全 文 ：书·实验研究·
收稿日期:2014－03－27
基金项目:黑龙江省青年科学基金资助项目(QC2009)
作者简介:陈晓明(1970－) ，男，在读博士后。研究方向:中药临床药理学。
通信作者:苏云明(1949－) ，男，教授，博士生导师。研究方向:中药现代药理学研究。Tel:13936646584 E-mail:suyunming@ 126．com
玻璃苣醇提取物对去势小鼠免疫功能及脑内神经递质的影响
陈晓明1，刚洪林2，苏云明1
(1．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;
2．哈尔滨市食品药品检验检测中心，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘要:目的 观察玻璃苣醇提取物对去势小鼠免疫功能及脑内神经递质的影响，探讨玻璃苣对更年期小
鼠模型的作用及其作用机制。方法 建立小鼠更年期模型，测定小鼠的脂肪系数和 Less指数以及脾系数和
胸腺系数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠脑组织匀浆液中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、5
－羟色胺(5-HT)的含量。结果 玻璃苣醇提取物对脂肪系数和 Less指数无明显的影响，能显著升高脾系数
和胸腺系数;各组均有升高去势小鼠脑内 DA，NA，降低去势小鼠脑内 5-HT含量的作用，其中玻璃苣醇提取
物高剂量组、中剂量组及更年安组差异均有统计意义(P＜0．05 或 P＜0．01)。结论 玻璃苣醇提取物能明显
增加更年期去势小鼠的脾系数和胸腺系数，对免疫系统有一定的保护作用;玻璃苣醇提取物在一定程度上能
升高去势小鼠脑内降低的 DA和 NA含量，降低去势小鼠脑内异常升高的 5-HT含量。
关键词:玻璃苣;更年期;免疫功能;脑内神经递质;酶联免疫吸附法
中图分类号:Ｒ285．5 文献标志码:B 文章编号:1003－8450(2014)05－0001－04
玻璃苣(Borage L)又称滨来香菜，为一年生或
多年生草本，性喜阳，适应性强，耐旱怕涝，在荒山、
草甸子、沙地中即能生长，全年生长期约 100 d［1］。
玻璃苣在中国古代常作为三餐食品，现通常作观赏
和供药用。
更年期原义是指妇女自有生殖能力逐渐到无生
殖能力的一段过渡阶段，指妇女在绝经前后由于雌
激素水平波动或下降所致的以自主神经系统功能紊
乱为主，伴有神经心理症状的一组症候群。研究资
料表明:绝经期妇女的低雌激素血症几乎是绝经期
症状的基础。科学研究发现，每一位妇女全身有
400多个部位的组织和器官的细胞膜上有雌激素受
体，当雌激素减少时，这些组织和器官就会发生退行
性变或代谢上的变化，导致更年期妇女在心理、精神
和神经内分泌等多个系统出现不平衡，进而出现一
系列神经内分泌失调的症状［2］。本课题通过观察
玻璃苣醇提取物对更年期去势小鼠脑内神经递质的
影响，探讨玻璃苣对更年期的作用及其作用机制。
1 实验材料
1．1 实验动物
健康 KM 小鼠，雌性，体质量 18 ～ 22 g，由黑龙
江中医药大学药物安全性评价中心提供，实验动物
合格证号:SYXK黑 2012001。
1．2 受试药与阳性对照药
本实验采用玻璃苣全株作为原料药，玻璃苣醇
提物由哈尔滨市食品药品检验检测中心提供;阳性
对照药更年安胶囊(规格 0．3 g /粒，批号 20120802，
吉林省博维药业有限公司生产)。
1．3 主要试剂及仪器
水合氯醛(批号 071209，昆山市石浦年沙助剂
厂) ，青霉素(批号 10010702，哈药集团制药总厂) ，
0．9%生理盐水(批号 091108，哈尔滨三联药业有限
公司) ，小鼠多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、5－
羟色胺(5-HT)的 ELISA检测试剂盒(北京奇松生物
科技有限公司)。H．H．S 11－4 型电热恒温水浴锅
(上海医疗器械五厂) ，DGX－9143B－1 型电热恒温
箱(上海一恒科学仪器有限公司) ，DGX－9143B－1
型电热鼓风干燥箱(上海福玛实验设备有限公司) ，
DY89－Ⅱ型电动玻璃匀浆机(宁波新芝生物科技股
份有限公司) ，Z36HK型台式高速低温离心机(德国
Hermle 公司) ，anthos201017750 型酶标仪(antho
slabtec instrument Austria) ，AL204－S 型电子分析天
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平(梅特勒－托利多仪器有限公司)。
2 方法与结果
2．1 模型的建立
