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紫花地丁微量元素的形态分析



全 文 :或偏碱性条件下存放。
(5)纳米银对细菌、真菌均具有较强的抑杀活
性,且无耐药性问题,对压疮、烧烫伤等皮肤外伤创
面具有较好的抗感染和促愈合作用,2006年4月,
国家食品药品监督管理局发布《关于纳米生物材料
类医疗器械产品分类调整的通知》(国食药监械
[2006]146号),将纳米生物材料类医疗器械(如纳
米金属银材料制成的医疗器械)明确为第三类医疗
器械管理,目前纳米银的安全性试验尚无国家标准,
研究单位有关纳米银的安全性评价资料经国家食药
监审定批准方可拿到批文,从前省级药食监批准的
纳米银械准字到期后须补充安全性研究资料重新报
国家局审批,虽然前些年有不少省级药食局批准的纳
米银产品面市,但是目前市面上已经看不到纳米银产
品,可见国家对纳米银审批的严格程度。目前市面上
有银离子产品,用于皮肤外伤的抗感染治疗,但是此
类产品的疗效不如纳米银,且不稳定,易变黑。
(6)作为抗菌剂来说,纳米银材料具有很多优
点,如抗菌作用强,无耐药性等。但在一些条件下,
纳米银材料容易发生颗粒聚集而失去纳米特性或被
氧化为棕色的氧化银,从而影响该材料的抗菌效果。
且在外伤治疗时,纳米银材料与生物体接触是否会
产生一些负面的效应,对正常细胞是否也具有杀伤
作用等涉及到纳米银作为抗菌材料本身的生物安全
性问题还有待研究。当前,纳米银在国内的发展阻
力较大,不过,美军最新的净水剂成份已将含氯改为
含银,这证明纳米银大有可用,下一步我们将加快研
究纳米银的毒理学与安全性问题,以期早日开发出
安全、有效、稳定的可用于外伤治疗的纳米银制剂。
参考文献:
[1] 陈美婉,彭新生,吴琳娜,等.纳米银抗菌剂的研究和应用[J].
中国消毒学杂志,2009,26(4):424-426.
[2] 马守栋,李明春,曹恩惠,等.纳米银溶液的质量标准研究[J].
中国药房,2011,22(41):3892-3893.
[收稿日期]2015-12-18
[基金项目]国家自然科学基金资助项目(编号:H2803/81202902);四川省科技厅项目(编号:2016TD0006) [作者简介]杨炀,女,在读硕士
生,研究方向:中药物质基础及质量标准化,电话:15202892932,E-mail:suiyhyang@163.com [通讯作者]陈胡兰,女,教授,研究方向:中药
物质基础及质量标准化,电话:15828388570,E-mail:hlan999@126.com
紫花地丁微量元素的形态分析
杨炀1,江泓1,张小飞1,傅超美1,2,3,邓赟1,2,3,董小萍1,2,3,陈胡兰1,2,3 (1.成都中医药大学药学院,四川 成都
611137;2.中药材标准化教育部重点实验室,四川 成都611137;3.中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培
育基地,四川 成都611137)
[摘要] 目的:测定紫花地丁中微量元素3种形态的含量,对微量元素在紫花地丁中的存在形态进行研究。方法:分别采用盐
酸浸提和滤膜分离得到紫花地丁中微量元素的无机态,颗粒态和溶解态,利用电感耦合等离子体-质谱法(ICP-MS)测定各形
态的含量,并进行了系统的形态分析。结果:9个微量元素大多均以无机态的形式存在,有机态所占比例在10%~53%之间。
汞的有机态比例虽在90%以上,但主要存在于颗粒态中,因此减低了水煎液中汞的毒性。除汞外,其他微量元素的可溶态比
例均较高,在42%~92%之间,它们在水煎液中的浸出率均不超过51%。结论:浸出率较低,可知传统的水煎液有利于减低重
金属的含量;而有机态占有一定的比例,为后期紫花地丁的物质基础研究奠定基础。
[关键词] 紫花地丁;微量元素;形态分析 ;ICP-MS
[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1001-5213(2016)16-1358-05 DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2016.16.06
Speciation analysis of trace elements in Viola yedoensis Makino
YANG Yang1,JIANG Hong1,ZHANG Xiao-fei 1,FU Chao-mei 1,2,3,DENG Yun1,2,3,SONG Xiao-ping1,2,3,
CHEN Hu-lan1,2,3 (1.School of Pharmacy,Chengdu University of TCM,Sichuang Chengdu 611137,China;2.Key Labora-
tory of Standardization of Chinese Herbal Medicines of Ministry of Education,Sichuang Chengdu611137,China;3.Province and
