全 文 ：2004 年 6 月　　　　　　　　　　　　　　　　　云南化工　　　　　　　　　　　　　 　　　　　Jun.2004
　第 31卷第 3期　　　　　　　　　　　　Yunnan Chemical Technology　　　　　　　　　　　　　　Vol.31 , No 3　
元宝枫黄酮提取方法研究
刘祥义1 ,付　惠1 ,张　晴2 ,王小波1
(1　西南林学院基础部 ,昆明 650224;　2　云南瑞宝天然色素有限公司 ,昆明 650200)
摘　要:　采用将正交试验与单因素实验相结合的方法 ,对影响黄酮提取率的主要因素进行研究。结果表明 ,
从元宝枫叶中提取黄酮的较佳条件为:用 50%甲醇为溶剂 ,料液比 1∶16 ,温度 800℃,提取时间 6 h。
关键词:　元宝枫叶;黄酮;提取;正交试验
中图分类号:　TQ28　　　文献标识码:　A　　　文章编号:　1004-275X(2004)03-0019-03
Study on the Extraction of Flavonoids from the Leaves of Acer truncatum
LIU Xiang-yi1 , FU Hui1 , ZHANG Qing2 ,WANG Xiao-bo1
(1　 Southw est Forest ry College , Kunming 650224 , China;
2　Yunnan Rainbow Natural Pigment Co., Ltd., Kunming 650200 , China)
Abstract:　Main factors ef fecting ext ract ion of flavonids f rom the leaves of Acer truncatum w ere studied by single
factor and orthogonal experiments , and opt imized condi tion for the ex traction of f lavonids w ere obtained as extraction wi th
50% MeOH at 80℃ f or 6h with a m aterial to solvent rat io of 1:16.
Key words:　 Acer truncatunm leaf;flavonoids;ext ract ion;orthogonal experiment
　　元宝枫(Acer truncatum Bunge)又名五角枫 、
是槭树科槭属(Acer)植物 ,因翅果形状像中国古代
“金锭”而得名 ,其树冠浓荫 ,树姿优美 ,叶果秀丽 ,
在我国广泛用于荒山育林 、绿化树种及行道树 ,属
我国特有树种[ 1] 。据报道 ,元宝枫叶中含丰富的
黄酮类化合物[ 2～ 3] 。黄酮类化合物对治疗冠状动
脉硬化 ,脑血管疾病 ,心绞痛以及降低胆固醇 ,降
低血压 ,抑制某些细菌及真菌具有很好作用[ 4] 。
为了充分开发利用元宝枫资源 ,本文利用黄酮得
率为指标 ,应用正交试验方法研究了提取溶剂 ,提
取时间 ,料液比 ,提取温度 ,提取次数对元宝枫叶
黄酮提取率的影响。
1　材料与方法
1.1　材料
元宝枫叶 ,采于云南威达元宝枫产业开发公
司晋宁县基地 ,样品由西北林学院王性炎教授鉴
定 ,总黄酮质量分数为 6.42%。
芦丁标准品(上海生化试剂厂);大孔树脂(南
开大学化工厂);其余试剂均为分析纯。
1.2　主要仪器
TU-1800SPC紫外可见分光光度计(北京普析
通用仪器有限公司)。RE-52型旋转蒸发仪(上海
安亭电子仪器厂)。
1.3　实验方法
叶※干燥※粉碎※石油醚脱脂※提取※过滤
※大孔树脂吸附※浓缩※干燥※产品
1.3.1　正交实验设计[ 5]
以温度 、时间 、料液比 3因素为考察对象 ,每
个因素选用 3个水平 ,利用 L9(33)表安排实验 。
1.3.2　单因素实验
取样后 ,采用不同的实验设计方案进行提取 ,
分别测定提取液中黄酮含量并折算为 100 g 干叶
黄酮的得率 。
1.4　分析方法
准确称取在 120℃干燥至恒重的芦丁标准品
[基金项目] 云南省科技攻关资助项目(2000A4-01)
100.0 mg ,置于 100mL容量瓶 ,用 50%甲醇溶液溶解
完全 ,定容。准确吸取 20.00 mL 于 100 mL 容量瓶 ,
用50%甲醇稀释定容 ,得 0.20 mg/mL标准溶液。分
别取 0 ,0.50 ,1.00 ,1.50 ,2.00 ,2.50 mL 标准溶液于 10
mL容量瓶 ,加入5%NaNO2 溶液 0.3 mL ,摇匀 ,放置
6min;加入 10%Al(NO3)3溶液 0.3 mL , 摇匀 ,放置 6
min;再加入 4%NaOH溶液 4 mL ,用 50%甲醇稀释
定容 , 摇匀 ,放置15min ,用紫外可见光分光光度计于
波长 510 nm处 , 试剂为空白参比 ,测定吸光度 A 值。
准确称取在 120℃干燥至恒重的样品 10.0 mg ,
