全 文 ：收稿日期:2003-09-01
作者简介:李宁(1979-), 女(汉族), 河北保定人 , 博士研究生 , 就读天然药物化学专业 , Tel:(024)23843711-3588 ,
E-mail:ning6767@sina.com。
文章编号:1006-2858(2004)02-0105-04
过山蕨总黄酮的化学成分研究(1)
李　宁1 , 李　铣1 , 杨世林2 , 王金辉1 , 王　楠1
(1.沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳　110016;　2.中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 ,北京　100094)
摘要:目的 分离 、鉴定过山蕨(Comptosorus sibiricus Rupr.)乙醇提取物中总黄酮的化学组成。方
法采用反复硅胶柱色谱法 、制备薄层色谱法等进行分离纯化 , 并通过理化常数测定和光谱分析鉴
定了其化学结构。结果 分离得到了 6 个黄酮类化合物 ,即山萘酚(kaempferol , Ⅰ), 山萘酚-7-O-α-
L-鼠李糖苷(kaempferol-7-O-α-L-rhamnoside , Ⅱ), 山萘酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempfero l 3-O-
β-D-g lucopyr anoside, Ⅲ), 山萘酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol- 7-O-β-D-glucopy ranoside , Ⅳ),
山萘酚-3 , 7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol 3 , 7-di-O-β-D-glucopy ranoside , Ⅴ),过山蕨素(山萘
酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷 , kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside -7-O-α-L-rhamnoside ,
Ⅵ)。结论 化合物Ⅱ为首次从该植物中分离得到。
关键词:过山蕨;化学成分;山萘酚苷
中图分类号:R 94　　　文献标识码:A
　　过山蕨 ,又名马蹬草 ,还阳草 ,过桥草 ,为铁角
蕨科植物过山蕨(Comptosorus sibiricus Rupr.)的
地上全草 ,主产于我国东北山区等地 ,历代本草未
见其有关药用记载。民间用于治疗血栓闭塞性脉
管炎 ,肾炎 ,外伤出血 ,子宫出血等具有很好的疗
效[ 1] 。现代药理研究表明过山蕨水提醇沉液对
兔耳血管 、蟾蜍后肢血管以及家兔在体后肢血管
有扩张作用 ,其有效部位为总黄酮和有机酸[ 2] 。
为了用现代科学技术手段阐明其药效物质基础 ,
我们对其中的总黄酮进行了化学成分研究。从其
全草乙醇提物中分离得到了 6 个化合物 ,根据理
化常数和光谱分析 ,分别鉴定为山萘酚(Ⅰ),山萘
酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅱ),山萘酚-3-O-β-D-吡喃
葡萄糖苷(Ⅲ), 山萘酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
(Ⅳ),山萘酚-3 ,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅴ),
山萘酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅵ )。
化合物Ⅱ为首次从该植物中分离得到。
1　仪器与材料
　　核磁共振光谱用 Bruker ARX—300 型核磁
共振仪测定(TM S内标);熔点用 Yanaco MP—S3
显微熔点测定仪测定(温度未校正);薄层层析硅
胶GF254(青岛海洋化工厂);柱层析硅胶(200 ～
300目 ,青岛海洋化工厂);试剂(分析纯);所用药
材由本校中药学教研室孙启时教授鉴定 。
2　提取与分离
过山蕨干燥全草 4.2 kg ,乙醇(ω=70%)加
热回流提取 3次 ,每次2 h ,减压回收溶剂 ,冷藏过
夜 ,滤除叶绿素 ,母液依次以石油醚 ,氯仿 ,乙酸乙
酯 ,正丁醇萃取 。乙酸乙酯萃取层(38.0 g)和正
丁醇萃取层(110.0 g)富集了总黄酮。对其进行
成分分离 ,经反复硅胶柱色谱 ,分别用不同比例的
氯仿-甲醇 ,乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱 ,反复重结晶
处理得到化合物 Ⅰ (9 mg)、 Ⅱ(32 mg)、 Ⅲ
(23 mg)、Ⅳ(10 mg)、Ⅴ(11 mg)、Ⅵ(>100 mg)。
3　鉴定
　　化合物 Ⅰ :黄色无定形粉末(甲醇), mp
274.0 ～ 276.0 ℃, 三氯化铁-铁氰化钾反应阳性
示有酚羟基存在 ,盐酸镁粉反应阳性 ,示为黄酮类
化 合 物。 1H-NMR (300 MHz , DMSO-d6 ):
δ12.49(1H , s , 5-OH), 10.82(1H , s , 7-OH),
10.13(1H , s , 4′-OH), 9.58(1H , s , 3-OH)为 4 个
酚羟基质子信号;δ8.04(2H , d , J =8.7 Hz)与
δ6.93(2H ,d , J =8.7 Hz)示有邻位偶合 ,为黄酮
B环 2′,6′,3′,5′位质子的特征信号 ,提示 4′羟基
存在;δ6.43(1H , d , J =2.0 Hz , 8-H)与 6.19
(1H , d , J =2.0 Hz , 6-H)2个互为间位偶合的质
子信号及低场δ12.48(1H , s)的 5羟基质子特征
第 21 卷 第 2 期