Ministry Jointly Constructed Key Laboratory and Breeding Base of System Research,Development and Utilization of Traditional
Chinese Medicine Resources,Sichuang Chengdu 611137,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To measure contents of trace elements in three forms in Viola yedoensis Makino,and research these
forms of trace elements.METHODS Hydrochloric acid extraction and membrane separation were used to extract inorganic
form,particulate form and dissolved form of trace elements in Viola and inductively coupled plasma mass spectrometry(ICP-
·8531· 中国医院药学杂志2016年8月第36卷第16期Chin Hosp Pharm J,Aug 2016,Vol 36,No.16
MS)was employed to determine contents of trace elements in various forms.Then these data were systematicaly analyzed.RE-
SULTS Most of nine trace elements existed in inorganic form,while proportion of organic form was between 10%to 53%.
Proportion of organic Hg was more than 90%,but mainly in form of particles,so toxicity of Hg was reduced in decoction.Ex-
cept for Hg,proportions of dissolved form of trace elements were higher and fel in range of 42%to 92%.Leaching rates of
these trace elements in decoction were not higher than51%.CONCLUSION Traditional decoction was conducive to reduce con-
tents of heavy metals at low leaching rates.Inorganic forms of trace elements occupy certain proportions,so dissolving trace ele-
ments can play pharmacodynamic effects in different forms.
KEY WORDS:Viola yedoensis Makino;trace element;speciation analysis;ICP-MS
  紫花地丁为堇菜科植物紫花地丁Viola ye-
doensis Makino.的干燥全草,为常用中药,收载于
《中国药典》2010年版。有清热解毒、凉血消肿之功
效,常用于治疗疔疮肿毒,痈疽发背,丹毒,毒蛇咬
伤[1]等症。为清热解毒要药。紫花地丁主要含有黄
酮、有机酸等有效成分,同时富含铜(Cu)、锌(Zn)等
具有免疫调节的微量元素[2]。现代研究发现清热解
毒中药与其免疫调节有关,而微量元素的作用不仅
与其含量有关,更在于其存在形态[3-4]。目前分离微
量元素不同形态有树脂法、色谱法、化学萃取法、超
滤法。结合原子吸收光谱法、电感耦合等离子体原
子发射光谱/质谱、原子荧光光谱法、化学发光法、等
离子选择电极法等分析手段,用于形态分析[5-7]。而
电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)具有极低检测限、
极宽动态线性范围及跟踪多元素信号变化等优点,
弥补了其余各检测器的不足,已广泛应用于食
品[8-9]、岩土[10]、中药[11-12]、生物样品[13-14]等学科的
分析,在形态分析中受到了人们的重视[15]。
目前人们做了大量的微量元素形态分析,但紫
花地丁中微量元素的形态分析还处于空白阶段。本
实验采取煎煮方式得到紫花地丁的水煎液,利用盐
酸浸提和膜分离得到微量元素的各形态,采用ICP-
MS法测定各形态的含量。结合前期测得的微量元
素的总量,对结果进行统计分析,为紫花地丁物质基
础研究奠定基础。
1 材料
1.1 试药 各元素标准溶液均为国家标准样品:
Hg(编号 GSB04-1729-2004)、Mn(编号 GSB04-
1736-2004)、Cd(编号 GSB04-1721-2004)、Zn(编号
GSB04-1761-2004)、Cu(编号 GSB04-1725-2004)、
