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叶中所含有的二醇型皂苷具较好的药理活性 , 特别对心血管
方面具有较高的开发价值 ,值得进一步研究。
杨世杰等[ 5]研究发现西洋参茎叶皂苷单体 Rb3 具有使麻
醉大鼠在体心脏的平均动脉压和左室内压(MAP±dp/ dtmax
和 LVSP)减少 , 并用斑片钳的连细胞电压钳法证明 Rb3
(300mg/ L)可使 L 、B 、T 型钙通道的开放时间缩短 , 开放概率
与异博定 37.5 mg/ L 相似 ,确切地证明 Rb3 对钙通道有阻滞
作用。本试验所用七叶心康胶囊原料药为本项目组采用醇
提 、上 D-101 大孔吸附树脂柱 、乙醇梯度洗脱 、正丁醇萃取等
方法 ,从三七茎叶中分离到三七茎叶提取物(含人参皂苷
Rb3≥30%,人参皂苷 Rc≥20%)。本次结果表明七叶心康胶
囊 1000mg/ kg , 200mg/ kg剂量组均能显著减轻 ISO 所致心肌
缺血大鼠心电图 ST 段下移的作用 , 其中七叶心康胶囊
200mg/ kg 剂量组在给 ISO 后 3min 起作用 , 与空白对照组比
较差异极为显著(P<0.01),提示七叶心康胶囊对试验性心肌
缺血均具有一定程度的保护作用 ,本实验从整体动物模型上
再次证明了三七茎叶中所含有的二醇型皂苷在心血管方面具
有较好的药理活性 , 这对云南丰富的三七茎叶的进行开发利
用提供了依据和保障。
参考文献:
[ 1] 陈奇.中药药理研究方法学[ M] .北京:人民卫生出版社.1993.
[ 2] 王怡.黄芪丹参滴丸抗垂体后叶素致大鼠急性 、心肌缺血的实验研
究[ J] .中药新药与临床药理[ J] .2003 , 14(2):91～ 93.
[ 3] 徐淑云.药理实验方法学[ M ] .第 3 版.人民卫生出版社 , 北京:
2002:1042.
[ 4] 雷秀玲.滇产回心草及回心康对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血
的保护作用[ J] .中国民族民间医药杂志[ J] .2002 , 56(2):170～ 172.
[ 5] 杨世杰.西洋参茎叶皂苷 Rb3对大鼠血液流动力学及单钙通道活
动的影响[ J] .中国药理学通报 , 1995 , 11(1)39～ 42.
(收稿日期:2009-03-08)
复方鹿仙草颗粒含量测定方法研究
耿家玲1 ,柴文英2
(1.云南省食品药品检验所 , 云南 昆明 650011;2.昆明医学院第一附属医院 , 云南 昆明 650011)
　　摘　要:目的:建立测定复方鹿仙草颗粒中苦参碱和氧化
苦参碱含量的 H PLC 方法 ,用以控制复方鹿仙草颗粒的质量。
方法:色谱柱为氨基柱;流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸
(81∶9.5 ∶9.5);检测波长为 220nm;流速 1.0m L/ min.结
果:苦参碱在 0.0676-2.028μg 范围内 , 氧化苦参碱 0.1533-
4.599μg 范围内线性关系良好(r 苦参碱=0.99994 , r 氧化苦
参碱=0.99999), 平均加样回收率苦参碱为 102.5%, 氧化苦
参碱为 97.4%(RSD 苦参碱 = 2.1%, RSD 氧化苦参 =
0.97%, n=6)。结论:本法灵敏 、快速 、准确 ,可用于复方鹿仙
草颗粒的质量控制。
关键词:复方鹿仙草颗粒;含量测定;苦参碱;氧化苦参
碱 HPLC
中图分类号:R927.2 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2009)07-0055-02
复方鹿仙草颗粒是中成药地方标准上升国家标准部分收
藏的药品 ,是由鹿仙草 、九香虫 、黄药子 、苦参 、天花粉 、土茯苓
等中药配伍加工制成的颗粒剂。具有疏肝解郁 、活血解毒之
功效。原标准只测定了氧化苦参碱的含量 , 为了更好地控制
制剂质量 ,笔者参考有关文献 , 研究了高效液相色谱法分离和
测定本品中苦参碱和氧化苦参碱含量的方法。
1　仪器与试药
Ag ilent HP-1100 型高效液相色谱仪 , 配 VWD 可变波
长检测器 、自动进样器。苦参碱和氧化苦参碱对照品(中检
所 , 110805-200306;0780-200004 , 供含量测定用), 流动相
溶剂为色谱纯 ,其余化学试剂均为分析纯。复方鹿仙草颗粒
由黄家医圈制药有限公司生产 。
2　实验方法与结果[ 1 ～ 3]
2.1　色谱条件　色谱柱为氨基柱(4.6×250mm , 5μm 汉邦公
司);流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸(81∶9.5∶9.5);检
测波 长为 220nm;流速 1.0m L/ min;柱温为 25℃;进 样
量 10μL 。
2.2　供试品溶液的制备　取本品 2.0g ,精密称定 ,置锥形瓶
中 ,加浓氨试液 0.5mL ,精密加入三氯甲烷 20m L , 密塞 , 称定
重量 ,超声处理 30min , 放冷 , 再称定重量 , 用三氯甲烷补足减
失的重量 ,摇匀 , 滤过。精密量取续滤液 5mL , 通过中性氧化
铝柱(100-200目 , 5g ,内径 1cm), 依次以三氯甲烷 、三氯甲烷
-甲醇(7:3)各 25m L洗脱 , 收集洗脱液 , 回收溶剂至干 ,残渣
加无水乙醇适量使溶解 , 并转移至 10mL 量瓶中 ,加无水乙醇
稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。
2.3　对照品溶液的制备　精密称取苦参碱对照品 6.76mg 和
