全 文 ：昆 明师范高 等专科学 校学报　　2007, 29 (4):69 ～ 70　　 CN53-1131/G4　ISSN1008-7958
JournalofKunmingTeachersColege
收稿日期:2007-07-09
基金项目:昆明师范高等专科学校重点学科建设资助项目(2004Z002)和校管课题资助项目(2005-02-004)
作者简介:沈放(1973—), 女(满族), 辽宁凤城人 ,讲师 ,硕士 , 从事生物化学 、天然产物开发和药理学教学研究;杨黎江
(1969—), 女 ,云南昆明人 , 副教授 ,硕士 , 主要从事生理学研究.
彝药海枫藤镇痛功效的鉴定
沈　放 , 杨黎江 , 路　斌 , 仝向荣 , 王德斌
(昆明师范高等专科学校 生物系 , 云南 昆明　650031)
摘要:海枫藤 MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li为云南彝族地区常用草药 , 用醋酸致痛法研究不同浓度的海枫
藤茎叶提取物对小鼠的镇痛作用.实验结果表明 , 海枫藤茎和叶的水溶性物质中含有镇痛作用的活性物质 , 并具
有剂量依存关系 ,且该物质在叶中的含量较高.应进一步进行海枫藤提取物镇痛活性成分的追踪研究 ,以期获得
高活性的镇痛新药.
关键词:海枫藤;彝药;镇痛作用;活性成分
中图分类号:R284.1　文献标识码:A　文章编号:1008-7958(2007)04-0069-02
TheAnalgesicEfectonMarsdeniaOficinalisTsiangetP.T.Li
ofTraditionalYiMedicine
SHENFang, YANGLi-jiang, LUBin, TONGXiang-rong, WANGDe-bin
(DepartmentofBiology, KunmingTeachersCollege, YunnanKunming650031, China)
Abstract:TestedtheextractionsfromMarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Lionanalgesicfunctionsofthemice, to
afirmsomeanalgesicmaterialsexistinthatplantwhichwasakindofcommonherbusedbytheYinationalitywho
livedinYunnanprovince, China.WegotfourextractionsfromthestemandleavesofMarsdeniaoficinalisTsiang
etP.T.Li, testedtheactivityofthem.WaterextractionfromthestemandleavesofMarsdeniaoficinalisTsianget
P.T.Lishowedthehighactivitiesofanalgesiainthemice, andhadadirectproportionoftheactivitieswiththeir
dosage.Comparedwitheachother, thehighactivitycompositionwasintheleaves.Itisnecesarytocontinuethis
researchtofindanewmedicinewithhighactivityofanalgesia.
Keywords:MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li;Yimedicine;analgesicfunctions;activitycomponent
　　海枫藤 MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li为
萝藦科牛奶菜属藤木类植物 ,具舒经通络 、除湿止痛
等功效 ,在彝族地区特别是哈尼族地区常用于治疗
风湿、关节炎等病症.目前海枫藤在临床上仅以配方
中药中的一味 ,少量运用于关节炎的治疗 ,提取物成
分和生理活性、药理方面均未见报道.目前对少数民
族医药的开发和研究 , 不但对补充我国传统医药理
论还是对少数民族地区的经济发展和文化开发方面
均具有深远的影响.因此作为一种少数民族常用草
药 ,海枫藤的研究及其进一步的开发具有重要意义.
为确定海枫藤的在镇痛方面的药理作用 , 我们对其
茎 、叶提取物进行了镇痛功效的鉴定实验.
1　材料和方法
1.1　材料
海枫藤(MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li),
由本系翟书华老师于 2006年夏秋两季在昆明市石
林县圭山野外采集而得 ,并分类鉴定.
1.2　仪器和试剂
UV-1600双光束紫外可见分光光度计 , 旋转
蒸发仪 ,低温离心机 ,捣碎机 ,超低温冰箱 ,冷冻干燥
仪(德国 ChristAlpha1-2),试剂均为国产分析纯.
1.3　实验动物
健康体重为 20 ～ 30g的昆明种小白鼠 ,雌雄不
限 , 将实验小鼠随机分组 , 分为给药组和空白组 , 每
组小鼠各 8只.
1.4　实验样品处理
1.4.1　海枫藤药效成分的提取分离
将海枫藤茎、叶粉碎过 20目筛 , 分别称取一定量
的茎或叶粗粉加入 95%的乙醇室温浸泡两天 ,滤纸过
滤 ,用旋转蒸发仪将滤液浓缩至无醇味.然后加入 1.5
倍量的石油醚萃取 ,在水相中加适量活性炭 ,搅拌吸附
4h,过滤,滤液用旋转蒸发仪浓缩至膏状(a);活性炭用
丙酮洗脱,洗脱液浓缩至膏状(b).将 a, b液用冷冻干
燥机干燥 ,分别获得海枫藤茎或叶的水、醇提取物.
