全 文 ：　实验研究　
复方竹节参片治疗类风湿性关节炎的实验研究
湖北民族学院医学院附属医院(恩施 445000)　李红橙
摘　要:目的:探讨中药复方竹节片治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:建立弗氏完全佐剂诱导大鼠关节炎病理模型 ,
采用复方竹节参片治疗 ,通过关节炎指数 、足趾容积 、病理学检查 、血清细胞因子测定进行观察。结果:复方竹节片能明显抑
制弗氏完全佐剂性关节炎大鼠关节肿胀及病理学改变 , 降低关节炎指数 ,使关节炎病理模型大鼠血清中异常增高的白细胞
介素-8(IL-8)和细胞肿瘤因子(TNFa)水平下降 、降低的白细胞介素-10(IL-10)水平升高(P<0.05)。结论:复方竹节
参片具有明显抑制促炎症细胞因子病理性的升高 , 从而有效控制了类风湿性关节炎病情发展。
关键词:类风湿性关节炎;佐剂;复方竹节参片;大鼠
中图分类号:R29　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)01-0026-03
　　复方竹节参片采用当地民族药物竹节参(五加科植物
竹节参 Panax Japonicus C.A.Mey.的干燥根茎 , 又名竹节
人参 、北三七 , 是我国西南地区民间用以治疗风湿痹证 、筋
骨疼痛 、虚损劳伤的名贵中草药)为主 , 选药和中药血当归 、
淫羊藿 、白芍 、青风藤 、地蜂子 、穿山龙等配伍组方 , 浓缩提
取 ,制备成复方竹节参糖衣片剂型 , 临床上主要用于各类风
湿性关节炎等风湿疾病〔1〕的治疗。本文旨在研究竹节参片
对佐剂性关节炎(adjuvant induced arthritis , AA)小鼠的治疗
效果 ,并测定对 AA 小鼠血清细胞因子 IL-8 、IL-10 、TN-
Fa的影响 ,探讨其可能作用机制。
1　材料和方法
1.1　实验动物及分组:健康Wirst大鼠(由湖北省实验动物
中心提供)50只 , 体重 200g ～ 220g。随机分为 5 组 ,即对照
组 、模型组 、复方竹节参片(6 、4g/ kg·bw)实验组 、雷公藤多
苷片(6g/kg·bw)治疗组。
1.2　药品试剂及器材:试验药品制备:复方竹节参片 , 批
号:040915 ,由湖北民族学院医学院附属医院制剂室提供。
复方竹节参片去糖衣粉碎 , 按水煎剂制备法得 1:2 浓缩药
液 ,过滤 , 滤液加 95%乙醇搅拌 , 冷藏 24h , 过滤 , 弃去沉淀
物 ,回收乙醇浓缩至 1:2(即每 ml含生药 2.0g),高压灭菌
保存备用。 雷公藤苷片由黄石市制药厂生产(批号:
040318),雷公藤多苷片临用时调制(每片含提取物 10mg),
对照组按 7.5mg/ kg 给药 , 弗氏完全佐剂(SIGMA 产品):IL
-8 、TNFa 试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所提
供;IL-10 试剂盒由深圳晶美生物工程公司提供;精密电子
分析天平 、TL-16G 型高速离心机(上海实验仪器厂生产);
GC-1200r 放射免疫计数器(中国安徽科大创新股份有限
公司);容积测量仪 , 自制;切片机 LeicaJungBiocut2035 , 德
国;AXIOSKOP2PLUS 光学显微镜 ,德国 ZEISS 公司。
1.3　AA 大鼠模型制备〔2〕与检测方法:各组均左后足跃皮
内注射弗氏完全佐剂(0.2ml/只)致炎 , 第 7 天时随机分为 5
组 ,于致炎第 8 日灌胃给药 , 每天 1 次 , 连续灌胃给药 21
天 ,对照组和关节炎模型组给生理盐水每只 1ml;复方竹节
