免费文献传递   相关文献

琐琐葡萄多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制研究



全 文 :596 Acta Nutrimenta Sinica,Dec.,2008, Vol.30 No.6

琐琐葡萄多糖对小鼠免疫性肝损伤的
保护作用及机制研究

刘 涛,马 龙,赵 军 1,马 琪,苏德奇,姬风彩
(新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,基础医学院机能中心实验室;
1 新疆药物研究所维吾尔药研究开发重点实验室,乌鲁木齐,830000)

【摘 要】目的 观察琐琐葡萄多糖(VTP)对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性
肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 昆明种雄性小鼠 72 只,随机分为正常对照组、模型组、
联苯双酯(DDB)阳性对照组以及 VTP 低、中、高剂量组共 6 组。除正常对照组外,其余各组均经尾
静脉注射 BCG 致敏,次日起,除正常对照组和模型组给予蒸馏水外,阳性对照组灌胃给予 DDB 溶液
200 mg/kg bw,VTP 低、中、高剂量组分别灌胃给予 VTP 溶液 50、150、300 mg/kg bw,连续 12d。D 12,
除正常对照组外,其余各组均经尾静脉注射 LPS,12h 后采血,取肝脏、脾脏,分别测定脏器系数、
生化指标、免疫指标,并观察肝脏病理组织学变化。结果 VTP 可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏
系数和脾脏系数;并可显著升高小鼠肝组织中 ALT、AST 和 SOD 活性,降低 MDA 和 NO 含量;各组
小鼠外周血中 CD4+、CD8+细胞亚群比例无显著变化,但 VTP 可在一定程度上调节 INF-γ 、IL-2、IL-4
和 IL-10 的分泌,恢复 Th1/Th2 细胞的平衡;病理组织学检查结果显示 VTP 可改善肝组织病理损伤,
与生化检查结果相一致。结论 VTP 对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与 VTP
的抗氧化功能及免疫调节功能有关。[营养学报,2008,30(6):596-601]

关键词: 琐琐葡萄;多糖;免疫性肝损伤
中图分类号: R151 文献标识码:A 文章编号:0512-7955(2008)06-0596-06

THE PROTECTIVE EFFECTS OF POLYSACCHARIDE FROM VITIS VINIFERAL ON
IMMUNOLOGICAL LIVER INJURY IN MICE AND ITS MECHANISM

LIU Tao, MA Long, ZHAO Jun1, MA Qi, SU De-qi, JI Feng-cai
(College of Public Health, College of Basic Medical Sciences, Xinjiang Medical University; 1Xinjiang Key Laboratory for Research and
Development of Uighur Drugs, Institute of Material Medical of Xinjiang, Urumqi 830000, China)

【Abstract】Objective To study the protective effects of polysaccharide from Vitis viniferal (VTP) on
Bacillus Calmette Guerin (BCG) and lipopolysaccharides (LPS) induced immunological liver injury model
in mice and its mechanism. Method Seventy two healthy Kunming mice were randomly divided into six
groups: control group, immunological liver injury model group, diphenyl dicarboxylate (DDB) positive
control group and low, middle and high dose groups of VTP. Beside the control group, the mice in other
groups were injected BCG by tail vein. Next day, the control and model group were given water, DDB
positive control group with DDB (200mg/kg bw), the low, middle and high dose group of VTP with VTP 50,
150, 300 mg/kg bw respectively given i.g during 12 d. On D 12, beside the control group, all mice were
injected with LPS by tail vein and were killed 12h later. Blood, serum, liver and spleen were sampled for
detecting the biochemical and immunological indices, and the pathological changes of liver. Results
Treatment with different doses of VTP could significantly reduce liver and spleen index, increase activities
收稿日期 2007-11-21
基金项目 国家自然科学基金(No.30660157);新疆维吾尔自治区高校科研计划青年启动基金项目(No.XJEDU2006S21)
作者简介 刘涛(1974-),女,副教授, E-mail:xjmult@163.com; 通讯作者:马龙
DOI:10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2008.06.019
营养学报2008年第30卷第6期 597
of ALT, AST, SOD and decrease contents of MDA and NO in liver tissue of mice. The ratio of CD4+ and
CD8+ in plasma had no significant change, but VTP could modulate the secretion of INF-γ, IL-2, IL-4 and
IL-10 in a certain extent and resume the balance of Th1 and Th2. Histopathological observations also
showed that VTP could ameliorate the liver injury in different degrees and were correlated with the
biochemical parameters. Conclusion Polysaccharide from Vitis viniferal has significantly protective effects
against immunological liver damage induced by BCG plus LPS in mice and its mechanism might be relative
to antioxidative activity and immune modulation.[ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2008, 30(6):596-601]