Cr[编号 GSB04-1723-2004(a)]、As(编号 GSB04-
1714-2004)、Ca[编号 GBW(E)080977]、Pb(编号
GSB04-1742-2004)、Bi(编号GSB04-1719-2004)、In
(编号 GSB04-1731-2004)、Ge(编号 GSB04-1728-
2004)单元素标准溶液(1 000μg·mL
-1)(国家有色
金属及电子材料分析测试中心);内标物质Ge、In、
Bi(国家有色金属及电子材料分析测试中心,质量浓
度为1 000μg·mL
-1);标准调谐液(美国安捷伦公
司,含 Ce、Co、Li、Mg、Ti、Y 各1μg·L
-1);硝酸
(GR,成都市科龙化工试剂厂,500 mL);实验用水
为超纯水。紫花地丁分别购于全国各地,经成都中
医药大学裴瑾教授鉴定,符合《中国药典》2015年版
紫花地丁项下要求。
1.2 仪器 MDS-8G微波消解仪(上海新仪微波化
学科技有限公司);7700X电感耦合等离子体质谱仪
(美国 Aglient公司);Molecular超纯水机(美国
Molecular公司);ME204E电子天平(德国 Mettler
Toledo公司)。
2 方法
2.1 样品前处理
2.1.1 无机态的分离 参考文献[13]中无机态的
制备方法。精密称取干燥的1.00g紫花地丁药材粉
末,加入20 mL1.2 mol·L-1的盐酸在70℃水浴下
振荡1 h,将所得的混合物以4 000 r·min-1离心10
min。取上清液用0.45μm膜过滤器过滤,将滤液定
容至50 mL(A液),备用。按“2.3”项下方法测定其
微量元素含量[13,16]。
2.1.2 水煎液的准备 参考文献[17]中的制备方
法。精密称取紫花地丁药材20 g,加入200 mL超
纯水,微沸1 h,倒出水煎液,再加200 mL超纯水微
沸1 h,合并2次水煎液,定容至500 mL(B液)。取
B液100 mL,高速离心(1×104 r·min-1)10 min后,
上清液过0.45μm滤膜,滤液定容至100 mL,得到
滤液C液,取 B液和 C 液各10 mL,按“2.2”与
“2.3”项下方法进行消解与测定其微量元素含量,可
得到微量元素溶解态含量,并计算得到颗粒态含
量[17-18]。加0.5 mL甲醛防腐。
微量元素浸出率(μg·g
-1)=(水煎液质量分
数/干药材质量分数)×100%
2.2 样品溶液的制备 分别精密量取B、C溶液3
mL,置聚四氟乙烯(PTFE)微波消解罐中,各加硝
酸5 mL,采用程序升温:0~10 min 从室温升至
120℃;11~16 min从120℃升至150℃;16~22
min从150℃升至180℃,功率1 000 W的方法进行微
·9531·中国医院药学杂志2016年8月第36卷第16期Chin Hosp Pharm J,Aug 2016,Vol 36,No.16
波消解。待消解完全后,取出消解罐,冷却至室温,
将消解液转入25 mL量瓶中,加水至25 mL,摇匀,
即得。同法制备空白溶液[19]。
2.3 ICP-MS法测定含量 分别量取 A液3 mL,
B、C消解后的溶液3 mL,按下述条件进行测定微
量元素的含量,条件为:射频功率:1 550 W;采样
深度:10 mm;等离子气流量:15 L·min-1;载气流
速:0.90 L·min-1;雾化室温度:2℃;碰撞模式:
He;气流量:4.5 mL·min-1;蠕动泵:0.10 r·s-1;
测量点数/峰:3;数据采样模式:跳峰采集,重复采
集3次。
3 结果
3.1 微量元素各形态含量结果 连续测定12批紫
花地丁样品中的9个微量元素的3个形态的含量,水
煎液中微量元素的含量结果见表1,可溶态微量元素
的含量结果见表2,根据课题组前期对微量元素总量
的测定[20],与水煎液中微量元素的总量=颗粒态量
+可溶态量,计算得到的颗粒态微量元素含量见表
3。无机态微量元素含量见表4,而总量=无机态量
+有机态量,根据课题组前期总量测定计算得到有机
态含量结果见表5。除去可疑值(与同一元素的其他
值有两个数量级的差异)得到各组的平均值。
表1 煎煮样品中微量元素的含量(μg·g
-1)
Tab 1 Contents of trace elements in boiled samples(μg·g
-1)
编号 产地 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1 山西 544.23  0.54 27.15 2.05 7.28 0.64 0.14 0.021 1.30
2 成都 620.51  0.32 22.22 0.81 3.74 0.43 0.02 0.005 0.19
3 安徽 690.92  0.44 23.60 1.13 13.17 0.53 0.03 0.006 0.72
4 江苏 477.79  0.13 19.62 1.28 6.35 0.43 0.04 0.002 0.38
5 哈尔滨 2 067.40  0.95 30.23 2.91 8.87 0.55 0.06 0.009 0.93
6 山东 6 159.03  0.20 13.25 0.53 7.22 0.33 0.07 0.001 0.25