选取健康 KM 雌性小鼠，以 200 mg /kg 水合氯
醛腹腔注射麻醉，待翻正反射消失后，腹位固定，腹
部中线膀胱上侧处剪毛，75%酒精消毒，切开皮肤和
腹肌约 1 cm，在膀胱下方有一呈 Y字形的器官就是
小鼠的子宫，沿着一侧子宫末端与输卵管连接的粉
红色、黄红色的即为卵巢。在卵巢下端穿一丝线，结
扎，剪去卵巢及余线，将组织推回腹腔，缝合切口，同
法摘取另一侧卵巢，缝合切口，切口处给予青霉素干
粉防止感染。实验室环境下饲养 1周。假手术组只
开腹腔不结扎输卵管和摘除卵巢(造模后单笼饲
养)。手术后第 2 天进行阴道涂片检查，连续 5 d，
以不出现角化上皮细胞为造模成功。
2．2 分组及给药
选取造模成功的小鼠 60 只，随机分成 6 组，分
别为玻璃苣醇提取物高剂量组(13．3 g /kg)、中剂量
组(6．65 g /kg)、低剂量组(3．33 g /kg) ，更年安组(0．
35 g /kg) ，模型组。另取 10 只小鼠，只开腹腔不摘
除卵巢，作为假手术组。于术后 1周开始灌胃给药，
各组每天给药 1次，连续给药 7 d，假手术组和模型
组给予同体积蒸馏水。
2．3 统计方法
采用 SPSS 17．0 统计软件进行分析，结果以 珋x±s
表示，采用单因素方差分析，P＜0．05 表示差异有统
计意义。
2．4 Less指数和脂肪系数的测定
小鼠末次给药后 30 min，麻醉动物，称重，准确
测量体长(从鼻至肛门的长度) ，计算 Less 指数;沿
腹中线打开腹腔，取净子宫周围脂肪，并称其湿重，
计算脂肪系数。计算方法如下:Less 指数 = 1 /3 体
质量×10÷体长，脂肪系数 =子宫周围脂肪湿重÷体
质量。结果见表 1。
表 1 对 Less指数和脂肪系数的影响(珔x±s，n=10)
组别 剂量 /(g /kg) Less指数 脂肪系数 /(mg /g)
假手术组 — 2．48±0．39 11．67±4．16
模型组 — 5．07±0．44* 20．81±4．02*
醇提取物高剂量组 13．30 4．67±0．60 18．32±2．93
醇提取物中剂量组 6．65 4．80±0．76 18．09±3．02
醇提取物低剂量组 3．33 4．67±0．47△ 18．18±3．75
更年安组 0．35 4．55±0．67△ 17．97±1．35△
注:与假手术组比较* P＜0．05，与模型组比较△P＜0．05。
结果显示，与假手术组比较，模型组 Less 指数、
脂肪系数均显著升高，2 组比较差异有统计意义
(P＜0．05) ;与模型组比较，各给药组均具有使去势
小鼠脂肪系数及 Less指数降低的趋势，但仅有醇提
取物低剂量组与更年安组的 Less 指数降低显著，更
年安组的脂肪系数降低显著，差异有统计意义(P＜
0．05)。提示玻璃苣醇提取物对于改善更年期小鼠
肥胖症的效果不明显。
2．5 胸腺系数和脾系数的测定
摘除脂肪后，分别取出胸腺、脾脏，称其湿重，计算
胸腺系数和脾系数。计算方法如下:胸腺系数=胸腺质
量÷体质量，脾系数=脾质量÷体质量。结果见表 2。
表 2 对脏器系数的影响(珔x±s，n=10)
组别 剂量 /(g /kg) 胸腺系数 /(mg /g) 脾脏系数 /(mg /g)
假手术组 — 2．59±0．67 6．40±1．05
模型组 — 1．26±0．36* 3．49±0．91*
醇提取物高剂量组 13．30 1．89±0．35△△ 4．55±0．71△△
醇提取物中剂量组 6．65 1．79±0．45△△ 4．28±0．98△
醇提取物低剂量组 3．33 1．78±0．68△ 4．18±0．68△
更年安组 0．35 1．92±0．38△△ 4．61±0．68△△
注:与假手术组比较* P＜0．05;与模型组比较△P＜0．05，△△P＜0．01。
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结果显示，与假手术组比较，模型组的胸腺系数
及脾脏系数均显著降低，2 组比较差异有统计意义
(P＜0．05) ;与模型组比较，各给药组的胸腺系数及
脾脏系数均显著升高，差异有统计意义(P＜0．05 或
P＜0．01)。提示玻璃苣醇提取物对更年期小鼠的免
疫系统具有一定的促进作用。
2．6 ELISA 法检测去势小鼠脑组织匀浆中 DA，
NA，5-HT的含量
各组小鼠在取完脏器后，置冰台上迅速取出小
鼠脑组织，用冰冷的生理盐水冲洗，滤纸吸干，精密
称取脑组织，加入 9倍冰冷生理盐水，制成 10%脑组
织匀浆，匀浆液于 4 ℃以 4 000 r /min 离心 1 5 min，
取上清液置于－70 ℃冰箱中保存待测。结果见表
3。
结果表明，与假手术组比较，模型组小鼠脑组织
匀浆中的 DA，NA 含量显著降低，5-HT 含量显著升