参片治疗组给药剂量 6 、4g/ kg·bw ;阳性药雷公藤多苷片治
疗组给药剂量 6g/kg·bw。 每天 1 次 , 共 21d。 关节炎指数
评价(Ar thritisindex A I):记录实验大鼠佐剂性关节炎的发
生及严重程度 , 分 5 级 , 0 级:无红肿;1 级:足小趾关节红
肿;2 级:趾关节 、足跖部均红肿;3 级:踝关节以下均红肿;4
级:包括踝关节 ,全部红肿。初次免疫后 7d起 , 每 7d评分 1
次;用排水法测足爪体积 ,以足爪肿胀抑制率观察复方竹节
参片对病变的抑制作用;采用放免法检测病变小鼠外周血
IL-8、IL-10 、TNFa;摘取小鼠继发病变左侧踝关节 , 10%
甲醛固定 , 8%甲酸脱钙 , 乙醇梯度脱水 , 浸蜡 , 石蜡包埋 , 切
片 ,HE 染色 ,病理学光镜观察:关节滑膜组织 、炎性细胞浸
润 、软骨破坏及骨侵蚀情况。
1.4　数据分析:实验数据采用 SPSS FOR WINDOWS10.0
软件进行 t检验统计处理。
2　结　果
2.1　大鼠关节组织病理学观察:正常组:踝关节组织学结
构正常;模型组:踝关节出现明显病变 , 关节软骨面毛糙凹
凸不平 、缺损 ,软骨细胞固缩甚消失形成软骨空陷窝 , 严重
者出现软骨下骨侵蚀 , 相邻骨质疏松 , 关节腔变窄 , 且滑膜
组织不同程度增生(滑膜充血 、水肿 、呈不规则增厚), 滑膜
内有大量淋巴细胞 、巨噬细胞 、中性粒细胞和浆细胞浸润 ,
表面滑膜组织可见灶性坏死 , 有的滑膜绒毛形成突向关节
腔内;竹节参组及雷公藤多苷片组:关节部分病变可见到不
同程度的轻 、中度慢性炎症 , 且软骨表面光滑 , 未见明显软
骨破坏及骨侵蚀 ,滑膜细胞仅轻度增生 , 且排列整齐 、细胞
26　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2009 年 1 月第 1 期
形态规则 ,见少量炎性细胞浸润。
2.2　关节炎指数比较:给药 1W 和 2W ,复方竹节参片实验
组与病理模型组相比 ,关节炎指数差异显著(P<0.05 或 P
<0.01);复方竹节参片高 、低组及雷公藤多苷片组之间比
较 ,无显著性差异 P>0.05(见表 1)。
2.3　对小鼠继发性炎症反应的影响:竹节参各剂量组对大
鼠佐剂性关节炎肿胀具有明显的抑制作用 , 与模型组比较
有显著性差异(P<0.05 或 P<0.01)(见表 2)。
表 1　关节炎指数的比较( x ±s n=10)
组别 剂量
g/ kg·bw
不同时间患侧关节炎指数的变化
1d 7d 14d
正常组 - 0 0 0
模型组 - 2.40±0.95＊ 3.80±0.76＊ 3.70±0.75＊
竹节参组 4.0 2.20±0.90＊ 2.90±0.65■ 2.60±0.87■
6.0 2.10±1.04＊ 2.40±0.81■■ 2.35±0.70■■
雷公藤组 6.0 2.30±0.95＊ 2.40±0.85■■ 2.50±0.81■
　　P <0.01 与正常组比较:■P<0.05 , ■■P<0.01 与模
型组比较
表 2　复方竹节参片对小鼠AA大鼠继发性
炎症反应的影响( x±s n=10)
组别 剂量
g/ kg·bw
不同时间患侧足肿胀度(vΔ)/ ml
1d 7d 14d
正常组 - 0.29±0.02 0.31±0.03 0.35±0.04
模型组 - 0.36±0.03＊ 0.42±0.03＊ 0.44±0.05＊
竹节参组 4.0 0.37±0.04＊ 0.37±0.04■ 0.38±0.04■
6.0 0.37±0.03＊ 0.36±0.03■■ 0.36±0.03■■
雷公藤组 6.0 0.36±0.03＊ 0.37±0.03■ 0.37±0.03■■