氧化苦参碱对照品 15.33mg , 分别置 10mL 量瓶中 , 加乙腈-
无水乙醇(80:20)溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得每 1mL 中含
苦参碱 0.676mg 和氧化苦参碱 1.533mg 的对照品贮备液。
2.4　标准曲线和线性范围　取对照品贮备液 , 分别制成每
1m L 含苦参碱 0.00676;0.01352;0.0338;0.0676;0.1352;
0.2028mg;氧化苦参碱 0.01533;0.03066;0.07665;0.1533;
0.3066;0.4599mg 的溶液。精密吸取 10μL 分别注入高效液
相色谱仪测定。以苦参碱和氧化苦参碱对照品含量(μg)为横
坐标 ,峰面积积分值为纵坐标 ,绘制标准曲线。线性回归方程
苦参碱 Y=5262.20358X+2.27377 , r=0.99994;氧化苦参碱
Y=5697.20745X +2.59299 , r =0.99999。 结果苦参碱在
552009 年第 30 卷第 7 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂志DOI :10.16254/j.cnki.53-1120/r.2009.07.041
0.0676-2.028μg范围内 ,氧化苦参碱在 0.1533-4.599μg 范
围内线性关系良好(r 苦参碱=0.99994 , r 氧化苦参碱=
0.99999)
2.5　阴性对照试验　按处方中药的比例及工艺 ,制备不含苦
参的颗粒 , 按样品溶液的制备方法处理得阴性空白样品 , 测
定。结果表明处方中其它药物和辅料不干扰苦参碱和氧化苦
参碱的测定。
2.6　稳定性试验　取同一批号(批号:070701)供试品溶液各
10μL , 分别于 0 , 2 , 4 , 8 , 9 , 18h 注入液相色谱仪测定 , 结果峰面
积积分值的 RSD均不超过 1.5%, 表明供试品溶液在 18h 内
稳定。
2.7　重复性试验　取同一批号(批号:070701)的供试品 , 同
法制备成 6 份供试品溶液。照[ 含量测定] 方法测定 , 结果苦
参碱和氧化苦参碱的 RSD均为 1.2%, 说明方法重复性好 ,操
作可行。
2.8　准确度试验　采用加样回收法 , 取对照品溶液(浓度:苦
参碱 0.0814mg/ mL , 氧化苦参碱 0.2506mg/ mL)5mL , 共 6
份 ,置锥形瓶中 , 蒸干。取 6 份已知含量的同一批号(批号:
070701)供试品约 1g , 置于上述锥形瓶中 , 按供试品溶液的制
备及测定法操作 , 结果平均回收率苦参碱=102.2%(RSD=
2.1%)、氧化苦参碱=97.4%(RSD=0.97%),说明供试品溶
液的提取 、测定方法可行。
2.9　样品测定　分别精密吸取对照品溶液(浓度:苦参碱
0.0676mg/m L , 氧化苦参碱 0.1533 mg/m L)与供试品溶液各
10μL , 注入液相色谱仪测定 ,结果见图 1 , 表 1。
(1)样品
(2)阴性空白
图 1　复方鹿仙草颗粒 HPLC图
表 1　方鹿仙草颗粒的含量测定
批号 取样(g)平均袋重(g)
含量(mg/袋)
苦参碱 氧化苦参碱 总量 总量平均
070102
2.0142
5.1040 2.30 7.52 9.82 9.872.0151 2.30 7.61 9.91
070101
2.1156
5.0782 2.28 6.58 8.86 8.852.0021 2.30 6.54 8.84
070301
2.0071
5.0033 2.15 6.44 8.59 8.582.0071 2.16 6.41 8.57
070401
2.0085
5.1125 2.30 6.56 8.86 8.842.0056 2.30 6.51 8.81
070402
2.0029
5.0089 1.75 4.95 6.70 6.702.0078 1.77 4.92 6.69
070503
2.0108
5.0101 1.68 4.83 6.51 6.472.0123 1.61 4.81 6.42
2.10　样品含量限度的确定　从 6 批样品中苦参碱和氧化苦
参碱的总量来看 , 最高的为 9.87mg/袋 ,最低的为6.47mg/袋。
由于苦参药材因产地 、采收季节和加工等因素影响 , 直接影响
到样品中含量的测定。所以 , 本品的含量限度拟定为“每袋含
苦参以苦参碱(C15H 24 N2O)和氧化苦参碱(C15 H24N 2O2)计 ,
不得少于 5.5mg”
3　讨论
苦参中的主要成分为苦参碱和氧化苦参碱 , 有文献报
道[ 4] , 苦参中存在还原性物质 ,能够把氧化苦参碱还原成苦参
碱 ,且温度越高 , 时间越长, 这种反应进行的越充分。《中国药
典》对苦参药材的质量控制标准也作了相应调整 , 由 2000 年版
苦参碱的含量改为 2005 年版苦参碱和氧化苦参碱的总含量。
复方鹿仙草颗粒原标准只测定氧化苦参碱的含量 , 色谱
条件为 C18柱 , 流动相为乙腈-0.02mo l/ L 硫酸铵溶液-十二
烷基硫酸钠(38:62:0.6g)(用 20%硫酸溶液调节 PH 值至
3.0)。在该条件下 ,氧化苦参碱出峰较快 , 难以同时测定出苦
参碱和氧化苦参碱的含量。
也曾选用 C18柱 , 分别以乙腈-0.2%三乙胺(用磷酸调节
PH 至 7.1)(20:80)、(30:70);乙腈-0.1%磷酸(用三乙胺调
节 PH 至 8.0)(20;80)、(30:70)为流动相[ 5]测定样品 ,结果均
不能在同一条件下使苦参碱和氧化苦参碱达到基线分离 , 影
响含量测定。
本实验在原标准中单纯测定氧化苦参碱含量的基础上 , 增
