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彝药大花卫矛化学成分的初步研究



全 文 :许云章,孙 美,王静霞,等. 彝药大花卫矛化学成分的初步研究[J]. 江苏农业科学,2014,42(7) :309 - 311.
彝药大花卫矛化学成分的初步研究
许云章,孙 美,王静霞,赵小燕,刘 圆,张吉仲
(西南民族大学民族医药研究院,四川成都 610041)
摘要:采用植物化学成分系统预试法,对采自四川凉山地区的彝药材大花卫矛(Euonymus grandiflorus Wall. f.
grandiflorus)所含化学成分进行分析。结果表明,彝药材大花卫矛样品中可能含有糖类、苷类、皂苷、鞣质、酚类、生物
碱、有机酸、黄酮、醌类、挥发油等化学成分。
关键词:彝药;大花卫矛;化学成分
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2014)07 - 0309 - 02
收稿日期:2013 - 10 - 31
基金项目:国家科技支撑计划(编号:2012BA127B07) ;西南民族大学
2012 年度中央高校基本科研业务费专项(编号:12NZYTH02)。
作者简介:许云章(1988—) ,男,新疆哈密人,硕士研究生,主要从事
民族药物研究。E - mail:xuyunzhang239@ 126. com。
通信作者:张吉仲,博士,副教授。E - mail:daowen2003@ 126. com 。
大花卫矛(Euonymus grandiflorus Wall. f. grandiflorus)为
卫矛科(Celastraceae)卫矛属(Euonymus L.)植物。乔木或灌
木,别名黑杜仲、金丝杜仲、火鸡果[1]。多生于山坡灌丛中或
沟谷林缘的石灰岩山地。分布于陕西、甘肃、湖北、湖南、四
川、贵州、云南等省,全年均可采。大花卫矛为彝药野杜仲
(又名痰药、四棱子)的原生药材之一,味辛、微苦、性平,归肝
经,可祛风除湿、活血通经、化痰散结,主治风湿疼痛、跌打伤
肿、腰痛、经闭、痛经等病症[2 - 3]。民间作为杜仲代用品使用,
有些地方杜仲与大花卫矛混用[4 - 5]。目前中国药典未收载大
花卫矛,国内外也未见有关大花卫矛化学成分及药理作用的
研究报道,因此本研究采用化学反应鉴别法对大花卫矛的化
学成分进行初步分析,以期为合理开发利用大花卫矛提供
依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料与试剂
大花卫矛药材采自四川省凉山彝族自治州会理县红旗牧
场,经西南民族大学刘圆教授鉴定为卫矛科卫矛属植物大花
卫矛(E. grandiflorus Wall. f. grandiflorus)的干燥树皮。
试验所用乙醇、石油醚、盐酸等试剂均为市售分析纯,水
为自制蒸馏水。
1. 2 试验仪器
METTLER AE240 电子分析天平[梅特勒 -托利多仪器
(上海)有限公司产品];HH - 2 型数显恒温水浴锅(国华电
器有限公司产品) ;DHG -9240A 型电热恒温鼓风干燥箱(上
海精密实验设备有限公司产品)。
1. 3 样品的制备[6 - 8]
取大花卫矛药材,45 ℃烘干,粉碎成粗粉,即为试验样品
粗粉。
1. 3. 1 水提取液的制备 称大花卫矛粗粉 10 g,加 100 mL
蒸馏水于具塞锥形瓶中,静置 24 h,用干燥滤器过滤,滤液即
为冷水提取液。取 10 mL冷水供试液,用于氨基酸、多肽和蛋
白质检测。其余滤液及残渣在 60 ℃水浴加热 0. 5 h,过滤,即
得热水提取液,用于还原糖、多糖、皂苷、苷类、生物碱、酚类、
鞣质和有机酸等成分检测。
1. 3. 2 乙醇提取液的制备 称大花卫矛药材粗粉 10 g 于圆
底烧瓶中,加入体积分数为 75%的乙醇 100 mL,静置 1 h,在
80 ℃水浴上加热回流 1 h,冷却后过滤,将滤液用旋转蒸发仪
浓缩,浓缩液即为乙醇供试液,用于黄酮类化合物、醌类、甾体
及三萜类、有机酸、酚类和鞣质等成分检测。取部分乙醇提取
液用水分散,用石油醚萃取至石油醚层无色,用于甾体或三萜
类、挥发油和油脂等成分检测。
1. 3. 3 酸性乙醇提取液的制备 称大花卫矛药材粗粉 3 g,
分别加入体积分数为 5%的 HCl 和体积分数 75%的乙醇各
30 mL,加热回流 1 h,冷却,过滤,滤液即为酸水提取液,用于
生物碱的检测。
1. 3. 4 石油醚提取液的制备 称大花卫矛药材粉末 5 g,加
入沸程为 60 ~ 90 ℃石油醚 50 mL,室温放置过夜,过滤,滤液
