全 文 : 第 27卷 第 4期 青 海 医 学 院 学 报 Vo .l 27 No. 4
2006年 JOURNAL OF Q INGHAIMEDICAL COLLEGE 2006
甘西鼠尾草中丹参酮 IIA的含量测定*
王利彦 1 赵 明 1 王津慧1 魏全嘉1 吴 萍 1 徐达宇 1 贾红卫 2
(1.青海大学医学院;2.青海检验检疫局 )
摘 要 目的 测定甘西鼠尾草中丹参酮 IIA的含量。方法 采用 HPLC法 ,色谱柱:ZORB-
AX Eclipe XDB -C18(250×4. 6mm , 5μm)柱 , 流动相为:甲醇 -水(75:25v /v), 检测波长:270nm。
结果 丹参酮 IIA在 6. 0 ~ 100. 0μg m l-1范围内 ,峰面积与进样浓度线性关系良好 ,回归方程 Y =
186. 3+245. 1C , r=0. 9974,平均回收率为 98. 0%, RSD =1. 67% ;栽培品甘西鼠尾草中丹参酮
IIA含量:1年生 0. 305% , 2年生 0. 539% , 3年生 0. 776% , 野生品 0. 573%。结论 所测样品
中丹参酮 IIA含量均高于《中国药典》2005年版丹参项下规定要求 , 且栽培 3年生甘西鼠尾草其丹
参酮 IIA含量高于野生品 。
关键词 甘西鼠尾草 丹参酮 IIA 高效液相色谱 含量测定
中图分类号 Q949.777.6 文献标识码 A
DETERM INING THE CONTENTSOF TANSHINONE IIA
IN SALVIA PRZEWALSK II
Wang Liyan
1 , ZhaoM ing1 , Wang Jinhui1 , WeiQuanjia1 , Wu P ing1 , Xu Daning1 , JiaHongw ei2
1. Q inghai UniversityM edicalC ollege;2. Q inghai Prov incia l Inspection andQuarantine Agency
AbstractObjective To dete rm ine the con tents o f tansh inone IIA in the Sa lvia P rzew a lski.i Methods The
concentration o f tanshinone IIA w as determ ined by HPLC m ethod , the ana ly sis involved a 250×4. 6mm co lumn
packed w ith C18(5μm). The mobile phase consisted o fme thy l methano l-w a ter (75:25v /v), the detection w as
set at 270nm. ResultsA good linearity w as obta ined in the range of 6. 0 -100. 0μg m l -1, the linearegression e-
qua tion w as Y=186. 3+245. 1C , r=0. 9974 , the average recove ries w as 98. 0%, RSD=1. 67%;To de term ine
the contents o f tansh inone IIA about Salvia Przew alsk ii show ed tha t:one year g row 0. 305%;tw o years grow 0.
539%;three years g row 0. 776%;w ild strain g row 0. 573% respective ly. Conc lusion The tansh inone IIA contents
in de te rm ined Salv ia Przew a lskiiw ere h ighe r than prescribed con tents o fChp(2005), the tanshinone IIA conten t in
tree years g row w as highe r than that ofw ild strain.
Key words Salv ia Przew alskii Tansh inone IIA HPLC Con tents dete rm ination
甘西鼠尾草(Salvia Przew alskiiM ax im)为唇形
科植物 (藏文译音:吉子恩保 )。[ 1]甘西鼠尾草的主
要有效成分是丹参酮 IIA , 本实验建立了甘西鼠尾
草中丹参酮 IIA的含量测定方法 , 并测定了人工种
植甘西鼠尾草中丹参酮 IIA的含量 , 为今后人工种
植开发利用甘西鼠尾草提供依据 。
1 仪器与试药
HP1100高效液相色谱仪 , Agilent 1100紫外检
测器 , HP化学工作站(美国惠普公司);AE240电子
分析天平 (梅特勒 -托利多仪器有限公司 );FZ102
262
* 王利彦(1963~ ),女 ,汉族 ,天津籍 ,教授
DOI牶牨牥牣牨牫牬牭牪牤j牣cnki牣jqmc牣牪牥牥牰牣牥牬牣牥牨牨
型植物粉碎机(泰斯特仪器有限公司 )。
丹参酮 IIA对照品由中国药品生物制品检定所
提供 (批号:110766 - 200416);甘西鼠尾草药材由
青海大学医学院中医系魏全嘉教授采集并鉴定;色
谱纯甲醇(上海化学试剂三厂 ),分析纯甲醇 (沈阳
化学试剂一厂),实验中所用其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
色谱柱:ZORBAX Eclipe XDB - C18(250 ×
4. 6mm , 5μm)柱;流动相:甲醇 -水 (75:25 v /v);流
速:1 m l m in- 1;柱温:25℃;检测波长:270 nm。
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 对照品溶液:精密称取丹参酮 IIA对照品 10
mg,置 50 m l棕色量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀;
精密量取 5m l,置 25m l棕色量瓶中 ,加甲醇稀释至
刻度 ,摇匀 ,即得 40μg m l- 1的对照品溶液。
2. 2. 2 供试品溶液:精密称取甘西鼠尾草粉末 (过
50目筛)0. 5 g,置磨口锥形瓶中 ,精密加入甲醇 50
m l,塞紧 ,称定重量 , 超声提取 1 h, 放冷后 , 称定重
量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,弃去初滤
液 ,收集续滤液作为供试品溶液 。
2. 3 线性关系考察
精密称定丹参酮 IIA10 mg,加甲醇制成溶液
(200μg m l- 1)。精密量取此溶液 0. 3、1. 0、2. 0、
3. 0、4. 0、5. 0 m l分别置于 10 m l棕色量瓶中 ,加甲
醇稀释至刻度 ,精密吸取 20 μl该液注入液相色谱
仪中 ,按上述色谱条件进行测定 ,以峰面积 (Y)对浓
度(C)进行回归分析 ,结果回归方程为:Y =186. 3+
245. 1C , r=0. 9974, 丹参酮 IIA在 6. 0 ~ 100. 0μg
m l
- 1范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2. 4 精密度试验
精密吸取 “2. 2. 1”项下对照品溶液 20 μl,注入
高效液相色谱仪 ,按上述色谱条件进行分析 ,测定 5
次 , 峰面积的 RSD为 0. 53%,表明仪器精密度良
好。
2. 5 重复性试验
精密称定同一批样品 5份 ,每份 0. 5 g, 按 “ 2.
