全 文 ：着植物体内酶的活性和次生代谢产物的积累，光照
处理得当，可收到显著的效果。本实验中无论是连
续光照还是连续黑暗，对大叶白麻愈伤组织的生长
都有一定的抑制作用，连续光照对愈伤组织三萜类
化合物产量的抑制作用也较明显。16 h /d 的光周
期较有利于愈伤组织生长和三萜类产物的积累，这
可能是大叶白麻在系统发育过程中适应自然界这种
光周期的变化的结果。
糖是培养基中不可缺少的碳源，也是能量物质，
对维持渗透压起一定的作用。本试验比较了同浓度
的蔗糖、葡萄糖、果糖对愈伤组织的生长和三萜类化
合物含量的影响，发现蔗糖效果较好。以不同浓度
蔗糖为碳源，发现浓度为 50 g /L 时最有利于愈伤组
织的生长和三萜类化合物的积累。当蔗糖浓度达到
60 g /L时，则愈伤组织生长和三萜类化合物积累受
到抑制，可能是过高的蔗糖导致培养基渗透压的提
高，从而不利于细胞被动吸收营养，影响了愈伤组织
的生长和三萜类化合物积累。
在组织培养过程中，常常使用化学成分复杂的
营养混合物，希望能提高某种成分的含量。培养基
中不同的附加物对于不同植物细胞的生长和次生代
谢物的积累的影响存在着差异［6］。据报道［7］，三萜
类皂苷化合物作为植物次生代谢物中的一类重要组
分，其合成和积累随水杨酸的加入而发生显著变
化。向培养细胞中加入一定浓度的聚乙二醇可促进
细胞间的相互作用，从而有利于细胞生长，同时改
变细胞膜的微结构使三萜类化合物更好地释放［8］。
角鲨烯是甾体类化合物和三萜类化合物的共同前
体，矮壮素可以抑制甾体类化合物的合成，从而促使
角鲨烯更好地转向三萜类化合物的合成。在本实验
中，培养基中分别添加水杨酸、聚乙二醇和矮壮素，
对大叶白麻愈伤组织生长和三萜类化合物含量的影
响明显不同，相比之下，水杨酸对愈伤组织增殖和三
萜类化合物积累的效果最好，矮壮素次之，聚乙二醇
的效果不理想，可能是聚乙二醇的浓度过高，导致培
养体系渗透压的提高，阻碍了愈伤组织生长，从而抑
制了三萜类化合物的积累。
参考文献:
［1］ 薛华茂，钱学射，张卫明，等. 罗布麻的化学成分研究进展
［J］. 中国野生植物资源，2005，24(4):6-8.
［2］ 张云峰，魏 东，郭祀远，等. 大花罗布麻的化学成分研究
［J］. 天然产物研究与开发，2006，18:954-957.
［3］ 钱曾年，顾振纶. 大花罗布麻叶的药理学研究［J］. 中成药，
1991，13(7):27-29.
［4］ 钱学射，张卫明，陈重明. 罗布麻的民族植物学与资源开发
利用［J］. 中国医学生物技术应用杂志，2002(3):268-275.
［5］ Butcher D N. Applied and fundamental aspects of plant cell，tis-
sue，and organ culture［M］. Beiling:Springer-Verlag，1977:
668.
［6］ 郭春兰，上官新晨，蒋 艳，等. 不同理化因子对青钱柳愈伤
组织生长和黄酮类化合物合成的影响［J］. 安徽农业大学学
报，2008，35(3):430-435.
［7］ 刘太峰. 水杨酸对人参培养物的影响［J］. 吉林农业科技学院
学报，2008，17(4).
［8］ 陈正山，王 勤. 聚乙二醇对东北红豆杉培养细胞的生长及
紫杉醇生产的影响［J］. 西北植物学报，2001，21(2):257-
261.
