全 文 ：著性;但未恢复到正常水平(与阴性对照组比较差异
有显著性)。APIC 低剂量组第 4 ,7 , 10天与模型组
比较差异无显著性 ,但恢复情况略好于模型组 。
Hb和 HCT 的恢复情况与 RBC 基本相同 ,不
同的是 APIC高 、中剂量组 ,硫酸亚铁组 ,混合物组
和阳性对照组第 10天可以恢复到正常水平(与阴性
对照组比较差异无显著性)。
在试验组中 A PIC组高 、中剂量组 、硫酸亚铁组
与混合物组第 10天的 RBC 、Hb 、HCT 恢复情况差
异无显著性 ,但是从小鼠的体征来看 , APIC 组的小
鼠食欲 、体温 、行动和毛发光泽等恢复情况都优于其
他试验组 ,提示 APIC 可能不良反应较小 。
APIC3个剂量组的恢复情况说明 APIC 对溶血
性贫血有较好的治疗效果 ,并且该复合物治疗作用
呈现出一定的量效关系。高剂量组各观察指标的恢
复情况较好 ,起效较快 ,第 4天即有较好恢复;中剂
量组起效较慢 ,第 4天恢复较差 ,第 7 天和第 10 天
恢复情况较好;低剂量组则一直恢复较差。
4　讨论
本实验造模所采用的苯肼剂量较小 ,第 4 天贫
血状况最严重。小鼠自身可有一定恢复 ,但到第 10
天并不能恢复到正常水平 。
当归多糖与铁所合成的当归多糖铁复合物 ,已
通过实验证实对缺铁性贫血大鼠有较好的疗效[ 6] ,
可以有效补充贫血所导致的机体铁缺乏 ,增加造血
速度 。当归多糖铁不仅具有较理想的稳定性 、水溶
性和吸收率等 ,不良反应少 ,生物利用度高;并且 ,配
体当归多糖是传统中药当归中刺激红细胞生成 、促
进造血祖细胞和多能造血干细胞增殖和分化的主要
活性成分 ,对溶血性贫血有一定的治疗效果。即当
归多糖铁具有补血和补铁的双重功效 。因此该复合
物有望开发成为一种新型的 、具有双重补血作用的 、
不良反应小的抗贫血药物。
参考文献:
[ 1] 　王凯平 ,张玉 ,戴立泉.当归多糖铁的合成[ J] .中华临床医药杂
志 , 2002 , 3(4):23-24.
[ 2] 　王凯平 ,张玉 , 戴立泉.当归多糖铁理化性质的初步研究[ J] .
中国中药杂志 , 2006 , 5(9):747-750.
[ 3] 　王凯平 ,张玉,戴立泉 ,等.当归多糖铁的溶出度和生物利用度
的研究[ J] .中草药 , 2006 , 3(3):377-380.
[ 4] 　戴立泉 ,王凯平 ,张玉 ,等.当归多糖铁的定性鉴别及其铁含量
的初步研究[ J] .中国药师 , 2005 , 8(7):608-610.
[ 5] 　徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学[ M ] .第 3 版, 北京:人
民卫生出版社 , 2005:1259.
[ 6] 　王凯平 ,李高 ,张玉.当归多糖铁治疗缺铁性贫血大鼠实验研究
[ J] .中国新药与临床 , 2007 , 26(6):405-407.
[收稿日期] 2007-01-26
[ 基金项目] 国家科技部十五科技攻关项目(编号:02C26214200695)　[ 作者简介] 陈平 , 女 ,教授 , E-mail:ch enping vip24@163.com 　[ 通讯
作者] 陈新 ,男 ,博士 ,讲师 ,电话:027-83943842 , E-mail:xchen@mai l.shcnc.ac.cn
硫酸-蒽酮法测定鄂产竹节参多糖含量
陈平 ,陈新 ,王珲 ,钱丽娜 ,张长春 　(武汉工业学院生物与制药工程系 , 湖北 , 武汉 , 430023)
[ 摘要] 　目的:建立鄂产竹节参多糖含量的测定方法。方法:采用水提 、醇沉的方法提取分离鄂产竹节参多糖 ,以葡萄糖为标
准液绘制标准曲线 ,用硫酸-蒽酮分光光度法测定多糖含量 ,检测波长为 610 nm。结果:鄂产竹节参的多糖含量为126.80 mg·
g-1 , 平均回收率为99.58%。结论:该方法简便 、快速 、重现性好。对鄂产竹节参多糖的测定可获得满意结果。
[ 关键词] 　鄂产竹节参;多糖;硫酸-蒽酮法
[中图分类号] R927.2　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2007)12-1654-03
Determination of polysaccharide from Panax ja ponicus of Hubei by anthrone-sulfuric acid
method
CHEN Ping , CHEN Xin , WANG Hui , QIAN Li-na , ZHANG Chang-chun (Depa rtment of Bio technology and
Chemical Enginee ring , Wuhan Polytechnic University , Hubei Wuhan , 430023 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To establish a spectr opho tometric me thod for the determina tion o f the poly saccharides in P anax ja-
ponicus CA.Mey of HuBei.METHODS　The po ly saccharides w ere extr acted w ith distilled wa te r and precipita ted w ith ethano l.