1.4.2　样品处理
称取海枫藤茎、叶的水、醇提取物 , 分别溶于一
定量的蒸馏水中 , 得 1mg/0.1mL, 500μg/0.1mL,
100μg/0.1mL, 10μg/0.1mL样品注射液.
1.5　实验步骤
对照组每只小鼠腹腔注射生理盐水 0.2mL/10
g,给药组每只小鼠分别腹腔注射一定浓度的样品注
射液 0.1mL/10g, 30min后腹腔注射 0.6%冰醋酸
0.2mL/10g, 观察 15min内小鼠扭体次数.用以下
公式计算扭体抑制率:
扭体抑制率=对照组扭体次数-实验组扭体次数对照组扭体次数 ×100%.
扭体抑制率大于 50%的可确定其有镇痛作用 ,
大于 70%的可确定其具有明显镇痛作用 [ 1].
2　结果与分析
2.1　海枫藤提取物对小鼠扭体反应的镇痛作用
将给药组小鼠分别注射 1mg/0.1mL的海枫藤茎
醇提物、海枫藤茎水提物、海枫藤叶醇提物和海枫藤叶
水提物后 ,检测其镇痛功效 ,实验结果见表 1所示:
表 1　海枫藤提取物对小鼠扭体反应的镇痛作用
组　别 动物数 /只 扭体次数 /次 扭体抑制率 /%
对照组 8 22.3±6.7 —
海枫藤茎水提物 8 6.2±4.1 72.4＊＊
海枫藤茎醇提物 8 16.5±5.5 26.7
海枫藤叶水提物 8 0.8±4.2 96.4＊＊
海枫藤叶醇提物 8 17.3±6.0 22.4
＊表示具镇痛作用;＊＊表示具明显镇痛作用.
从表 1可看出 , 1mg/0.1mL的海枫藤茎水提物和
叶水提物中含有镇痛活性物质 ,具有明显镇痛效果.
2.2　不同浓度的海枫藤茎水提物对小鼠扭体反应
的镇痛作用
将给药组小鼠分别注射 1mg/0.1mL, 500μg/
0.1mL, 100μg/0.1mL, 10μg/0.1mL的海枫藤茎
水提物 ,检测其镇痛功效 , 实验结果见图 1:
从图 1可以看出 , 海枫藤茎的水溶性物质中所
含有的具镇痛作用的活性物质 ,其剂量与镇痛效果
呈正比关系.茎水提物镇 痛的回归方程为:
y= 0.057 4x+16.116, R2 =0.995 7, 当注射剂量
达 590μg/0.1mL时 ,即可出现镇痛功效.
2.3　不同浓度的海枫藤叶水提物对小鼠扭体反应
的镇痛作用
将给药组小鼠分别注射 1mg/0.1mL, 500μg/
0.1mL, 100μg/0.1mL, 10μg/0.1mL的海枫藤叶
水提物 ,检测其镇痛功效 ,实验结果见图 2:
由图 2可以看出 ,海枫藤叶水溶性物质中含有的
具镇痛作用活性物质与镇痛效果存在剂量依存关系.
叶水提物的镇痛回归方程为:y=0.037 5x+57.186,
R2 =0.976,当注射剂量为 10μg/0.1mL时, 就已经表
现出较好的镇痛效果(扭体抑制率为 57.8%).
3　讨论
彝族地区产名贵药已有悠久历史 , 彝族药物数
达千种 ,且多以鲜品入药 , 并且使用单味药较多 , 是
中国医学伟大宝库中的一个重要组成部分.彝族药
物具有其独有的特色 ,云南白药、排毒养颜胶囊等就
是利用彝族药物资源开发的特色药品 ,已成为民族
药物开发利用的典范.因此通过对彝族传统药用植
物的系统研究 、整理 , 挖掘和开发民族药 ,可进一步
开发新的高效中药产品 , 为天然植物资源开发和利
用取得新的突破和成果.
镇痛药物常用的有罂粟壳、阿冷酊剂、可待因、杜
冷丁、吗啡、海洛因等 ,此类药物具有止痛、镇静、催眠、
止咳、止泻等功效 , 但具有依赖性(即上瘾).随着
Cox-2抑制剂的消炎镇痛药万络(默克公司产品)和
Bextra(辉瑞公司产品)可能使接受心脏搭桥手术的患
者发生心脏病和中风风险上升的消息的公布 ,镇痛药
的安全性成为该类药物的瓶颈.开发和研制新型无副
作用的镇痛药成为药品研发领域新的热点和重点.