黄心卫矛化学成分的分离与鉴定
朱小迪1， 李永慈1* ， 王建忠2， 赵秀海1， 周海成3
(1.北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室，北京 100083;2. 四川大学华西药学院，四川 成都
610065;3.长白山保护管理中心保护处，吉林 延边 133613)
收稿日期:2010-04-08
基金项目:财政部林业公益性行业科研专项(200904022);“十一五”国家科技支撑项目(2006BAD03A0804;2008BADB0B05)。
作者简介:朱小迪 (1983 －)，男，硕士，研究方向:长白山地区药用植物化学成分研究以及与环境因子的关系。Tel:13438906158 Email:
jimmyyrain@ 163. com
* 通讯作者:李永慈(1965 －)，女，博士，副教授。Email:lyczs@ 21cn. com
关键词:黄心卫矛;化学成分;胡萝卜苷亚油酸酯;10-eicosanol
摘要:目的:研究黄心卫矛(Euonymus macropterus Rupr.)的化学成分。方法:采用色谱技术分离纯化，并通过波谱技术及
理化性质鉴定化合物结构。结果:从黄心卫矛根部的乙醇提取物中分离得到 6 个化合物，分别鉴定为胡萝卜苷亚油酸酯
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(daucosterol linoleate，1)，10-eicosanol(2)，胡萝卜苷(daucosterol，3)，β-谷甾醇(β-sitosterol，4)，二十八烷酸(octacosanoic，
5)，烟酰胺(nicotinamide，6)。结论:以上化合物均尚未见从黄心卫矛中分离得到的相关文献报道。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)01-0107-03
Isolation and identification of chemical constituents from Euonymus macropterus
ZHU Xiao-di1， LI Yong-ci1* ， WANG Jian-zhong2， ZHAO Xiu-hai1， ZHOU Hai-cheng3
(1. The Key Laboratory for Silviculture and Conservation of Ministry of Education，Beijing Forestry University，Beijing 100083，China;2. West China Col-
lege of Pharmarcy，Sichuan University，Chengdu 610065，China;3. Protection Section of Protection and Management Center of Changbai Mountain，Yan-
bian 133613，China)
KEY WORDS:Euonymus macropterus Rupr.;chemical constituents;daucosterol linoleate;10-eicosanol
ABSTRACT:AIM:To investigate the chemical constituents of Euonymus macropterus. METHODS:Compounds
were isolated by chromatography method，and their structrues were identified by NMR and MS analyses. RESULTS:
Six compounds were isolated from the ethanol extract of the roots of Euonymus macropterus. Their structrues were
identified as daucosterol linoleate(1)，10-eicosanol(2)，daucosterol(3)，β-sitosterol(4)，octacosanoic(5)，nic-
otinamide (6). CONCLUSION:Above mentioned compounds are isolated from this plant for the first time.
黄心卫矛(Euonymus macropterus Rupr.)，是卫
矛科(Celastraceae)卫矛属植物，为小灌木，主要分
布于朝鲜，日本，西伯利亚及我国东北地区海拔 500
m ～1350 m 的山地林中［1］。卫矛属植物在我国有
悠久的药用历史，其中多个种在抗肿瘤、抗炎、抗菌
等以及有舒筋恬络，止血消瘀，治疗肾虚腰痛，月经
不调等方面都有较好的疗效。卫矛属植物化学成分
结构类型多样，包括倍半萜类、黄酮类、三萜类、甾
体、强心苷类以及长链脂肪族化合物等［2］。黄心卫
矛的化学成分迄今未见相关文献报道，本试验对该
种植物根部化学成分进行了研究，分离得到 6 个化
合物，分别鉴定为胡萝卜苷亚油酸酯(1)，10-eico-
sanol(2)，胡萝卜苷(3)，β-谷甾醇(4)，二十八烷酸
(5)，烟酰胺(6)。其中化合物 1，2，5 从卫矛属植物
中分离得到均尚未见相关文献报道。
1 仪器和材料
Varian UNION400 /54 及 Bruker Avance 600 核
磁共振仪，TMS 为内标;Waters QuattroPremier 串联
