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外植体类型及年龄对蓝靛果忍冬诱导分化的影响



全 文 :第39卷 第4期 林 业 科 技 Vol. 39 No. 4
2 0 1 4 年 7 月 FORESTRY SCIENCE & TECHNOLOGY July 2 0 1 4
文章编号:1001 - 9499 (2014)04 - 0014 - 02
外植体类型及年龄对蓝靛果忍冬
诱导分化的影响
*
李 黎 张 悦**
(黑龙江省科学院自然与生态研究所 湿地与生态保育国家地方联合工程实验室,哈尔滨 150040)
摘要:研究外植体类型及外植体年龄对蓝靛果忍冬诱导分化的影响,比较不同外植体类型及外植体年龄分化率
的差异,对外植体类型及外植体年龄进行筛选。结果表明:1 年生茎尖可作为最佳外植体,分化率平均可达
98. 8%,外植体类型及外植体年龄均对蓝靛果忍冬诱导分化均有显著影响。
关键词:蓝靛果忍冬;外植体类型;外植体年龄;分化率
中图分类号:S 793. 9,S 722. 3 + 5 文献标识码:A
蓝靛果忍冬(Lonicera edulis),忍冬科忍冬属
落叶灌木,高 1. 3 ~ 1. 5 m,叶长圆状卵形,长卵
形或倒卵状披针形;花生于叶腋,花期为
5 ~ 6 月;浆果椭圆形或长圆形,暗蓝色,果熟期
8 ~ 9 月[1]。果实酸甜可口,含有大量的维生素 C、
18 种氨基酸和多种微量元素,果实适合鲜食以及
用来加工成果汁、果酒、饮料等,同时也是加工
天然食用色素的极好原料,具有很高的经济价值。
蓝靛果忍冬中存在丰富的生理活性物质,这些化
学成分对于治疗目前人类许多常见疾病的治疗都
有重大价值[2],因此,在食品和医疗保健品的开
发上具有重要意义。蓝靛果忍冬在中国的人工栽
培始于 1980 年代初,但由于没有开展育种工作,
目前对其快速繁殖的研究也较少,栽培技术也尚
存在一些问题。对蓝靛果忍冬组织培养技术进行
研究,可以为蓝靛果忍冬的优良种苗繁育以及工
厂化生产奠定基础。
1 材料与方法
1. 1 材 料
2012 年 6 月初,采集蓝靛果忍冬定植后 1 年
生和 2 年生植株带芽的茎尖、茎段。
1. 2 方 法
消毒方法 将采集的外植体浸入清水中浸泡,
加入少量洗衣粉搅拌浸泡 2 ~ 3 min,然后在流水
下冲洗 4 ~ 6 h;置于超净工作台上,用 75%酒精
表面消毒 30 s;倒掉酒精,在 0. 1%氯化汞溶液中
浸泡 8 ~ 10 min 后,用无菌水冲洗 6 ~ 7 次,接种
于培养基上,观察其污染、萌芽及生长情况。
培养条件 白天温度(23 ± 2)℃,夜间不低
于 15℃,光照时间为 12 ~ 14 h /d,光照强度为
2 000 Lx。
试验设计 以污染率、分化率和增殖倍数为
统计参数,利用多元统计方法进行数据处理,对
蓝靛果忍冬外植体类型、外植体年龄进行筛选,
最终确定蓝靛果忍冬最佳的外植体类型及外植体
年龄。
2 试验结果与分析
2. 1 外植体分化率统计
外植体类型分别为茎尖、茎段,外植体年龄
分别为 1 年生和 2 年生植株。试验采用完全随机
设计,培养条件和培养基成分完全相同,每组为
30 瓶,重复 3 次。由表 1 可以看出,茎尖污染率
* 省攻关引导项目“蓝靛果忍冬优良品系快繁育苗技术研究与示范”资助
第 4 期 李 黎等:外植体类型及年龄对蓝靛果忍冬诱导分化的影响
低于茎段,分化率、增值倍数均高于茎段,且
1 年生优于 2 年生。
表 1 外植体分化率统计
外植体
接种数
量 /瓶
污染率
/%
分化率
/%
增殖
倍数
生长情况
茎尖(1 年生) 90 7. 78 98. 80 6. 2 产生丛生芽
茎段(1 年生) 90 10. 0 95. 06 5. 5 产生丛生芽
茎尖(2 年生) 90 12. 23 91. 14 4. 0 产生丛生芽
茎段(2 年生) 90 14. 44 87. 01 3. 8 产生丛生芽
2. 2 外植体的筛选
由外植体类型及外植体年龄对蓝靛果忍冬诱
导分化影响的方差分析结果(表 2)可知,外植体
类型及外植体年龄均对蓝靛果忍冬分化率有显著
影响,且外植体年龄的影响最大,达到了极显著
水平,其次是外植体类型的影响。
表 2 外植体类型及年龄对蓝靛果
忍冬诱导分化影响的方差分析
变异来源 自由度 均方 F值 P值
外植体年龄 1 183. 85 121. 00 0. 0001
外植体类型 1 45. 75 30. 11 0. 0006
年龄 ×类型 1 0. 08 0. 05 0. 82
误差 8 1. 52
总体 11
采用 Duncan法进行多重比较,结果(表 3)表
明,外植体年龄间差异极显著(P < 0. 01),根据
平均值大小,选择 1 年生。外植体类型间差异极
显著(P < 0. 01),茎尖的分化率明显优于茎段,
故取茎尖作为外植体。
表 3 外植体类型及年龄对蓝靛果
忍冬诱导分化影响的多重比较
处理
平均
分化率 /%
标准差
5%
显著水平
1%
显著水平
茎尖(1 年生) 98. 80 2. 32 a A
茎段(1 年生) 95. 06 2. 20 b B
茎尖(2 年生) 91. 14 4. 34 c C
茎段(2 年生) 87. 01 4. 52 d D
所以,从外植体类型及外植体年龄综合来看,
蓝靛果忍冬最佳外植体应选择 1 年生茎尖,该处
理分化率平均达到了 98. 8%。
3 结论与讨论
植物细胞的组织培养除与培养基的成分有关
外,另一个重要因素就是外植体本身。从理论上
讲,植物细胞都具有全能性,若条件适宜,任何
组织、器官都可作为外植体;但实际上,同一植
物不同器官,同一器官不同的生理状态,对外界
诱导反应的能力及分化再生能力是不同的。因此,
选择适宜的外植体,需要从外植体来源、外植体
大小、取材季节及外植体的生理状态和发育年龄
等多方面加以考虑。
参 考 文 献
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[3] 李淑芹. 蓝靛果中黄酮类成分初探及总含量测定 [J]. 东
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[D]. 北京:北京林业大学,2010.
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第 1 作者简介:李黎(1976 -),女,工程师,硕士,
研究方向:园林植物育种及组织培养。
通讯作者:张悦(1962 -),男,研究员,研究方向:
植物资源开发与利用。
收稿日期:2014 - 03 - 20
(责任编辑:潘启英)
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