全 文 ：水榆花楸微型繁殖技术的研究
宋洪文，张象君，辛宝英，王小岚 (黑龙江林业职业技术学院生态工程系，黑龙江牡丹江 157011)
摘要 ［目的］研究水榆花楸的微型繁殖技术。［方法］以带侧芽的水榆花楸茎段为外植体，研究不同外植体消毒时间、基本培养基及植
物生长调节剂种类和浓度对水榆花楸侧芽诱导、丛生芽增殖及生根的影响。［结果］外植体的最佳消毒时间为 7 min;侧芽的最佳诱导培
养基为 MS + KT 2． 0 mg /L + IBA 0． 2 mg /L;丛生芽的最佳增殖培养基为MS + KT 2． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L;最佳生根培养基为 1 /2MS +
IBA 0． 5 mg /L。［结论］该研究为水榆花楸苗木的大规模工业化生产提供了技术支持。
关键词 水榆花楸;微型繁殖;培养基;诱导率;增殖率;生根率
中图分类号 S792． 25 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2013)05 －01898 －02
Study on Micro Propagation Technology of Sorbus alnifolia
SONG Hong-wen et al (Department of Ecological Engineering，Heilongjiang Forestry Vocation － Technical College，Mudanjiang，Hei-
longjiang 157011)
Abstract ［Objective］The aim was to study the micro propagation technology of Sorbus alnifolia． ［Method］The effects of different sterilization
time，basic culture mediums，plant growth regulator types and concentrations on the lateral buds induction，clustered buds proliferation and roo-
ting of S． alnifolia were studied by using stem segments with lateral buds as explants． ［Result］The best sterilization time of explants was 7 min;
the best induction medium of lateral buds was MS + KT 2． 0 mg /L + IBA 0． 2 mg /L;the best proliferation medium of clustered buds was MS + KT
2． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L;the best rooting medium was 1 /2MS + IBA 0． 5 mg /L． ［Conclusion］This study provided technical support for the
large － scale industrialization production of S． alnifolia seedlings．
Key words Sorbus alnifolia;Micro propagation;Medium;Induction rate;Proliferation rate;Rooting rate
作者简介 宋洪文(1969 － ) ，女，黑龙江望奎人，副教授，从事植物学研
究，E-mail:shw_mdjlx@ 163． com。
收稿日期 2013-01-23
水榆花楸［Sorbus alnifolia(Sieb． et Zucc)K． Koch］是蔷薇
科花楸属的一种落叶乔木，其树高可达 20 m，叶片呈卵形或
椭圆卵形，长 5 ～10 cm，宽 3 ～6 cm，先端短渐尖，基部宽楔形
至圆形，边缘有不整齐的尖锐重锯齿，复伞房花序较疏松，具
花 6 ～25 朵，花瓣卵形或近圆形，呈白色，果实椭圆形或卵
形，呈红色或黄色，花期 5月，果期 8 ～9月［1］。
水榆花楸树体高大，干直光滑，树冠圆锥状，叶形美观，
秋季叶变成金黄色，果实转为鲜红色，具有很高的观赏价值，
园林应用前景广阔。但其种子发芽率低，苗木数量满足不了
市场需求，而采用微型繁殖技术育苗可在短期内获得大量优
质苗木，解决生产需求。笔者在文中就此方面开展了研究。
1 材料与方法
1． 1 材料 选取二年生水榆花楸枝条的侧芽作为外植体材
料，于 2011年 4月 15日在黑龙江林业职业技术学院植物园
内采取。
1． 2 方法
1． 2． 1 外植体消毒时间选择。采集腋芽饱满的枝条，除去
叶片，切成 2 ～3 cm的茎段(每段带有 1 个侧芽) ，用自来水
冲洗 5 min，75%乙醇消毒 30 s，再用 0． 1% AgCl2 分别消毒
6、7、8、9、10 min，无菌水冲洗 8次［2］后，在超净工作台上接种