7 安徽砀山 505.68  0.32 28.33 1.75 8.93 0.47 0.04 0.002 0.62
8 云南姚安 441.84  0.37 25.13 0.88 4.48 0.53 0.06 0.001 0.90
9 河北安国 555.91  0.22 26.08 1.57 4.98 0.44 0.04 0.001 0.56
10 陕西 750.72  0.64 34.37 3.84 9.24 0.60 0.09 0.015 0.73
11 广西 716.89  0.50 40.34 4.32 16.29 0.63 0.05 0.003 0.62
12 云南昆明 537.89  0.56 64.20 1.15 18.79 0.54 0.78 0.002 1.38
平均值 1 172.40  0.43 29.54 1.62 8.35 0.51 0.12 0.005 0.65
表2 可溶态微量元素的含量(μg·g
-1)
Tab 2 Content of trace elements in soluble forms(μg·g
-1)
编号 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1  198.29  0.39 29.30 1.64 5.27 0.63 0.14  0.009  1.29
2  173.84  0.24 21.48 0.38 2.91 0.39 0.02<0.000 0.13
3  200.33  0.17 23.43 1.13 10.28 0.50 0.03  0.000 04 0.65
4  346.96  0.11 19.42 0.89 5.86 0.42 0.03  0.00 0.31
5  244.56  0.26 21.24 - 36.37 0.40 0.03  0.001  0.40
6  6 134.90  0.20 12.86 0.40 4.62 0.30 0.06<0.000 0.18
7  196.23  0.32 26.67 1.04 3.97 0.45 0.04<0.000 0.39
8  142.87  0.19 23.71 0.56 3.66 0.47 0.05<0.000 0.42
9  150.86  0.11 23.87 1.38 4.29 0.39 0.03<0.000 0.43
10  143.63  0.20 32.60 2.00 5.21 0.56 0.06  0.000 22 0.36
11  128.01  0.25 38.30 0.83 2.76 0.58 0.03<0.000 0.24
12  202.72  0.35 59.76 0.66 15.65 0.49 0.45<0.000 0.79
平均值 688.60  0.23 27.72 1.04 6.43 0.47 0.08  0.002  0.53
表3 颗粒态微量元素含量(μg·g
-1)
Tab 3 Contents of trace elements in particulate forms(μg·g
-1)
编号 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1  345.95 0.16 - 0.40 2.01 0.01 0.003  0.008  0.01
2  446.67 0.08 0.74 0.43 0.83 0.04 0.004  0.005  0.06
3  490.59 0.28 0.16 0.00 2.98 0.03 0.003  0.006  0.07
4  130.82 0.02 0.20 0.22 0.94 0.01 0.001  0.002  0.07
5  1 822.84 0.69 8.99 - 5.23 0.16 0.024  0.007  0.54
6  24.14 0.01 0.39 0.13 2.60 0.03 0.005  0.001  0.07
7  309.45 0.01 1.66 0.70 4.96 0.02 0.000  1.66  0.23
8  298.97 0.18 1.43 0.32 0.820 0.06 0.004  1.06  0.482
9  405.05 0.11 2.21 0.18 0.69 0.05 0.006 15.62  0.13
10  607.08 0.44 1.76 1.84 4.03 0.03 0.028 15.40  0.38
11  588.88 0.25 2.04 3.49 13.53 0.05 0.015  3.21  0.39
12  335.17 0.20 4.45 0.50 3.14 0.05 0.340  2.41  0.59
平均值 483.80 0.20 2.18 0.93 4.02 0.05 0.039  5.97  0.25
表4 无机态微量元素含量(μg·g
-1)
Tab 4 Contents of trace elements in inorganic forms(μg·g
-1)
编号 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1  8 807.88 1.29 - 9.48 13.99 0.92  0.66  0.001  9.63