置蒸发皿中浓缩,即得石油醚提取液,用于检测挥发油和油脂
甾体或三萜类化合物。
1. 4 化学成分分析
向盛有供试液的试管中加入相关的化学试剂,根据反应
现象(如颜色、沉淀等)判断某种化学成分在大花卫矛药材中
是否存在。
2 结果与分析
大花卫矛水提取液、乙醇提取液、酸性乙醇提取液及石油
醚提取液化学成分分析结果见表 1 至表 3。
由表 1 至表 3 可以看出,大花卫矛中应该含有糖、苷类、
皂苷、鞣质、酚类、生物碱、有机酸、黄酮、醌类、挥发油等化学
成分,与卫矛属植物化学成分[9 - 10]基本相符。
3 结论
彝药大花卫矛是四川凉山彝医多种配方中使用的重要药
材,对痛风、风湿、类风湿等疾病疗效显著。本研究首次对大
花卫矛药材进行了化学成分分析,初步确定大花卫矛中含有
糖类、苷类、皂苷、鞣质、酚类、生物碱、有机酸、黄酮、醌类、挥
—903—江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 7 期
表 1 大花卫矛水提液中化学成分
检查项目 试液或反应 正反应指标 现象 结果
氨基酸、蛋白 加热沉淀反应 沉淀或浑浊度 无 -
质和肽类 双缩脲反应 紫色、红色或紫红 无 -
茚三酮反应 蓝或蓝紫色 无 -
糖和苷类 菲林试剂 砖红色沉淀 砖红色沉淀 ++
Molish 反应 紫红色环 紫红色环 ++
氨性硝酸银反应 褐色斑点 褐色斑点 ++
皂苷 泡沫试验 经振摇产生大量气泡,10 min内泡沫明显不消失 经振摇产生大量气泡,10 min内泡沫明显不消失 ++
酸酐 -浓硫酸试验 黄→红→紫青→污绿色 无 -
氯仿 -浓硫酸试验 棕黄色(氯仿层),绿色荧光(硫酸层) 无 -
鞣质和酚类 FeCl3 反应 蓝、暗绿或蓝紫色 蓝紫色 ++
松木片试验 红色或红紫色 红紫色 ++
生物碱 碘化铋钾反应 橘红色沉淀 橘红色沉淀 +
碘化碘钾反应 浅棕或暗棕色 浅棕色 +
碘化汞钾反应 白色或浅黄色沉淀 白色沉淀 +
磷钼酸 白色或淡黄色沉淀 淡黄色沉淀 +
苦味酸试剂 黄色结晶或非结晶沉淀 黄色沉淀 ++
有机酸 pH值试纸 pH值 < 7 pH值 < 7 ++
溴麝香草酚蓝试验 显黄色 显黄色 ++
注:+表示有此反应,++表示反应显著,-表示无此反应。
表 2 大花卫矛乙醇提取液、酸性乙醇提取液中化学成分
检查项目 试液或反应 正反应指标 现象 结果
鞣质和酚类 FeCl3 反应 蓝、暗绿或蓝紫色 暗绿色 ++
松木片试验 红色或红紫色 红紫色 ++
生物碱 碘化铋钾反应 橘红色沉淀 橘红色沉淀 +
碘化碘钾反应 浅棕或暗棕色 浅棕色 +
碘化汞钾反应 白色或浅黄色沉淀 白色沉淀 ++
磷钼酸 白色或淡黄色沉淀 淡黄色沉淀 ++
苦味酸试剂 黄色结晶或非结晶沉淀 黄色沉淀 ++
黄酮类 三氯化铝反应 黄色 黄色 ++
盐酸 -镁粉反应 红色 红色 +
浓氨水反应 黄色或红色 黄色 ++
醌类 醋酸镁试验 红色 红色 +
盐酸 -镁粉反应 红色 红色 +
碱性试剂显色反应 加碱呈红色,酸化后红色退去 加碱呈红色,酸化后红色退去 ++
甾体或三萜类 醋酐 -浓硫酸试验 黄→红→紫青→污绿色 无 -
氯仿 -浓硫酸试验 棕黄色(氯仿层),绿色荧光(硫酸层) 无 -
挥发油及油脂 油斑试验 油斑室温挥发(挥发油)、油斑不消失(油脂) 油斑室温挥发 +
5%磷钼酸乙醇液 蓝色斑点 蓝色斑点 +
有机酸 pH值 试纸 pH值 < 7 pH值 < 7 ++
溴麝香草酚蓝试验 显黄色 显黄色 ++
注:+表示有此反应,++表示反应显著,-表示无此反应。
表 3 大花卫矛石油醚提取液中化学成分
检查项目 试液或反应 正反应指标 现象 结果
甾体或三萜类 醋酐 -浓硫酸试验 黄→红→紫青→污绿色 无 -
氯仿 -浓硫酸试验 棕黄色(氯仿层) ,绿色荧光(硫酸层) 无 -
挥发油及油脂 油斑试验 油斑室温挥发(挥发油)、油斑不消失(油脂) 油斑室温挥发(挥发油) +(挥发油)
5%磷钼酸乙醇液 蓝色斑点 蓝色斑点 +
注:+表示有此反应,-表示无此反应。
发油等化学成分,为进一步进行该植物生物活性成分的确定、
提取、分离等研究提供基础。因植物中所含化学成分复杂,且
存在相互干扰等问题,对于未检识出的成分,是否存在其他成
分,正在进行深入研究。
—013— 江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 7 期
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徐新娟,李勇超. 2 种植物相对电导率测定方法比较[J]. 江苏农业科学,2014,42(7) :311 - 312.