加了苦参碱的含量测定 ,色谱柱采用 NH2 柱 ,对生物碱分离专
属性较强;流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液。该条件
分离效果较好 ,且空白无干扰 ,可以有效的控制制剂质量。
参考文献:
[ 1] 国家药典委员会.中国药典[ M] .北京:化学工业出版社 , 2000:8.
[ 2] 国家药典委员会.国家药品标准工作手册[ M ] .第 3版.北京:化
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56 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2009 年第 30 卷第 7 期
Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
Vol.30.N o.7 (General No.193) July , 2009
Main Content
Clinical Effect of Entecavir(ETV)Combined with Anluo Huaxian Pill on the Treatment of Chronic Hepatitis B liver fibrosis Patients
　　 FAN Ying-li , FEN Zhi-cheng , YUAN Yong⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Effect of Flavonoids of Ampelopsis Grmsedntara Leaves on the Serum and Liver Antioxidant Enzymes of Benzopyrene Mice
　　 ZHONG Zheng-x ian , YANG Xiu-fen , CHEN Xue-fen , et al⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Selection of Qiyexinkang Capsule for Cardiovascular Pharmacology
　　 YANG He-jin , BAO Guang-lei , ZHAO Chun-mei , et al⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of the Content of Matrine andOxymatrine in Fufang Luxiancao Granule
　　 GENG Jia-ling , CHA I Wen-ying⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Clinical Effect of Entecavir(ETV)Combined with Anluo Huaxian Pill on the Treatment of Chronic Hepatitis B liver fibrosis Patients
FAN Ying-li , FEN Zhi-cheng , YUAN Yong
(Department of T raditional Chinese M edicine, The A ffiliated Hospital of Hainan M edical College, Haikou , Hainan , 570102)
Abstract:Objective:T o observe the clinical effect of entecavir(etv)combined with Anluo Huaxian Pill o n the treatment of chronic
hepatitis B liver fibro sis patients.Methods:46 patients were randomly divided into one treatment g roup and one control g roup.The
treatment group was treated with ETV and Anluo Huax ian pill while the control g roup was treated only with ETV.Six months w as a course
of treatment.HBV-DNA and liver fibrosis indicato rs(HA 、LN 、PCIII、CIV)w ere observed before and afte r the treatment.Results:The
HBV-DNA and liver fibrosis indicato rs of the tw o g roups declined appa rently after the treatment.The level o f the liver fibrosis indicators in
the trea tment g roup w as lower than that of the control g roup.The difference w as significance(P<0.01).Conclusion:The treatment of
ETV combined with A nluo Huaxian pill obviously improves the levels of the chronic hepatitis B liver fibrosis patients.
