全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2010年 第 35卷 第 3期
海南蒲桃[Syzygium cumini(L.)Skeels]，别名乌 墨，又称楠木，是我国热带、南亚热带地区野生
Primary study on activity and stability of procyanidins extracted from
Syzygium cumini(L.) Skeels on the scavenging DPPH radical
HUANG Si-mei, ZHANG Jing*
(The School of Life Sciences of Jiaying University, Meizhou 514015)
Abstract: The procyanidins extracted from S. cumini fruit, was studied for its DPPH radical scavenging
activity(DRSA) and the effects of temperature, light and pH on the DRSA stability. The results showed that IC50
of the procyanidins on DRSA was 5.9077 μg/mL. DPPH radical scavenging rate (DRSR) of the procyanidins wasnt
reduced by being treated with 20~80 ℃ for 8 h, and but reduced significantly by being treated with 90 ℃ for 3 h
and 100 ℃ for 2 h. The procyanidins of the DRSR was reduced 5.68% and 20.46% respectively when was
treated under 120 ℃ and 130 ℃ for 30 min. DRSR wasnt reduced in pH 1~9 water solution for 8 d, and but
dropped significantly in pH 10 for 2 d and pH 11~12 for 1 d. DRSR wasnt affected by 3418 lx irradiation for 8
d, and but dropped 14.80% by being irradiated with 45~70 klx sunlight for 8 h.
Key words: Syzygium cumini; procyanidins; antioxidant capacity; DPPH
黄思梅， 张 镜 *
(嘉应学院生命科学学院，梅州 514015)
摘要： 从海南蒲桃果实提取原花青素，研究了原花青素清除 DPPH自由基的活性及温度、光照及
pH对海南蒲桃原花青素清除 DPPH自由基活性的影响。结果：海南蒲桃原花青素对 DPPH自由
基的半抑制剂量 IC50为 5.9077 μg/mL。20~80 ℃处理 8 h原花青素 DPPH自由的清除率与初始值
差异不显著，90 ℃处理 3 h和 100 ℃处理 2 h DPPH自由的清除率与 1 h间差异显著。120 ℃及
130 ℃处理 30 min分别较初始的 DPPH自由基清除率低 5.68%和 20.46%；pH1~9处理 8 d对原花
青素自由基清除活性无显著降低，pH10处理 2 d及 pH11~12处理 1 d原花青素 DPPH自由基清
除活性较初始值显著下降。光照度 3418lx以下照射 8d自由基清除率较初始值无显著差异，45~
70 klx太阳光处理 8 h自由基的清除率降低 14.80%。
关键词： 海南蒲桃；原花青素；抗氧化活性；1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)
中图分类号： TS 201.2 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2010)03-0204-04
海南蒲桃原花青素 DPPH自由基
清除活性及稳定性的初步研究
收稿日期： 2009-06-27 *通讯作者
基金项目： 广东省科技计划项目(2009B011300015)。
作者简介： 黄思梅(1968—)，女，实验师，主要从事食品及植物生理生化实验教学与科研工作。
提取物与应用
·204·
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2010.03.063
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常绿乔木[1]，喜温暖湿润气候，对土壤要求不严，
适宜生长在5~10cm 以上的沙壤土为表层的红壤
或黄壤土中，火烧迹地、丘陵地泥炭土边缘的硬
骨草雨季积水地域和热带稀树旱生林及草原地区
也能正常生长[2]，有火烧不死之美誉。海南蒲桃花
多实丰，果实富含多种成分，具有治疗糖尿病、
痢疾等疾病的药用价值，鲜果生食，对慢性咳嗽
和哮喘有治疗效果。干果研末，肉汤送服，还可
