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新疆圆柏枝皮醇提物抗菌活性的测定



全 文 :55※基础研究 食品科学 2006, Vol. 27, No. 07
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新疆圆柏枝皮醇提物抗菌活性的测定
祖丽皮亚·玉努斯
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:本文对新疆圆柏枝皮乙醇提取物的抑菌特性进行了研究,测试了提取物对食品中主要致病、致腐细菌的
最低抑菌浓度和最低杀菌浓度、试验了提取成分对热、压力、紫外光和金属离子的稳定性,结果表明:新疆圆
柏枝皮乙醇提取物对受试菌均有较低的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度,分别为:枯草芽孢杆菌MIC 0.25%,MBC
0.5%;金黄色葡萄球菌MIC 0.125%,MBC 0.125%;大肠杆菌 MIC 0.0625%,MBC 0.125%;苏云金杆菌MIC
0.125%,MBC 0.25%;普通变形杆菌MIC 0.0625%,MBC 0.125%,产气肠杆菌MIC 0.03125%,MBC 0.125%。
抑菌成分对热、压力、紫外光及金属离子稳定。
关键词:新疆圆柏枝皮乙醇提取物;抑菌活性;稳定
Antibacterial Effect of the Ethanol Extract from Sabina vulgarisAnt Bark
ZULFIYA Yunus
(College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract :This paper studied the antimicrobial characteristics of extracts from Sabina vulgaris Ant bark with ethanol. The results
indicated that the extract of a certain concentration can inhibit the growth of bacteria. That was: Bacillus subtilis: MIC 0. 25%,
MBC 0.5%, Staphylococcus aureus: MIC 0.125%, MBC 0.125%, Escherichia coli: MIC 0.0625%, MBC 0.125%, Bacillus
thruingiensis: MIC 0.125%, MBC 0.25%, Proteus vulgaris: MIC 0. 0625%, MBC 0.125%, Enterobacter aerogenes: MIC
0.03125%, MBC 0.125%. Extract of Sabina vulg ris Ant was also studied for its stability to temperature, ultraviolet and metal
ions.
Key words:extract of Sabina vulgaris Ant bark (ESVB);antibacterial activity;stabil ty
中图分类号:Q949.667 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)07-0055-04
收稿日期:2005-10-17
基金项目:新疆大学青年教师科研启动基金项目(QN040122)
作者简介:祖丽皮亚·玉努斯(1970-),女,讲师,硕士研究生,研究方向为微生物学。
2006, Vol. 27, No. 07 食品科学 ※基础研究56
新疆圆柏(Sabina vulgaris Ant.)又叫叉子圆柏、双
子柏、爬柏、臭柏、砂地柏、沙地柏、天山圆柏。
葡匐灌木,高不及1m,稀灌木或小乔木[1]。主要分布
在欧洲南部、中亚及南亚的部分地区,我区分布于阿
勒泰山,天山北路,准噶尔西部山地及北塔山。该树
种耐干旱,耐严寒,耐瘠薄,根系发达,葡地灌丛
庞大,是北疆山区亚高山带,中山带重要的水土保持
和水源涵养树种,也是干旱山坡固沙造林的良好树种之
一[2]。
新疆圆柏的枝叶与种子可以入药,主治风湿性关节
炎,类风湿性关节炎,布氏杆菌病,皮肤瘙痒,小
便不利,迎风流泪,视物不清,头痛等[ 3 ]。
圆柏树皮中含有12种化学成分,有6种提取物具有
较强的细胞毒作用,对白血病P-388细胞具有明显的抑
制作用,即可抗肿瘤[4]。对新疆圆柏杀虫作用的研究已
取得了突破性进展[5]。但是,关于新疆圆柏抑菌活性的
研究尚未见报道。