Its total so luble sugar contents we re de tected colorimetrically by the anthr one-sulf uric acid method a t 610 nm with gluco se as
standard.RESULTS　The so luble poly saccharide from Panax japonicus C.A.M ey of HuBei w as 126.8 mg·g -1 .The average
recove ry w as 99.58%.CONCLUSION　The methods is simple , rapid and w ell reproducible , it is suitable fo r the determination
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of poly saccharide f rom Panax japonicus of H ubei.
KEY WORDS:Pana x japonicus of Hubei;poly saccharides;anthr one-sulfuric acid me thod
　　竹节参(Panax japonicus CA.Mey)是五加科
植物竹节参的根茎 ,以其根茎状如竹节而得名 ,是名
贵中药 、中国药典收载品种[ 1] 。竹节参是土苗医药
的常用药物 ,具有滋补强壮 、止血通经 、舒筋止痛 、活
血祛淤 ,健脾和胃等功能。竹节参多糖类成分具有
较强的免疫调节及抗疲劳功效 ,为竹节参的重要活
性成分[ 2-3] 。本研究采用硫酸-蒽酮分光光度法测定
鄂产竹节参多糖含量 ,并探讨了有关实验条件对测
定结果的影响。
1　材料
UV-265FW 紫外分光光度计(日本 shimadzu
公司);葡萄糖(AR 国药集团化学试剂有限公司);
鄂产竹节参(湖北省恩施州 ,经武汉工业学院陈平教
授鉴定);其他试剂均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　多糖的提取　取鄂产竹节参根茎 ,称取 10 g ,
加入 100 mL水 ,80 ℃搅拌提取 3次 ,每次 1 h ,合并
水层 , 50 ℃减压浓缩至 100 mL 。浓缩液加 300 mL
无水乙醇 ,搅匀 ,以3 000 r·min-1离心 20 min 。倾
出上清液 ,取沉淀加丙酮 20 mL 回流 1 h ,离心 ,取
沉淀 ,加乙醚 20 mL回流 1 h ,滤过 ,得沉淀 ,置真空
干燥箱中 ,于 50 ～ 60 ℃干燥至恒重 ,置干燥器中备
用。
2.2　硫酸-蒽酮试剂(2 g·L-1)的配制　称取 1 g 蒽
酮置量瓶中 ,加少量浓硫酸 ,搅拌使其溶解 ,加浓硫
酸至 500 mL 摇匀 ,得 2 g·L-1硫酸-蒽酮试剂 ,当日
配制使用 。
2.3　测定条件的选择[ 4] 　将精密称取干燥至恒重
的葡萄糖50.0 mg 置于 50 mL 量瓶中 ,纯化水溶解
并定容至刻度 ,摇匀 ,制得1.0 g·L-1葡萄糖贮备液 。
取葡萄糖贮备液以纯化水稀释成 200 mg·L-1制得
葡萄糖稀释液。吸取葡萄糖稀释液1.0 mL ,置于具
塞试管中 ,加入0.2%蒽酮试剂4.0 mL ,迅速浸于冰
水浴中冷却 ,后放入热水浴中 ,管口加盖玻璃塞 ,以
防蒸发 ,准确煮沸 10 min取出 ,自来水冷却 。室温
放置 10 min ,以试剂空白为参比 ,在 460 ～ 800 nm
波长范围进行扫描。将精密称量干燥至恒重的竹节
参粗多糖样品 ,加热水溶解 ,转移至 100 mL 量瓶
中 ,精密移取 25.0 mL 于 500 mL 量瓶中 ,加水定
容 ,得竹节参粗多糖贮备液 。取竹节参粗多糖贮备
液1.0 mL 于 25 mL 量瓶中 ,以纯化水定容为竹节
参粗多糖供试液 。分别取1.0 mL 竹节参粗多糖供
试液 ,置于 10 mL 具塞试管中 ,按上法操作 ,在 460
