全 文 ：基金项目：新疆维吾尔自治区科技支撑计划项目（２０１１３３１２７）
作者简介：张　薇（１９７２－），女，硕士，讲师，研究方向：药物分析。
苯酚－硫酸法测定天山花楸果实中多糖含量
张　薇１，周　芳２，常军民１，孙　莲１
（１新疆医科大学药学院化学教研室，乌鲁木齐　８３００１１；２新疆医科大学，乌鲁木齐　８３００１１）
摘要：目的　建立新疆天山花楸果实多糖含量测定方法。方法　采用苯酚－硫酸法，以葡萄糖为对照品，检
测波长４９０ｎｍ。结果　天山花楸果实中多糖含量为４．１１％，平均加样回收率为９８．７％，ＲＳＤ　１．８％ （ｎ＝６）。结
论　该法操作简便，结果准确，重复性好，可用于天山花楸果实多糖的含量测定。
关键词：天山花楸；多糖；苯酚－硫酸比色法
中图分类号：Ｒ９１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１２）０９－１１８７－０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｉｎ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．
ｂｙ　ｐｈｅｎｏｌ－ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ
ＺＨＡＮＧ　Ｗｅｉ　１，ＺＨＯＵ　Ｆａｎｇ２，ＣＨＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｍｉｎｇ１，ＳＵＮ　Ｌｉａｎ１
（１　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ；２　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｉｎ
ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｐｈｅｎｏｌ－ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒ－
ｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｗｉｔｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｓ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　４９０ｎｍ．Ｒｅ－
ｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗａｓ　４．１１％，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９８．７％，ＲＳＤ　ｗａｓ　１．８％（ｎ＝６）．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｒａｐｉｄ，ａｃｃｕｒａｃｙ　ａｎｄ　ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｉｎ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ
Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｐｈｅｎｏｌ－ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ
　　天山花楸 （Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．）系蔷薇
科花楸属植物，是维吾尔族和哈萨克族民间习用的
一种药材，常以果实、嫩枝叶和茎皮入药，临床上主
要用于肺结核、哮喘、咳嗽、胃炎、胃痛等症的治
疗［１］。目前有关天山花楸多糖的研究报道非常有
限，为此本研究建立苯酚－硫酸法测定天山花楸果实
中多糖含量，旨在为进一步研究天山花楸多糖的药
理活性及结构鉴定提供理论依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器　紫外－可见分光光度计（日本岛津公
　第３５卷　第９期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３５　ＮＯ．９
　２０１２年９月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｅｐ．２０１２
司），电子天平（德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）。
１．２　试药　葡萄糖标准品购自Ｓｉｇｍａ公司，乙醇、
丙酮、苯酚等试剂均为分析纯，水为蒸馏水，样品采
自新疆呼图壁林场，由新疆医科大学药学院帕丽达
教授鉴定为蔷薇科花楸属植物天山花楸果实。
２　方法与结果
２．１　溶液的制备
２．１．１　对照品溶液制备　精密称取１０５℃干燥至
