全 文 ：成都中医药大学学报
JournalofChengduUniversityofTCM
2010年 3月第 33卷第 1期
Mar.2010, Vol.33, No.1
不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量比较
陈胡兰　汤沛然　张梅　裴瑾　董小萍
(1.成都中医药大学药学院 , 四川 成都　610075)
　　摘　要:目的:采用高效液相色谱法对 21批不同产地紫花地丁药材中秦皮乙素的含量进行了测定 。
方法:使用 ThermoHYpersil-keystongBDSC18高效液相色谱柱 , 以甲醇 -0.1%磷酸 (15∶85)为流动相 ,
检测波长 349 nm。结果:不同产地的紫花地丁中秦皮乙素的含量有较大差异 , 其中河北产紫花地丁中秦
皮乙素的含量较高 , 但不稳定;陕西 、河南产紫花地丁中秦皮乙素的含量较稳定。结论:紫花地丁中秦皮
乙素的含量随地域差异变化较大。
关键词:紫花地丁;秦皮乙素;含量
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1004-0668 (2010)01-0072-03
基金项目:四川省中医药管理局科研基金资助项目 (编号:200613)
作者简介:陈胡兰 , 女 , 1974年生;副教授 , 博士 , 从事中药及其复方物质基础及质量标准化研究。
DeterminationofEsculetininViolayedoensisMakino.from
DiferentProducingRegions
CHENHu-lan, TANGPei-Ran, ZHANGMei, etal
(1.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu, 610075, China)
[ Abstract] Objective:Tocomparethecontentsofesculetin inViolayedoensisMakino. from DiferentProducing
Regions.Methods:HPLCmethodwasused.TheHPLCsystemconsistedofThermoHYpersil-keystongBDSC
18
column(150mm×
4.6mm5μm)andmethanol-0.1% Phosphorylation(15:85)mixtureasthemobilephase.Thedetectionwavelengthwasat349
nm.Results:The contentof esculetin in Viola yedoensis Makino. from differentproducing regions is remarkably
different.Conclusion:ProducingregionsisthecrucialfactorforqualityofprocessingandproducinginViolayedoensisMakino.
[ Keywords] :ViolayedoensisMakino;EsculetinDetermination
　　紫花地丁[ 1]为堇菜科 (Violaceae)植物紫花
地丁 ViolayedoensisMakino.的干燥全草 , 其功能为
清热解毒 , 凉血消肿 , 用于疔疮肿毒 , 痈疽发背 ,
丹毒 , 毒蛇咬伤 , 临床应用广泛。
本课题在前期对紫花地丁有效部位的化学成分
进行了研究 , 从中分离得到秦皮乙素 , 且含量较
高 , 文献报道其具有明显的抗炎 、抑菌 、 镇痛 、抗
氧化 、 抗肿瘤和免疫调节等作用[ 2] , 故选用秦皮
乙素作为含量测定指标 , 采用高效液相色谱法测定
了其在 21批不同产地的紫花地丁药材中的含量 。
结果表明紫花地丁中秦皮乙素的含量随地域差异变
化较大 , 现报道如下。
1　材料与仪器
1.1　材料
　紫花地丁药材分别购于四川 、 陕西 、 黑龙
江 、 河北等地药材市场或药店 , 由成都中医药大学
裴瑾博士鉴定为堇菜科植物紫花地丁 Violayedoen-
sisMakino的干燥全草 。药材来源见表 1。
秦皮乙素对照品:批号:110741-200506, 中
国药品生物制品检定所提供。
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DOI :10.13593/j.cnki.51-1501/r.2010.01.020
第 1期 陈胡兰 等　不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量比较　
乙腈 (色谱纯 , 美国 Fisher公司);甲醇 (色
谱纯 , 美国 Fisher公司);高纯水 (实验室自制)。
其余试剂为分析纯。
表 1　紫花地丁药材来源
批号 品种 来源 产地
1 ViolayedoensisMakino. 成都市荷花池药材市场 陕西
2 ViolayedoensisMakino. 南京市药店 陕西
3 ViolayedoensisMakino. 昆明市药材市场 陕西
4 ViolayedoensisMakino. 黑龙江省哈尔滨市药店 陕西
5 ViolayedoensisMakino. 吉林省白山市药材公司 吉林省白山市