Key words:Vitis viniferal; polysaccharide; immunological liver injury

琐琐葡萄为葡萄科葡萄属植物葡萄(Vitis
viniferal L.)成熟果实,主产于新疆吐鲁番、
和田、鄯善等地,除含有大量葡萄糖、果糖、维
生素、氨基酸等营养成分外,还含有黄酮[1]、萜
类[2]、多糖等生物活性物质[3],是维吾尔医常用
一种药食兼用植物,有健脾胃、理肺、生津、养
血等作用,维医用于治疗脾胃不和、神志不安等,
民间用于治疗小儿麻疹、肝炎等病毒性疾病[4],
效果显著,但其作用机制尚不清楚。肝炎发病机
制较为复杂,涉及病毒复制、炎症介质释放、免
疫功能紊乱及自由基损伤等多个环节。本研究用
卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导建立由于
机体免疫功能变化而导致的肝损伤模型,研究琐
琐葡萄多糖的保护作用,为阐明多糖与琐琐葡萄
的抗病毒作用及其机制,为开发相关免疫调节制
剂或保肝产品提供实验依据。

1 材 料 与 方 法
1.1 材料与试剂
联苯双酯(DDB,德州德药制药公司);LPS
(E coli 0555:B5,Sigma 公司);卡介苗(BCG,
上海生物制品检定所产品);谷草转氨酶(AST)、
谷丙转氨酶(ALT)试剂盒(中生北控生物科技公
司);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试
剂盒(南京建成生物工程研究所);N-萘基-乙烯
二胺、对氨基苯磺酰胺(Fluka 进口分装);小鼠
血清干扰素-γ(INF-γ)、白介素-2(IL-2)、白
介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)ELISA 试剂
盒(美国 Biosource 公司);Rat Anti- Mouse CD8a
FITC 和 Rat Anti-Mouse CD4 R-PE 试剂盒(美国
Caltag 公司)。
琐琐葡萄购自吐鲁番维吾尔药材市场,为
Vitis vinifera L.的成熟干燥果实。采用热水提
取、乙醇沉淀、Sevage 法除蛋白及透析、分离、
纯化提取琐琐葡萄多糖(VTP),以半乳糖为对照
品,采用苯酚-硫酸法测定其含量为 8.19%[3]。
1.2 主要仪器
XD 711 型酶标仪(上海迅达医疗器械公司);
FACS Calibur 流式细胞仪(德国 Beckman 公司);
SaBa18 AMS 全自动生化分析仪(Roma-Italy);
721 分光光度计(上海第三医疗仪器厂);LD5- 2A
低速离心机(北京医用离心机厂); DK-S24 型电
热恒温水浴锅(上海精宏仪器厂)。
1.3 实验分组及方法
昆明种小鼠 72 只,雄性,体重 20±2g,由
新疆医科大学实验动物中心提供(SPF 级),在 IVC
屏障系统中饲养,自由饮食,人工昼夜,室温保
持 23℃~25℃,相对湿度 50%~60%。按体重随机
分为正常对照组、模型组、VTP 各剂量组(50、
150、300 mg/kg bw)和 DDB 组(200 mg/kg bw),
每组 12 只。除正常对照组静脉注射等量生理盐水
外,其余均经尾静脉注射 0.2 ml(每只 1 mg)
BCG 生理盐水悬液。次日起除正常对照组和模型
组灌胃给予生理盐水,各干预组分别按设定剂量
灌胃给予 VTP 或 DDB,灌胃容积为 20 ml/kg bw,
连续 12 d,末次灌胃 1 h 时后,除正常对照组静
脉注射等容量生理盐水外,其余各组小鼠均经尾
静脉注射 LPS 溶液 0.2 ml(每只 6.5 μg),禁食
过夜,不禁水。12h 后称重,眼眶取血,脱颈椎
处死,取肝脏和脾脏标本,作相关指标检测。
1.4 观察指标
1.4.1 脏器系数:取肝脏和脾脏,用 4℃生理盐
水冲洗净血污后,滤纸吸干,称重,计算肝脏、
脾脏系数。
脏器系数(%)=[脏器湿重(g)/体重(g)×10]×100
598 Acta Nutrimenta Sinica,Dec.,2008, Vol.30 No.6
1.4.2 生化及免疫指标:取肝右叶相同部位的一
小块肝组织,以 4℃生理盐水制成 10%和 1%的肝
匀浆,3000 r/m 离心 10 min,吸取上清液,置
-20℃冷冻保存,待测;按试剂盒说明书分别测
定肝组织匀浆中 ALT、AST、SOD 活性及 MDA、NO
含量;采用流式细胞仪测定外周血 CD4+、CD8+细
胞亚群的比例;采用 ELISA 法按试剂盒说明书操
作,检测血清 INF-γ、IL-2、IL-4 和 IL-10 水平。
1.4.3 病理组织学检查及评分标准:取每组 8 只
小鼠肝左叶相同部位肝组织,用 10%的甲醛溶液
固定,石蜡包埋切片,常规 HE 染色,中性树胶封
片,在光学显微镜下观察肝组织病理学变化。肝
组织病变程度分级方法采用以下标准:按肝脏坏
死程度分为 5 级:0 级,正常或肝脏有轻微变性,
肝细胞无坏死;1 级,点状坏死,坏死区占肝小
叶<1/4;2 级,点灶状坏死,坏死区占肝小叶
1/4~1/3;3 级,灶状坏死,1/3<坏死区占肝小
叶≤1/2;4 级,片状坏死,坏死去占肝小叶>1/2。
1.5 统计学处理
应用SPSS12.0软件包,数据均以 x ±s表示,
计量资料采用方差分析 ANOVA、LSR 对数据进行统
计分析,病理检查结果采用 Kruskal- Wallis 检
验及 ANOVA、LSR 分析统计,检验水准α=0.05。