治寒性哮喘和过敏性哮喘，是一种很好药效的水
果[3]。张亮亮等[4]对海南蒲桃色素的提取及稳定性
进行的初步研究，笔者近年研究发现海南蒲桃果
实内原花青素的含量较高，对其 DPPH 自由基清
除活力与温度、光照和pH 对抗氧化活性稳定性的
影响进行了研究，以为海南蒲桃果实原花青素的
开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料与主要仪器
1.1.1 海南蒲桃果实 从广东省梅州市采集成熟的
海南蒲桃果实，自来水洗净晾干，低温冷冻备用。
1.1.2 主要试剂 石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙
醇、甲醇、盐酸、硫酸高铁铵、氢氧化钠、正丁
醇、Vc：分析纯；1,1- 二苯基 -2- 苦基苯肼
(DPPH)：Sigma-Aldrich公司。
1.1.3 主要仪器与设备 超低温冷冻箱：美国NU-
AVR 公司；冻干燥机：美国VirTis公司；0111自
动换档数字式照度计：泰仕电子工业股份有限公
司；FA1604A 电子分析天平：上海精天电子仪器
厂；SS-325 高压灭菌锅：日本 TOMY 公司；
pHS-2C 数显酸度计：上海智光仪器表有限公司；
U-2800紫外-可见光分光光度计：日本日立等。
1.2 实验方法
1.2.1 海南蒲桃原花青素制备 海南蒲桃果实冻
干、粉碎，80 目筛过筛粉末用石油醚浸提除脂，
除尽溶剂后以 60% 乙醇(v/v)浸提 4 h，4800 r/min，
离心20min，上清液避光冷冻干燥得原花青素粗
提物。乙酸乙酯与粗提物按3∶1(v/w)混合浸泡1h，
离心 20min弃上清液，离心沉淀加在甲醇浸提 1
h，离心去上清液，离心沉淀重复处理4次，最后
加入乙醇∶乙酸乙酯 =7∶3浸提1h，离心收集清液
冻干作为供试的海南蒲桃原花青素样品，样品原
花青素含量58.07%。
1.2.2 原花青素含量的测定 准确称取适量的海南
蒲桃原花青素样品，用甲醇溶解并定容，正丁醇/
盐酸法测定样品原花青素的含量[5]。
1.2.3 原花青素光谱扫描 样品溶液190~1100nm
内扫描，得海南蒲桃果实原花青素吸收光谱。
1.2.4 原花青素DPPH 自由基清除率测定方法
DPPH 是一种稳定的自由基，其乙醇溶液呈紫
色。当 DPPH 溶液中加入自由基清除剂时，517
nm 最大吸收波长的吸光度降低，下降幅度与自由
基被清除率呈线性关系，因此可以检测自由基的
清除率活力，亦作为评价活性物质抗氧化能力的
指标。原花青素DPPH 自由基(以下简称自由基)清
除的活性按文献[6-7]方法测定。
1.2.5 原花青素抗氧化活性的测定 配制系列质量
浓度的原花青素样品及Vc溶液，将1mL 溶液与
DPPH 溶液 1 mL 反应 30 min 后立即测其吸光值，
建立线性回归方程，计算原花青素与Vc清除自由
基 50% 的质量浓度(IC50)，以 IC50大小为样品清除
自由基活性大小的依据，IC50值越小自由基清除活
力越大，IC50值越大自由基清除活力越小[8-9]。花色
苷自由基清除率参照文献[9]方法测定。
1.2.6 温度对原花青素自由基清除率的影响 原花
青素溶液恒温水浴加热或高压灭菌器加热处理，
冷却至室温后补足体积，测定自由基清除率。
1.2.7 pH 对原花青素自由基清除率的影响 高浓度
原花青素溶液分别调pH1~12，室温避光存放，定
时取样再调溶液的pH 至4.0，测定自由基清除率。
.2.8 光照对原花青素自由基清除率的影响 原花
青素溶液于不同荧光光照度的光照培养箱内25℃
处理，定时测定溶液自由基清除率。将100mL 溶
液装入250mL 容量瓶内封口，分别放于室外在太
阳光与荧光下照射处理后，定时取样测定自由基
的清除率。
实验处理均重复3次，以LSR 法进行差异显
著性比较。
2 结果与分析
2.1 原花青素光谱图
海南蒲桃提取物样品pH4.0溶液190~1100nm
光谱图见图 1，275~280 nm 间的吸收峰系原花青
素唯一的特征峰[10]，图 1中276 nm 峰的吸光值为
1.790，该峰表明样品中原花青素的吸收峰。样品
在 500~550 nm 内无吸收，表明样品中不存在花
色苷。
海南蒲桃粗提物中除含有原花青素外，亦有
一定的花色苷。花色苷是花青素与糖结合而成的、
提取物与应用
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同样具有清除自由基活性的天然产物。因供试样
品中无花色苷的存在，所以此样品进行的实验研
究结果能真实反应海南蒲桃原花青素的抗氧化性
及其稳定性。
2.2 原花青素体外自由基清除活性
由图2得知，Vc浓度与自由基的清除率呈正
相关，线性回归方程：y=4.5951x+19.771，由方程
Vc清除自由基IC50= 6.5785μg/mL。
从图 3 可以看出，原花青素浓度在 2~12
μg/mL 内，自由基清除率呈较好的线性关系，线
性回归方程：y=6.2324x+13.181，由方程求出自由
基清除IC50=5.9077μg/mL，海南蒲桃原花青素清
除自由基IC50值为Vc的1.1135倍。
葡萄籽原花青素是研究报道较多的天然抗氧
化剂，葡萄籽原花青素的抗氧化能力随着纯化程
度的提高而提高，不同纯度的原花青素其抗氧化
能力约为 Vc的 0.92~1.74 倍[11]，海南蒲桃原花
