全 文 ：佛甲草对佐剂性关节炎大鼠氧化应激的影响
*
曹性玲，麻海娟，喻 思，周 青，吴丽珍，黄志华
(赣南医学院机能实验室，江西 赣州 341000)
摘 要:目的:研究佛甲草醇提物对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用并探讨其对氧自由基的影响。方法:采用弗氏
完全佐剂免疫诱导大鼠佐剂性关节炎动物模型;观察不同浓度佛甲草提取物对佐剂性关节炎(AA)大鼠的慢性足
肿胀度、血清中一氧化氮(NO)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。结果:与模型组相比，高、低剂
量的佛甲草醇提物均能抑制大鼠慢性足肿胀，降低大鼠的血清 NO水平，并使 GSH-Px的含量增加。结论:佛甲草
醇提物对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用，其作用可能与其恢复抗氧化物酶活性，提高自由基的清除能力有关。
关键词:佛甲草醇提物;佐剂性关节炎;抗氧化作用
中图分类号:Ｒ965 文献标志码:A 文章编号:1001 － 5779(2014)03 － 0329 － 03
The antioxtion effect of Sedum Lineare Thunb on adjuvant arthritis mice
CAO Xing-ling，Ma Hai-juan，YU Si，et al
(Gannan Medical University，Ganzhou，Jiangxi 341000)
Abstract:Objective:To observe the therapeutic effect of Sedum lineare Thunb (SLT)on adjuvant arthritis and its effects
on antioxidation in mice． Method:By establishing rheumatoid arthritis rats model with injecting Freund complete adju-
vant，observe the effect of the high and low dosage of SLT to the chronic paw swelling，nitric oxide (NO)content and glu-
tathione peroxidase (GSH-Px)activity in serum． Ｒesult:Both SLT groups could reduce the swelling of the model rats，
change the level of serum NO，which were lower than the model group，whereas the SLT groups increased the activity of
serum GSH-Px． Conclusion:SLT had therapeutic action to rheumatoid arthritis rats，and the mechanism probably was that
SLT could strengthen the activity of antioxidase，and scavenge oxygen-free radicals．
Key words:Sedum Lineare Thunb;adjuvant arthritis;antioxidation
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，ＲA)是以
关节和关节周围组织非化脓性炎症为主的慢性全身
性自身免疫性疾病，早期表现为滑膜红肿，关节明显
肿胀，多侵犯小关节如手、足和腕，常为对称性，具有
慢性、进行性、侵蚀性等特点，最终可导致关节畸形
和功能丧失等。中医药对 ＲA的治疗有着悠久的历
史和切实的疗效［1］。佛甲草(Sedum Lineare Thunb，
SLT)是景天科植物佛甲草的全草，性味甘寒，具有
清热、解毒、消肿等功效，民间常用于治疗咽喉肿痛、
痈肿、痢疾、黄疸、肝炎等［2］。本课题组的前期研究
结果证实 SLT 可以对弗氏完全佐剂 (Freund＇s
complete adjuvant，FCA)诱导的关节炎(adjuvant
arthritis，AA)大鼠急性足肿胀及继发性关节炎均有
较强的抑制作用，调节免疫功能是其机制之一［3］，
但其对慢性足肿胀的影响及氧化应激是否参与其
中，尚未见相关报道。本实验在继往的研究工作基
础上，采用 AA大鼠动物模型，观察 SLT对类风湿性
关节炎的治疗作用及其抗氧化机制。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 动物 50 只 SPF 级 SD 大鼠，雄性，体重
(180 ± 20)g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司
提供［合格证号:SCXK(湘)2011-0003］。实验前适
应性饲养 1 周。
1． 1． 2 药物 佛甲草醇提物:佛甲草晒干后粉碎至
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第 34 卷 第 3 期 赣 南 医 学 院 学 报 Vol． 34 NO． 3
2014 年 6 月 JOUＲNAL OF GANNAN MEDICAL UNIVEＲSITY JUN． 2014
* 基金项目:江西省卫生厅科技项目(NO． 20141117)
通讯作者:黄志华，生理学教授，硕士研究生导师，研究方向:中药药理。E-mail:18970786003@ 163． com
粗粉，取适量蒸馏水加热提取 3 次，每次 30 min，过
滤，合并 3 次滤液并浓缩至适量，加入相当浓缩液 3
倍量 95%乙醇，放置冰箱 48 h 后减压过滤，滤液回
收乙醇至无醇味并浓缩成 2． 5 g·mL －1的溶液。雷
公藤多苷片(Tripterygium，TPT，批号:20101001，黄