2 结 果
2.1 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠脏
器系数的影响(表 1)

Table 1 Effect of VTP on liver and spleen index in
normal and BCG+LPS induced intoxicated mice
(g/10g, x ± s )
Group n Liver index Spleen index
Control 12 0.5564±0.0577 0.0298±0.0083
BCG+LPS 10 0.6979±0.12378a 0.0843±0.0247a
BCG+LPS+DDB 200mg/kg 12 0.5466±0.0628b 0.0502±0.0101b
BCG+LPS+VTP 50mg/kg 11 0.5433±0.0168b 0.0504±0.0070b
BCG+LPS+VTP 150mg/kg 11 0.5586±0.0557b 0.0516±0.0122b
BCG+LPS+VTP 300mg/kg 12 0.5833±0.0480b 0.0596±0.0115b
a:P<0.01 vs control group; b:P<0.01vs BCG+LPS group

与正常对照组比较,免疫性肝损伤模型组小
鼠肝脏、脾脏系数明显增加(P<0.01);与模型
组比较,VTP 各剂量组和 DDB 组均可显著拮抗肝
脾的肿大(P<0.01)。
2.2 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠肝
组织匀浆 ALT 和 AST 活性的影响(表 2)
与正常对照组比较,BCG+LPS 组小鼠肝组织
匀浆中 ALT 和 AST 活性显著降低(P<0.01),说
明模型复制成功。与 BCG+LPS 组比较,DDB 组和
VTP 各剂量组均能不同程度的升高肝组织 ALT 和
AST 活性(P<0.01,P<0.05),且各剂量组 DDB
组织 ALT 活性具有一定的剂量反应关系(P<
0.01,P<0.05),提示 VTP 具有较好的升高肝组
织转氨酶活性的能力。