青素清除自由基IC50为Vc的1.1135倍，表明海南
蒲桃原花青素抗氧化活力较高。
2.3 温度对原花青素自由基清除活性的影响
2.3.1 100℃以下热处理原花青素的结果
由图4可见，80℃以下的所有处理在 8 h 原
花青素自由的清除率与初始值相当。90~100℃处
理1h原花青素自由基的清除率明显高于初始值，
可能是热处理使样品释放出酚类物质使其具有
更强的抗氧化活性[12]，处理1h之后逐渐低，90℃
处理 3 h(LSR0.05=3.2749)和 100℃处理 2 h(LSR0.05=
2.8549)与1h间差异显著。
2.3.2 100℃以上高温对原花青素自由基清除活性
的影响 110~130℃高温处理30min对原花青素自
由基清除率的影响见图5。
差异显著性测定(LSR 0.05=2.8749)表明 110、
120℃及130℃处理间的差异均达显著水平，120
℃处理自由基清除率较初始值低5.68% ，130℃处
理的低 20.46% ，但 110℃处理与初始值无显著
差。
2.4 pH 值对原花青素自由基清除活性的影响
不同pH 对海南蒲桃原花青素自由基清除率的
影响见图6。统计分析表明，pH 1~9处理8d原花
青素自由基除率活性未显著降低。pH 10处理2d、
pH 11~12处理1d原花青素自由基清除活较初始
值显著下降。
200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100
波长/nm
Ab
s
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
图 1 海南蒲桃原花青素的吸收光谱图
100
80
60
40
20
0
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
浓度/(μg/mL)
自
由
基
清
除
率
/%
y=4.5951x+19.771
R2=0.9994
图 2 Vc质量浓度与自由基清除率的关系
y=6.2324x+13.181
R2=0.9984
100
80
60
40
20
0
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
浓度/(μg/mL)
自
由
基
清
除
率
/%
图 3 原花青素质量溶液与自由基清除率的关系
图 5 高温处理对原花青素自由基清除率的影响
80
60
40
20
0
DP
PH
自
由
基
清
除
/%
温度/℃
未处理（CK） 110 120 130
72.69 ab 74.48 a
68.56 b
57.81 c
图 4 100 ℃以下热处理对原花青素自由基清除率的影响
80
70
60
50
40
30
DP
PH
自
由
基
清
除
率
/%
0 1 2 3 4 5 6 7 8
时间/h
20℃
50℃
80℃
30℃
60℃
90℃
40℃
70℃
100℃
提取物与应用
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2.5 光照对花色苷自由基清除活性的影响
2.5.1 不同荧光光照度对对花色苷自由基清除活性
的影响 数据统计分析，得知海南蒲桃经
625~3418lx照射8d自由基清除率较初始值无显
著差异，表明海南蒲桃原花青素在光照度不太大
条件下原花青素的稳定性较好。
2.5.2 太阳光对原花青素自由基清除活性的影响
45~70 klx 太阳光处理 8 h 原花青素自由基
清除率数据统计分析得 LSR0.05=2.3695，结果见
表 1。
太阳光直射处理 3 h 后原花青素清除自由基
清除活性较初始值差异显著，处理 3 h 使自由基
清除率降低5.16% ，处理8降低14.80% ，表明原
花青素在高光照度太阳光直射下自由基清除活性
的稳定差。
3 结论与讨论
海南蒲桃原花青素的体外抗氧化活性较高。
虽然文献报导葡萄籽原花青素的体内抗氧化活性
为Vc的20倍，而体外对自由基的清除率一般与
Vc相当，如孙芸等报导葡萄籽原花青素自由基的
清除率为Vc的自由基清除率1.3889倍[13]。海南蒲
桃原花青素体外对自由基清除的 IC50较 Vc 的
1.1135倍，可见海南蒲桃原花青素的体外抗氧化
活性较高，但其体内的生物活性有待进一步研究。
海南蒲桃原花青素体外抗氧化活性的稳定性
较好，自由基清除活性在 80℃高温处理 8 h，
3418lx、pH 1~9 处理 8 d 后均未显著降低。但常
用食品有机和无机添加剂对海南蒲桃原花青素体
外抗氧化活性的稳定性的影响，尚有待进行全面
的实验研究。
海南蒲桃果实活性产物综合利用价值大。我
国云南、广西、广东、福建等省区有栽培，广东
省各地已在城市绿化中大量推广应用，并将其作
为防护林的屏障树。在我国南方沿海地区优越的
气候条件下，海南蒲桃的结果量极大，果实内既
有丰富的花色苷活性物质[4]，亦有较大量的原花青
素，因而海南蒲桃果实内的天然活性产物是一极
具开发利用价值的资源。
参考文献：
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表 1 45~70 klx太阳光照处理不同时间原花青素自由基
清除率
图 6 不同 pH对原花青素自由基清除率的影响
100
80
60
40
20
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