至 MS培养基上，1周后统计消毒效果。
1． 2． 2 基本培养基选择。将外植体分别接种到 MS、B5、
white、N6 基本培养基上
［3］，2周后统计生长情况。
1． 2． 3 生长调节剂选择。将外植体分别接种到 MS + BA
1． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L、MS + KT 1． 0 mg /L + NAA 0． 1
mg /L、MS + BA 1． 0 mg /L + IBA 0． 1 mg /L、MS + KT 1． 0 mg /L
+ IBA 0． 1 mg /L 4种培养基上，2周后统计生长情况。
1． 2． 4 侧芽诱导培养。在“1． 2． 3”试验基础上，以 MS为基
本培养基，加入细胞分裂素 KT(浓度分别为 1． 0、1． 5、2． 0、
2． 5、3． 0 mg /L)和生长素 IBA(浓度分别为 0． 1、0． 2、0． 4、0． 6
mg /L)作为诱导培养基，将枝条中段的外植体接种在不同的
侧芽诱导培养基上，2周后统计生长情况。
1． 2． 5 丛生芽增殖培养。在“1．2．3”试验基础上，以 MS为基
本培养基，加入细胞分裂素 KT(浓度分别为 1． 0、1． 5、2． 0、2． 5、
3． 0 mg /L)和生长素 IBA(浓度分别为 0． 1、0． 2、0． 5、1． 0 mg /L)
作为增殖培养基，剪取在培养基 MS上产生的 1 cm长侧芽，接
种在不同丛生芽诱导培养基上，2周后统计生长情况。
1． 2． 6 生根培养。以 1 /2MS 为基本培养基，生长素采用
NAA、IBA，浓度 0． 1、0． 5、1． 0、1． 5、2． 0 mg /L，剪取在培养基
MS上产生的 1 cm长侧芽，接种在不同根诱导培养基上，20 d
后统计根生长情况。
2 结果与分析
2． 1 外植体的消毒 外植体消毒接种后 1 周，每处理随机
抽取 40个样本，统计分析结果，发现不同处理时间之间外植
体消毒成活率差异显著。其中 7 min与其他时间消毒效果差
异显著(P ＜ 0． 05) ，效果最好，成活率为 78． 42%;其次是消
毒 6、8 min，成活率为66%左右，差异不显著(P ＞0． 05) ;最差
为 10 min，成活率仅为 8． 44%。外植体消毒 6 ～7 min时成活
率降低的原因是:灭菌不彻底，产生污染;消毒 9 ～ 10 min成
活率降低的原因是:产生药害;消毒 8 min时，不但产生污染，
还有药害。随着消毒时间的延长，消毒作用明显增强，但药
害也明显加大。生产上用 0． 1% AgCl2 消毒 7 min为最佳。
2． 2 基本培养基选择 从各培养基处理中随机选取 40 个
样本分析得到 MS、B5、white、N6培养基的侧芽诱导率分别为
40． 33%、25． 42%、24． 00%、25． 37%，其中，B5、white、N6 3 种
责任编辑 朱琼琼 责任校对 况玲玲安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2013，41(5):1898 － 1899
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.05.160
培养基之间差异不显著(P ＞ 0． 05) ，而 MS培养基的诱导率
高于其他 3种培养基且差异显著(P ＜ 0． 05) ，因此 MS 较其
他 3种培养基更适于水榆花楸培养。
2． 3 生长调节剂选择 从 4种培养基处理中各随机抽取 20
个样本，统计分析侧芽诱导率及芽高生长情况，结果见表 1。
表 1 不同生长调节剂组合对外植体生长的影响
生长调节剂 诱导率∥% 芽高生长∥cm
MS + BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L 12． 370 ±5． 101 b 0． 500 ±3． 021 b
MS + BA 1． 0 mg /L + IBA 0． 1 mg /L 15． 420 ±2． 564 b 1． 900 ±4． 211 a
MS + KT 1． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L 50． 000 ±4． 516 a 0． 500 ±3． 932 b
MS + KT 1． 0 mg /L + IBA 0． 1 mg /L 53． 210 ±2． 201a 1． 700 ±3． 413 a
注:同列不同小写字母差异显著(P ＜0． 05)。
从诱导率结果看:含 BA 的培养基组间差异不显著，含
KT的培养基组间差异不显著，含 BA 与 KT 的组间差异显
著，且含 KT的培养基诱导作用优于含 BA 的培养基。从芽
高生长结果看:培养基中含 NAA的组间差异不显著，培养基
含有 IBA的组间差异也不显著(P ＞0． 05) ，而含 NAA与 IBA
的组间差异显著，且含 IBA的培养基促进芽高生长作用优于
含 NAA的培养基。因而水榆花楸微型繁殖细胞分裂素选用
KT，生长素选用 IBA。
2． 4 侧芽诱导 随机抽取各培养基处理样品各 40 个，统计
分析侧芽有效(不含玻璃化或形成愈伤组织的芽)［4］诱导率，