2. 2”项下方法制备供试品溶液 , 按上述色谱条件进
样 20 μl, 测得峰面积值 ,计算出甘西鼠尾草的平均
含量为 0. 544%, RSD为 1. 90%, 表明分析方法精
密度良好 。
2. 6 稳定性试验
精密称定样品 0. 5 g, 按 “ 2. 2. 2”项下方法制备
供试品溶液 ,在第 0、2、4、6、8 h时分别精密吸取 20
μl注入高效液相色谱仪 , 测得峰面积值 ,计算 RSD
为 0. 61%。结果表明:样品在 8 h内稳定性良好。
2. 7 回收率实验
分别精密称取同一批已知含量样品 4份 (丹参
酮 IIA含量为 0. 526%),精密加入丹参酮 IIA对照
品适量 ,按含量测定法制备 ,测定含量 ,计算回收率 ,
结果平均回收率为 98. 0%, RSD为 1. 67%(n=4),
结果见表 1。从回收率的结果看 ,方法的准确度较
好。
表 1 加样回收率实验结果
样品量(g) 样品中丹参酮含量(m g)
丹参酮 IIA
加入量(mg)
测得值
(m g)
回收率
(%)
平均
(%)
RSD
(%)
0. 4815 2. 53 0. 50 3. 01 96. 0
0. 4776 2. 51 0. 50 3. 00 98. 0
0. 4923 2. 59 0. 50 3. 09 100. 0 98. 0 1. 67
0. 4867 2. 56 0. 50 3. 05 98. 0
2. 8 样品测定
精密称取不同生长年限甘西鼠尾草 0. 5 g,分别
按 “2. 2. 2”项下方法制备供试品溶液 。精密吸取供
试品溶液及 “ 2. 2. 1”项下对照品溶液各 20 μl分别
测定其中丹参酮 IIA的含量 (外标法 ), 色谱图见图
2,结果见表 2。
263
表 2 甘西鼠尾草中丹参酮 IIA的含量测定(n=3)
品 种 生长年限 采集时间 栽培 /采集地区 丹参酮 IIA含量(%)
栽培甘西鼠尾草 1年 秋季 贵德县 0. 305
栽培甘西鼠尾草 2年 秋季 贵德县 0. 539
栽培甘西鼠尾草 3年 秋季 贵德县 0. 776
野生甘西鼠尾草 3 ~ 5年 秋季 贵德县 0. 573
3 讨论
供试品溶液的制备是根据《中国药典》2005版
丹参中丹参酮 IIA的提取方法 [ 2]进行的 ,符合规定
要求;其他各项分析效能指标和参数均符合 HPLC
分析的基本要求 。
丹参酮 IIA是甘西鼠尾草所含的主要成分 ,含
量高低直接影响药材质量 。《中国药典》2005年版
规定丹参中丹参酮 IIA含量不得少于 0. 20%[ 2] ,本
实验结果表明 ,在青藏高原 ,野生及人工种植甘西鼠
尾草中丹参酮 IIA含量均符合《中国药典》规定。
甘西鼠尾草栽培品严格按照《中药材生产质量
管理规范》即 GAP标准进行种植栽培 ,从实验结果
可以看出 ,栽培品 3年的丹参酮 IIA含量明显高于
野生品。
参考文献
[ 1] 中国科学院西北高原生物研究所. 《藏药志》. 西
宁:青海人民出版社 , 1991.92 -93
[ 2]中华人民共和国药典委员会. 《中国药典》(2005版
一部). 北京:化学工业出版社 , 2005.52
收稿 2006 -09 - 21
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