2 种植物相对电导率测定方法比较
徐新娟,李勇超
(河南科技学院,河南新乡 453003)
摘要:以爬山虎、棉花、玉米、大豆和法国梧桐 5 种植物叶片为材料,对抽气法和浸泡法 2 种处理方法在不同处理
时间下植物叶片相对电导率测定结果进行比较研究。结果表明:采用抽气法,5 种植物均在抽气 15 min 和 20 min 时
达到测定最大值;浸泡法的测定结果依植物种类有所差异,其中爬山虎和棉花在 4 h和 8 h达到最大值,其余 3 种植物
则在 24 h。对抽气 15、20 min与浸泡 4、8、24 h的测定结果作相关分析,结果浸泡 24 h 与抽气 15 min 呈极显著正相
关。采用 2 种方法测定时,抽气 15 min和浸泡 24 h是较为理想的选择。
关键词:相对电导率;抽气法;浸泡法
中图分类号:Q945. 78 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2014)07 - 0311 - 02
收稿日期:2013 - 11 - 13
基金项目:河南省重点攻关项目(编号:122102310277)。
作者简介:徐新娟(1979—) ,女,河南漯河人,硕士,实验师,主要从事
植物生理学研究。E - mail:xinjuan_xu@ 163. com。
逆境胁迫下,植物细胞膜透性会发生改变,可以通过测定
细胞渗透在溶液中的电解质来判断膜受伤害的程度,进而了
解植物的受害程度,因而相对电导率是衡量植物抗性的一个
重要指标,对电导率的测定在植物抗寒、抗旱、耐盐碱研究中
被广泛应用[1 - 3]。在研究试验中,采用一种准确有效的方法
测定植物叶片的相对电导率显得尤为重要。传统试验方法中
采用抽气法进行材料处理,时间虽短,但由于抽气装置容积的
限制,在大批量材料试验时需要重复多次进行,过于费时费
力。浸泡法可以同时处理大批材料,且操作简便,但在浸泡时
间上仍存在争议。因此,本研究比较 5 种植物在抽气法和浸
泡法 2 种处理方法与不同时间处理下叶片相对电导率测定结
果的差异,以期为实践中植物叶片相对电导率的最佳测定提
供参考。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
试验材料为爬山虎、棉花、玉米、大豆和法国梧桐这 5 种
植物的功能叶,均取自河南科技学院试验田。
1. 2 试验设计
相对电导率的测定参照李合生的方法[4],并略作改动。
先用自来水冲洗叶片,除去表面污物后再用去离子水冲洗
1 ~ 2次,用干净纱布吸干叶片表面水分,然后用打孔器打取叶
圆片(避开主叶脉),每组随机取 20 个,放入加有 10 mL 去离
子水的小烧杯中。抽气法中设置 4 个抽气时间:8、15、20、
30 min;浸泡法中设置 7 个时间:1、2、4、6、8、12、24 h。抽气和
浸泡结束后分别测定溶液电导率,记为 R1;然后将小烧杯放
入沸水浴加热 10 min,放至室温后再测定溶液电导率,记为
R2。相对电导率 = R1 /R2 × 100%。
1. 3 数据分析
所有数据均为测定平均值,数据采用 SAS 9. 0 进行统计
分析,LSD法多重比较。
2 结果与分析
2. 1 不同抽气时间对叶片相对电导率测定结果的影响
从表 1 可以看出,抽气时间对相对电导率的测定结果有
显著的影响。5 种植物相对电导率的最大值均在 15 min 或
20 min 出现。显著性分析表明,除棉花外,其余 4 种植物在不
同抽气时间下测定的结果差异显著,其中玉米、大豆和法国梧
桐均在抽气 15 min时达到最大值,爬山虎则在抽气 20 min 时
最高,达 34. 16%,显著高于其他 3 个时间处理。这可能是植
物种类的个体差异所致。抽气 30 min 时数值下降,表明抽气
时间过长会对测定结果起到相反的效果。
—113—江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 7 期