Table 2 Effect of VTP on AST and ALT activity of
liver tissues in normal and BCG+LPS induced
intoxicated mice(U/g prot, x ± s)
Group n ALT AST
Control 12 631.78±81.08 215.73±26.19
BCG+LPS 10 242.75±63.15a 51.59±12.03a
BCG+LPS+DDB 200mg/kg 12 519.57±154.05b 90.61±13.30b
BCG+LPS+VTP 50mg/kg 11 384.88±142.20c 87.47±29.03b
BCG+LPS+VTP 150mg/kg 11 406.72±230.66b 92.61±15.66b
BCG+LPS+VTP 300mg/kg 12 518.14±109.17bde 94.12±17.85b
a:P<0.01 vs control group; b:P<0.01,c:P<0.05vs BCG+LPS group;
d:P<0.05 vs the same low dose group; e:P<0.05 vs the same middle
dose group

2.3 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠肝
组织匀浆 SOD 活性及 MDA、NO 含量的影响(表 3)

Table 3 Effect of VTP on SOD activity and MDA, NO
content of liver tissues in normal and BCG+LPS
induced intoxicated mice( x ± s, nmol/mg prot)
Group n SOD* MDA NO
Control 12 106.85±14.25 14.71±3.99 1.91±0.30
BCG+LPS 10 57.67± 9.08a 32.49±6.22a 4.27±0.64a
BCG+LPS+DDB 200mg/kg 12 92.84±14.55b 20.45±3.03b 2.26±0.54b
BCG+LPS+VTP 50mg/kg 11 72.59±15.60c 22.53±3.80b 3.25±0.54b
BCG+LPS+VTP 150mg/kg 11 81.03±21.46b 18.10±3.85be 2.63±0.31bd
BCG+LPS+VTP 300mg/kg 12 85.40±14.76b 19.51±3.24b 2.56±0.38bd
a:P<0.01 vs control group; b:P<0.01,c:P<0.05vs BCG+LPS group;
d:P<0.01,e:P<0.05 vs the same low dose group;*:U/mg prot

与正常对照组相比,BCG+LPS 组肝组织匀浆
中 SOD 活性显著降低,MDA 和 NO 含量显著升高
(P<0.01);与 BCG+LPS 组比,DDB 组和 VTP 各
剂量组均能不同程度的使肝组织 SOD 活性增高,
MDA 和 NO 含量降低(P<0.01,P<0.05),其中,
VTP各剂量组降低NO含量具有一定的剂量依赖关
系(P<0.01),以上结果提示 VTP 有一定的清除
自由基和抗脂质过氧化损伤能力。
2.4 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠外
周血 CD4+和 CD8+细胞百分比的影响(表 4)
与正常对照组比较,BCG+LPS 组、DDB 组和 VTP
各剂量组小鼠外周血 CD4+和 CD8+细胞百分比均无
统计学意义,提示 BCG+LPS 诱导的小鼠免疫性肝
损伤未见 CD4+和 CD8+细胞数量的变化。
2.5 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠血
清 Th1 和 Th2 细胞因子水平的影响(表 5)
营养学报2008年第30卷第6期 599
Table 4 Effect of VTP on CD4+、CD8+ ratio of blood in
normal and BCG+LPS induced intoxicated mice
(%, x ± s )
Group n CD4+ CD8+
Control 12 43.56±7.69 14.58±2.23
BCG+LPS 10 37.89±7.05 11.07±2.47
BCG+LPS+DDB 200mg/kg 12 39.43±4.83 11.61±2.87
BCG+LPS+VTP 50mg/kg 11 43.28±11.55 10.64±2.26
BCG+LPS+VTP 150mg/kg 11 38.33±9.65 11.09±3.47
BCG+LPS+VTP 300mg/kg 12 32.91±5.97 10.81±3.98

