全 文 ：2004年11月第11卷第11期 中国中医药信息杂志 ·985·
HPLC法测定栘衣中槲皮素的含量
台海川 1,彭 霞 2
(1.西双版纳州药品检验所,云南 景洪 666100；2.西双版纳州傣医药研究所,云南 景洪 666100)
摘要：目的 测定傣药栘衣中槲皮素的含量。方法 采用高效液相色谱法,C18柱为固定相,甲醇-0.4%磷酸为
流动相,梯度洗脱,360 nm为检测波长,柱温为30 ℃。结果 槲皮素在0.586～11.72 μg范围内,峰面积与其浓度
呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.52%,RSD=1.2%(n=3)。结论 该法简单、快速,重现性好。
关键词：傣药；栘衣；高效液相色谱法；槲皮素；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2004)11-0985-02
Determination of Quercetin in Yiyi by HPLC TAI Hai-chuan1, PENG Xia2 (1.Institute for Drug Control of
Xishuangbanna, Jinhong 666100, China；2.Institute of National Medicine of Xishuangbanna, Jinhong 666100, China)
Abstract：Objective To determination the contents of quercetin in Yiyi. Method HPLC method was
used. Chromatographic condition included inertsil ODS-3 column (4.6 mm×200 mm, 5 μm)
and the mobile phase consisting of methanol-0.4% phosphoric acid, gradient elution with a
detection wavelength of 360 nm. Results The calibration curves were linear in the range of 0.586～
11.72 μg for quercetin, r =0.9999, average recoveries of quercetin were 99.52%, RSD was 1.2%
(n =3).
Conclusion This method was simple and quickly, accurat and easy to operate.
Key words：Daiyao；Yiyi；HPLC；quercetin；quantitative determination
栘衣是蔷薇科植物栘衣[1]Docynia delavayi (Franch.)
Schneid的茎皮及叶,性味酸涩、凉,有消炎、收敛、接骨之
功效,在西双版纳傣医中常作为烧烫伤、骨折之药用。栘衣中
含有多种黄酮类化合物[2],其中主要活性物质为槲皮素,目前
还没有对栘衣中的槲皮素进行含量测定的报道。本实验采用
HPLC法测定栘衣中槲皮素的含量,并考察了方法学。实验分
离效果好、重现性好、定量准确。
1 仪器与试药
岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪,岛津SPD-10Avp紫外检
测器,岛津Class-VP6.12工作站。槲皮素对照品购于中国药
品生物制品检定所。栘衣样品由西双版纳州民族医药研究所
提供。甲醇为色谱纯,其余试剂为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：Zirchrom ODS-1(4.6 mm×200 mm)；流动相：
甲醇-0.4%磷酸,梯度洗脱；流速为1 mL/min；检测波长为360
nm。色谱图见图1。


注：A.对照品；B.栘衣；C.槲皮素
图1 栘衣的HPLC图
3 方法与结果
3.1 对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品适量,用甲醇制成586 μg/mL的
对照品储备液。取对照品储备液2 mL置25 mL容量瓶中,加
甲醇至刻度,摇匀,得浓度为46.88 μg/mL的对照品溶液。
3.2 样品溶液的制备
取本品粉末约1 g(60 ℃干燥24 h),精密称定,置索氏提
取器中,加氯仿回流提取 3 h,弃去氯仿,药渣挥干,加甲醇回
流提取 6 h,提取液蒸干,残渣加甲醇-25%盐酸(4∶1)混合液
25 mL,回流 30 min,放冷,转移至 50 mL量瓶中,并加甲醇至
刻度,摇匀,即得。
3.3 线性关系的考察
取对照品储备液0.5、1、2、3、5、10 mL,分别置10 mL
容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。吸取上述溶液,分别进样 20
μL,以进样量为横坐标(X),峰面积积分值为纵坐标(Y),进行
线性回归,回归方程：Y=72 740X－121 262.2,r =0.9999,线
性范围为0.586～11.72 μg。
3.4 精密度考察
精密吸取槲皮素对照品溶液20 μL,分别重复进样5次,
测定,结果槲皮素峰面积的RSD=0.91%。
3.5 重现性试验