高，2组比较差异具有统计意义(P＜0．05) ;与模型组
比较，除了醇提取物低剂量组外，其他给药组小鼠脑
组织匀浆中的 DA，NA含量显著升高，5-HT含量显著
降低，差异具有统计意义(P＜0．05或 P＜0．01)。
表 3 对去势小鼠脑内 DA，NA，5-HT含量的影响(珔x±s，n=10)
组别 剂量 /(g /kg) DA/(pg /mL) NA/(pg /mL) 5-HT /(ng /mL)
假手术组 — 48．03±9．95 290．44±67．29 0．58±0．16
模型组 — 26．36±7．29* 187．10±47．30* 1．08±0．19*
醇提取物高剂量组 13．30 34．54±7．71△ 258．84±64．79△△ 0．89±0．15△△
醇提取物中剂量组 6．65 35．47±7．35△△ 252．57±95．43△ 0．90±0．15△
醇提取物低剂量组 3．33 31．64±7．84 195．76±46．36 1．03±0．22
更年安组 0．35 38．92±10．11△△ 278．72±33．15△△ 0．75±0．17△△
注:与假手术组比较* P＜0．05;与模型组比较△P＜0．05，△△P＜0．01。
3 讨论
更年期由于卵巢分泌雌激素水平下降，伴有免
疫功能衰退。胸腺和脾脏是人体的免疫器官，它们
的质量能在一定程度上反映中枢免疫器官内淋巴细
胞的数量，故可以通过了解胸腺、脾脏系数来间接了
解体内淋巴细胞总体水平。实验中发现去势小鼠胸
腺明显萎缩，脾脏指数减少，提示其免疫功能低下，
各给药组可使去势小鼠的胸腺系数和脾系数明显增
大，与模型组比较差异有统计意义(P＜0．05)。故可
推断，玻璃苣醇提取物可以改善更年期综合征中的
免疫力低下的症状。
围绝经期综合征是妇科常见病之一，也是更年
期阶段的主要疾病之一。西医学对围绝经期综合征
的机制尚未完全明了，在大量的临床和实验基础研
究中，NAI－N 学说越发为人们所接受。其中，由于
卵巢功能减退，雌激素分泌减少所致的 HPG功能紊
乱而出现的以自主神经功能紊乱为主的症状群，导
致了神经递质、激素、细胞因子等失衡，是目前较为
公认的围绝经期综合征的发病原因和主要表现［3］。
结合西医学，NAI－N学说与更年期的发生有着密切
联系，近年来受到大家的重视，张新民［4］研究表明，
衰老时下丘脑某些神经细胞机能下降，造成了下丘
脑内各类神经递质之间的平衡失调，推测这可能是
中枢神经内分泌细胞机能下降乃至整个神经内分泌
和免疫系统功能下降的主要原因之一。
近年来研究认为，大脑皮质通过单胺类和鸦片
肽类神经递质(5-HT和 β－内啡肽)对下丘脑活动起
主要调节作用。雌激素撤退使中枢和周围的这些神
经递质浓度发生变化，随之而来使人体各种生理功
能调节紊乱，产生不同程度的自主神经系统紊乱和
由它导致的微循环障碍引起的一系列症候群，更与
情绪变化密切相关。妇女临近围绝经期时，卵巢衰
竭引起分泌雌、孕激素功能下降，血浆雌激素、孕激
素水平下降引起下丘脑内源性鸦片肽(EOP)的活
力下降，从而 EOP 对 NA 的进展性抑制作用减弱，
引起中枢 NA 的不稳定，触发潮热的发生［4］。研究
认为，患者潮热、汗出及更年期综合征症状评分指数
均与 L－色氨酸、5－羟色氨酸呈正相关关系，提示血
浆吲哚类物质含量变化与更年期综合征的发病有
关，而患者的性激素水平变化、精神神经症状、自主
神经症状等均与 EOP 代谢的改变有关［5］。
研究证实玻璃苣醇提取物可显著升高胸腺系
数、脾脏系数，升高去势小鼠脑内 NA，DA 含量，降
低去势小鼠脑内 5-HT 含量，表明玻璃苣对免疫系
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统有一定的保护作用;玻璃苣醇提物能够在一定程
度上升高去势小鼠脑内降低的 NA 和 DA 含量，降
低去势小鼠脑内异常升高的 5-HT 含量，从而发挥
防治更年期综合征的作用，这一作用机制有待于进
一步深入研究。
参考文献:
［1］胡荣，姜炳文．玻璃苣的开发利用研究［J］．林产化工通
讯，1993(3) :15－17．
［2］Burger H，Woods N F，Den Narstein L，et al． Nomenclature
and endocrinology of menopause and perimenopause［J］．Ex-
pert Ｒev N Aurother，2007，7(1) :35－43．
［3］索玉平，王宝迎，王丹青，等．坤宁安对围绝经期综合征大
鼠下丘脑 β－内啡肽及神经递质的影响［J］．中国药物与
临床，2006，6(1) :21－23．
［4］张新民．补肾中药对老年大鼠下丘脑单胺类神经递质作
用研究［J］．上海医科大学学报，1990，7(5) :365．