6 ViolayedoensisMakino. 吉林省长春市药店 辽宁
7 ViolayedoensisMakino. 河北省保定市药店 河北
8 ViolayedoensisMakino. 黑龙江省哈尔滨市药店 河北
9 ViolayedoensisMakino. 吉林省长春市药店 河北
10 ViolayedoensisMakino. 河北省安国药材市场 河北
11 ViolayedoensisMakino. 广东省广州市药店 河南
12 ViolayedoensisMakino. 北京市药店 河南
13 ViolayedoensisMakino. 北京市药材公司 山西
14 ViolayedoensisMakino. 北京市药材公司 山东
15 ViolayedoensisMakino. 北京市药材公司 山东
16 ViolayedoensisMakino. 北京市药材公司 江苏
17 ViolayedoensisMakino. 北京市药材公司 江苏
18 ViolayedoensisMakino. 重庆市药材市场 四川
19 ViolayedoensisMakino. 黑龙江省哈尔滨市药店 湖南
20 ViolayedoensisMakino. 广东省广州市药店 广西
21 ViolayedoensisMakino. 贵州省贵阳市药房 贵州
1.2　仪器
Waters2695 SeparationModule高效液相色谱
仪 , Waters2996PhotodiodeAray检测器 , Empower
Pro色谱工作站;BP121S型 Sartorius电子天平 (北
京 Sartorius天平有限公司 , 十万分之一);CQ250
超声波清洗机。
2　实验方法
2.1　色谱条件
色谱柱:ThermoHYpersil-keystongBDSC18高
效液相色谱柱 (150mm×4.6mm5μm);流动相:
甲醇-0.1%磷酸 (15∶85);流速:1.0 mL/min;柱
温:30℃。检测波长:349 nm。理论板数以秦皮乙
素峰计算不低于 3000。
2.2　对照品溶液制备
精密称取秦皮乙素对照品适量 , 用甲醇溶解 ,
制得 54.4 μg/mL的秦皮乙素对照品溶液。
2.3　供试品的制备
2.3.1　提取时间的考察
精密称取紫花地丁药材粉末约 1 g, 置 50 mL
平底烧瓶中 , 精密加入甲醇 25mL, 称定重量 。采
用不同时间对样品进行加热回流提取 , 放冷 , 再称
定重量 , 用甲醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤过 。吸
取续滤液 5 mL, 置 10 mL量瓶中 , 用甲醇定容至
刻度。取该溶液 10 μL, 注入高效液相色谱仪 , 进
行测定 。实验结果表明提取时间为 0.5 h时峰面积
最低 , 其余时间的峰面积相差不大 , 为确保其他成
分不被破坏 , 选择提取时间为 1h。
2.3.2　不同提取方法的考察
精密称取紫花地丁药材粉末 2份 , 各约 1 g,
按照 “2.3.1” 项下方法制备供试品溶液 , 分别采
用甲醇回流和甲醇超声提取制备样品 , 进行测定 。
实验结果表明回流提取方法比超声提取法所提取出
的秦皮乙素含量高 。
2.4　线性关系考察
分别精密吸取秦皮乙素对照品溶液 (54.4μg/
mL)5μL, 10 μL, 15 μL, 20 μL, 25 μL, 30μL
注入高效液色谱仪中 , 以甲醇 -磷酸 (15∶85)为流
动相 , 流速 1 mL/min, 进行等度洗脱 , 检测波长
349nm, 记录色谱图 , 依次测定峰面积 , 以峰面积
(y)对进样量 (x)进行线性回归 , 得到回归方
程:y=533981x+83287, R =0.9996。结果表
明 , 秦皮乙素在 0.272 ～ 1.632μg范围内呈良好的
线性关系 。
2.5　精密度试验
精密吸取对照品溶液 (54.4 μg/mL)10 μL,
注入高效液色谱仪 , 重复进样 6次 , 试验结果表明
6次测定其峰面积 RSD=0.09%, 说明仪器的精密
度良好。
2.6　稳定性试验
精密称取紫花地丁药材粉末约 1g, 按照
“2.3” 项下方法制备供试品溶液 。精密吸取供试
品溶液 10 μL, 分别在 0、 2、 4、 6、 8、 10、 12、
14h重复进样 , 测定 。结果表明供试品溶液在 14
h内稳定性良好 。
2.7　重复性试验
精密称取紫花地丁药材粉末共 6份 , 各约 1g,
按照 “2.3” 项下供试品溶液的制备方法 , 制成供
试品溶液 , 分别进样 10 μL, 测定 , 试验结果表明
6份样品测定结果 RSD=0.28%, 说明该方法的重
复性良好 。
2.8　加样回收试验
精密称取紫花地丁药材粉末共 6份 , 各约 0.5
g, 置 50 mL圆底烧瓶中 , 分别精密加入甲醇 21
mL和秦皮乙素对照品溶液 (0.0528 mg/mL)3.0
mL, 称定重量。加热回流提取 1h, 放冷 , 再称定
重量 , 用甲醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤过 。吸取
续滤液 5 mL, 置 10 mL量瓶中 , 用甲醇定容至刻
度。分别取上述溶液 10 μL, 注入高效液相色谱
仪 , 测定 。结果见表 2。 6份样品平均回收率为
