全 文 ：·中草药· 北方园艺２０１３（０８）：１６８～１７２
第一作者简介：赵志莲（１９７２－），女，硕士，高级讲师，研究方向为药
用植物资源及生物技术。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｚｌｚｈ６６６＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．
责任作者：李海峰（１９７１－），男，硕士，副教授，研究方向为药用植物
资源及生物技术。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｈｆｚｈ８８８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．
基金项目：云南省应用基础研究资助项目（２０１０ＺＣ１３６）；大理学院
２０１１年中青年学术带头人培养资助项目；大理学院２０１２年应用
基金资助项目。
收稿日期：２０１２－１２－１３
滇龙胆种质资源筛选及离体培养的初步研究
赵 志 莲１，２，李 海 峰１，张 德 全１，段 宝 忠１
（１．大理学院 药学与化学学院，云南 大理６７１０００；２．云南省大理农业学校，云南 大理６７１００３）
摘 要：以不同居群、同一居群不同滇龙胆植株为试材，采用 ＨＰＬＣ法对滇龙胆根茎中龙
胆苦苷含量进行测定，再以龙胆苦苷含量≥８．０％的感通、湾桥和蝴蝶泉居群茎尖为外植体，研
究了培养基、培养温度对滇龙胆离体培养及植株再生的影响。结果表明：大理苍山滇龙胆不同
居群根茎中龙胆苦苷含量差异达到显著或极显著水平，其中，感通居群、中和居群、湾桥居群和
蝴蝶泉居群根茎中龙胆苦苷含量较高，达到８．０％以上；上关居群根茎中龙胆苦苷含量最低，为
（５．８４９±０．０１４９３）％。滇龙胆同一居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差异较小，喜洲居群不同植
株根茎中龙胆苦苷含量差异达到显著水平（Ｐ＜０．０５），中和居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差
异达到极显著水平（Ｐ＜０．０１），其它居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量无显著差异。滇龙胆茎尖
生长点离体培养及植株再生的最适宜培养基为１／２ＭＳ培养基，再生植株诱导率可达８０．００％，不
定芽高（５．６±０．２）ｃｍ，最佳培养条件是２０℃／２５℃变温培养，再生植株诱导率可达８７．７８％，不定
芽高（７．５±０．２）ｃｍ。
关键词：滇龙胆；种质资源；龙胆苦苷；离体培养；植株再生
中图分类号：Ｑ ９４５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１３）０８－０１６８－０５
滇龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ Ｆｒａｎｃｈ．Ｅｘ Ｈｅｍｓｌ）属龙
胆科龙胆属多年生草本植物，别名坚龙胆、龙胆草、兰花
根、青鱼胆等，主要分布在云南、贵州、四川等地［１］，是国
家重点保护三级野生药材濒危物种。滇龙胆是云南道
地药材，以根茎入药，具有清热泻火、保肝、健脾、杀菌等
作用［２］，是龙胆泻肝片颗粒、龙胆泻肝汤、龙胆注射液等
１００多种中成药的原料，仅在云南年需求量近１ ０００ｔ［２］。
近年来，随着药厂对滇龙胆药材需求量的增加，滇龙胆
野生种质资源遭到了严重破坏，加之紫茎泽兰泛滥速度
没有得到有效控制，致使野生种质资源濒危程度加剧。
研究发现，滇龙胆中活性成分龙胆苦苷的含量因不
同产地、不同部位存在较大差异，云南不同产地滇龙胆
干燥根茎中龙胆苦苷含量在２．７５％～４．８７％之间［３］，大
理产滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量显著高于全云南省的
平均水平［４－５］，大理苍山是龙胆科龙胆属植物主要分布
地区之一，有云南龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｆｒａｎｃｈ．）、
着色龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｐｉｃｔａ Ｆｒａｎｃｈ．ｅｘ Ｈｅｍｓｌ．）、具耳
龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｏｔｏｐｈｏｒａ Ｆｒａｎｃｈ．ｅｘ Ｈｅｍｓ．）、乳突龙胆