四级杆质谱仪及 VGAutoSpec3000 质谱仪;X4 型数
字纤维熔点仪，温度计未校正(北京福凯科技发展
有限公司);R-201 旋转蒸发仪(上海申胜生物技术
有限公司);柱色谱硅胶(200 ～ 300 目)(青岛海洋
化工厂);反相硅胶 LichropropRP-18(德国 Merck 公
司);层析氧化铝(中性)(100 ～ 200 目)(上海谊恒
工贸公司精细化工厂);其余试剂为分析纯。
黄心卫矛(花期)，2008 年 5 月采收于吉林省长
白山地区海拔 600 ～ 800 m 的阔叶红松次生林灌木
层片，采收部位为根部(大根取表面根皮)。于阴凉
处晾干 40 d，粉碎成粗粉备用。经北京林业大学林
学院赵秀海教授鉴定为黄心卫矛(Euonymus mac-
ropterus Rupr.)。
2 提取分离
黄心卫矛根部的干燥粗粉(19. 5 kg)用 10 倍量
的 95%乙醇提取 2 次，每次 1 h，回收溶剂，得到浸
膏 380 g。将浸膏进行硅胶柱色谱梯度洗脱(氯仿-
甲醇系统，100 ∶ 0，98 ∶ 2，95 ∶ 5，9 ∶ 1，8 ∶ 2，6 ∶ 4，
1 ∶ 1，3 ∶ 7，0 ∶ 100)。氯仿洗脱部分采用硅胶柱色
谱梯度洗脱(环己烷-乙酸乙酯系统，100 ∶ 0，98 ∶ 2，
95 ∶ 5，9 ∶ 1，8 ∶ 2，6 ∶ 4，1 ∶ 1)，重结晶等手段反复
分离纯化，得到化合物化合物 4(186 mg)，5(62
mg)。氯仿-甲醇(95 ∶ 5)部分经硅胶柱色谱(环己
烷-乙酸乙酯系统梯度洗脱)及氧化铝柱色谱(氯仿-
甲醇系统梯度洗脱)多次分离纯化，得到化合物化
合物 1(17 mg)。氯仿-甲醇(9 ∶ 1)部分先经过硅胶
柱色谱(氯仿-甲醇系统)反复分离，再通过重结晶
(甲醇)得到化合物 3(135 mg)，经 C18反相柱色谱
(水-甲醇系统)梯度洗脱得到化合物 6(23 mg)，采
用氧化铝柱色谱(氯仿-甲醇系统梯度洗脱)反复纯
化，并用乙醚萃取，收集醚层，蒸干溶剂，得到化合物
2(25 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:黄色膏状物，ESI-MS m/z:877［M +
K］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0. 64 (3H，s，H-
18)，0. 77(3H，s，H-27)，0. 80(3H，s，H-26)，0. 82
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(3H，m，H-29)，1. 01(3H，s，H-19)，1. 25(14H，m，
7 × CH2)，2. 33 (2H，H-2″)，2. 78(2H，m，H-11″)，
3. 36 ～ 4. 35 (4H，H-2′ ～ H-5′)，4. 30 ～ 4. 39(3H，
H-1′，H-6′)，5. 35(5H，H-6，H-9″，H-10″，H-12″，
H-13″) ;13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:37. 3(C-1)，
29. 4(C-2)，79. 7 (C-3)，38. 9(C-4)，140. 3(C-5)，
122. 1(C-6)，31. 9(C-7)，31. 9(C-8)，50. 2(C-9)，
36. 7(C-10)，21. 1(C-11)，39. 8 (C-12)，42. 3(C-
13)，56. 8(C-14)，24. 3(C-15)，28. 3(C-16)，56. 2
(C-17)，11. 9(C-18)，19. 4(C-19)，36. 2(C-20)，
19. 0(C-21)，34. 0(C-22)，26. 2(C-23)，45. 8(C-
24)，29. 1(C-25)，18. 8(C-26)，19. 8 (C-27)，23. 1
(C-28)，12. 0(C-29)，101. 2(C-1′)，73. 5(C-2′)，
76. 2(C-3′)，70. 4(C-4′)，73. 8(C-5′)，63. 5(C-6′)，
174. 4(C-1″)，34. 3(C-2″)，25. 0(C-3″)，29. 2(C-
4″)，29. 2(C-5″)，31. 9(C-6″)，29. 8(C-7″)，27. 2(C-
8″)，127. 9(C-9″)，130. 2(C-10″)，25. 6(C-11″)，
130. 0(C-12″)，128. 1(C-13″)，27. 2(C-14″)，29. 4
(C-15″)，31. 5(C-16″)，22. 7(C-17″)，14. 1(C-18″)。
与文献［3-4］对照一致，确定其为胡萝卜苷亚油酸酯
(daucosterol linoleate)。
化合物 2:白色针晶，ESI-MS m/z:297［M-H］－，
281，171，157，127。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:
0. 88(6H，t，2 × CH3)，1. 25 ～ 1. 43(30H，15 × CH2)，
1. 58(4H，m，H-9，H-11)，3. 49(1H，H-10);13 C-
NMR(CDCl3，100 MHz)δ:14. 0(C-1)，22. 6(C-2)，
31. 8(C-3)，29. 3 ～ 29. 6 (C-4 ～ C-7)，25. 6(C-8)，
37. 4(C-9)，72. 0(C-10)，37. 4(C-11)，25. 6(C-12)，
29. 3 ～ 29. 6 (C-13 ～ C-17)，31. 8(C-18)，22. 6(C-