石飞云制药有限公司生产)。SLT 和 TPT 临用前用
双蒸水配制成实验所需浓度。
1． 1． 3 试剂 一氧化氮(nitric oxide，NO)、谷胱甘
肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)检测
试剂盒购自南京建成生物工程研究所;FCA为Sigma
公司产品。
1． 1． 4 仪器 自制足趾容积测量器;连续光谱多功
能酶标仪，美国热电;BS224S电子天平，北京赛多利
斯天平有限公司;中佳 KLC-2046 型低速冷冻离心
机，科大创新股份有限公司中佳分公司;LB801 型超
级恒温水浴箱，湖北黄石市医疗器械厂。
1． 2 方法
1． 2． 1 动物模型复制及分组 SD大鼠 50 只，随机
分为正常对照组、佐剂性关节炎模型组、佛甲草醇提
物低剂量组(4 g·kg －1)、佛甲草醇提物高剂量组
(8 g·kg －1)及阳性药物对照组(TPT，10 mg·
kg －1) ，每组 10 只。按文献［4］方法，各组大鼠左后足
常规消毒后，于足底皮下注射 0． 1 mL FCA 致炎，正
常对照组注射 0． 1 mL生理盐水。第 7 d 加强一针，
复制佐剂性关节炎模型。于致炎前 3 d 及致炎后
28 d，各组分别连续灌胃给予高、低剂量的佛甲草醇
提物、阳性药物及等体积的生理盐水，每日 1 次。
1． 2． 2 足肿胀度测定 根据排水法原理采用自制
足跖容积测量器，于致炎前测定每只大鼠左、右后肢
足跖容积(mL) ，分别于致炎前和致炎后 8、12、16、
20、24、28 d测定大鼠致炎侧足容积，以致炎前、后致
炎足容积差作为肿胀度。
1． 2． 3 血清 NO含量和 GSH-Px活性测定 于致炎
后 28 d，10%水合氯醛麻醉大鼠，腹主动脉取血，静
置，1 500 × g，4 ℃离心 10 min，分离血清于 － 80 ℃
保存，采用 NO 试剂盒和 GSH-Px 试剂盒，严格按照
试剂盒说明书要求进行操作，检测血清中 NO 含量
和 GSH-Px活性。
1． 2． 4 统计学处理 采用 Prism 5． 0 统计学软件进
行统计学分析。计量资料用 x ± s 表示，各组间测定
指标的总体比较采用单因素方差分析，组内各指标
的多重比较采用 q 检验，P ＜ 0． 05 认为差异有统计
学意义。
2 结 果
2． 1 SLT对 AA 大鼠足肿胀度的影响 如图 1 所
示，与正常组相比，模型组致炎右足各时间点出现明
显肿胀(P ＜ 0． 001) ;TPT、4 g·kg －1和 8 g·kg －1
SLT治疗后各时间点足肿胀度降低(P ＜ 0． 001) ，两
组治疗效果与阳性药物 TPT 组接近，以 4 g·kg －1
SLT治疗组效果更好。
注:＊＊＊P ＜0． 001与对照组相比;###P ＜0． 001与模型组相比
图 1 佛甲草醇提物对 AA大鼠足肿胀度的影响
2． 2 SLT对 AA 大鼠血清 NO 含量及 GSH-Px 活性
的影响 如图 2、图 3 所示，与正常组相比，模型组
大鼠血清 NO含量升高(P ＜ 0． 05) ，GSH-Px 活性降
低(P ＜ 0． 01) ;TPT、4 g·kg －1和 8 g·kg －1 SLT治疗
后，NO含量降低(P ＜ 0． 01) ，GSH-Px 活性升高(P
＜ 0． 001) ;SLT治疗组与 TPT组比较，差异无统计学
意义。
注:* P ＜ 0． 05，与对照组相比;##P ＜ 0． 01 与模型组相比
图 2 SLT对 AA大鼠血清 NO含量的影响
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赣 南 医 学 院 学 报 2014 年
注:＊＊P ＜ 0． 01 与对照组相比;
##P ＜ 0． 01，###P ＜ 0． 001 与模型组相比
图 3 SLT对 AA大鼠血清 GSH-Px活性的影响
3 讨 论
类风湿关节炎(Ｒheumatoid Arthritis，ＲA)是以
损害滑膜、软骨和骨的一种慢性、炎性、系统性的自
身免疫性疾病，但其发病机制仍不明确。类风湿因
子的存在和其导致的其他结果被认为是类风湿性关
节炎的基本特征，而类风湿因子的产生可能就是与
氧自由基的增加有关［5］。研究发现，与健康人群相
比，ＲA患者血浆中脂质、蛋白和 DNA过氧化反应产
物增多，还原型谷胱甘肽、GSH-Px、超氧化物歧化酶
(superoxide dismutase，SOD)和 过 氧 化 氢 酶
(catalase，CAT)等抗氧化系统活性降低［6］。氧自由
基水平升高，可导致关节损伤，其直接和间接毒性作
用可引起关节及关节外组织的严重损伤［7］。因此，
氧自由基在 ＲA 病理生理中起到了非常重要的作
用，患者的脂质过氧化程度可作为评定疾病活动指
数［6］。
NO是一种具自由基特性的小分子气体物质，
高水平 NO导致细胞毒性作用，介导免疫损伤［8］，在
ＲA患者血清中 NO水平较正常人升高［9］。NO可促
进巨噬细胞合成释放 IL-1β，TNF-α 等炎性细胞因
子，导致滑膜和炎性细胞产生和释放前列腺素增多。
以上证据显示，NO 参与了 ＲA 的发病机制。GSH-
Px 是体内存在的一种清除自由基和抑制自由基反
应的重要系统，对于防止体内自由基引起的膜脂质
过氧化发挥重要作用。有研究表明，ＲA 患者血浆
GSH-Px水平降低［6，10］。本实验发现，SLT可明显降
低 AA大鼠慢性足肿胀度，结合前期研究结果［3］，提
示 SLT对 AA大鼠具有很好的治疗作用。另外，SLT
治疗后，AA大鼠血清 NO 降低，GSH-Px 活性升高，
说明 SLT可通过提高抗氧化物酶活性，促进自由基
的清除，抑制氧化应激，从而对 FCA 诱导的关节炎
起治疗作用。
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(收稿日期:2014 － 04 － 30) (责任编辑:敖慧斌)
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3 期 曹性玲，等 佛甲草对佐剂性关节炎大鼠氧化应激的影响