． 018 5 11． 21 0． 091 3 43． 87
3 0． 011 49 9． 72 0． 019 0 11． 53 0． 090 2 43． 32
4 0． 011 49 9． 72 0． 018 5 11． 21 0． 086 8 41． 71
平均含量(%) 9． 63 11． 21 42． 75
RSD(%) 0． 012 0． 02 0． 02
C:吸光值 X:多糖含量
2． 2 稳定性 分别取同样药用蒲公英粉末(叶、花、根)各 2 g，按
文献［6］方法制取样品溶液，测吸光值，每隔 1 h测其稳定性，结果
见图 1。
由图中可以看出，各器官的多糖稳定性在 4 h 内变化不大，
即稳定性较好，将样液保存于 4℃冰箱中可至少存放 3 d 其稳定
性变化不大。
2． 3 回收率测定 分别精取已知含量的药用蒲公英的叶、花、根
样品液 10 ml，各加入精制药用蒲公英多糖 10 mg，测定吸光值，
每种样品测 4 次，取平均值。回收率测定结果见表 2 ～ 5。
从表中可见药用蒲公英叶、根的回收率较好，在 95%以上，
花的回收率略有波动，原因可能为操作过程中产生的误差。叶、
根的 RSD值都较小。总体来说药用蒲公英叶、花、根多糖在整个
测定过程中损失较少，即用蒽酮 －硫酸比色法测定药用蒲公英中
多糖含量是适宜的。
图 1 药用蒲公英叶、花、根多糖稳定性测定
表 2 3 种器官多糖的回收率
器官 OD值 平均回收率(%) RSD(%)
叶 0． 195 8 95． 80 1． 17
花 0． 191 2 91． 64 4． 01
根 0． 573 2 96． 81 1． 16
表 3 叶回收率
测定
次数
叶样品
液 V /ml
多糖含
量 m /μg
投入精制
多糖 m /mg
OD
值
总糖
m /μg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 10 128． 84 10 0． 194 5 409． 21 94． 83
2 10 128． 79 10 0． 199 5 419． 68 98． 37 95． 80 1． 17
3 10 128． 85 10 0． 194 5 409． 21 94． 83
4 10 128． 90 10 0． 194 5 409． 10 95． 18
表 4 花回收率
测定
次数
花样品
液 V /ml
多糖含
量 m /μg
投入精制
多糖 m /mg
OD
值
总糖
m /μg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 10 100． 31 10 0． 199 418． 63 96． 55
2 10 100． 52 10 0． 185 399． 79 87． 67 91． 64 4． 01
3 10 100． 40 10 0． 190 389． 31 90． 84
4 10 100． 32 10 0． 191 401． 88 91． 48
表 5 根回收率
测定
次数
根样品
液 V /ml
多糖含
量 m /μg
投入精制
多糖 m /mg
OD
值
总糖
m /μg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 10 86． 89 10 0． 5735 120． 29 96． 96
2 10 86． 80 10 0． 5755 120． 71 98． 17 96． 81 1． 16
3 10 86． 79 10 0． 571 119． 76 95． 44
4 10 86． 83 10 0． 573 120． 88 96． 65
3 讨论
用硫酸 －蒽酮比色法测定蒲公英多糖含量是可行的，重现
性和稳定性较好。反应中硫酸既起到水解多糖又起到溶解蒽酮
的作用，因此选择硫酸 －蒽酮加入量定为 4 ml 是适宜的。药用
蒲公英是多年生植物，其内部应积聚了许多作为支持其骨架的主
要物质糖类，而叶与花为当年生，其含量应少于根部，从本次实验
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 9 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 9
可知多糖含量排列顺序为:根部多糖含量﹥花中多糖含量﹥叶中
多糖含量。药用蒲公英叶多糖含量为 9． 63%(n = 4) ，平均加样
回收率为 95． 80%，RSD = 1． 17%;花多糖含量为 11． 21%(n =
4) ，平均加样回收率为 91． 64%，RSD = 4． 01%;根多糖含量为
42． 75%(n = 4) ，平均回收率为 96． 81%，RSD = 1． 16%。
经过测定药用蒲公英的叶、花、根的多糖含量，可知大部分的
多糖储存于根中，根部多糖含量为 42． 75%。我国蒲公英种质资
源丰富，且蒲公英对环境适应力强，分布广泛，极易生长，因此是
一种具有广阔开发前景的植物多糖种质资源。
参考文献:
［1］ 陈 华，李银心．蒲公英研究进展和用生物技术培育耐盐蒲公英展
望［J］．植物学通报，2004，21(1) :19．
［2］ 杨晓杰，付学鹏，刘泽东．蒲公英多糖抗疲劳作用研究［J］． 时珍国
医国药，2008，19(11) :2686．
［3］ 付学鹏，杨晓杰，李本丽，等．蒲公英不同器官多糖含量测定及抗氧
化性研究［J］．食品研究与开发，2008，29(3) :26．
［4］ 杨晓杰，付学鹏．蒲公英多糖体外抑瘤和抗突变作用［J］．时珍国医
国药，2009，20(7) :46．
［5］ 杨晓杰，陈 静，程加春，等．蒲公英多糖的超滤分离及其清除自由
基的作用研究［J］．时珍国医国药，2009，20(8) :50．
［6］ 张惟杰．糖复合物生化研究技术，第二版［M］．杭州:浙江大学出版