2  8 282.65 1.32 45.24 7.25 13.92 0.32  0.15<0.000  2.22
3  10 184.84 1.26 61.16 7.17 13.22 1.21  0.24<0.000  5.66
4  10 728.63 1.21 61.50 7.03 17.59 0.62  0.27<0.000  4.04
5  9 412.89 1.46 54.97 - 14.32 1.00 0.27  0.001  4.44
6  11 521.76 1.52 34.45 8.30 16.43 1.90  0.56  0.002  3.05
7  10 038.41 1.36 60.12 8.90 15.95 1.02  0.27  0.000 49 2.76
8  8 405.71 1.28 56.61 6.33 18.04 1.64  0.43  0.005  10.40
9  9 828.77 1.21 58.79 9.06 15.99 0.88  0.27  0.000 81 6.31
10  8 355.92 1.19 56.56 7.59 17.22 0.78  0.67  0.001  2.82
11  8 625.52 1.18 76.58 7.73 13.24 0.84  0.28<0.000  6.50
12  6 064.40 1.13 - 7.87 14.74 0.62  7.24  0.000 24 6.12
平均值 9 188.12 1.28 63.77 7.76 18.53 1.05  0.94  0.001  5.33
表5 有机态的微量元素含量(μg·g
-1)
Tab 5 Contents of trace elements in organic forms(μg·
g-1)
有机态 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1  1 440.49 1.82 23.92 1.86 6.08 0.25 0.13 0.11 1.48
2  2 042.09 1.53 17.78 0.28 0.45 0.001 0.06 0.04 0.81
3  2 402.45 1.49 27.80 1.00 2.18 0.08 0.05 0.05 0.81
4  1 638.43 1.47 21.47 0.60 3.04 0.32 0.04 0.04 1.04
5  3 183.87 1.12 28.04 1.28 6.21 0.05 0.04 0.04 1.27
6  3 294.12 0.76 11.54 0.36 1.58 1.07 0.001 0.03 0.67
7  3 221.92 1.07 29.64 0.57 4.09 0.04 0.04 0.03 1.46
8 -1 197.44 1.71 11.59 1.09 46.54 0.77 9.13 0.05 5.73
9  1 302.72 1.31 19.38 2.73 6.88 0.14 0.26 0.06 2.54
10  4 429.28 1.48 30.32 2.19 2.13 0.19 0.34 0.04 1.48
11  1 163.14 1.08  0.35 0.37 7.57 0.13 0.34 0.14 0.78
12  4 136.85 2.15 - 0.41 37.75 0.54 6.90 0.07 0.93
平均值 2 254.83 1.42 29.65 0.97 7.89 0.23 0.12 0.06 1.58
3.2 微量元素的浸出率 根据前期实验与水煎液
测定结果计算得到微量元素浸出率为表6。可知紫
花地丁药材中含量丰富的Ca元素,其量远远大于
另外8个微量元素,但它的浸出率平均值最低,其次
为Pb,Hg,Cr,Cu,Cd,Mn,Zn,As。总体平均值不
超过51%。个别数值较大可能为实验过程中引入
杂质所致。紫花地丁中含有丰富的微量元素,对人
体免疫功能有调节作用,但重金属含量较大又对人
体有害,因此较低的浸出率说明传统的中药煎煮方
法有一定的科学依据,并且水煎液中含有一定的微
量元素得到证实。
·0631· 中国医院药学杂志2016年8月第36卷第16期Chin Hosp Pharm J,Aug 2016,Vol 36,No.16
表6 微量元素浸出率(%)
Tab 6 Leaching rates of trace elements(%)
编号 Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
1  5.31 17.42 32.00 18.05 36.27 53.89 17.91 16.13 11.75
2  6.01 11.26 35.26  5.03 26.02 50.28  9.80 14.29 6.10
3  5.49 16.07 26.53 13.81 66.26 44.57 12.03 12.69 11.09
4  3.86  5.04 23.65 11.63 28.41 45.74  9.25  7.61 6.12