2 0 0 4 年 3 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.21 　No.2
Mar.2004 p.105
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2004.02.007
信号表明 A环为 5 ,7-二氧代结构 ,推测化合物为
3 ,5 ,7 ,4′-四羟基黄酮 。其1H-NMR数据与文献对
照基本 一致 , 故鉴 定化 合 物 Ⅰ 为 山 萘酚
(kaempferol)[ 3] 。
化合物 Ⅱ:黄色针晶(甲醇), mp 226.0 ～
228.0 ℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有酚
羟基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish反应阳性 ,酸水解后纸层析检测有鼠李
糖 存 在。 1H-NMR (300 MHz , DMSO-d6 ):
δ12.49(1H , s , 5-OH),10.17(1H , s ,4′-OH), 9.58
(1H , s , 3-OH)为 3 个酚羟基质子信号;δ8.11
(2H ,d , J =9.0 Hz ,2′, 6′-H)与δ6.93(2H ,d , J=
9.0 Hz ,3′,5′-H)为 B 环质子信号;δ6.83(1H ,d ,
J =2.0 Hz ,8-H)与 6.42(1H , d , J =2.0 Hz , 6-H)
为A 环质子信号;δ5.55 ～ 1.13 之间有 11个质
子信号。其数据与山萘酚氢谱数据比较:缺少
δ10.82(1H , s ,7-OH)羟基信号;在δ5.55 ～ 1.13
之间多出 11 个氢信号;δ1.13(3H , d , J =
6.0 Hz)为鼠李糖上甲基特征信号 , δ5.55(1H ,
br.s)为端基质子信号 ,根据其偶合情况判断苷键
构型为 α型;并且 H-8 ,H-6信号分别向低场移至
δ6.83和δ6.42 。故推测化合物 Ⅱ为山萘酚-7-
O-α-L-鼠李糖苷。
根据相关文献鉴定化合物 Ⅱ为山萘酚-7-O-
α-L-鼠 李 糖 苷 (kaempferol-7-O-α-L-rhamno-
side)[ 4] 。
化合物 Ⅲ:黄色针晶(甲醇), mp 223.0 ～
224.0 ℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 , 示有酚
羟基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish反应阳性 ,酸水解后纸层析检测有葡萄
糖 存 在。 1H-NMR (300 MHz , DMSO-d6 ):
δ12.48(1H , s , 5-OH), 10.82(1H , s , 7-OH),
10.11(1H , s , 4′-OH)为 3 个酚羟基质子信号;
δ8.05(2H ,d , J =9.0 Hz ,2′, 6′-H)与δ6.89(2H ,
d , J =9.0 Hz , 3′, 5′-H)为 B环质子信号;δ6.44
(1H , d , J =2.0 Hz , 8-H)与 6.21(1H , d , J =
2.0 Hz ,6-H)为 A 环质子信号;δ5.47 ～ 3.10之
间有 11 个糖区质子信号 。 13C-NMR(75 MHz ,
DMSO-d6)谱中共给出 21个碳信号:δ156.4(C-
2), 133.3(C-3), 177.6(C-4), 161.3(C-5), 98.8
(C-6), 164.2(C-7), 93.7(C-8), 156.5(C-9),
104.1(C-10), 121.0(C-1′), 131.0(C-2′, 6′),
115.2(C-3′, 5′),160.2(C-4′), 101.0(C-1″), 77.7
～ 60.0(C-2″～ 6″)。其氢谱数据与山萘酚氢谱数
据比较:缺少δ9.58(1H , s , 3-OH)质子信号;在高
场区多出 11 个质子信号 , δ5.47(1H , d , J =
7.2 Hz)为葡萄糖端基质子信号 ,根据其偶合常数
确定苷键构型为 β 型。综合以上分析推测化合
物为山萘酚 3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。根据相关
文献鉴定化合物为山萘酚 3-O-β-D-吡喃葡萄糖
苷(kaempferol 3-O-β-D-glucopy ranoside)[ 5] 。
化合物 Ⅳ:黄色针晶(甲醇), mp 267.0 ～
268.0℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有酚羟
基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish反应阳性 ,酸水解后纸层析检测有葡萄
糖 存 在。 1H-NMR (300 MHz , DMSO-d6 ):
δ12.49(1H , s , 5-OH),10.17(1H , s ,4′-OH), 9.58
(1H , s , 3-OH)为 3 个酚羟基质子信号;δ8.09
(2H ,d , J =9.0 Hz ,2′,6′-H)与δ6.90(2H , d , J =
9.0 Hz ,3′,5′-H)为 B环质子信号;δ6.85(1H ,d ,
J=2.0 Hz ,8-H)与 6.40(1H , d , J =2.0 Hz , 6-H)
为A环质子信号;δ5.48 ～ 3.10之间有 11个糖
区质子信号。 13C-NMR(75 MHz , DMSO-d 6)谱
中共给出 21 个碳信号:δ147.9(C-2), 136.1(C-
3), 176.2(C-4), 160.7(C-5), 99.3(C-6), 162.9
(C-7), 94.8(C-8), 156.3(C-9), 105.1(C-10),
