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西南红山茶初代培养基筛选



全 文 :  第 4期
2010年 12月 四川林勘设计SICHUANFORESTRYEXPLORATIONANDDESIGN No.4Dec.2010 
 
  西南红山茶初代培养基筛选*
程建军1 ,曹爱珍 2 ,何静茹 3 ,杨刚 3
(1.四川省仪陇县林业局 ,四川 仪陇 637600;
2.四川省仪陇县农业局 ,四川 仪陇 637600;
3.四川农业大学林学园艺学院 ,四川雅安 625000)
摘 要:试验以西南红山茶带芽茎段为材料 ,研究了不同浓度配比的 6-BA和 NAA培养
基对外植体启动率 、侧芽高度的影响。结果表明:5号培养基(MS+0.2 mg/LNAA+2 mg/
L6-BA)培养效果最好 , 启动率最高 ,为 71.1%,侧芽平均高度为 1.73cm。单独分析了不
同浓度 6-BA与 NAA对侧芽启动率和侧芽高度的影响 ,得出 6-BA对于侧芽高度影响
显著 ,而外植体的启动率受 6-BA与 NAA共同作用。
关键词:西南红山茶;外植体;初代培养基
SelectionofInitialCultureMediumforCameliapitardi
CHENGJian-jun1 , CAOAi-zhen2 , HEJing-ru3 , YANGGang3
(1.ForestryBureauofYilongCounty, Yilong637600, China;
2.AgricultureBureauofYilongCounty, Yilong637600, China;
3.SichuanAgriculturalUniversity, Yaan625014, China)
Abstract:UsingstemsegmentwithbudofCameliapitardicultureastestmateri-als, thispaperstudiedefectsof6-BAandNAAwithdiferentconcentrationonin-
ductionrateofexplantandtheheightoflateralbud.TheresultsshowedthatNo.
fiveculturemedium(MS+0.2mg/LNAA+2mg/L6-BA), inwhichtheinduc-tionratewas71.1% andtheaverageheightoflateralbudwas1.73 cm, hadthe
besttrainingefect.6-BAculturemediumhadsignificantefectontheheightof
lateralbud, theinductionrateofexplantwasafectedby6-BAandNAAcolec-
tively.Keywords:Cameliapitardi, Explant, Initialculturemedium
  西南红山茶(Cameliajaponica)属山茶科山
茶属常绿灌木或乔木 ,初春开花 ,花期长 ,花色艳
丽 ,具有很高观赏价值 ,是园林绿化常用花卉。播
种 、扦插 、嫁接和压条等传统方法繁殖率低 ,品种
易退化 ,不利于规模化生产 ,组培繁殖不受时间 、
季节限制 ,短时间内能快速培育出优质种苗 ,大大
提高了繁殖系数 ,加速西南红山茶种植发展 ,对优
良品种和珍惜品种的保护具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
选春季生长旺盛的西南红山茶新梢顶端半木
质化的带芽茎段 , 0.1%的升汞消毒后无菌水清
洗多次 ,切去原端口 ,剪切成 1 ~ 2㎝带一个茎节
的茎段备用 ,这样有利于侧芽的生长 。
1.2方法
按形态学原理接种到培养基上 ,试验设 9个
处理(见表 1), 3次重复 ,每个处理接种 30个外
植体 , 置于 (24 ~ 28)℃室温下 , 光照 1500 ~
2000Lx,光照时间每天 12 h。每隔 2天观察记录
外植体生长情况 ,统计培养基污染瓶数 ,数据处理
* 收稿日期:2010-09-12
作者简介:程建军(1982 ~ ), 男 ,四川省仪陇县林业局 , 助理工程师 ,主要从事园林生态 、植物病理方面研究。
采用 spss13.0软件统计分析。
表 1 西南红山茶组织培养培养基配方
处理 培养基
1 MS+0.1mg/LNAA+3mg/L6-BA
2 MS+0.1mg/LNAA+2mg/L6-BA
3 MS+0.1mg/LNAA+1mg/L6-BA
4 MS+0.2mg/LNAA+3mg/L6-BA