19)，14. 0(C-20)。ESI-MS中，171，157，127 等碎片
峰提示羟基连接在 10 位碳上［5］。与文献［6-7］对照
一致，故确定为 10-eicosanol。
化合物 3:白色粉末，mp 290 ～ 291 ℃。硫酸-乙
醇(10%)105 ℃显色呈紫红色，ESI-MS m/z:599［M
+ Na］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5. 33(1H，H-
6)，4. 42(1H，t，H-3)，4. 22(1H，d，H-1′);13C-NMR
(CDCl3，100 MHz)δ:38. 8(C-1)，29. 7(C-2)，77. 2
(C-3)，40. 6(C-4)，140. 9(C-5)，121. 7(C-6)，
33. 8(C-7)，31. 9(C-8)，50. 1(C-9)，25. 9(C-10)，
21. 1(C-11)，28. 3(C-12)，42. 3(C-13)，56. 7(C-
14)，24. 3(C-15)，42. 3(C-16)，55. 9(C-17)，12. 1
(C-18)，19. 6(C-19)，36. 7(C-20)，19. 4(C-21)，
36. 0(C-22)，37. 3(C-23)，45. 6(C-24)，29. 2(C-
25)，19. 1(C-26)，20. 2(C-27)，23. 1(C-28)，12. 3
(C-29)，101. 3(C-1′)，73. 9(C-2′)，77. 4(C-3′)，
70. 6(C-4′)，77. 3(C-5′)，61. 6(C-6′)。与文献［8］
对照一致，故确定其为胡萝卜苷(daucosterol)。
化合物 4:白色粉末，mp 119 ～ 121 ℃。硫酸-乙
醇(10%)105 ℃显色呈紫红色，1H-NMR (CDCl3，
400 MHz)δ:3. 56(1H，H-3)，1. 04(3H，s，C19-
Me)，0. 95(3H，d，J = 6. 0 Hz，C21-Me)，0. 8 ～ 0. 9
(9H，C26-Me、C27-Me、C29-Me)，0. 68(3H，s，C18-
Me)。与文献［9］对照一致，且 TLC 的 Rf 值及显色
行为与 β-谷甾醇对照品一致，故确定为 β-谷甾醇
(β-sitosterol)。
化合物 5:白色粉末，mp 85 ～ 86 ℃。EI-MS m/
z:425［M +1］+，397，396，384，323，297，283，241，
227。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0. 88(3H，t，H-
28)，1. 25(48H，H-4 ～ 27)，1. 63(2H，H-3)，2. 35
(2H，t，H-2);13 C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:180. 4
(C-1)，34. 1(C-2)，24. 7(C-3)，29. 1(C-4)，29. 3
(C-5)，29. 4 ～ 29. 7(C-6 ～ C-24)，29. 3(C-25)，
31. 9(C-26)，22. 7(C-27)，14. 1(C-28)。与文献
［10］对照一致，确定其为二十八烷酸(octacosano-
ic)。
化合物 6:白色蜡状物，mp 126 ～ 128 ℃。EI-MS
m/z:122［M］+。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ:7. 53
(1H，dd，J = 8. 0，4. 8 Hz，H-5)，8. 29(1H，d，J = 8. 0
Hz，H-4)，8. 68(1H，d，J = 4. 8 Hz，H-6)，9. 04(1H，
s，H-2);3C-NMR(CD3OD，100 MHz)δ:149. 6(C-
2)，131. 3(C-3)，137. 4(C-4)，125. 1(C-5)，152. 8
(C-6)，169. 8 (-C = O)。氢碳谱及质谱数据数据与
文献［11］对照基本一致，确定其为烟酰胺(nicotin-
amide)。
4 讨论
以上化合物均未见从黄心卫矛中得到的相关文
献报道。其中烟酰胺为《中国药典》(2005 版)收载
品种，为辅酶 I和辅酶Ⅱ的组成部分，对生物体内代
谢有重要意义。医学上用于治疗糙皮病、肝脏疾病
及日光性皮炎，大剂量可降低胆固醇和甘油三酯，并
可作为医药中间体用于异烟肼、尼克刹米及烟酸肌
醇酯等药品生产［12］。现采用工业方法生产，自然界
中多分布于胚芽，肉类及含油量高的种子中，而从植
物根部分离得到则较少见。本实验未分离得到倍半
萜类化合物。
参考文献:
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志. 第 45 卷
901
2011 年 1 月
第 33 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2011
Vol. 33 No. 1
［M］. 北京:科学出版社，1999:85-86.
［2］ 方振峰，华会明. 卫矛属植物化学成分及药理活性研究进展
［J］.国外医药·植物药分册，2007，22(1):6-11.
［3］ Toshihiro H，Motoo T，Yoshinori A. Piscicidal sterol acylglu-
cosides from Edgeworthia chrysantha［J］. Phytochemisty，1991，
30(9):2927-2931.