（Ｇｅｎｔｉａｎａ ｐａｐｉｌｌｏｓａ Ｆｒａｎｃｋ．）、红花龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎａ
ｒｈｏｄａｎｔｈａ Ｆｒａｎｃｈ．ｅｘ Ｈｅｍｓ．）等数十种花期与滇龙胆
相同的物种，为滇龙胆与近缘野生种间进行自然杂交提
供了丰富的物质基础，经过长期的自然选择，可能蕴藏
着丰富的滇龙胆优质种质资源，所以对大理苍山滇龙胆
优质种质资源进行筛选，利用植物组织培养技术对优质
种资源进行离体培养、保存，为实现滇龙胆优质种质资
源可持续利用具有重要意义。因此，该研究拟采用高效
液相色谱法（Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，
ＨＰＬＣ）对大理苍山滇龙胆不同野生居群进行筛选，再以
根茎中龙胆苦苷含量较高的优质种质资源茎尖为外植
体，在培养基中不添加植物激素的条件下研究培养基、
培养温度对滇龙胆离体培养及植株再生的影响，旨在为
滇龙胆野生优质种质资源筛选、离体保存、快速繁殖和
资源可持续利用等提供依据和参考。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
２０１１年９～１１月，在大理苍山东坡选择感通、中和、
湾桥、喜洲、蝴蝶泉、上关等滇龙胆野生资源分布较丰富
的６个地方，每个地方采集１个野生居群，采样点生境以
土壤类型为红壤的荒山向阳坡草地上为宜，每个居群随
机采集无病虫害的开花期植株３０株，采集植株之间的
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北方园艺２０１３（０８）：１６８～１７２ ·中草药·
株距＞３ｍ，居群间距离＞６ｋｍ，采集的植株自然干燥。
经鉴定为龙胆科滇龙胆（Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ）植株。滇龙胆优质
种质资源离体培养及植株再生供试材料为１２～２月份
有休眠芽分化的植株。
仪器与试剂：美国惠普公司Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相
色谱仪，包括Ｇ１３１３ＡＡＬＳ自动进样器、Ｇ１３１５Ａ／Ｂ ＤＡＤ
检测器、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｃｈｅｍ Ｓｔａｔｉｏｎ色谱工作站；ＳＫ５２００Ｈ型
超声波清洗仪（上海科导超声仪器有限公司）；梅特勒电
子天平ＡＥ２４０（瑞士）；ＦＹ１３５型中草药粉碎机（天津市
泰斯特仪器有限公司）；ＢＵＣＨＩ旋转蒸发仪；Ｍｉｌｉｐｏｒｅ纯
水处理系统；高压灭菌器；无菌操作台；智能人工气候
箱等。
龙胆苦苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：
１１０７７０－２００５１０），高效液相用甲醇为色谱纯，高效液相用
水为三重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
１．２ 试验方法
１．２．１ 滇龙胆优质种质资源筛选 样品的选择：不同居
群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量测定时，从每个居群中随
机选取根茎质量在６．０～６．６ｇ之间的植株９株混合作
为样品。同一居群不同滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量测
定时，从每个居群中随机选取根茎质量在６．０～６．６ｇ之
间的植株１株作为样品，每个居群随机选择６株。样品
中龙胆苦苷含量测定：样品经过粉碎、过筛（１００目）、混
合均匀，按照李娇等［６］的方法提取并测定龙胆苦苷含
量，每个样品重复测定３次。对照品及样品的色谱图如
图１所示，龙胆苦苷含量用龙胆苦苷质量／干物质质量
的质量分数表示。
图１ 龙胆苦苷对照品（Ａ）和样品（Ｂ）色谱图
Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
ｓｕｂｓｔａｎｃｅ（Ａ）ａｎｄ ｓａｍｐｌｅ（Ｂ）
１．２．２ 滇龙胆离体培养及植株再生 材料的处理：外植
体为龙胆苦苷含量≥８．０％的感通居群、湾桥居群和蝴
蝶泉居群茎尖，不同群的外植体分别用自来水洗净后，
切取２～３ｃｍ的休眠芽，在无菌操作台上用７０％的酒精
溶液消毒３０ｓ，再用０．１％ＨｇＣｌ２消毒８～１０ｍｉｎ，最后用
无菌水洗涤４～６次，在解剖镜下培养皿中无菌滤纸上
切取滇龙胆休眠芽生长点（含３对叶原基），分别接种到
培养基中，建立不同居群的培养系。培养基及培养条