～ 800 nm 波长范围进行扫描。
取稀释后的竹节参粗多糖贮备液和葡萄贮备糖
液各0.5 mL 于 25 mL 量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,摇
匀 ,取1.0 mL 具塞试管中 ,然后按上法操作 ,在 460
～ 800 nm 区间进行扫描。扫描结果见图 1 ,试验表
明 ,竹节参多糖与葡萄糖的紫外最大吸收波长为
610 nm ,且与葡萄糖吸收曲线形状一致 。
图 1　吸收曲线
1.粗多糖;2.葡萄糖+多糖;3.葡萄糖
Fig 1　abso rp tion spect ra
1.polysaccharide;2.glucose+polysaccharide;3.glucose
2.4　标准曲线的制作　准确移取葡萄糖贮备液 1 ,
2 , 3 ,5 , 8 ,10 mL ,分别置于 50 mL 量瓶中 ,加水至刻
度(相当于 20 , 40 , 60 , 80 , 100 , 160 , 200 mg·L-1)。
分别取上述溶液1.0 mL 置 10 mL 具塞试管中 ,加
入0.2%蒽酮试剂4.0 mL , 迅速浸于冰水浴中冷
却 ,各管加完后一起放入热水浴中 ,管口加盖玻璃
塞 ,以防蒸发 ,准确煮沸 10 min 取出 ,自来水冷却。
室温放置 10 min ,以试剂空白为参比 ,在 610 nm 波
长处测定吸收度。得到每 1 mL 含葡萄糖 20 ～ 200
μg 范围内葡萄糖量和吸收度呈良好的线性关系 ,回
归方程为:A=3.716C-0.028 , r=0.999 8。
2.5　精密度试验　平行取 7份葡萄糖稀释液和竹
节参粗多糖供试液 ,蒽酮-硫酸法显色后测定吸光
度 ,计算结果 ,葡萄糖与竹节参多糖的 RSD分别为
1.1%,1.8%。
2.6　稳定性试验　精密量取1.0 mL 葡萄糖稀释液
和竹节参粗多糖的供试液 ,置于具塞试管中 ,各加入
加入0.2%蒽酮试剂4.0 mL ,按“2.3”项下操作 ,于
室温自然光下放置 2 h ,每 10 min测定一次 ,结果 A
值在 120 min 内为0.712 ～ 0.715和0.184 ～ 0.186 ,
稳定性好 。
2.7　重复性考察　取同一批样品 ,按粗多糖贮备液
的制备方法平行制备 6份 ,按上述方法进行含量测
定 ,分别测定吸光度 ,计算浓度。结果竹节参粗多糖
贮备液的平均质量浓度为 0.632 g·L-1 , RSD 为
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0.8%,表明该方法重复性良好 。
2.8　回收率实验　分别精密称取5.0 mg 葡萄糖 ,
配制成 50 mg·L-1溶液。向 50 mL 量瓶中分别精
密量取5.0 mL 竹节参粗多糖贮备液 5份 ,同时 ,分
别精密加入1.0 mL 葡萄糖溶液 ,后用纯化水稀释至
50 mL ,按“2.3”项下操作进行含量测定 ,计算回收
率 ,结果见表 1。
表 1　回收率测定结果
Tab 1　Result o f recove ry
葡萄糖加入量
/mg
葡萄糖测得量
/mg
回收率
/ %
平均回收率
/ %
RSD
/ %
4.90 4.89 99.80
4.72 4.80 101.69
5.01 4.98 99.40 99.58 1.32
4.92 4.86 98.78
5.14 5.05 98.25
2.9　样品的测定　准确移取竹节参粗多糖供试液
1.0 mL ,按“2.4”方法显色 ,测定吸光度 ,以下列公
式计算各样品多糖的含量(mg·g-1):多糖的含量=
(C×D)/(W ×E)式中:C为测试液中多糖浓度(g·
L-1),D 为供试液的稀释因子 , E 为称量多糖样品
占提取总多糖样品比例因子 ,W 为样品质量(g)。
结果竹节参中多糖的含量为126.80 mg·g -1 。
3　讨论
本实验采用蒽酮-硫酸法来测定样品中多糖含
量 ,影响该方法准确性的因素为是否加热 、加热时
间 、及测定波长[ 5-6] 。