　　P <0.01 与正常组比较:■P<0.05 , ■■P<0.01 与模
型组比较
表 3　复方竹节参片对大鼠佐剂性关节炎
外周血 I L-6 、IL-8 、TNFa的影响( x ±s n=10)
组别
剂量
(g/
kg·bw)
IL-10
(pg/ml)
IL-8
(ng/ml)
TNFa
(pg/ml)
正常组 - 102.37±18.08 0.60±0.13 2.54±0.29
模型组 - 44.06±13.62＊ 1.78±0.23＊ 3.70±0.25＊
竹节参组 4.0 59.27±16.77■ 1.16±0.44■ 2.96±0.71■
6.0 73.33±14.41■■ 1.03±0.50■ 2.72±0.31■■
雷公藤组 6.0 74.34±14.28■■ 0.73±0.18■■ 2.70±0.34■■
　　P <0.01 与正常组比较:■P <0.05 , ■■P <0.01 与模
型组比较
2.4　对佐剂性关节炎模型大鼠外周血细胞因子的影响:与
正常组比较 ,模型组大鼠血清中 IL-8 、TNFa水平明显升
高 , IL-10 明显降低(P<0.01);经灌胃用药 1 周后 , 复方
竹节参片和雷公藤片组能使病变小鼠血清中 IL-8、INFa
水平降低 , IL-10 水平明显升高(P<0.05 , P<0.01),且复
方竹节参片和雷公藤片组无显著差异(见表 3)。
3　讨　论
类风湿性关节炎(RA)是一种以慢性炎症为特征的免
疫性疾病 , 主要侵犯全身各处关节 , 呈多发性和对称性慢性
增生性滑膜炎 , 由此引起关节软骨和关节囊的破坏 , 最后导
致关节强直畸形。本研究采用弗氏完全佐剂诱导大鼠关节
炎病理模型 , 其病理特征与人类风湿性关节炎相似。
复方竹节参片由竹节参 、当血归 、淫羊藿 、白芍 、地蜂
子 、青风藤 、穿山龙等配伍组成 , 具有益气活血 、通络止痛 、
祛风除湿 、温肾壮骨的功效。临床用于治疗风湿性 、类风湿
性关节炎和损伤性 、骨质增生性关节炎等〔1〕病症。 本研究
显示复方竹节参片及雷公藤片治疗组均能明显减轻 AA 大
鼠左后足趾肿胀程度 , 降低大鼠关节炎指数 ,两治疗组之间
比较无显著性差异;通过细胞因子的检测我们进一步发现 ,
病变大鼠外周血中的 IL-8、IL-10、TNFa 水平发生了显
著性变化。细胞因子实质上是维持免疫细胞功能协调运
转 ,相互联络的“信使” , 其促炎因子与抗炎因子间的失
衡〔4 , 5〕是导致肌体组织免疫损伤和“炎症瀑布”的主要因素。
竹节参能明显抑制 IL-8 、TNFa活性的释放和升高 IL-10
水平 , 对免疫异常有一定调节恢复作用 , 从而对减轻炎症反
应与组织破坏有积极作用;从病理改变程度方面 , 复方竹节
参片组与雷公藤组均能有效控制 AA 小鼠炎细胞浸润 、关
节狭窄 、软骨和骨的侵蚀破坏。因此 , 复方竹节参片能显著
控制 AA大鼠的病情发展 , 其明显抑制促炎症细胞因子 IL
-8、TNFa病理性的升高可能是复方竹节参片有效治疗类
风湿关节炎的作用机制之一。
参考文献
〔1〕陈龙全 , 张国安 , 何军 , 等.复方竹节参片治疗风湿类疾
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〔3〕张国恩 , 杨德华 , 钱玉中 ,等.痹康饮事剂治疗大鼠胶原
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co lonic mucosa of inflammatory bow el〔J〕.Scand J Gas-
troenterol , 2001 , 36:854.