Keywords:entecavir;Anluo Huaxian Pill;hepatitis B;hepatic fibrosis
Study on the Effect of Flavonoids of Ampelopsis Grmsedntara Leaves on the Serum and Liver Antioxidant Enzymes of Benzopyrene Mice
ZHONG Zheng-xian , YANG Xiu-fen , CHEN Xue-fen , et al
(Guang xi Institute o f T raditional Chinese Medicine , Nanning , Guangx i , 530022)
Abstract:Objective:T o study the effect of flavonoids of Ampelopsis grmsednta ra leaves on the serum and live r antio xidant enzymes of
benzopyrene mice.Methods:The flavonoids of Ampelopsis grmsedntara leaves was used to perfuse the mice for 2 weeks , one-time pe rfusion
of Benzopy rene administered to take the blood and liver to dete rmine the contents o f superoxide dismutase(SOD), glutathio ne peroxidase
(GSH-PX), gatalase(CAT), r-glutamyltranspeptidase enzyme(r-GT)activity and malondialdehyde(MDA).Results:The flavonoids of
ampelopsis grmsedntara leaves could obviously raise the activity of SOD 、GSH-PX 、CAT in the serum and liver of the mice and lower the
activity of r-GT and the content of MDA.Conclusion:Ampelopsis g rmsedntara leaves have antiox idation effect w hich is probably one o f the
mechanisms of anti-carcinogens of the flavonoids of Ampelopsis g rmsedntara leaves.
Key words:flavo noids of Ampelopsis grmsedntara leaves;benzopy rene;antioxidase;mice
Study on the Selection of Qiyexinkang Capsule for Cardiovascular Pharmacology
YANG He-jin , BAO Guang-lei , ZHAO Chun-mei , et al
(Yunnan Institute of M ateria M edica , Kunming , Yunnan , 650111)
Abstract:Objective:T o observe the protective effect of Qiyexinkang capsule on ar rhythmia mice models throug h experiment to prove
the pharmacological activity functions of Q iyexinkang capsule for cardiovascular and provide the basis fo r the further development of stem
and leaf o f Panax notoginseng.Methods:A chlorofo rm-induced ar rhythmia mice model , an aconitine-induced ar rhythmia rat model and an
isoproterenol-induced acute myo cardial ischemia rat model we re made to test the effect of Qiy exinkang capsule on the ear blood perfusion of
rats and their blo od viscosity so as to select the pharmacological activity functions of Q iyexinkang capsule fo r cardiovascular.Results:
Qiyexinkang capsule showed an obvious pro tective effect on the chloroform-induced arrhy thmia mice , aconitine-induced arrhy thmia rats and
isoproterenol-induced acute myocardial ischemia arrhy thmia rats and could g rea tly improve the blood flow of the ears of the test mice and
lower the blood viscosity of the normal rats.Conclusion:Qiyexinkang capsule has a strong pharmacological activity for the cardiovascular
and is wo rth studying and developing further.
Key words:Qiyexinkang capsule;arrhy thmia;myocardial ischemic;animal model
Determination of the Content of Matrine andOxymatrine in Fufang Luxiancao Granule
GENG Jia-ling , CHAI Wen-ying
(Yunnan Institute o f Food and D rug Inspection , Kunming , Yunnan , 650011)
Abstract:Objective:T o establish a HPLC method for the determination of the content of matrine and oxymatrine in F ufang Luxiancao
G ranule.Methods:The chromatog raphic co lumn was NH2 column;mobile phrase was acetonitrile-ethyl alcohol-3% phosphoric acid(81:
9.5:9.5)with a detection waveleng th of 220nm a t the flow rate of1.0 ml/min.Results:The matrine and ox ymatrine show ed a g ood liner
relation at the range of 0.0676-2.028μg and a t the range of 0.0676-2.028μg respectively(matrine r=0.99999)and 0.1533-4.599μg
(oxymatrine r=0.99999).The average recovery rates of the matrine and oxymatrine were 102.5%(RSD=2.1%)and 97.4%(RSD=0.
97%)respectively.Conclusion:The HPLC method is sensitive, rapid and accurate and can be used to control the quality of Fufang
Lux iancao G ranule.
Key words:Fufang Luxiancao G ranule;content determinatio n;matrine;oxymatrine;HPLC