恒重葡萄糖对照品适量，置１００ｍＬ量瓶中，用蒸馏
水溶解定容至刻度，摇匀得质量浓度为０．１ｍｇ／ｍＬ
的葡萄糖对照品溶液。
２．１．２　供试品溶液制备　取天山花楸果实粗粉３０ｇ，
精密称定，置索氏提取器中，加入乙醚加热回流提取至
无色。残渣挥干乙醚至烧杯中，加蒸馏水１５０ｍＬ，加
热回流提取３次，每次１ｈ。合并滤液，减压浓缩，用
Ｓｅｖａｇｅ法［２］除蛋白１０次后，加无水乙醇至含醇量
为８５％，置于冰箱中静置过夜，抽滤得多糖，反复醇
沉３次，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，６０℃真空
干燥得粗多糖。精密称取粗多糖３５ｍｇ，用蒸馏水
溶解定容至５０ｍＬ量瓶中，移取１ｍＬ，蒸馏水定容
至２５ｍＬ，即得供试品溶液［３－５］。
２．２　检测波长的确定　各取１ｍＬ葡萄糖对照品、
供试品溶液于试管中，分别加入新配的５０ｇ／Ｌ苯酚
溶液１．０ｍＬ、浓硫酸溶液３．０ｍＬ，摇匀，４０℃水浴
加热１５ｍｉｎ后置冰水中冷却５ｍｉｎ，于４００～７００ｎｍ
处扫描，选择最大吸收波长４９０ｎｍ为检测波长。
２．３　线性关系考察　精密量取“２．１．１”项下葡萄糖
对照品溶液１．０、２．０、３．０、４．０、５．０和６．０ｍＬ，分别
置于１０ｍＬ量瓶中，用水定容。各取１ｍＬ照“２．２”
项下方法于４９０ｎｍ处测定吸光度，以溶液质量浓
度Ｘ（ｍｇ／ｍＬ）对吸光度Ｙ进行线性回归，得回归方
程：Ｙ＝４７．２７１　４　Ｘ＋０．０１１　３，ｒ＝０．９９９　６。结果表
明葡萄糖在质量浓度１０～６０μｇ／ｍＬ范围内与吸光
度呈良好线性关系。
２．４　换算因子测定　取天山花楸果实粗粉５ｇ，精
密称定，照“２．１．２”项操作，制得干燥恒重的多糖颗
粒，精密称取１５ｍｇ置１００ｍＬ量瓶中，用水溶解定
容后摇匀，吸取１ｍＬ于试管中，按照“２．２”项下操
作，于４９０ｎｍ处测定吸收值，根据ｆ＝Ｗ／ＣＤ（Ｗ 为
多糖重量，Ｃ为多糖溶液中葡萄糖的重量，Ｄ为多糖
的稀释倍数）计算换算因子ｆ为２．６６。
２．５　精密度试验　取葡萄糖对照品溶液连续测定
６次，吸光度ＲＳＤ为０．７４％。
２．６　重复性试验　取天山花楸果实样品５ｇ，按
“２．１．２”项下方法操作，平行制备供试品溶液６份，
测定吸光度，经换算后，糖含量的ＲＳＤ为１．１％。
２．７　稳定性试验　取同一份供试品溶液，室温静
置，每隔１０ｍｉｎ测定吸光度，经换算后，糖含量的
ＲＳＤ为１．３％ （ｎ＝６），结果表明供试品溶液显色后
在１ｈ内吸光度稳定。
２．８　加样回收率试验　精密称取２．５ｇ已知多糖
含量的天山花楸果实粗粉６份，分别加入制得的干
燥恒重多糖颗粒０．１ｇ，按“２．１．２”项下方法操作，所
得粗多糖用蒸馏水溶解定容至５０ｍＬ量瓶中，移取
１ｍＬ，用蒸馏水定容至１００ｍＬ，摇匀，测定吸光度，
结果平均回收率为９８．７％，ＲＤＳ为１．８％，见表１。
表１　加样回收率实验结果（ｎ＝６）
样品含量／ｇ 加入量／ｇ 测得量／ｇ 回收率／％ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
０．１０２　７　 ０．１００　４　 ０．２０１　３　 ９８．２
０．１０２　２　 ０．０９９　３　 ０．１９８　９　 ９７．４
０．１０３　３　 ０．１０８　１　 ０．２１２　６　 １０１．１　 ９８．７　 １．８
０．１０２　８　 ０．１０４　２　 ０．２０７　８　 １００．８
０．１０３　２　 ０．０９９　２　 ０．２００　３　 ９７．９
０．１０３　７　 ０．１０１　２　 ０．２０１　７　 ９６．８
２．９　样品多糖含量测定　取样品３批，按样品制备
和测定方法操作，测定吸光度，按外标法计算多糖含
量，结果果实中多糖平均含量为４．１１％。
３　结论
文献 报 道 欧 洲 花 楸 果 实 中 多 糖 含 量 为
６．５％［６－７］。本研究测得天山花楸果实多糖含量为
４．１１％，与其相比较低，但相对甘蔗等植物含量则
较高［８］。
（下转１１９２页）
８８１１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３５卷　
Ｂｅｄｆｏｒｄ等［５］研究认为食管癌３ＤＣＲＴ在不增加
肺平均受量的条件下可以使总剂量增加５～１０Ｇｙ，
从而将局控率提高１５％～２５％。国内部分学者也
认为食管癌３ＤＣＲＴ可提高局控率和近期生存率，
并不增加放疗毒副反应［６－７］。本研究结果显示，
３ＤＣＲＴ放疗近期有效率高于ＣＦ组 （Ｐ＝０．０２７），
与国内外研究结果相符。３ＤＣＲＴ组食管癌患者１、
２、３年生存率均高于ＣＦ组，且多因素分析临床分
期、不同放疗方式为影响食管癌的独立预后因素，说
明三维适形放疗确能通过提高肿瘤局部受照剂量而
提高局控率及近期生存率。
本研究显示３ＤＣＲＴ组放射性食管炎发生高于
ＣＦ组，而血液系统反应低于ＣＦ组，表明３ＤＣＲＴ毒
副反应主要为食管局部反应，所以在制订治疗计划
时应斟酌增加靶区剂量和控制局部反应二者的关