［5］Shughrue P J，Merchenthaler I． Evidence for novel estrogen
binding sites intherathip pocampus［J］． N Auroscience，
2000，1999(4) :605－612．
［编辑:陈正君］
The influence of alcohol extract of borage L on immune function and
neurotransmitter of castration mice
Chen Xiaoming1，Gang Honglin2，Su Yunming 1
(1．Heilongjiang University of TCM，Harbin 150040，China;
2．Food and Drug Testing Center of Harbin ，Harbin 150040，China)
Abstract:Objective To observe the effect of alcohol extract of borage L on immune function and neurotrans-
mitter of castrated mice，explore the role of borage L on mice model of menopause and its mechanism． Methods
Built menopause model of mice，measured the Less index，coefficient of fat，spleen and thymus coefficient of mice
;detected the dopamine(DA) ，noradrenalin(NA) ，5-hydroxytryptamine(5-HT)levels in brain homogenate of mice
by using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)． Ｒesults The alcohol extract of borage L have not obvious
effects on fat coefficient and Less index，but the spleen and thymus coefficient were significantly increased;brain
DA，NA were increased，and 5-HT was reduced in each group of castration mice，there was significant difference
among alcohol extract high and middle-dose group and Gengnianan group(P＜0．05 or P＜0．01)． Conclusion The
alcohol extract of borage L can significantly increase the coefficient of spleen and thymus of castrated mice，and has
protection on the immune system in certain extent;it can rising the content of DA and NA，reducing 5-HT content
which abnormally elevated in brain of castration mice．
Key words:borage L;menopause;immune function;brain neurotransmitter;enzyme-linked immunosorbent a
ssay
櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋
·作者 编者 读者·
科技期刊中汉字数字的使用范围
在科技期刊中，汉字数字主要用于以下场合:1)定型的词、词组、成语、惯用语、缩略语或具有修辞色彩
的词语中作为语素的数字必须用汉字，例如第一作者、相差十万八千里;2)相邻 2 个数字并列连用表示的概
数必须使用汉字数字，且连用的 2个数字之间不得加顿号，例如一两千米、七八十岁;3)带有“几”字的数字
表示的概数，例如十几、几十万分之一;4)中国及世界各国、各民族的非公历纪年;5)含有月日简称表示事
件、节日和其他特定含义的词组中的数字;6)古籍参考文献中的数字。
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