件：培养基试验以ＭＳ、１／２ＭＳ（ＮＨ４ＮＯ４为１／２的ＭＳ培
养基）、Ｂ５、Ｗｈｉｔｅ和Ｍｉｌｅｒ ５种培养基［７－８］作为基本培养
基，培养基中分别添加蔗糖３０ｇ／Ｌ、琼脂８．０ｇ／Ｌ、ｐＨ
为５．６，培养条件２０℃培养、光照强度３ ０００ｌｘ、光照时
间１６ｈ／ｄ。培养温度设为１５、２０、２５℃３个恒温培养和
１５℃／２５℃、２０℃／２５℃２个变温培养，以１／２ＭＳ作为基
本培养基，添加成分及培养条件同上。培养容器为
１５０ｍＬ三角瓶，每瓶加入４０ｍＬ培养基，１２０℃高压灭菌
１５ｍｉｎ，每瓶接种３个外植体，每个处理接种１０瓶，每个
试验设３次重复。
１．３ 数据分析
所得滇龙胆种质资源筛选数据用ＳＰＳＳ １３．０统计
软件进行分析，筛选出滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量较高
的优质种质资源。
滇龙胆离体培养３０ｄ后统计不定芽数和不定芽高，
不定芽数为接种外植体中有芽生成的外植体数，诱导率
（％）为不定芽数占接种外植体数的质量分数。所得数
据用ＳＰＳＳ １３．０统计软件进行差异显著性分析。
２ 结果与分析
２．１ 滇龙胆居群间及居群内植株根茎中龙胆苦苷含量
比较
２．１．１ 不同居群根茎中龙胆苦苷含量比较 从表１可
以看出，大理苍山不同居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量
差异较大。不同居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量由高
到低的顺序为湾桥居群、感通居群＞中和居群＞蝴蝶泉
居群＞喜洲居群＞上关居群。对不同居群滇龙胆根茎
中龙胆苦苷含量进行显著性测验表明，湾桥居群和感通
居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量之间无显著差异，湾桥
居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量极显著高于中和居群，
感通居群和中和居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量之间
没有显著差异，中和居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量极
显著高于蝴蝶泉居群，喜洲居群滇龙胆根茎中龙胆苦苷
含量极显著于上关居群。大理州苍山不同居群滇龙胆
根茎中龙胆苦苷含量整体较高，含量较低的上关居群为
表１ 滇龙胆不同居群根茎中
龙胆苦苷含量比较分析（Ｍｅａｎ±ＳＤ，ｎ＝３）
Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍｅ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎ
居群
Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
编号
Ｎｏ
龙胆苦苷含量
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ／％
感通Ｇａｎｔｏｎｇ ＧＴ２０１１ ８．２３１±０．０１５１ＡＢａｂ
中和Ｚｈｏｎｇｈｅ ＺＨ２０１１ ８．２０４±０．０１１７Ｂｂ
湾桥 Ｗａｎｑｉａｏ ＷＱ２０１１ ８．２６３±０．０２０５Ａａ
喜洲Ｘｉｚｈｏｕ ＳＺ２０１１ ６．２５５±０．０２１３Ｄｄ
蝴蝶泉Ｈｕｄｉｅｑｕａｎ ＨＤＱ２０１１ ８．１４４±０．０２１０Ｃｃ
上关Ｓｈａｎｇｇｕａｎ ＳＧ２０１１ ５．８４９±０．０１４９Ｅｅ
注：数据后大小写字母分别表示Ｐ＝０．０１和Ｐ＝０．０５水平存在显著性差异。
下同。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ ｓｍａｌ ａｎｄ ｃａｐｉｔａｌ ｌｅｔｔｅｒ ｍｅａｎ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｒｏｍ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｔ ０．０５ａｎｄ ０．０１
ｌｅｖｅｌｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
９６１
·中草药· 北方园艺２０１３（０８）：１６８～１７２
（５．８４９±０．０１４９）％，龙胆苦苷含量是《中国药典》２０１０年
版１．０％的限量标准的５倍多［７］，说明苍山野生滇龙胆
中存在龙胆苦苷含量较高的优质种质资源，这为从野生