Table 5 Effect of VTP on factors of Th1 and Th2 of
serum in normal and BCG+LPS induced intoxicated
mice(pg/ml, x ± s )
Th1 Th2
Group n
IL-2 IFN-γ IL-4 IL-10
Control 12 29.77
±21.21
52.29
±23.31
19.91
±7.14
103.35
±23.43
BCG+LPS 10 61.10
±23.75a
116.13
±22.40a
11.75
±7.42b
47.11
±28.84a
BCG+LPS+
DDB200mg/kg
12 32.48
±20.74d
68.00
±26.72c
17.17
±8.52
92.38
±14.51c
BCG+LPS+
VTP 50mg/kg
11 59.24
±27.78
107.49
±49.22
13.97
±6.68
68.15
±30.43d
BCG+LPS+
VTP 150mg/kg
11 50.37
±24.02
87.69
±45.12
16.56
±6.72
77.12
±21.87c
BCG+LPS+
VTP 300mg/kg
12 42.84
±31.15
82.49
±24.62d
16.66
±5.81
81.66
±22.20c
a:P<0.01,b:P<0.05 vs control group; c:P<0.01,d:P<0.05 vs
BCG+LPS group

BCG+LPS 组小鼠血清 Th1 型细胞因子 IL-2 和
IFN-γ 分泌量增多,Th2 型细胞因子 IL-4 和
IL-10 分泌量减少,与正常对照组比较均有统计
学意义(P<0.01,P<0.05)。与 BCG+LPS 组比较,
DDB 组可显著降低 IL-2 的分泌(P<0.05),VTP
各剂量组虽有一定的抑制 IL-2 分泌的趋势,但无
统计学意义。DDB 组和 VTP 高剂量组均可不同程
度的降低 IFN-γ 的分泌(P<0.01,P<0.05)。
DDB 组和 VTP 各剂量组虽有一定促进 IL-4 分泌趋
势,但无统计学意义。DDB 组和 VTP 各剂量组均
可不同程度的促进 IL-10 的分泌(P<0.01,P<
0.05)。以上结果提示琐琐葡萄提取物 VTP 可在一
定程度上调节 Th1 和 Th2 型细胞因子的分泌,恢
复 Th1/Th2 细胞的平衡,有一定的免疫调节作用。
2.6 VTP 对 BCG+LPS 诱导的免疫性肝损伤小鼠肝
组织病理学改变(表 6)
按肝细胞坏死程度分级后进行统计分析,
BCG+LPS 组与正常对照组比较肝细胞坏死程度具
有统计学意义(P<0.01);与 BCG+LPS 组比较,
DDB 组和 VTP 各剂量组均能不同程度改善肝细胞
损伤状况(P<0.01,P<0.05)。
光镜下可见正常对照组,肝小叶结构完整清
晰,极少部分肝细胞轻度水肿,肝细胞再生明显,
偶见间质炎性细胞浸润(图 1)。BCG+LPS 组肝细
胞存在大范围的片状坏死和嗜酸性变,汇管区和
大静脉周围伴有弥漫性炎细胞浸润(图 2)。DDB
组偶见肝实质点灶状坏死和散在的嗜酸性变,汇
管区炎性细胞浸润较少(图 3)。VTP 低剂量组可
见散在的肝实质灶状坏死和嗜酸性变,汇管区炎
性细胞浸润较多(图 4),VTP 中、高剂量组可见
散在的肝实质点状坏死和嗜酸性变,汇管区和肝
小叶内炎性细胞浸润极少(图 5,6)。

Table 6 Effect of VTP on pathological changes of liver
tissues in normal and BCG+LPS induced intoxicated
mice(n=8, x ± s)
Levels
Group
0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
Control 8 0 0 0 0
BCG+LPS 0 0 0 1 7a
BCG+LPS+DDB 200mg/kg 0 6 2 0 0b
BCG+LPS+VTP 50mg/kg 1 1 1 3 2b
BCG+LPS+VTP 150mg/kg 3 4 1 0 0bc
BCG+LPS+VTP 300mg/kg 3 3 2 0 0b
a:P<0.01 vs control group; b:P<0.01 vs BCG+LPS group; c:P
<0.05 vs low dose group


Fig.1 Liver from normal control group(HE,10×25)

Fig.2 Liver from BCG+LPS group(HE,10×25)

Fig.3 Liver from DDB group(HE,10×25)

Fig.4 Liver from VTP low dose group(HE,10×25)
600 Acta Nutrimenta Sinica,Dec.,2008, Vol.30 No.6

Fig.5 Liver from VTP middle dose group(HE,10×25)

Fig.6 Liver from VTP high dose group(HE,10×25)