5  16.41 36.80 36.42 38.21 43.17 52.44 20.18 21.83 16.35
6  41.57  8.80 28.81  5.00 40.13 40.31 12.64  3.68 6.76
7  3.81 13.40 31.56 18.50 19.81 47.96 12.25  8.49 9.14
8  6.13 12.40 14.57 11.89  6.94 60.78  0.59  2.92 2.59
9  4.99  8.74 33.37 24.81 18.76 43.30  7.46  1.82 6.31
10  5.87 24.17 39.56 20.42 47.76 61.18 26.70 42.39 17.04
11  7.32 21.90 52.44 53.30 78.30 64.20  7.47  2.24 8.57
12  5.27 16.94 61.09 13.92 127.82 46.55 - 3.42 19.59
平均值 9.34 16.08 34.60 19.55 44.97 50.93 30.60 11.46 10.12
3.3 微量元素无机态与有机态的分析 根据前期
实验与无机态,有机态的元素含量计算得到无机态
与有机态占总量的比例,如表7。汞主要以有机态
的形态存在,因此减低了它的毒性。有机态所占比
例Cr>Zn>Mn>Pb>As>Ca>Cu>Cd,在10%
~53%之间。
表7 无机态与有机态分别占总量比(%)
Tab 7 Proportions of organic and inorganic forms of trace
element(%)
Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
无机态占比 80.30 47.55 66.37 88.37 65.13 76.59 89.92 2.85 77.09
有机态占比 19.70 52.45 33.63 11.63 34.87 23.41 10.08 97.15 22.91
3.4 水煎液中微量元素的形态分析 微量元素在
紫花地丁水煎液中存在游离离子、分子或者其他结
合方式的物理化学形态,颗粒态是金属元素跟水煎
液中的悬浮物或沉积物结合而成的一种化学形态,
溶解态则是金属元素于水煎液中溶出而存在的化学
形态;溶解态金属在水煎液中最主要的形式是简单
的无机金属离子、水合金属离子、羟基络合物、碳酸
盐络合物及与有机质结合的配合物[17]。按照实验
步骤分离元素形态,分析测定及计算后得到水煎液
中微量元素的可溶态及颗粒态如表2和表4。可知
各元素可溶态与颗粒态所占比例如表8。Hg基本
存在于颗粒态中,Mn,As,Cd,Pb,Ca大部分存在于
可溶态中,Zn与Cr在两种形态中的数量相差不大。
而 Mn,Cu,Zn微量元素易形成配合物,在水煎液中
可能大量以配合物的形式存在,且参与酶的活动代
谢,对免疫功能有调节作用[21],紫花地丁的药效学
作用也可能与这些配合物有一定的关系,为后期配
合物的探索奠定基础。
4 讨论
(1)前期实验可知微量元素在紫花地丁中的含
量相对较高,但水煎之后,浸出率较低,因此提取方
法对微量元素含量影响较大。
(2)9个微量元素中钙、锌、锰、铜、镉、铬、铅、
表8 各元素可溶态与颗粒态水煎液中所占比例(%)
Tab 8 Proportions of soluble and particulate forms of trace
elements in boiled sample(%)
Ca  Cr  Mn  Cu  Zn  As  Cd  Hg  Pb
颗粒态占比41.27 46.63 7.39 57.61 48.17 9.73 33.73 102.28 38.17
可溶态占比58.73 53.37 92.61 42.39 51.83 90.27 66.27 -2.28 61.83
砷,无机态均占较大比例存在,有机态比例占在
10%~53%之间,而汞的有机态比例较大,在90%
以上,且主要存在于颗粒态中,因此减低了水煎液中
汞的毒性。这证实了传统的水煎液有一定的科学道
理,因此本实验为传统水煎液提供了一定的理论依
据。
(3)Mn,As可溶态的比例在90%以上,Cd,Pb,
Ca,Mn,Zn,Cr,Cu等可溶态在42%~67%之间。
可溶态可能以不同的形态存在于水煎液中,存在形
式可能与药用功效有一定关系。
(4)实验结果中存在不合理数据,一方面可能在
待测样品的制备中,实验操作环境与试剂影响而引
入杂质,如消解后暴露在空气中,所用试剂含有杂
质。另一方面可能由于微量元素与有机配体结合较
弱,在样品处理过程中,发生形态变换等现象。
(5)本文在借鉴已有分析方法的基础上,对紫花
地丁中9个微量元素的4个形态进行了分析。结果
表明,微量元素有一部分以有机态的形式存在,而有
机态主要包括金属盐与配合物。紫花地丁中含有各
种可形成配体的化学物质,如多种氨基酸、多糖、黄
酮等物质,因此微量元素可能以多种配合物形式存
在于紫花地丁中。为后期紫花地丁的物质基础研究
奠定基础。
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[收稿日期]2015-11-24