滇龙胆居群中筛选根茎中龙胆苦苷含量较高的优质种
质资源提供了依据。
２．１．２ 同一居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量比较
从表２可以看出，大理苍山滇龙胆６个居群不同植株根
茎中龙胆苦苷含量变化较小，感通居群、湾桥居群、蝴蝶
泉居群和上关居群中滇龙胆不同植株根茎中龙胆苦苷
含量无显著差异，喜洲居群不同植株根茎中龙胆苦苷含
量差异达到显著水平（Ｐ＜０．０５），中和居群不同植株根
茎中龙胆苦苷含量差异达到极显著水平（Ｐ＜０．０１）。该
结果表明，同一居群不同植株滇龙胆根茎中龙胆苦苷含
量具有较稳定的居群遗传能力，为从野生滇龙胆居群中
筛选出根茎中龙胆苦苷含量较高的优势居群作为繁殖
材料提供了依据。
表２ 滇龙胆居群内不同植株的根茎中龙胆苦苷含量比较（Ｍｅａｎ±ＳＤ，ｎ＝３）
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
感通居群
Ｇａｎｔｏｎｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
中和居群
Ｚｈｏｎｇｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
湾桥居群
Ｗａｎｑｉａｏ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
喜洲居群
Ｘｉｚｈｏｕ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
蝴蝶泉居群
Ｈｕｄｉｅｑｕａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
上关居群
Ｓｈａｎｇｇｕａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
编号
Ｎｏ．
龙胆苦苷
Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ／％
ＧＴ０１ ８．２３３±０．０１４２Ａａ ＺＨ０１ ８．２１８±０．０１８３Ａａ ＷＱ０１ ８．２６３±０．０３２９Ａａ ＳＺ０１ ６．２７３±０．０２２５Ａａ ＨＤＱ０１ ８．１９８±０．０１３６Ａａ ＳＧ０１ ５．８３８±０．０２０４Ａａ
ＧＴ０２ ８．２３７±０．０２０６Ａａ ＺＨ０２ ８．０２３±０．０１６１Ｃｃ ＷＱ０２ ８．２２０±０．０３５５Ａａ ＳＺ０２ ６．２０４±０．０２５９Ａｂ ＨＤＱ０２ ８．１６３±０．０１７６Ａａ ＳＧ０２ ５．８２１±０．０２４５Ａａ
ＧＴ０３ ８．２３８±０．０３５６Ａａ ＺＨ０３ ７．９９２±０．０２４５Ｃｃ ＷＱ０３ ８．１８７±０．０４６５Ａａ ＳＺ０３ ６．２０３±０．０１８０Ａｂ ＨＤＱ０３ ８．２０４±０．０２２６Ａａ ＳＧ０３ ５．７５８±０．０７１３Ａａ
ＧＴ０４ ８．２２２±０．０２４５Ａａ ＺＨ０４ ８．１７８±０．０１７０Ｂｂ ＷＱ０４ ８．２４３±０．０１８２Ａａ ＳＺ０４ ６．２３９±０．０１６５Ａａｂ ＨＤＱ０４ ８．１８８±０．０２２４Ａａ ＳＧ０４ ５．７７８±０．０１２０Ａａ
ＧＴ０５ ８．２２５７±０．０２５８Ａａ ＺＨ０５ ８．０３４±０．０１１５Ｃｃ ＷＱ０５ ８．１９４±０．０１１５Ａａ ＳＺ０５ ６．２１３±０．０２０２Ａｂ ＨＤＱ０５ ８．１７６±０．０２６２Ａａ ＳＧ０５ ５．８０５±０．０２５８Ａａ
ＧＴ０６ ８．２５２±０．０２７４Ａａ ＺＨ０６ ７．５４６±０．０３０４Ｄｄ ＷＱ０６ ８．２２４±０．０１３９Ａａ ＳＺ０６ ６．２２０±０．０２０８Ａｂ ＨＤＱ０６ ８．１７８±０．０１１９Ａａ ＳＧ０６ ５．８１６±０．０１６３Ａａ
２．２ 滇龙胆离体培养及植株再生的研究
２．２．１ 培养基对滇龙胆离体培养及植株再生的影响
由图２可知，在不同的培养基上均能从滇龙胆茎尖生长
点诱导不定芽的产生，但是，滇龙胆茎尖生长点接种在
Ｂ５和１／２ＭＳ培养基上芽诱导率显著（Ｐ＜０．０５）高于其
它培养基；无机盐浓度高的ＭＳ培养和无机盐含量非常
低的 Ｗｈｉｔｅ培养基均不利于滇龙胆茎尖生长点诱导不定
芽。滇龙胆茎尖生长点接种后经过４～６ｄ培养，生长点
开始萌动，再经过１６～２４ｄ培养不定芽高２～６ｃｍ，其
中，ＭＳ培养基和１／２ＭＳ培养基上不定芽高显著（Ｐ＜
０．０５）高于其它培养基。
图２ 培养基对滇龙胆离体培养及植株再生的影响
Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
２．２．２ 培养温度对滇龙胆离体培养及植株再生的影响