取同一批样品,精密称取5份,按样品含量测定方法制备
供试液,测定,结果槲皮素含量的RSD=0.82%。
3.6 稳定性试验
取对照品溶液每2 h进样1次,测定5次,槲皮素峰面积
的RSD=1.91%,表明在10 h内基本稳定。
3.7 回收率试验
取已知含量的样品5份,各精密加入槲皮素504.66 μg,
按样品分析方法操作,计算回收率为99.52%,RSD =1.2%。
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3.8 样品测定
吸取各供试品溶液20 μL,分别进样,测定槲皮素峰面积
积分值,按外标法计算含量。测定结果见表1。
表1 栘衣中槲皮素的含量测定(n=3)
批号 槲皮素含量(%) RSD(%)
1 0.475 0.31
2 0.512 1.34
3 0.503 0.26
4 0.520 0.52
5 0.532 1.34
４ 讨论
本实验曾选用流动相甲醇-0.4%磷酸[3](50∶50),但槲皮
素出峰时间太长,保留时间约为 20 min,未出完的其它杂质峰
对下边的实验影响较大,后经摸索,采用梯度洗脱法,分离效果
达到要求。我们将时间分为7段,第3段可保证槲皮素在此时
间段内得到分离；第 5段可缩短未出完杂质的出峰时间；第 7
段可使流动相的比例平衡至初始比例,保证下次实验的流动
相条件不变,如果缩短平衡时间会影响实验的重现性。
我们曾将样品制成不经水解和经水解两种供试液,发现
未经水解的供试液与对照品峰相同保留时间处有峰面积很小
的宽峰,判断有多个成分未分开,可能没有或有很少的槲皮
素；而水解后的供试液中含有较大的槲皮素峰,且分离度和峰
形较好。实验结果显示,测定经水解后得到的槲皮素可反映栘
衣的内在质量。
目前,国内尚无文献报道栘衣中的槲皮素含量测定。本实
验采用HPLC法测定槲皮素的含量,分离效果好,重现性好,定
量准确。但栘衣中成分较复杂,其他成分的定量方法尚需进一
步研究。
参考文献：
[1] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海：上海人民出版社,1977．
[2] 官 智．黄酮成分的研究[J].天然产物的研究与开发,2000,12(3)：
34－37.
[3] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S]．北京：化学工业出版社,2000.
(收稿日期：2004-02-16)

关于复方丹参片质量检验的几点建议
秦增贵,张红波,牛其云
(莱芜市药品检验所,山东 莱芜 271100)
关键词：复方丹参片；质量检验
中图分类号：R284.1 文献标识码：C 文章编号：1005-5304(2004)11-0986-01
复方丹参片由丹参、三七、冰片组成,具有活血化瘀、理
气止痛的功效。《中国药典》通过对丹参酮ⅡA的薄层层析鉴
别和HPLC法测定含量来控制丹参药材的质量,虽然同是检测
丹参酮ⅡA,但却采取了完全不同的两种提取方法。为了有效
的控制复方丹参片的质量,我们探讨了较简单的方法,并作了
比较,证明与药典标准规定方法所得的结果一致。
1 薄层色谱过滤方法的改进
2000年版《中国药典》复方丹参片鉴别[1]项下采用薄层
色谱鉴别丹参酮ⅡA,以对处方中的丹参进行检识,其中供试
液的制备方法是：“取样品5片,糖衣片除去糖衣,研细,加乙
醚10 mL,超声处理5 min,滤过 滤液挥干,残渣加醋酸乙酯2
mL溶解,作为供试品溶液”。在上述操作中,由于乙醚的沸点
较低(34.6 ℃),易挥发,室温下过滤往往产生纸层析现象,使
得丹参酮ⅡA层析于滤纸的上缘而难以洗脱,造成被测成分损
失。因此,操作过程中应特别注意。若将过滤改为离心,分取
上清液点样,则结果较好。
2 薄层色谱的提取、层析方法的改进
2000年版《中国药典》复方丹参片鉴别[1]项下供试品
溶液的制备可直接取含量测定项下的供试品溶液2.5 μL,展
开剂改用石油醚-醋酸乙酯(8∶2),展开,取出,晾干,便可见
红色或浅红色斑点。可省去提取的麻烦。
3 微量升华法的改进
1990年版《中国药典》复方丹参片鉴别[2]项下采用微量
升华显色法检测冰片。在实际操作中,有部分样品由于含水量
较高,升华时水分蒸发后凝聚于收集玻片上形成水滴,难以得
到白色的升华物结晶,导致最终显色结果不明显。为了便于结
果判定,可先用玻棒蘸取少量香草醛硫酸显色剂涂于收集玻
片上,然后再进行升华操作,随着冰片的不断升华,玻片上涂
有显色剂的地方便逐渐呈现出规定的玫瑰红色。
4 含量测定取样的改进
由于丹参酮ⅡA对照品价格较贵,配制后不易久置,易分
解,而许多药品的检验又都用到丹参酮ⅡA,整体用量较大,所
以对照品溶液的制备可减半量操作：取丹参酮ⅡA对照品5 mg,
置25 mL棕色量瓶中,加甲醇依法制得即可。
供试品溶液的制备中规定：用甲醇溶解超声处理后,再用
甲醇补足减失的重量。在实际操作中,甲醇超声时温度上升较
低,减失的重量很少,一般在lO～20 mg之间,而许多人在试验
中习惯用滴管加液,一滴液体约为50 mg,很容易加过量,又无
法再取出,就直接去操作下一步,计算出的结果往往偏低。建
议在操作中,用定量毛细管加液,以减少误差。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2000.518.
[2] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,1990.477
(收稿日期：2004-04-15)