从表 2可见不同浓度生长调节剂对水榆花楸诱导效果显著，
浓度过低诱导作用小，诱导率低，而浓度过高则形成愈伤组
织，在 MS + KT 2． 0 mg /L + IBA 0． 2 mg /L培养基上有效侧芽
诱导率最高，达 84． 33%左右。
表 2 不同生长调节剂组合对有效侧芽诱导率的影响
IBA浓度
mg /L
KT浓度∥mg /L
1． 0 1． 5 2． 0 2． 5 3． 0
0． 1 54． 40 ±1． 234 Cb 65． 49 ±2． 652 Ba 82． 53 ±2． 982 Aa 80． 02 ±2． 232 Aa 42． 61 ±2． 811 Da
0． 2 58． 44 ±1． 326 Ca 62． 61 ±2． 580 Ba 84． 33 ±1． 591 Aa 83． 51 ±1． 692 Aa 32． 55 ±2． 904 Db
0． 4 43． 53 ±3． 967 Cc 51． 68 ±3． 152 Bb 72． 59 ±2． 993 Ab 74． 59 ±1． 094 Ab 28． 36 ±2． 332 Dbc
0． 6 40． 73 ±2． 287 Bc 35． 35 ±4． 117 Bc 65． 52 ±3． 641 Ac 61． 51 ±2． 983 Ac 24． 57 ±3． 537 Cc
注:同行不同大写字母代表差异显著，同列不同小写字母代表差异显著(P ＜0． 05)。
2． 5 增殖培养 随机抽取各培养基处理样品各 40 个，统计
分析丛生芽增殖率(表 3) ，发现不同生长添加剂浓度组合间
有效(不含玻璃化或形成愈伤组织的芽)丛生芽增殖率差异
显著，KT促进芽分化，KT浓度在 1 ～ 3 mg /L时差异显著，随
着浓度增加增殖率达最大值 7． 0(KT 2． 5 mg /L) ，KT浓度为
3 mg /L时部分芽产生玻璃化或形成愈伤组织，有效丛生芽增
值率降低。在同一 KT浓度下，随着 IBA浓度的升高，有效丛
生芽增殖率降低，利于芽生长，抑制丛生芽的分化。综合分
析，最佳增殖培养基为MS + KT 2． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L，有
效增殖率为 7． 0。
表 3 不同生长调节剂组合对有效丛生芽增殖率的影响
IBA浓度
mg /L
KT浓度∥mg /L
1． 0 1． 5 2． 0 2． 5 3． 0
0． 1 1． 4 ±0． 59 Da 3． 6 ±0． 57 Ca 5． 5 ±0． 52 Ba 7． 0 ±0． 72 Aa 4． 2 ±0． 17 Ca
0． 2 1． 7 ±0． 23 Da 3． 4 ±0． 56 Ca 4． 7 ±0． 13 Bb 6． 3 ±0． 14 Ab 4． 0 ±0． 38 Ca
0． 5 1． 3 ±0． 55 Da 2． 4 ±0． 67 Cb 4． 3 ±0． 75 Bb 5． 6 ±0． 76 Ac 3． 8 ±0． 58 Ba
1． 0 － 0． 6 ±0． 60 Cc 1． 7 ±0． 67 Bc 4． 1 ±0． 60 Ad 3． 5 ±0． 51 Ab
注:同行不同大写字母代表差异显著，同列不同小写字母代表差异显著(P ＜0． 05)。
2． 6 生根培养 随机抽取不同培养基处理样品各 40个，统
计有效根发生率(表 4) ，发现 IBA、NAA均能促进生根，当浓
度低于 1． 0 mg /L时，随着浓度增加促进生根效果明显，而当
浓度大于 1． 0 mg /L时，随着浓度增加有效根数量减少，形成
愈伤组织、玻璃化现象增加。相同浓度的 IBA、NAA 间差异
显著，且 IBA优于 NAA。综上所述，确定最佳根诱导培养基
为 1 /2MS + IBA 0． 5 mg /L，生根率达 85． 3%。
表 4 不同培养基的有效根发生率
浓度∥mg /L NAA IBA
0． 1 13． 32 ±1． 245 Db 30． 21 ±0． 913 Ca
0． 5 45． 21 ±1． 237 Bb 85． 34 ±1． 251 Aa
1． 0 56． 20 ±1． 342 Ab 66． 51 ±1． 795 Ba
1． 5 32． 61 ±0． 825 Ca 33． 32 ±1． 042 Ca
2． 0 12． 64 ±1． 202 DC 23． 32 ±1． 234 Da
注:同行不同大写字母代表差异显著，同列不同小写字母代表差异显
著(P ＜0． 05)。
3 结论
该试验建立了水榆花楸微型繁殖工厂化为育苗技术，
即:外植体采用二年生枝条的侧芽茎段;外植体用 0． 1%
AgCl2 消毒时消毒时间应选择 7 min 为最佳，成活率为
78． 42%;诱导侧芽分化最佳培养基为 MS + KT 2． 0 mg /L +
IBA 0． 2 mg /L，诱导率达 84． 33%;丛生芽增殖最佳培养基为
MS + KT 2． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L，增值率为 7． 0;最佳生根
培养基 1 /2MS + IBA 0． 5 mg /L，生根率达 85． 3%。
参考文献
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