如图３所示，滇龙胆茎尖生长点接种在Ｂ５培养基上在
１５℃／２０℃或２０℃／２５℃变温条件下培养，不定芽诱导率
显著（Ｐ＜０．０５）高于其它温度培养，变温培养有利于滇
龙胆茎尖生长点诱导不定芽；１５℃低温培养不能诱导
不定芽，２５℃高温培养不定芽诱导率较低，培养温度过
高或过低都不利于滇龙胆茎尖生长点诱导不定芽。滇
龙胆茎尖生长点接种后经过３～４ｄ培养，生长点开始
萌动，再经过１６～２４ｄ培养不定芽高２～６ｃｍ，其中，
２５℃恒温培养和２０℃／２５℃变温培养上不定芽高显著
（Ｐ＜０．０５）高于其它培养温度。
图３ 培养温度对滇龙胆离体培养及不定芽生长的影响
Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
３ 讨论
滇龙胆野生优质种质资源是自然界长期进化、自然
杂交选育的结果，是育种和基因工程的基础，所以对大
０７１
北方园艺２０１３（０８）：１６８～１７２ ·中草药·
理苍山滇龙胆优质种质资源进行筛选，利用植物组织培
养技术离体保存优质种资源，对实现滇龙胆优质种质资
源可持续利用具有重要意义。该研究结果表明，大理苍
山滇龙胆不同居群根茎中龙胆苦苷含量差异达到显著
或极显著水平，但不同居群根茎中龙胆苦苷含量都较高，
上关居群根茎中龙胆苦苷含量最低（５．８４９±０．０１４９％），也
是《中国药典》２０１０年版１．０％限量标准的５倍多［９］，说
明大理苍山存在龙胆苦苷含量较高的野生优质种质资
源；滇龙胆同一居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差异
较小，除喜洲居群和中和居群不同植株根茎中龙胆苦苷
含量差异达到显著或极显著水平，其它居群不同植株根
茎中龙胆苦苷含量无显著差异，滇龙胆根茎中龙胆苦苷
含量具有较稳定的居群遗传能力，研究结果与杨维泽
等［１０］的研究结果相似，云南滇龙胆居群间表型变异高于
居群内。为从野生滇龙胆居群中筛选滇龙胆根茎中龙
胆苦苷含量较高的优质种质资源提供理论依据。
朱宏涛等［１１］对滇龙胆无性繁殖进行研究，建立了滇
龙胆无性繁殖系；罗春梅等［１２］用滇龙胆的顶芽及侧芽作
为外植体，筛选出不定芽诱导的最佳条件。但是，他们
的研究都是在培养基中添加了植物生长调节剂，经过愈
伤组织途径完成植株再生，为了使野生滇龙胆居群根茎
中龙胆苦苷含量较高的优良性状得到稳定遗传，分别以
龙胆苦苷含量较高的感通居群、湾桥居群和蝴蝶泉居群
野生优质种质资源为外植体，在培养基中不添加任何植
物激素的条件下研究培养基、培养温度对滇龙胆优质种
质资源茎尖生长点诱导不定芽进行初步研究，结果表
明，滇龙胆茎尖生长点诱导不定芽的最适宜培养基为
１／２ＭＳ培养基、２０℃／２５℃变温培养，再生植株诱导率可
达８７．７８％，不定芽高（７．５±０．２）ｃｍ。并建立了感通居
群、湾桥居群和蝴蝶泉居群３个居群的离体培养及植株
再生体系。但是，野生滇龙胆优质种质资源离体培养再
生植株根茎中龙胆苦苷含量较高的性状是否能够得到
稳定遗传还需进一步研究。
参考文献
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Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ
ｔｈｅ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
ＺＨＡＯ Ｚｈｉ－ｌｉａｎ１，２，ＬＩ Ｈａｉ－ｆｅｎｇ１，ＺＨＡＮＧ Ｄｅ－ｑｕａｎ１，ＤＵＡＮ Ｂａｏ－ｚｈｏｎｇ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｄａｌｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉ，Ｙｕｎｎａｎ ６７１０００；２．Ｄａｌｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｄａｌｉ，Ｙａｎｎａｎ ６７１００３）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ
Ｆｒａｎｃｈ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍｅ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ Ｆｒａｎｃｈ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ
ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｑｕａｌｉｔｙ ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｎ ｏｒ ｅｑｕａｌ ｔｏ
８．０％ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａｒｉｇｅｓｃｅｎｓ Ｆｒａｎｃｈ ｗｅｒｅ ｅｘｐｌｏｒｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ
ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｒｈｉｚｏｍｅ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ Ｆｒａｎｃｈ ｆｒｏｍ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｄａｌｉ Ｃａｎｇｓｈａｎ ｒｅａｃｈｅｄ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｏｒ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍ，ｉｎ Ｇａｎｔｏｎｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，Ｚｈｏｎｇｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，Ｗａｎｑｉａｏ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，
ａｎｄ Ｈｕｄｉｅｑｕａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｒｅａｃｈｅｄ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ８．０％．Ｉｎ
Ｓｈａｎｇｇｕａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ（５．８４９±０．０１４９％）．Ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ｐｌａｎｔ ｉｎ ｒｈｉｚｏｍｅ ｏｆ Ｇ．ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ ｈａｄ ｓｍａｌ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ Ｘｉｚｈｏｕ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｒｅａｃｈｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ（Ｐ＜０．０５），ｉｎ Ｚｈｏｎｇｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｒｅａｃｈｅｄ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ（Ｐ＜０．０１），
ｗｈｉｌｅ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ
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·新品种选育· 北方园艺２０１３（０８）：１７２～１７４
第一作者简介：；李艳梅（１９７３－），女，实验师，研究方向为植物病理
及其防治。
责任作者：杨英军（１９６８－），男，硕士，教授，研究方向为果树种质资
源及其应用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｙｉｎｊｕｎ２００３＠１２６．ｃｏｍ．
基金项目：洛阳市科技发展计划资助项目（０８０１０４４Ａ）；河南科技
大学人才科学研究基金资助项目（０５０１８）。
收稿日期：２０１２－１２－１８
晚熟鲜食桃新品种“玉西红蜜”的选育与
品种特性研究
李 艳 梅１，韩 文 忠２，姜 全 会３，杨 英 军１
（１．河南科技大学 林学院，河南 洛阳４７１００３；２．新安县仓头镇，河南 新安４７１０１１；３．宜阳县锦屏镇，河南 宜阳４７１０１１）
摘 要：“玉西红蜜”是采用杂交方法选育，于９月下旬成熟的晚熟桃品种；其果形美观，色泽鲜
艳，品质优异，耐贮性好。现以主栽品种“北京晚蜜”、“八月鲜”为对照，对其生物学特性、果实品质及
其发育特性进行了测定分析。表明凡适宜“大久保”、“北京晚蜜”种植的地区，都适宜推广该品种。