海枫藤茎、叶经过乙醇提取和水提取对其有效
成分初步分离后 , 我们对其茎叶提取物进行了镇痛
功效鉴定.研究结果表明 ,海枫藤茎和叶的水溶性物
质中均含有镇痛作用的活性物质 , 而醇提取物中没
有发现具有明显镇痛活性的物质存在;通过将海枫
藤茎 、叶水提取物稀释成 4个浓度检测其镇痛活性
的实验 ,进一步证实了其茎、叶水溶性物质中含有镇
痛活性物质 ,且其镇痛效果与浓度呈正比例关系;对
比茎水溶性物质和叶水溶性物质的镇痛效果 , 我们
发现具有镇痛活性的物质在叶中的含量较高 , 注射
较低含量的叶水提物(10μg/0.1mL)就能达到较好
的镇痛效果(扭体抑制率为 57.8%).因此 , 应进一
步进行海枫藤镇痛活性成分的追踪研究 ,以期获得
高活性的镇痛新药.
(下转第 74页)
70 　　　　　　　　　　　　　昆明师范高等专科学校学报　　　　　　　　　　　　　　2007年 12月
[ 3] 　 NOCTORG, FOYERCH.Ascorbateandglutathione:
keepingactiveoxygenundercontrol[ J] .AnnuRevPlant
PhysiolPlantMolBiol, 1998, 49:249-279.
[ 4] 　SCANDALIOSJG.OxidativeStressandMolecularBiology
ofAntioxidantDefenses[ M] .NewYork:ColdSpringHar-
borLaboratoryPress, 1997.
[ 5] 　SMIRNOFFN.Antioxidantsystemsandplantresponseto
theenvironment.In:SmirnoffN(ed)Environmentand
PlantMetabolism:FlexibilityandAcclimation[ M] .Ox-
ford:BiosScientificPublishers, 1995:217-243.
[ 6] 　KN RZEROC, DURNERJ, B GERP.Alterationsin
theantioxidativesystemofsuspension-culturedsoybean
cells(Glycinemax)inducedbyoxidativestress[ J] .
PhysiologiaPlantarum, 1996, 97:388-396.
[ 7] 　SMINOFFN, CUMBESQJ.Hydroxylradicalscavenging
activityofcompatiblesolutes[ J] .Phytochem, 1989, 28:
1057-1060.
[ 8] 　ANAJ, JOSEAH, LUISADR, etal.Evidenceforthe
presenceoftheascorbate-GlutathionecycleinMitochon-
driaandperoxisomesofpealeaves[ J] .Plantphysiol,
1997, 114:275-284.
[ 9] 　ZHANGBK, ZHENGRL.Animprovedspectrophotomet-
ricassayforsuperoxidedismutasebasedontheautoxida-
tionofpyrogallol[ J] .JournalofLanznouUniversity(Nat-
uralSciences), 1990, 26(3):99-102.
[ 10] 　BRADFORDMM.Arapidandsensitivemethodforthe
quantificationofmicrodramquantitiesofproteinsutili-
zingtheprincipleofprotein-dye-binding[ J] .AnalytBio-
chem, 1976, 44:276-287.
[ 11] 　FOYERCH, LOPEZ-DELGADOH, DATJF.Hydrogen
peroxideandglutathathione-associatedmechanismsof
acclimstorystresstoleranceandsignaling[ J] .Phsiol.
Plant, 1997, 100:241-254.
(上接第 70页)
　　海枫藤 MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li为
萝藦科牛奶菜属藤木类植物 ,具舒经通络 、除湿止痛
等功效 ,在彝药中常用于治疗风湿、关节炎等病症.
萝藦科植物富含具镇痛作用的活性成分 , 如牛心朴
子 (Cynanchum komanovi)[ 2] , 徐长卿 (Cynachum
paniculatum(Bge.)Kitag.)[ 3]等.作为拥有大量萝藦
科植物资源和多种民族医药资源的云南省 , 在该类
植物的开发和研究方面仅限于其化合物结构的研
究 ,对其活性和药效却鲜有报道.目前海枫藤在临床
上仅运用于治疗关节炎 ,提取物成分和生理活性、药
理方面均未见报道.通过本研究可进一步补充对萝
藦科牛奶菜属植物的药用价值认识 , 同时从新药开
发和民族药开发的角度上来说 ,对海枫藤进行有效
成分 、生理活性和药理研究具有重要意义.
[参　考　文　献 ]
[ 1] 　钱之玉.药理学实验与指导 [ M] .中国医药科技出版
社 , 2003:32-33.
[ 2] 　张永康 , 何生虎 , 李勇 , 等.牛心朴子生物碱的镇痛抗
炎作用试验 [ J] .动物医学进展 , 2006, 27(11):99
-100.
[ 3] 　孙奋治 ,蔡鸣 , 楼凤昌 , 等.徐长卿中 3-羟 -4 -甲氧
苯乙酮的镇痛 、抑制胃肠蠕动作用 [ J] .中国中药杂
志 , 1993(6):362-363.
74 　　　　　　　　　　　　　昆明师范高等专科学校学报　　　　　　　　　　　　　　2007年 12月