本文详细报道了新疆圆柏枝皮醇提物对食品中常见
污染菌的抑制作用,以及有关理化因素对其抗菌活性的
影响,阐明了其抗菌特性,旨在能开发出一种天然的
食物防腐剂,同时也为新疆圆柏的综合利用开辟了一条
新途径。
1 材料与方法
1.1植物材料
新疆圆柏 8月下旬采于新疆乌鲁木齐南山,本院
植物教研室鉴定。
1.1.1主要仪器
旋转蒸发器 RE-52A;电热恒温水浴锅 BJ407-
118;压力蒸汽灭菌器 YXQ-SG46-2;西门子冰箱
KK22EOOTI;智能生化培养箱 SPX;电热恒温培养
箱 PYX-DHS。
1.1.2主要试剂
9 5 %的乙醇、葡萄糖、氯化钾、二氯化铁、三
氧化铁 天津市福晨化学试剂公司;牛肉膏、蛋白
胨、琼脂粉 北京奥博星责任公司;氯化钠 天津市医
药公司。
1.1.3供试菌种
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis;金黄色葡萄菌Sta-
phylococcus aureus;大肠杆菌Escherichia coli;苏云
金杆菌Bacillus thruingiensis;普通变形杆菌Proteus
vulgaris;产气肠杆菌Enterobactera erogenes;以上菌
种均由本院微生物教研室提供。
1.1.4培养基
液体培养基:LB液体培养基(培养细菌)。
固体培养基:LB培养基(培养细菌),马铃薯培养
基(培养真菌)。
1.2方法[6~10]
1.2.1制备圆柏枝皮乙醇提取物
称取500g圆柏枝皮,加2000ml的95%乙醇置于室
温下24h,次日电热恒温水浴锅中回流提取90min,抽
滤得滤液,药渣在加3倍的95%乙醇提取60min,滤得
药液。将两次所得滤液合并置于旋转蒸发仪中减压浓缩
并分离出乙醇,最后的浓缩液用干燥箱烘干(45~50℃)
后贮藏备用。
1.2.2培养基的制备
配置足够量的培养基,分装,灭菌,置于0~
4℃下冷藏备用。以提取备用液(ESVB)作为100%原
液,先用少量乙醇溶解,再加无菌蒸馏水稀释配成浓
度为25%的提取物溶液。准确量取该溶液加入到盛有
液体培养基的试管中,配成不同浓度的圆柏枝皮溶液
系列培养基。
1.2.3供试菌悬浮液的的制备
在相对应的试管斜面培养基上,细菌置35~37℃活
化18h,真菌27~28℃活化44~48h。分别用接种环挑取
少许菌体置于装有9ml无菌生理盐水的试管内,震荡均
匀,两倍稀释法稀释,制成菌悬浮液。细菌用比浊法计
数。调整菌悬浮液浓度,使其含菌量为103~104个/ml,
即得供试菌株悬浮液。
1.2.4最低抑菌浓度(MIC)的测定
每一系列接种一种供试菌悬浮液(0.1ml),每个浓度
做3个重复,另取1稀释系列,不接种任何菌做空白对
照,置适宜温度下培养(36±1)℃,24h;观察实验结
果。以能抑制细菌生长的最低添加量为该提取物的最低
抑菌浓度 (MIC)。因含提取物的培养液肉眼不宜辩明菌
体的生长情况,可将提取叶的接种系列和空白系列在
722型分光光度计上比色测定,二者OD值相同即培养
基中没有菌生长的最低浓度即为提取叶的最低抑菌浓度
(MIC)。
1.2.5最低杀菌浓度(MBC)的测定
将提取物的浓度高于MIC(包括MIC)的各管或培养
皿继续培养24h,观察生长情况。以仍无菌生长的添加
量为该提取物的最低杀菌浓度(MBC)。
1.2.6提取物热稳定性的测定
将稀释至一定浓度的提取物分别置于30、50、80、
100℃水浴和121℃湿热条件下处理10min后,测定其抑
菌活性。
1.2.7提取物紫外稳定性的测定
将提取物分别在紫外灯下处理10、20、30、40、
57※基础研究 食品科学 2006, Vol. 27, No. 07
50、60min后测定其抑菌活性。
1.2.8提取物金属离子稳定性的测定
用1N的不同金属离子 (Na+、K+、Ca2+、Fe2+、Fe3+)
溶液浸泡提取物,12h后测定其抑菌活性。
2 结果与分析
菌种 MIC(%) MBC(%)
枯草芽孢杆菌 0.25 0.5
金黄色葡萄球菌 0.125 0.125
大肠杆菌 0.0625 0. 125
苏云金杆菌 0.0.125 0.25
普通变形杆菌 0.0625 0.125
产气肠杆菌 0.03125 0.125
表1 提取物对细菌的最低抑菌和最低杀菌浓度
Table 1 MIC and MBC of ESVB on some bacterials
注:以上均是三次平行实验结果。
2.1提取物对供试菌的MIC
由表1可见,提取物对个供试菌种均有较低的抑菌
作用浓度。提取物对细菌的最低抑菌浓度为0.25%,最
低杀菌浓度为0.5%。
2.2热处理和压力对提取物抗菌效力的影响(以大肠杆
菌和金黄色葡萄球菌为例)
提取物的热稳定性良好,经30、50、80、100、
121℃高温处理15min后仍保持其原有的抗菌效力。因此