3 讨 论
本研究采用 BCG 联合 LPS 成功诱导了小鼠免
疫性肝损伤模型,其肝损伤病理改变和病理生理
机制上更接近人类肝炎,主要表现为单核细胞、
枯否细胞在致炎因子(BCG)的作用下,向肝脏
聚集并致敏。致敏的枯否细胞在接触 LPS 后,会
释放某些细胞毒性介质,包括氧自由基、NO、
TNF-α 和 IL 等[5],从而造成肝细胞损伤,故是
目前研究肝炎发病和治疗较理想的模型之一[6]。
据报道,巨噬细胞接触 LPS 后产生的自由基
可导致肝组织的过氧化损伤,进而破坏滑面内质
网和其内的 CYP450 酶系。由于胞膜通透性改变,
使得细胞内钾、酶与辅酶丢失及 Ca2+浓度增加,
启动肝细胞坏死[7],而 SOD 和具有其酶活性的物
质可通过清除超氧阴离子自由基显著抑制 LPS 诱
导的肝细胞损伤[8]。肝细胞也可经特异性细胞因
子及 LPS 协同诱导,持续产生大量的 NO,介导多
种病理生理效应,包括肝细胞毒性效应[9]。本研究
结果显示模型组在 BCG 致敏后注射 LPS,可引起
肝小叶和汇管区大量炎性细胞浸润,肝细胞出现
胞浆嗜酸性变和胞核消失,呈现点灶状坏死、片
状坏死等病变,同时,肝组织中 ALT、AST、SOD
活性显著降低,MDA 和 NO 水平明显升高,血清
Th1 细胞因子分泌上调、Th2 细胞因子分泌下调,
提示 SOD、NO、免疫细胞因子的异常生成共同参
与了免疫性肝损伤的病理过程。由于肝细胞膜完
整性的破坏使 ALT 和 AST 大量释放入血,表现为
模型组肝组织中的 ALT 和 AST 水平与正常对照组
比显著降低,并显著增大了肝脏和脾脏系数,说
明免疫性肝损伤模型复制成功。
多糖(polysaccharides)参与分子识别、细
胞粘附及防御等生理过程的调节活动,具有抗病
毒、免疫促进、抗肿瘤及降血糖等作用[10],是近
年来天然药物研究的热点课题之一。本研究发现
经VTP干预后,可不同程度抵抗小鼠肝脏和脾脏的
肿大,并恢复肝组织ALT和AST活性,升高小鼠肝
组织中SOD活性,减少MDA和NO的生成,表明VTP
对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其机
制可能与VTP提高机体抗氧化物酶活性,有效清除
自由基,降低脂质过氧化产物生成,保护肝细胞
膜的完整性,改善肝细胞功能有关。
CD4+和CD8+细胞可共同介导免疫调节,在免疫
应答过程中起重要调节作用。辅助性T细胞(Th
细胞)是CD4+ T细胞中一个亚群,在机体免疫调
节、免疫防御和免疫病理等方面都起十分重要作
用,根据其所分泌的细胞因子不同,可分为Th1
与Th 2两个功能不同的独立亚群。Th1细胞主要产
生分泌IL-2、IFN-γ等细胞因子,介导细胞免疫
应答;Th2细胞主要分泌IL-4、IL-10等细胞因子,
可使B细胞活化、促进抗体产生,介导体液免疫反
应。两者间存在相互制约或促进作用,组成一个
复杂的分子网络,参与免疫炎症反应及器官功能
的自我稳定。目前已发现Th1/Th2细胞极化异常或
失衡是机体不能有效清除HBV和病毒感染细胞的
主要因素之一[11]。本研究表明,与正常对照组比,
BCG+LPS模型组外周血中CD4+、CD8+细胞百分比未
升高,但血清中Th1型细胞因子IL-2、IFNγ分泌
显著增多,Th2型细胞因子IL-4、IL-10分泌显著
降低。当给予不同剂量VTP进行干预时,虽然没有
引起CD4+、CD8+细胞百分比的变化,但可不同程度
显著降低IFN-γ和IL-2的分泌,促进IL-10和IL-4
的分泌,提示VTP虽然没有促进免疫细胞的增殖和
分化,但可在一定程度上调节Th1和Th2型细胞因
子分泌,恢复Th1/Th2细胞平衡,发挥一定的免疫
调节功能,对肝组织损害具有保护和改善的作用。
通过本研究表明 VTP 可通过提高机体抗氧能
力及免疫调节等作用机制发挥对免疫性肝损伤
的保护作用,这为利用新疆葡萄开发出安全、价
廉、有效的抗病毒民族新药奠定了基础。