关键词：桃；新品种；晚熟；“玉西红蜜”
中图分类号：Ｓ ６６２．１ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００１－０００９（２０１３）０８－０１７２－０３
桃（Ｐｒｕｎｓ ｐｅｒｓｉｃａ（Ｌ．）Ｂａｔｓｃｈ）适应性强，结果早、管
理易，是世界主要水果之一，也是我国第三大落叶果树。
但目前生产中，早中熟品种所占比例大，成熟期接近，采
收期短、贮运性差，中晚熟品种（果实８月中旬以后成熟）
较少。同时随着“果树进城”和观光果园的兴起以及乡
村旅游发展的需要，近年来发展起来的食赏兼用模式，
是一种新型栽培方式与管理模型。因此晚熟耐贮、花果
兼优、型果兼优的桃新品种选育与示范是今后育种与生
产发展的重要目标［１－２］，目前已经育成了一些食赏兼用
桃品种［３－４］。
“玉西红蜜”是河南科技大学杂交育成的晚熟大果
桃新品种［５－７］。果大色艳，抗逆性好。成熟于中秋节和
国庆节期间，非常适宜食赏兼用栽培，市场前景很好。
１ 选育过程
于１９９６年３月下旬进行杂交。以“北京晚蜜”、“八
月鲜”、“眉县冬桃”、“河洛红蜜”、“艳光油桃”、地方晚熟
桃等为亲本，进行几十个组合的正反杂交，当年获得杂
交种子经层积和催芽处理，于翌年春播种。９月中旬将
栽培性状明显的杂种苗嫩枝嫁接在２ａ生的毛桃实生砧
木上正常管理。经过１９９８～２００８年连续１０ａ观察，在
“北京晚蜜”×（“八月鲜”＋”眉县冬桃’）组合中选育出大
果、味甜、粘核、抗逆性好、耐贮运的“玉西红蜜”。并于
２００９年通过河南省林木良种审定委员会审定。
２ 生物学特性研究
分别在２００６～２００８年连续对“玉西红蜜”物候期、单
果重、可溶性固形物、有机酸含量等品质与特性进行测
定和研究。试验材料为５～８ａ生桃树，毛桃作砧木，对
照品种为“北京晚蜜”和“八月鲜”，株行距３．５ｍ×４ｍ，
管理水平较高，树体生长健壮、整齐一致，３～４根主枝。
试验地点在孟州市槐树乡、山东省平原县等地。供试品
种以单株为小区，３次重复，选择３个主枝最先端的３枝
新梢调查，每隔１５ｄ测量其长度。着果后每个品种各小
区选３０个果实，间隔２０ｄ测量各品种果实的纵横径及
单果重。用天平称重；游标卡尺测果实纵横径及皮厚；
手持测糖仪测定可溶性固形物；斐林试剂法测定糖含
量；中和法测定酸含量。
２．１ 植物学特征
“玉西红蜜”树冠呈自然半圆形，树姿半开张。新梢
绿色，阳面有红晕，节间长２．３５ｃｍ。叶为狭披针形，长
ｆｏｒ ｓｔｅｍ－ｔｉｐ ｇｒｏｗｔｈ－ｐｏｉｎｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＧｅｎｔｉａｎａｒｉｇｅｓｃｅｎｓＦｒａｎｃｈ ｗａｓ １／２ＭＳ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｒｅａｃｈ ８０．００％，ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｈｅｉｇｈｔ（５．６±０．２）ｃｍ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ
ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｖａｒｉａｂｌｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｔ ２０／２５℃，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｃｏｕｌｄ ｒｅａｃｈ
８７．７８％，ｗｉｔｈ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｈｅｉｇｈｔ（７．５±０．２）ｃｍ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｔｉａｎａ ｒｉｇｅｓｃｅｎｓ Ｆｒａｎｃｈ；ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ；ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ；ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ；ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
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