121.9(C-1′), 130.1(C-2′, 6′), 115.8(C-3′, 5′),
160.0(C-4′), 100.5(C-1″), 77.5 ～ 60.0(C-2″～
6″)。其氢谱数据与山萘酚氢谱数据比较:缺少
δ10.82(1H , s , 7-OH)质子信号;在高场区多出 11
个质子信号 ,δ5.48(1H , d , J =7.2 Hz)为葡萄糖
端基质子信号 ,根据其偶合常数确定苷键构型为
β型。故推断化合物Ⅳ为山萘酚 7-O-β-D-吡喃葡
萄糖苷。其13C-NMR 谱数据与文献中山萘酚 7-
O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照基本一致 ,故鉴定化合
物Ⅳ为山萘酚 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempfer-
ol 7-O-β-D- glucopy ranoside)[ 6] 。
化合物 Ⅴ:黄色粉末(甲醇), mp 246.0 ～
247.0 ℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有酚
羟基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish 反应阳性 , 酸水解得到葡萄糖。 1H-
NMR(300 MHz , DMSO-d 6):δ12.49(1H , s , 5-
OH),10.17(1H , s , 4′-OH)为 2个酚羟基质子信
号;δ8.05(2H , d , J =9.0 Hz , 2′, 6′-H)与δ6.89
(2H ,d , J =9.0 Hz , 3′, 5′-H)为 B 环质子信号;
δ6.79(1H , d , J =2.4 Hz , 8-H)与 6.44(1H , d ,
J =2.4 Hz , 6-H)为 A 环质子信号;δ5.50 ～ 3.10
之间有 22个糖区质子信号。13C-NMR(75 MHz ,
106 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 21卷
DMSO-d6)谱中共给出 27个碳信号:δ156.1(C-
2), 133.5(C-3), 177.4(C-4), 160.9(C-5), 99.8
(C-6), 162.9(C-7), 94.5(C-8), 156.9(C-9),
105.7(C-10), 120.8(C-1′), 131.0(C-2′, 6′),
115.2(C-3′, 5′),160.2(C-4′), 100.4(C-1″), 98.7
(C-1 ), 77.7 ～ 60.1(C-2″～ 6 )。其1H-NMR数
据与化合Ⅰ氢谱数据比较:缺少了δ9.58(1H , s ,
3-OH),10.82(1H , s , 7-OH)质子信号;在高场区
多出 22 个质子信号 , 其中 δ5.50(1H , d , J =
6.9 Hz), 5.11(1H , d , J =7.2 Hz)为葡萄糖端基
质子信号 ,提示为葡萄糖双糖苷 ,根据其偶合常
数 ,确定苷键构型均为 β型 。故推断化合物Ⅴ为
山萘酚 3 , 7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。其和13C-
NMR谱数据与文献中山萘酚 3 , 7-二-O-β-D-吡喃
葡萄糖苷13C-NMR谱数据对照基本一致 ,故鉴定
化合物Ⅴ为山萘酚-3 , 7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
(kaempferol 3 , 7-di-O-β-D-glucopy ranoside ,
Ⅴ)[ 6] 。
化合物 Ⅵ :黄色细小针晶(甲醇), mp 246.0～
247.0 ℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有酚羟
基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish 反应阳性 ,酸水解得到葡萄糖和鼠李
糖。 1H-NMR(300 MHz , DMSO-d 6):δ12.48
(1H , s , 5-OH), 10.11(1H , s , 4′-OH)为 2 个酚羟
基质子信号;δ8.08(2H , d , J =9.0 Hz , 2′, 6′-H)
与δ6.89(2H ,d , J =9.0 Hz ,3′,5′-H)为 B环质子
信号;δ6.89(1H , d , J =2.0 Hz , 8-H)与 6.45
(1H ,d , J =2.0 Hz , 6-H)为 A环质子信号;δ5.55
～ 1.12之间有 22个糖区质子信号。其数据与化
合物 Ⅱ氢谱数据比较:缺少了δ9.58(1H , s , 3-
OH)质子信号;在δ5.55 ～ 1.12之间又多出 11个
质子信号 ,其中δ5.49(1H , d , J =7.0 Hz)为葡萄
糖端基质子信号 ,提示为葡萄糖 、鼠李糖双糖苷 ,
根据其偶合常数 ,确定苷键构型分别为 β和α型。
故推断化合物 Ⅵ 为山萘酚 3-O-β-D-葡萄糖-7-O-
β-L-鼠李糖苷。与文献中山萘酚 3-O-β-D-吡喃葡
萄糖-7-O-β-L-鼠李糖苷1H-NMR 谱数据对照基
本一致 ,故鉴定化合物 Ⅵ 为山萘酚 3-O-β-D-吡喃
葡萄糖-7-O-β-L-鼠李糖苷(kaempferol 3-O-β-D-
glucopyranoside-7-O-β-L- rhamnoside)[ 7] 。
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Studies on chemical constituents of the total
flavonoids from Comptosorus sibiricus Rupr.(1)