2008 年 3 月 31 日收稿
Experimental studys on the mechanism of compound Japanese ginseng pill
in therapying rheumatoid arthritis
Li hong-cheng
(The attached hosptial of Medical school of Hubei Insti tute for Nationalities.Hubei 445000)
Abstracts:Objective:To explore the mechanism of compound Japanese ginseng pill in therapying rheumatoid
arthritis.Methods:Seting up a pathological model of rats arthritis indused by freund s complete adjuvant , adop-
tiong compound Japanese ginseng pill to therapy , and observing by detecting the arthritis index ,pathological ex-
amination , serum cell gene determination.Results:Compound Japanese ginseng pill can inhibit the sw elling of
the rats and rats pathological was changed obviously .And it reduce the index of rats arthri tis and IL-8 , INFa
which are enhanced abnormally.Conclusions:Compound Japanese ginseng can rest rain the pathological in-
creasement of inf lammatory cell clearly , therfore i t can control the development of rheumao toid arthritis effec-
tively.
Key words:rheumatoid arthritis;adjuvant ;compound Japanese ginseng pill;rat
不同炮制方法对手参滋补强壮作用的影响
内蒙古民族大学蒙医药学院 2007 级研究生(通辽 028000)　金　亮　　　
内蒙古民族大学蒙医药学院(通辽 028000)　　　　　　　王秀兰(导师)
摘　要:目的:探讨不同炮制方法对手参滋补强壮作用的影响。方法:制备手参羊奶炮制品和牛奶炮制品。将小鼠分成空白
对照组 ,手参生药组 , 羊奶炮制品组和牛奶炮制品组 ,并分别进行抗疲劳试验和耐缺氧试验;将大鼠分组 、给药 ,测定血清超
氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)。结果:手参羊奶炮制品对小鼠游泳时间具有显著延长作用(P<0.01)。手参羊奶炮
制品和手参牛奶炮制品对大鼠血清 SOD活性均有显著增强作用(均 P<0.05)。结论:手参羊奶炮制和牛奶炮制品均有一定
的滋补强壮作用。
关键词:手参;炮制品;滋补强壮
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)01-0028-02
　　手参是蒙医临床上常用的蒙药。味甘 , 涩 , 性温 , 具有
滋补津液 , 止遗精 , 滋补身体之功效。临床上主要用于阳
痿 、少精 、遗精等症〔1〕。手参化学成分主要有皂苷 , 多糖
等〔2 , 3〕。具有促进母细胞的增殖和抗乙型肝炎表面抗原等
药理作用〔4〕。蒙医临床上常用经炮制的手参。常用炮制方
法有羊奶煮法和牛奶煮法〔5〕。目前尚未见到蒙药手参炮制
方法与药理作用相关性研究报道 , 为了探索它们之间的关
系进行了此项试验。
1　实验材料
1.1　药品及试剂:手参 Cymnadenia conopsea(L.)R.Br.购
自通辽市药材公司 , 由布和巴特尔教授鉴定。粉碎成直径
0.8cm 小块备用。新鲜羊奶和牛奶从牧民家购买。 SOD 和
MDA试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.2　实验仪器:MDF-U2086S 型超低温冰箱 , 日本产品。
7230 型分光光度计 , 上海仪器厂产品。 BS-210S 型电子天
平 ,购自北京天平有限公司。CSJ120 型粗粉机 , 丹东永德药
物化学器材生产有限公司产品。
1.3　实验动物:昆明种小鼠和Wistar大鼠由沈阳医学院实
28　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2009 年 1 月第 1 期