可将提取物加入到食品中与食品处理并用,提高加工食
品的保存性。
2.3紫外稳定性的测定(以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌
为例)
结果表明随紫外处理时间的变化,提取物的抑菌活
性基本保持不变,由此可见,该提取物对紫外具有极
高的稳定性。
2.4金属离子稳定性的测定(以大肠杆菌和金黄色葡萄
球菌为例)
提取物经Na+、K+、Ca2+三种离子处理后,抑菌
活性基本保持不变。但经Fe2+、Fe3+处理后的提取物的
抑菌活性明显高于对照样。
3 讨 论
3.1新疆圆柏中活性成分种类很多,目前已从中分离
出了d-sabinyi acetate、d-sabinene、脱氧鬼臼毒素、
脱氧苦鬼臼毒素、coumarsabin、siderin等多种萜类、
木质素类、酚类及烃类物质等多种生物活性成分。它
们均显有抗癌活性[4]。新疆圆柏枝皮乙醇提取物的主要
活性成分和这些成分联合起来的抑菌和杀菌机理有待进
一步研究。
3.2经Fe2+、Fe3+处理后的提取物的抑菌活性明显高于
对照样,其中可能的原因有两种;一是金属离子本身对
菌体的生长存在抑制作用;二是金属离子与抑菌成分发
生鳌合作用,从而提高其抑菌效力。
4 结 论
4.1实验证明,新疆圆柏枝皮乙醇提取物具有良好的
抑菌作用,其抑菌的范围比较广泛。一定浓度的圆柏
枝皮乙醇提取物对供试细菌都显示出一定的抑制作用,
MIC和MBC均较低。
2006, Vol. 27, No. 07 食品科学 ※基础研究58
磷酸盐混合物对鸡胸肉盐溶蛋白
凝胶特性的影响
彭增起1,李继红2
(1.南京农业大学食品科技学院,江苏 南京 210095;2.中国农业大学生物学院,北京 100094)
摘 要:本试验以艾维茵肉鸡鸡胸肉为试材,采用混料回归试验设计,在特定的条件下加入不同配比的磷酸盐
TSPP、STPP、HMP,提取盐溶蛋白,制备热诱导凝胶。通过蛋白含量及其组分、凝胶保水性、流变性的测
定,筛选最适磷酸盐混合物。结果表明,不同磷酸盐混合物改善凝胶特性的程度不同。在0.01mol/L MgCl2、
0.6mol/L NaCl和pH7.0条件下,改善鸡胸肉盐溶蛋白凝胶特性的最佳磷酸盐配比为TSPP:STPP:HMP = 1/3:5/12:1/4。
当这种磷酸盐混合物的添加量为3g/kg时,可使鸡胸肉盐溶蛋白凝胶保水性和流变特性保持较高水平。
关键词:磷酸盐;鸡胸肉;凝胶;特性
Study on the Effect of Polyphosphates Mixtures on Gel Properties of Chicken
Breast Salt Soluble Proteins
PENG Zeng-qi1,LI J -hong2
(1.College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China;
2.College of Biology Science, China Agricultural University, Beijing 100094, China)
Abstract :The gel functional properties of salt soluble proteins of chicken breast was studied here by Mixed regression design
in this experiment. Different polyphosphates mixture(STPP, DSPP, HMP) were applied to improve the meat quality in a certain
cases. The protein content, protein composition, water-holding-capacity(WHC), rheological properties of heat-induced gel of
chick breast were measured and analysed, so that the better polyphosphates mixture was choosed. The main research contents
收稿日期:2005-11-20
作者简介:彭增起(1956-),男,教授,研究方向为畜产品加工。
4.2在食品加工中,热处理、紫外光消毒工艺非常普
遍,本研究结果显示新疆圆柏枝皮乙醇提取物对高温、
压力、紫外线及多数金属离子都有良好的稳定性,可
用于食物防腐、保鲜等领域,具有广泛的使用范围。
这无疑给新疆圆柏的综合利用和深加工提供了一条可行
而有效的途径。
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