[基金项目]湖北省自然科学基金(编号:2013CFB361) [作者简介]吕操,男,本科,药师,研究方向:药物新剂型与生物药剂学,电话:027-
68835024,E-mail:245529621@qq.com [通讯作者]宋红萍,女,硕士,主任药师,研究方向:药物新剂型与生物药剂学,电话:027-68835014,E-
mail:1060599549@qq.com
玫瑰花总黄酮对乳腺增生大鼠上皮-间质转换的影响
吕操,杜丽芬,宋红萍 (华中科技大学同济医学院附属普爱医院,湖北 武汉430033)
[摘要] 目的:探讨玫瑰花总黄酮对实验性乳腺增生大鼠上皮-间质转换(EMT)的影响。方法:通过注射雌激素和孕激素诱
导大鼠乳腺增生,观察玫瑰花总黄酮(200和100 mg·kg-1·d-1)给药干预对乳腺组织形态学变化、乳腺fibronectin、α-SMA、E-
cadherin、colagen-I和TGF-β1表达情况,以及微小RNA(miR)-21和 miR-29a/b水平的影响。结果:玫瑰花总黄酮给药能显
著改善模型动物乳腺增生的趋势,抑制乳腺组织colagen-I沉积和TGF-β1表达,缓解EMT上皮标记物E-cadherin的缺失以
及间质标记物fibronectin和α-SMA等的过度表达,降低miR-21并一定程度恢复 miR-29a/b的水平。结论:玫瑰花总黄酮对
乳腺EMT发生的程度具有潜在的抑制作用。
[关键词] 玫瑰花;乳腺增生;上皮-间质转换
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]1001-5213(2016)16-1362-04 DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2016.16.07
Effects of total flavonoids fromRosa rugosa on epithelial-to-mesenchymal transition in rats with
hyperplasia of mammary gland
LYU Cao,DU Li-fen,SONG Hong-ping(Puai Hospital,Tongji Medical Colege,Huazhong University of Science and
Technology,Hubei Wuhan 430033,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To assess effects of total flavonoids fromRosa rugosa (FRR)on epithelial-to-mesenchymal transi-
tion(EMT)in rats with hyperplasia of mammary gland(HMG).METHODS Rat model of HMG was induced by intramuscu-
lar injection of estrogen and progestogen.Effects of FRR(200 or 100 mg·kg-1·d-1)on mammary morphology changes,expres-
sions of fibronectin,α-SMA,E-cadherin,colagen-I and TGF-β1,as wel as levels of microRNA (miR)-21 and miR-29a/b were
investigated.RESULTS FRR obviously approved mammary morphology disorders,decreased colagen-I and TGF-β1 expres-
sion,and inhibited deletion of EMT characteristic epithelial marker E-cadherin,and over-expression of mesenchymal markers fi-
bronectin andα-SMA.FRR also reduced mammary level of miR-21 and enhanced level of miR-29a/b.CONCLUSION FRR is a-
ble to inhibit EMT in rats.
KEY WORDS:Rosa rugosa;hyperplasia of mammary gland;epithelial-to-mesenchymal transition
  中药材玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa
Thunb.)的干燥花蕾,在我国民间用于治疗乳痈乳
癖等,并收载于2015年版《中国药典》[1-2]。我们的
前期研究发现玫瑰花富含黄酮类活性物质并完善了
玫瑰花总黄酮制备方法和其口服安全性评价[3],随
后在动物实验中我们发现玫瑰花总黄酮具有抑制乳
·2631· 中国医院药学杂志2016年8月第36卷第16期Chin Hosp Pharm J,Aug 2016,Vol 36,No.16