5 MS+0.2mg/LNAA+2mg/L6-BA
6 MS+0.2mg/LNAA+1mg/L6-BA
7 MS+0.3mg/LNAA+3mg/L6-BA
8 MS+0.3mg/LNAA+2mg/L6-BA
9 MS+0.3mg/LNAA+1mg/L6-BA
2 结果与分析
2.1 外植体在初代培养基上的生长情况
外植体接种 10d后切口周围出现白色膨大 ,
即形成愈伤组织 , 30d后愈伤组织开始分化形成
不定芽 ,部分外植体茎节处开始萌发侧芽 , 50d左
右形成 1 ~ 4个不定芽 ,其中 18瓶培养基受污染
霉变 ,污染指数 18.5%。
2.2 不同浓度配比生长调节剂对外植体启动率
的影响
不同浓度配比生长调节剂对外植体启动率的
影响如图 1:6-BA和 NAA浓度不同 ,外植体启
动率差异显著 , 5号培养基(MS+0.2 mg/LNAA
+2mg/L6-BA)启动率最高 ,达 71.1%;其次是
4号 、6号分别为 54.5%和 57.8%;3号培养基效
果最差 ,启动率仅为 30%。
图 1 不同处理下外植体启动率图
2.2.1 NAA对启动率的影响
图 2所示 , 0.2mg/L的 NAA平均启动率(如
2号 、5号 、8号)最高 , 为 61.3%,明显高于 0.1
mg/L和 0.3 mg/L的 39.27%和 44.8%, 6-BA
浓度一定时 ,不同浓度 NAA对外植体启动率影响
差异显著。
图 2 不同 NAA浓度的启动率柱状图
2.2.2 6-NA对启动率的影响
如图 3, NAA相同浓度时 , 6-BA浓度为 2
mg/L平均启动率 (2号 、 5号 、 8号 )最高 , 为
56.31, 1 mg/L和 3 mg/L时平均启动率较低 ,分
别为 41.49%和 47.42%,处理间差异显著。
图 3 不同 6-BA浓度的启动率柱状图
2.3 不同浓度配比生长调节剂对外植体侧芽高
度的影响
图 4可知 , 5号培养基上外植体侧芽高度最
高 ,为 1.73㎝ ,其次为 8号 、2号分别为 1.6㎝和
15㎝ , 1号培养基侧芽高 1.1㎝ ,最低 。
图 4 不同处理侧芽高度图
2.3.1 NAA浓度对侧芽高度的影响
图 5 , 0.2 mg/LNAA侧芽平均高度 1.41㎝ ,
25程建军等:西南红山茶初代培养基筛选
最高 , 0.1 mg/L和 0.3 mg/L时的芽高分别为
1.24㎝和 1.34㎝ ,处理间差异不显著 ,说明 NAA
浓度对侧芽高度作用效果不明显。
2.3.2 6-NA浓度对侧芽高度的影响
图 6所示 ,不同浓度 6-NA处理侧芽平均高
度差异显著 ,其中 6-NA浓度为 2 mg/L时侧芽
高度最高 ,为 1.62㎝ , 1 mg/L和 3 mg/L时较低 ,
分别为 0.46㎝和 0.41㎝。
图 5 不同 NAA浓度下侧芽高度柱状图
图 6 不同 6-BA浓度下侧芽高度柱状图
3 结论与讨论
研究表明 ,细胞分裂素在促进侧芽丛生时 ,主
要是通过活化磷酸酶 ,消弱 CDK酪氨酸磷酸化的
抑制作用 (CDK/CYCA), 促进细胞分裂进入 M
期 ,达到促进细胞分裂和伸长 ,形成愈伤组织 ,生
长素的主要作用是低浓度时促进腋芽生长 、切口
基部细胞分裂 、维管束分化 、形成层活性 、伤口愈
合 ,这两种生长调节剂是组织培养中不可缺少的
物质 ,常在初代培养基中用来诱导外植体分化 。
NAA与 6-BA浓度配比不同对外植体的启
动率 、侧芽高的作用效果各不相同 ,试验表明:西
南红山茶外植体启动率受 NAA与 6-BA共同作
用 ,而侧芽高度主要受 6-BA作用 , NAA对其影
响不明显。其中 5号培养基 (0.2mg/LNAA+
2mg/L6-BA)外植体启动率最高 ,处理间差异显
著 , 6-BA浓度为 2mg/L时侧芽高度最高 ,处理
间差异显著 。NAA浓度过大将会抑制植物生长 ,
本试验 NAA浓度选在 0.1 ~ 0.3mg/L之间 ,其中
0.2mg/L时效果最好 ,低于或高于 0.2mg/L外植
体启动率均较差 ,处理之间差异显著 ,这可能与生
长素的二重性有关 ,与袁颖等以攀西西南山茶幼
叶为材料 , NAA浓度为 1.0mg/L时诱导效果最好
的结论不同 ,可能由于红山茶的茎 、叶等器官本身
生长素含不同以及对 NAA作用的敏感程度不同
有关。
植物的生长发育和生理变化受激素调控 ,但
不是某一种激素的单独作用 ,而是植物体内各种
内源激素及外源激素相互作用的结果 ,如果一种
激素能加强另一激素的效应 ,则表现为增效作用 ,
本试验中 NAA与 6-BA是否表现为增效作用以
及两种调节剂单独作用效果有待进一步研究。
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