时间/d
DP
PH
自
由
基
清
除
/%
pH1 pH2 pH3 pH4
pH5 pH6 pH7 pH8
pH9 pH10 pH11 pH12
图 7 不同光度对原花青素自由基清除率的影响
80
75
70
65
60
55
0 1 2 3 4 5 6 7 8
时间/d
DP
PH
自
由
基
清
除
/%
625 lx
248lx
1268 lx
2896 lx
1805 lx
3418 lx
清除率 处理时间/h 清除率
58.38 a 5 52.87 c
57.82 a 6 51.63 cd
56.53 ab 7 50.75 d
处理时间/h
0
1
2
55.37 b
54.06 cb
3
4
8 49.74 d
提取物与应用
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食 品 科 技
2010年 第 35卷 第 3期
医药(植物药分册),2007,22(5):213-214
[12] Debasis Bagchi, Manashi Bachi, Sidney J Stohs, et al.
Free radical and grape seed proanthocyanidin extract im－
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[13] 孙芸,徐宝才,谷文英,等.葡萄籽原花青素聚合度与自由
基清除能力关系的研究[J].食品科学,2007,28(12):423-
428
花脸香蘑[Lepistasordida(Fr.)Sing]属于担子菌亚
门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、香蘑属，又名为
紫晶口蘑、丁香蘑、花脸蘑等。主要分布于贵州、
黑龙江、辽宁、河北、河南、甘肃、青海、四川、
Study on the antioxidant activity of Lepista sordida
WANG Xin-tong, CUI Hai-dan, SHEN Ming-hua*
(Medical College, Yanbian University, Yanji 133000)
Abstract: Objective: To study the antioxidant activity of Lepista sordida extract. Methods: The total antioxidant
activity, the scavenging activities on·OH, DPPH, the SOD, GSH-Px and CAT activities as well as MDA level
of H2O2 -induced liver homogenate were investigated using the colorimetric method. Results: The total
antioxidant was positively correlated with the concentration of Lepista sordida extract. Lepista sordida exerted
the scavenging activity against·OH, DPPH, decreased MDA and increased the SOD, GSH -Px and CAT
activities in the liver tissue. Conclusions: Lepista sordida possessed an in vitro antioxidant activity.
Key words: Lepista sordida; antioxidant activity; experiment
王欣彤， 崔海丹， 沈明花 *
(延边大学医学部，延吉 133000)
摘要： 目的：研究花脸蘑提取物的体外抗氧化作用。方法：利用比色法测定花脸蘑乙醇提取物
的总抗氧化能力、对羟基自由基(·OH)和二苯基苦味酰基苯肼(DPPH)的清除能力以及 H2O2诱导的
肝损伤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和
丙二醛(MDA)的含量。结果：总抗氧化能力与花脸蘑提取物的浓度呈正相关，花脸蘑提取物具有
清除·OH和 DPPH自由基能力，提高肝组织 SOD、GSH-Px、CAT活性并抑制肝组织 MDA的生
成。结论：花脸蘑提取物具有体外抗氧化作用。
关键词： 花脸蘑；抗氧化；实验
中图分类号： TS 202.3 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2010)03-0208-03
花脸香蘑抗氧化作用的研究
收稿日期： 2009-06-15 *通讯作者
基金项目： 国家自然科学基金项目(30760150)；吉林省教育厅项目。
作者简介： 王欣彤(1986—)，女，硕士研究生，研究方向为中草药生理活性物质的分析。
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提取物与应用
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