置于25mL容量瓶 ,用50%甲醇溶液溶解完全 ,定容。
准确吸取 1.00mL 于 10 mL容量瓶 ,加入 5%NaNO2
溶液 0.3mL ,摇匀 ,放置6 min;加入 10%Al(NO3)3溶
液0.3 mL , 摇匀 ,放置 6min;再加入 4%NaOH溶液
4mL ,用 50%甲醇稀释定容 , 摇匀 ,放置 15 min。用
紫外可见光分光光度计于波长 510 nm处 ,测定吸光
度 A值。计算样品中总黄酮含量。
2　结果与讨论
2.1　线性范围与回归方程
芦丁质量浓度在10 ～ 90 mg/L 范围内服从比耳
定理 ,用最小二乘法进行线性回归 ,得芦丁溶液质量
浓度 C与吸光度值A的回归方程式:A=-0.0029+
0.4751C , r=0.9999。
2.2　不同质量分数甲醇对黄酮提取率的影响
黄酮是一类弱极性的分子 ,易溶于醇和丙酮 ,且
在热水中有较大的溶解度。考虑到试剂的价格及工
业化生产的可行性 ,本研究选择不同质量分数甲醇作
溶剂 ,在800℃,料液比[ m(叶 , g)∶V(水 ,mL),下同]
1∶8下 ,提取结果见图1。
图 1　甲醇质量分数对黄酮得率的影响
由图1可见 ,随甲醇质量分数的增加 ,黄酮的提取
率逐渐升高 ,50%甲醇提取率最高 ,随后黄酮提取率随
甲醇质量分数的增加而降低 ,当甲醇质量分数为 100%
时 ,黄酮的溶出受到抑制。同时 ,随着溶剂中甲醇质量
分数的增加 ,叶绿素等脂溶性物质的溶出量也随之增
大 ,提取液颜色逐渐加深。水提取液为褐色 ,100%甲醇
提取液为深绿色。其它质量分数甲醇提取液颜色介于
这两种之间。故本研究选用50%甲醇为溶剂。
2.3　正交试验结果
选择提取时间 、料液比和提取温度为因素 ,如表1。
表 1　正交试验因素水平选择
水平 提取时间(A)/ h 料液比(B) 温度(C)/ ℃
1 4 1∶8 40
2 5 1∶12 60
3 6 1∶16 80
表 2　正交试验结果与计算
实验号 时间A 固液比 B 温度 C 黄酮得率/ %
1 1 1 3 5.17
2 2 1 1 4.96
3 3 1 2 5.18
4 1 2 2 5.69
5 2 2 3 5.50
6 3 2 1 5.32
7 1 3 1 5.12
8 2 3 2 5.65
9 3 3 3 5.92
K 1 15.98 15.31 15.40
K 2 16.11 16.51 15.69
K 3 16.42 16.69 16.59
极差 R 0.32 1.38 1.19
较优水平 A3 B3 C3
从表 2的正交试验结果与计算可以看出 ,最
佳组合为 9号 A3B3C3 ,即提取时间 6h 、料液比 1∶
16和提取温度 80℃。最差组合为 7 号。同时存
在 K 3>K 2>K 1 ,可判断随着时间的延长 、料液比
的增大 、提取温度的提高 ,黄酮的得率基本都呈上
升趋势 。通过极差数据分析可知:料液比因素影
响最大 ,温度其次 ,时间的影响最小 。
2.3.1　单因素实验分析
在正交试验的基础上 ,通过单因素实验对各
因素的影响进行了更深入的探讨。
2.3.2　提取温度对黄酮提取率的影响(图 2)
由图 2可见随温度的升高 ,黄酮提取率逐渐
增加。较佳温度为 80℃ 。
图 2　温度对黄酮提取率的影响
·20· 云南化工　　　　　　　　　　　　　　　　　2004年第 3期　
2.3.3　提取时间对黄酮提取率的影响(图 3)
图 3　时间对黄酮提取率的影响
由图 3可见随提取时间的延长 ,黄酮提取率
逐渐增加 。较佳时间为 6 h。
2.3.4　料液比对黄酮提取率的影响(图 4)
图 4　料液比对黄酮提取率的影响
由图 4可见随料液比的增大 ,黄酮提取率逐
渐增加。较佳料液比为 1∶16。
2.4　提取次数对黄酮提取率的影响
多次提取有利于植物体中有效成分提取。但
从工作量 、生产成本等因素考虑 ,须有一个较合理
的提取次数。本研究都采用 2次提取 ,第 3 次提
取液通过显色分析 ,浓度已较低。因此 ,2 次提取
较为合理。
3　结论
将正交试验结果与单因素实验相结合 ,对影
响黄酮提取率的主要因素进行分析的结果标明 ,
从元宝枫叶中提取黄酮的相关参数为:提取溶剂
50%甲醇;提取时间 6;料液比 1∶16;提取温度
80℃;提取次数 2 次。其中料液比为最大影响因
素 ,温度其次 ,时间的影响最小 。
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作者简介:刘祥义(1964 ～ )男 , 广东梅州人 , 副教授 , 博士
生 , 主要从事天然产物方向研究。
(收稿日期:2004-04-06)　
(上接第 18页)
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作者简介:付惠(1959 ～ ), 女 ,教授 , 主要从事天然产物
方向研究。
(收稿日期:2004-04-20)　
·21·　2004年第 3期　　　　　　　　　　　　刘祥义等:元宝枫黄酮提取方法研究