实验中 ,加入蒽酮试剂时会产生热量 ,反应温度
和时间条件不易控制。置于冰水浴中冷却 ,再平行
加热相同时间后冷却 ,可以较好的提高实验结果的
重现性和准确性。在该条件下显色产物的最大吸收
波长为 610 nm 。
提取物中有游离的单糖 ,影响测定结果 ,采用乙
醇沉淀后进行测定 ,避免单糖和小分子寡糖对多糖
含量测定的影响。
有颜色的样品 ,易影响测定结果 ,所以 ,乙醇沉
淀后 ,进一步采用丙酮和乙醚进行处理脱色除杂 ,较
好的提高了方法的准确性。
本实验从鄂产竹节参中提取出竹节参多糖 ,并
对其含量进行了测定。研究表明 ,鄂产竹节参多糖
含量较高 ,可进一步开发利用。鄂产竹节参多糖的
结构组成和生理活性有待进一步研究 。
参考文献:
[ 1] 　中国药典.一部 [ S] .2005:93.
[ 2] 　刘桂林 ,陈平,张俊红 ,等.鄂产竹节参多糖成分抗疲劳作用的
研究[ J] .中国医院药学杂志 , 2006 , 26(12):1459-1461.
[ 3] 　孟卫星 ,陈龙全 ,袁德培.复方竹节参对小鼠免疫功能影响的实
验研究[ J] .恩施医专学报 , 1998 , 15(4):1-3.
[ 4] 　张惟杰.糖复合物生化研究技术[ M ] .第 2版.杭州:浙江大
学出版社 , 1999:12-13.
[ 5] 　李晓辉 ,何云庆 ,李荣芷.不同产地灵芝中多糖的含量测定[ J] .
中国中药杂志 , 1997 , 22(2):83.
[ 6] 　李绍平 ,黄赵刚 ,张平 ,等.蒽酮-硫酸法测定亮菌糖浆中多糖
的含量[ J] .中草药 , 2001 , 32(2):124.
[收稿日期] 2007-05-18
[ 基金项目] 广州市医药卫生科技基金资助项目(编号:2005-YB-096);广东省自然科学基金资助项目(编号:06012928)　[ 作者简介] 温预关,
男 ,副主任药师 ,电话:020-81891425-8632-8393 , E-m ail:w enyuguande@163.com
草酸依地普仑片多次给药药动学研究
温预关1 ,曾转萍2 ,廖日房3 ,马崔1 ,林建荣1 　(1.广州市脑科医院国家药品临床研究基地 , 广东 广州 510370;2.广东药
学院流行病学教研室 ,广东 广州 510224;3.中山大学第二附属医院药剂科 ,广东 广州 510120)
[ 摘要] 　目的:探讨健康国人多次口服草酸依地普仑片体内药动学特点。方法:9 名健康受试者 , 每日空腹口服草酸依地普仑
片 10 mg , 连续 8 d ,采用高效液相色谱荧光检测法测定血浆中依地普仑浓度 ,并计算药动学参数。结果:多次口服 10 mg依地
普仑片后药-时曲线符合二室模型 ,其 Cmax , tmax , t1/2 , AUC0-132 , AUC0-∞ , AUCSS , 波动度 DF , 累积系数 R 分别为(38.0±6.4)μg
·L -1 ,(3.1±1.2)h ,(36.8±6.4)h , (1 580.0±778.8)μg·h·L-1 ,(1 772.0±804.0)μg·h·L-1 , (598.5±124.4)μg·h·L-1 ,
(79.2±27.5)%,(1.51±0.07)。结论:草酸依地普仑多次给药后在健康中国人体内耐受良好 ,人体内的药动学行为与国外文
献报道基本一致。
[ 关键词] 　草酸依地普仑;高效液相荧光色谱法;药动学
[中图分类号] R285.5 , R969.1　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213(2007)12-1656-03
Pharmacokinetics of domestic escitalopram oxalate tablets after multiple oral doses
·1656· 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 12期 C hin H osp Pharm J , 2007 Dec , Vol 27 , No.12