[参 考 文 献]
[1] 刘涛,马龙,赵军,等.琐琐葡萄总黄酮对小鼠免疫性
营养学报2008年第30卷第6期 601
肝 损 伤 保 护 作 用 的 研 究 [J]. 新 疆 医 科 大 学
报,2007,30:1226-1229.
[2] 刘涛,马龙,赵军,等.超声法提取琐琐葡萄中总三萜
的工艺研究[J].食品研究与开发,2007, 28:8-11.
[3] 刘涛,马龙,赵军,等.琐琐葡萄多糖的提取及抗氧化
能力研究[J].新疆医科大学报,2007,30:1230-
1232.
[4] 刘勇民.维吾尔药志[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出
版社,1999:496.
[5] Ferluga J, Allison AC. Role of mononuclear
infiltrating cells in pathogenesis of hepati-
tis[J]. Lancet,1978,2:610.
[6] Calvo JR, Reiter RJ, Garcia JJ. Characteriza-
tion of the protective effects of metalonin and
related indoles against alpha-naphthyl iso-
thiocyanate-induced liver injury in rats[J]. J
Cell Biochem, 2001,80:461-470.
[7] Nicoletti F, Beltrami B, Raschi E, et al. Pro-
tection from concanavalin A(Con A)-induced T
cell-dependent hepatic lesions and modulation
of cytokine release in mice by sodium fusidate
[J]. Clin Exp Immunol,1997,110:479-484.
[8] Osakabe N, Yasuda A, Natsume M, et al. Rosma-
rinic acid, a major polyphenolic component of
Perilla frutesens, reduces lipopolysaccharide
induced liver injury in D-galactosamine sensi-
tized mice[J]. Free Radic Biol Med, 2002,33:
798-806.
[9] Grace L. Lipopolysaccharides in liver injury:
molecular mechanisms of Kupffer cell activa
tion[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Phy-
siol, 2002, 283:256-265.
[10] 邓小云,丁登峰,戴美红,等.植物多糖药理作用研究
进展[J].中医药导报,2006,12:86-89.
[11] Constant SL, Bottomly K. Induction of Th1 and
Th2 CD4+ T cell response : The alternative
approaches[J]. Annu Rev Immunol,1997,15:297
-322.

* * * * * *

(上接595页)
[8] 廖德丰,陈季武,谢萍,等. α-硫辛酸和二氢硫辛酸
的抗氧化作用[J]. 华东师范大学学报, 2007,3: 87
-93.
[9] Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC. AIN-93 puri-
fied diets for laboratory rodents:final report
of the American Institute of Nutrition ad hoc
writing committee on the reformulation of the
AIN-76A rodent diet[J].J Nutr, 1993,123:1939
-1951.
[10] Esfandiari N.Utility of the nitroblue tetrazo-
lium reduction test for assessment of free
ra-dical production by seminal leukocytes and
spermatozoa[J]. Andrology, 2003,24:862-869.
[11] Li Y, Zhu H, Michael A. Detection of mito-
chondria-derived free radical production by
the chemilumigenic probes lucigenin and lumi-
nol [J]. Biochim Biophys Acta, 1999,1428:1
-12.
[12] 夏弈明,朱莲珍.血和组织中谷胱甘肽过氧化物酶活
力的测定方法[J]. 卫生研究,1987,16:29-33.
[13] 朱宇旌,张勇.动物对饲料中脂肪的消化、吸收、代
谢及其影响因素[J]. 动物营养,1999,6:22-24.
[14] 海春旭.自由基医学.西安:第四军医大学出版社
[M],2006.321-324.
[15] 陈群,乐国伟,施用晖,等. 氧自由基对动物消化道
损伤及干预研究进展[J].中国畜牧兽医,2006, 33:
106-108.
(续 完)