(下转第 96页)　　
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成都中医药大学学报 2010年第 33卷
3.2　注意排便情况
观察患者排便情况。指导患者养成良好的排便
习惯 , 如出现大便困难 , 嘱患者切勿盲目用力 , 以
防用力排便使腹压增加 , 诱发恶性心律失常 , 甚至
心脏破裂而死亡 。便秘时可食蜂蜜 、 香蕉 、 核桃
仁 , 给予缓泻剂 , 或番泻叶代茶饮等帮助排便 。
4　生活护理
4.1　一般护理
病室宜安静 、 整洁 、 空气清新 、 温湿度适宜 ,
并注意保暖 , 病情轻者可轻微活动 , 重者应绝对卧
床休息 , 在重病卧床期间 , 一切生活护理如洗漱 、
进食 、 二便 、翻身等 , 应由护理人员协助 , 并预防
褥疮及其它护理并发症的发生 。
4.2　起居规律有常
寒邪内侵是胸痹原因之一 , 明代养生典籍
《遵生八笺》 指出 “季冬之月 , 天地闭寒 , 阳潜阴
施 , 万物伏藏 , 去冻就温……” 因此胸痹病人冬
季须注意保暖 , 避免寒邪凝滞心脉而发胸痹 。 《素
问 ·上古天真论 》 曰:“饮食有节 , 起居有常 , 不
忘作劳 , 故能形与神俱。” 我们依据 “天人合一 ”
的理论 , 与四季气候相适应 , 帮助病人建立合理的
作息时间表。病情恢复后 , 多参与有氧体育锻炼 ,
如气功 、 慢步走等 , 但须掌握合理的运动方法 , 要
避免运动前后情绪激动;运动前不宜饱餐;运动要
循序渐进 , 持之以恒;运动时要注意保暖;运动后
避免洗热水澡等。通过锻炼 , 可是气血条达 , 血脉
通畅 , 有利于机体康复 。
5　服药护理
择时服药的机理根植于中医阴阳学说的观点 ,
以及人体内阴阳变化调节的规律性 。强调根据人体
气血盛衰变化 , 阳药用于阴时 , 阴药用于阳时 , 升
药用于降时 , 而降药用于升时 。根据八钢辩证确定
服药的温度 , 即 “寒者热之” 、 “热者寒之” 的服
药原则 , 以提高药力[ 2] 。
6　睡眠调护
胸痹病人日睡眠应保持在 8 h为宜。可采取下
列措施帮助病人入睡:①按时睡觉 , 使睡眠建立起
时间规律;②晚餐不宜过饱 , 睡前不吃零食 、不喝
浓茶 、不做剧烈运动 , 不过多思考问题;③睡前可
用热水泡脚 20min;④午睡时间不宜过长 , 一般控
制在 1 h之内;⑤适当辅以安神养心之品 。
(收稿日期: 2009-05-09)
　　 (上接第 73页)
99.89%, RSD=2.63%, 回收率良好 。
2.9　样品测定
精密称取 21批紫花地丁粉末约 1 g, 按上述方
法制备供试品溶液 , 进样 10 μL, 依法测定 。结果
见表 3。
表 3　不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量 (n=3)
产地 含量 (%) RSD(%)
陕西 0.349 1.05
陕西 0.303 1.24
陕西 0.344 1.47
陕西 0.313 1.33
吉林省白山市 0.367 1.09
辽宁 0.448 2.01
河北 0.589 1.41
河北 0.636 1.56
河北 0.808 1.37
河北 1.030 1.77
河南 0.317 1.03
河南 0.399 1.11
山西 0.662 2.35
山东 0.286 1.98
山东 0.246 1.47
江苏 0.465 1.54
江苏 0.657 1.26
四川 0.386 1.65
湖南 0.453 2.04
广西 0.420 1.63
贵州 0.524 1.75
表 2　加样回收率试验结果
编号 取样量 (g)
样品中秦皮乙
素含量 (mg)
添加量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0.529 1.850
2 0.593 2.072
3 0.513 1.794
4 0.535 1.869
5 0.508 1.775
6 0.505 1.776
1.584
3.409 98.43%
3.727 104.5%
3.415 102.35%
3.405 96.95%
3.336 98.6%
3.327 98.56%
99.89% 2.63%
3　结果与讨论
由表 3看出 , 21批紫花地丁药材中秦皮乙素
的平均含量为 0.476%;含量最高的是购自河北安
国药材市 场产于 河北的 紫花地丁 , 含量 为
1.030%;来自河北 、 山西 、江苏的紫花地丁 , 秦
皮乙素的含量较高;产于山东 、陕西 、 河南的紫花
地丁 , 秦皮乙素的含量普遍偏低;产于吉林 、 广
西 、 辽宁等省的紫花地丁 , 秦皮乙素的含量接近平
均含量;产于陕西 、河南的紫花地丁 , 各批次间秦
皮乙素的含量比较接近 。说明不同产地的紫花地丁
中秦皮乙素的含量存在差异。同一产地 , 可能由于
采收期的不同 , 秦皮乙素的含量也有差异。
参考文献
[ 1] 国家药典委员会 .中国药典·一部 [ M] .2005年版 .
北京:化学工业出版社 , 2005.
[ 2] 江西新医学院 .中药大辞典· 下册 [ M] .上海:上
海科技出版社 , 2001:2178.
(收稿日期: 2009-05-17)
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