社，1999:35．
［7］ 付学鹏，杨晓杰． 蒲公英多糖的提取及含量测定［J］． 现代食品科
技，2007，23(5) :37．
收稿日期:2010-08-11; 修订日期:2011-02-18
基金项目:云南省技术创新人才基金(No． 2004PY02 － 12)
作者简介:张新华(1973-) ，男(汉族) ，云南曲靖人，现任云南白药集团股
份公司高级工程师，学士学位，主要从事中药材、制剂质量标准制订研究
工作．
* 通讯作者简介:万近福(1965-) ，男(汉族) ，河南商丘人，现任云南白药
集团股份有限公司高级工程师，主要从事中药和活性天然产物的新药开
发工作．
虎尾草中金丝桃苷和总黄酮含量测定
张新华，韦建荣，万近福*
(云南白药集团股份有限公司，云南 昆明 650032)
摘要:目的 应用高效液相色谱法测定虎尾草中金丝桃苷含量。方法 色谱条件:Agilent ZOBAX XDB C18色谱柱(0． 5
μm，4． 6 mm × 150 mm) ，流动相为乙腈 －四氢呋喃 － 0． 1%(ml /ml)磷酸(14∶ 2∶ 84) ，检测波长 350 nm;流速 1． 0 ml /
min。结果 金丝桃苷线性范围 0． 212 ～ 5． 005 μg，相关系数 r = 0． 999 99，平均回收效率 97． 5%，RSD = 2． 65%(n = 6)。结
论 利用上述方法测定虎尾草中金丝桃苷含量具有提取率高、样品稳定、重复性好、结果准确，为虎尾草提供了药材中金
丝桃苷准确、灵敏的含量测定方法。应用紫外分光光度法测定虎尾草中的总黄酮，不同部位检测结果表明，叶和花含黄
酮较多，根和茎含黄酮较少，为以后药材的合理应用提供了依据。
关键词:虎尾草; 金丝桃苷; 总黄酮; 高效液相色谱
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 09． 085
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)09-2229-02
虎尾草为报花春科虎尾草 Lysimachis barysbachs Bung，一年
生草本，云南各地均有分布，主要生长在云南大理、丽江、香格里
拉等地海拔为 2 400 ～ 2 700 m 的山坡、路旁、较潮湿处，具有补
血、调经散淤、清热消肿等功效，对月经不调、痛经血崩、感冒风
热、咽喉肿痛等症有较好的疗效，并收载于《云南省中药材标
准》［1，2］。据报道，虎尾草主要化学成分为金丝桃苷和芦丁等黄
酮类化合物［3］，总黄酮提取物可显著增加家兔颈动脉及脑血流
量［4］，其含量测定国内还未见报道，建立虎尾草药材的含量测定
方法和含量限度，完善虎尾草的质量标准，是非常必要的。为此，
我们利用反相高效液相色谱法和分光光度法，对虎尾草中的金丝
桃苷和总黄酮进行了含量测定方法学的研究。结果表明该方法
准确、灵敏，重现性好，获得了满意的结果，可用于虎尾草药材的
质量控制。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司，包
括四元梯度泵，自动进样器，柱温箱，紫外检测器，Chemstation 色
谱系统) ;PE λ － 2 型紫外分光光度仪(美国 PE公司)。
1． 2 对照品 金丝桃苷对照品(中国药品生物制品检定所) ;芦
丁对照品(中国药品生物制品检定所)。
1． 3 药材 采自丽江、建水等地，经鉴定为虎尾草 Lysimachis
barysbachs Bung。
2 方法与结果
2． 1 吸收波长的选择 取对照品溶液，用流动相稀释后，用紫外
分光光度仪测定，测得金丝桃苷最大的吸收波长为 350 nm。
2． 2 色谱条件 经筛选，确定采用以下色谱条件:Agilent ZOBAX
XDB － C18(5 μm，4． 6 mm × 150 mm)色谱柱，流动相为乙腈 －四
氢呋喃 － 0． 1%(ml /ml)磷酸(14∶ 2∶ 84) ，流速 1． 0 ml /min，检
测波长 350 nm，柱温室温。精密吸取对照品溶液和供试品溶液
各 5 μl，注入液相色谱仪，测定，以外标法计算。
2． 3 对照品溶液及供试品溶液的制备
2． 3． 1 对照品溶液的制备 准确称取金丝桃苷对照品 5． 6 mg，
溶解至 50 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2． 3． 2 供试品溶液制备 精密称取虎尾草粗粉约 1 g，置圆底烧
瓶中，用 60%乙醇回流提取 2 h，抽滤，并用 60%乙醇洗涤容器，
洗液并入滤液，在水浴上挥去乙醇，加 20 ml 水溶解后用石油醚
(30 ～ 60℃)脱脂两次，石油醚每次用量为 20 ml，水液浓缩至浆
状液，用 60%乙醇适量溶解，过滤至 50 ml容量瓶中，60%乙醇洗
涤，合并洗液与滤液，用 60%乙醇定容至刻度，摇匀，备用。
2． 4 方法学考察
2． 4． 1 线性关系考察 精密吸取金丝桃苷对照品溶液 1，2，5，
10，15，20，25 μl，按上述色谱条件，测定金丝桃苷峰面积，以峰面
积值为纵坐标，金丝桃苷的量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，计
算得回归方程 Y = 398． 66X － 13． 436，相关系数 r = 0． 999 99，线性
范围为 0． 212 ～ 5． 005 μg。
2． 4． 2 精密度实验 精密量取上述对照品溶液 5 μl，重复进样 6
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 9 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 9 期