［4］ 王 瑞，侴桂新，朱恩圆，等. 川赤芍化学成分研究［J］. 中国
药学杂志，2007，42(9):661-663.
［5］ 洪山海.光谱解析法在有机化学中的应用［M］.北京:科学出
版社，1980:279-281.
［6］ 易贵元，曹晨忠. 取代基效应对脂肪醇13 C NMR 化学位移的
影响［J］.波普学杂志，2009，26(1):58-74.
［7］ Vijai K A，Hala N E，Shabana I K，et al. Constituents of Nelum-
bo nucifera leaves and their antimalarial and antifungal activity
［J］. Phytochem Lett，2008(1):89-93.
［8］ 李丽梅，李维林，郭巧生，等. 白背三七化学成分研究［J］. 时
珍国医国药，2008，19 (1):118-119.
［9］ 周大颖，杨小生，杨 波，等. 黔产毛子草化学成分研究［J］.
天然产物研究与开发，2007，19:807-808.
［10］ 桑已曙，史海明，闵知大. 峨嵋葛根的化学成分研究(II)
［J］.中草药，2002，33(9):776-778.
［11］ 洪承权，朴香兰，楼彩霞. 泽泻化学成分的分离与鉴定［J］.
重庆工学院学报，2008，22 (4):78-81.
［12］ 赵雪峰，谭 宁.国内外烟酸 /烟酰胺市场分析［J］.精细与专
用化学品，2004，12(19)22-26.
黄连生物碱的 HPLC-MS分析
郭锦明1， 王跃飞1* ， 胡丽萍1， 宋殿荣2， 戚爱棣1
(1. 天津中医药大学中医药研究院，现代中药发现与制剂技术教育部工程研究中心，天津 300193;2. 天津中
医药大学第二附属于医院，天津 300193)
收稿日期:2010-04-12
基金项目:国家科技部中医药行业专项(200707011);高等学校博士学科点专项科研基金(20070063003)
作者简介:郭锦明(1985 －)，男，硕士生，研究方向:药物分析。Tel:13803072537 E-mail:hellogjm@ yahoo. cn
* 通讯作者:王跃飞，男，助理研究员。E-mail:wangyuefei_2006@ hotmail. com
关键词:小檗碱;药根碱;黄连碱;巴马汀;黄连;HPLC-MS
摘要:目的:利用高效液相色谱-质谱法，对黄连药材中的化学成分进行定性研究并对主要成分进行定量研究。方法:采
用Waters Symmetry C18(3. 9 mm × 150 mm，5 μm)色谱柱;流动相为乙腈和 0. 05%甲酸水梯度洗脱;检测波长 345 nm;流
速为 0. 8 mL /min;柱温 35 ℃;正离子检测模式;电喷雾离子化(ESI)。结果:鉴定了 8 个成分分别为木兰花碱、格陵兰黄
连碱、黄连碱、表小檗碱、非洲防己碱、药根碱、小檗碱和巴马汀;同时对小檗碱、药根碱、黄连碱和巴马汀进行了含量测
定。结论:该方法简便、准确，可用于黄连药材的质量评价。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)01-0110-04
Analysis of the main alkaloids of Coptis chinensis by HPLC-MS
GUO Jin-ming1， WANG Yue-fei1* ， HU Li-ping1， SONG Dian-rong2， QI Ai-di1
(1. The TCM Research Centre of Tianjin University of TCM，Engineering Research Center of Modern Chinese Medicine Discovery and Preparation Technique，
Ministry of Education，Tianjin 300193，China;2. The Second Hospital Affiliated to Tianjin University of TCM，Tianjin 300193，China)
KEY WORDS:berberine;jatrorrhizine;coptisine;palmatine;Coptis chinensis;HPLC-MS
ABSTRACT:AIM:To develop a method for qualitatively and quantitatively analysing the constituents in Coptis
chinensis by HPLC with diode-array detection and mass-spectrometer. METHODS:The chromatographic separa-
tion was performed on a Waters Symmetry C18 column (5 μm，3. 9 mm × 150 mm)using acetonitrile and 0. 05%
formic acid aqueous solution under gradient program at a flow rate of 0. 8 mL /min. Column temperature was 35 °C，
detection wavelength was set at 345 nm with finnigan ion trap mass spectrometer and positive ion mode. RESULTS:
Eight characteristic compounds were identified as magnoflorine，groenlandicine，coptisine epiberberine，columbam-
ine，jatrorrhizine，berberine and palmatine by HPLC-DAD-MS. Based on the qualitation of eight compounds，four
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2011 年 1 月
第 33 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2011
Vol. 33 No. 1