LI Ning
1 , LI Xian1 , YANG Shi-lin2 , WANG Jin-hui1 , WANG Nan1
(1.School of Tradi tional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceutical Universi ty , Shenyang　
110016 , China;　2.Insti tute of Materia Medica , Chinese Academy of Medical Sciences &Pek ing U-
nion Medical Col lege , Peking　100094 , China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of the to tal flavonoids f rom the ethanol(ω=0.7)
ex tract of the w hole herb of Comptosorus sibiricus Rupr..Methods The compounds w ere isolated by chro-
matog raphy on the silica gel column and ident if ied on the basis of physico-chemical constants and spect ral
107第 2 期 李　宁等:过山蕨总黄酮的化学成分研究(1)　　　
analy sis.Result Six compounds were isolated as kaempferol(Ⅰ), kaempferol-7-O-α-L-rhamnoside(Ⅱ),
kaempferol 3-O-β-D- glucopy ranoside(Ⅲ), kaempferol 7-O-β-D-glucopy ranoside(Ⅳ),kaempferol 3 , 7-di-
O-β-D-g lucopyranoside(Ⅴ), kaempferol-3-O-β-D- glucopy ranoside -7-O-α-L-rhamnoside(Ⅵ)respectively.
Conclusion Compound Ⅱ is obtained from this plant fo r the first time.
Key words:Comptosorus sibiricus Rupr;chemical consti tuents;kaempferol-O- glycoside
(上接第 86页)
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Studies on the release kinetics of ambroxol hy-
drochloride resinate in vitro
LIU Hong-fei1 , N IE Shu-fang1 , PAN Wei-san1 , LIU Xiao-juan2 , ZHANG Xin2 , LI Xiao-
fang3
(1.School of Pharmacy , Shenyang Pharmaceutical University , Shenyang 　110016 , China;　2.J inzhou
Medical College , Jinzhou　100211 , China;　3.The Third Af f iliated Hospital of Dalian Medical Uni-
versity , Dalian　116600 , China)
Abstract:Objective To prepare the ambroxol hydrochloride resinates and study the release kinetics of the
drug-resinate in vit ro.Methods The drug-resinates w ere made by the bath method and column method.
The drug release kinetics w ere also invest ig ated in dif ferent releasing mediums (deionic w ater ,
0.15 mol·L-1 NaCl , 1 mol·L-1 NaCl and 0.15mol·L-1 HCl and 0.15 mol·L-1 KCl).Results It was
show n that the release rate increased w ith the minishing of the particle sizes of resinates , the increase of the
ionic strength of the release mediums and the rise in temperature.And the release rate changed w ith the
counter-ion type.Conclusions The release rate of the drug-resinates is correlated with the particle sizes of
resinates , ionic st reng th of the release mediums , the type of counter-ion and the temperature.
Key words:ambroxol hydrochloride;ion exchange resin;ion exchange reaction;drug release kinetics
108 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 21卷