系，根据ＤＶＨ设计出优化的治疗方案。
总之，３ＤＣＲＴ 的应用能最大限度地减少肿瘤
靶区周围组织的照射剂量，明显提高食管癌根治的
局控率及生存率，但最佳分割方式、最佳分割剂量、
治疗时间以及是否采用同步化疗及采用何种化疗方
案等问题仍需要进一步研究。
参考文献：
［１］　Ｋｉｍ　ＭＫ，Ｃｈｏ　ＫＪ，Ｋｗｏｎ　ＧＹ，ｅｔ　ａｌ．ＥＲＣＣ１ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ　ｃｈｅ－
ｍｏｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｐｏｏｒ　ｏｕｔｃｏｍｅ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｃａｎｃｅｒ
［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２００８，４４（１）：５４－６０．
［２］　崔年基，卢泰祥，邓小武．实用临床放射肿瘤学［Ｍ］．广州：中山
大学出版社，２００５：２０３．
［３］　曾敏，吕茵，王海峰，等．卡培他滨化疗联合三维适形放疗治疗
食管癌近期疗效观察［Ｊ］．新疆医科大学学报，２０１１，３４（１２）：
１３７３－１３７５．
［４］　殷蔚伯，谷铣之．肿瘤放射治疗学［Ｍ］．３版．北京：中国协和
医科大学出版社，２００２：６０９，５９８－６２０．
［５］　Ｂｅｄｆｏｒｄ　ＪＬ，Ｖｉｖｉｅｒｓ　Ｌ，Ｇｕｚｅｌ　Ｚ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｔｒｅａｔ－
ｍｅｎｔ　ｐｌａｎｎｉｎｇ　ｓｔｕｄｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｄｏｓｅ　ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ
ｉｎ　ｃｏｎｆｏｒｍａｌ　ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｅｓｏｐｈａｇｕｓ［Ｊ］．Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ
Ｏｎｃｏｌ，２０００，５７（２）：１８３－１９３．
［６］　王义海，张新春，张瑾熔，等．食管癌三维适形放射治疗疗效观
察［Ｊ］．新疆医科大学学报，２００５，２８（７）：１７２－１７４．
［７］　张宜勤，陆进成，翟振宇，等．三维适形放疗食管癌临床研究初
步结果［Ｊ］．中华放射肿瘤学杂志，２００５，１４（１）：３１－３３．
［收稿日期：２０１２－０３－２８］
（本文编辑　施洋

）
（上接１１８８页）
　　供试品溶液制备方法的考察中石油醚、乙醚对
样品前处理对比研究表明，乙醚可有效去除脂溶性
杂质。本实验以多糖含量为考察指标，对提取温度
（６０、８０、１００℃）、提取时间（０．５、１．０、１．５ｈ）、醇沉体
积分数（０．７５、０．８５、０．９５）进行了考察。结果表明最
佳条件为加热提取１ｈ，醇沉体积分数为０．９５。
参考文献：
［１］　陈坚，王岩，艾买提江，等．天山花楸原植物、化学成分和药理学
活性研究（初报）［Ｊ］．中国中医基础医学杂志，２００１，７（１）：４５－４７．
［２］　王庆奎，邢克智，赵海运，等．当归多糖除蛋白质的方法与条
件优化［Ｊ］．时珍国医国药，２０１１，１２２（２）：５２５－５２６．
［３］　张锦雀，吴晓珊，朱善岚，等．金线莲多糖苯酚－硫酸法测定条件
的优化［Ｊ］．中国医院药学杂志，２０１０，３０（２）：１１３－１１６．
［４］　钟岩，潘浦群．苯酚－硫酸法测定鲜人参中多糖含量［Ｊ］．时珍国
医国药，２００８，１９（８）：１９５７－１９５８．
［５］　袁羿，刘涛，马龙．琐琐葡萄多糖颗粒剂中多糖的含量测定
［Ｊ］．新疆医科大学学报，２０１０，３３（５）：５１２－５１３．
［６］　努尔墩·麦麦提尼亚孜，买尔旦·马合木提，古丽仙·胡加．新
疆不同区域沙枣中总糖、多糖与鞣质的含量比较研究［Ｊ］．新疆
医科大学学报，２００９，３２（７）：７９１－７９３．
［７］　Ｃｈｕｓｈｅｎｋｏ　ＶＮ，Ｎｏｓｏｖｓｋａｙａ　ＴＤ，Ｋａｒａｍｏｖａ　ＯＥ，ｅｔ　ａｌ．Ｃａｒｂｏ－
ｈｙｄｒａｔｅｓ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ａｕｃｕｐａｒｉａ［Ｊ］．Ｋｈｉｍｉｙａ　Ｐｒｉｒｏｄｎｙｋｈ　Ｓｏｅｄｉｎｅ－
ｎｉ，１９９２，５（１）：５７４－５７５．
［８］　刘昔辉，区惠平，杨荣仲，等．甘蔗叶多糖的提取与含量测定
［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５（３４）：１０９６０－１１０３５．
［收稿日期：２０１２－０２－２９］
（本文编辑　施洋）
２９１１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３５卷